Trên cơ sở điều kiện sắc ký đã xây dựng tiến hành định tính, định lượng trong viên felodipin 5 mg giải phóng có kiểm soát - sản phẩm nghiên cứu của Bộ môn Bào chế trường Đại học Dược Hà Nội.
Tiến hành:
− Chuẩn bị dung dịch chuẩn: Cân chính xác khoảng 25,0 mg Felodipin chuẩn vào bình định mức dung tích 25,0 ml, thêm khoảng 15 ml pha động, lắc cho tan, sau đó pha loãng bằng pha động đến vạch, lắc đều được dung dịch nồng độ 1 mg/ml. Lấy 1,00 ml dung dịch nồng độ 1 mg/ml vào bình định mức 50,0 ml, thêm pha động tới vạch được dung dịch chuẩn nồng độ 20 µg/ml. − Chạy sắc ký các mẫu theo điều kiện đã chọn, ghi pic đáp ứng. Mỗi mẫu thử tiến hành 3 lần, lấy kết quả trung bình.
− Hàm lượng felodipin so với lượng ghi trên nhãn được tính theo công thức: % hàm lượng = mC× H × (1-a) ×𝑆𝑆𝑡𝑡 × 𝑉𝑉𝑡𝑡 × 𝐹𝐹𝑡𝑡
𝑆𝑆𝑐𝑐 × 𝑉𝑉𝑐𝑐 × 𝐹𝐹𝑐𝑐× 𝑉𝑉�
𝑉𝑉𝑡𝑡×𝑏𝑏×100 Trong đó:
St, Sc (mAu.s): diện tích tương ứng của dung dịch thử và dung dịch chuẩn. Ft, Fc: hệ số pha loãng tương ứng của dung dịch thử và chuẩn.
Vt, Vc: thể tích của dung dịch thử và chuẩn trước khi pha loãng (ml). a (%): phần trăm hàm ẩm của felodipin chuẩn.
H: hàm lượng của felodipin chuẩn (%). mtb: khối lượng trung bình viên (mg).
mt, mC: khối lượng bột tương ứng của chế phẩm thử và chuẩn (mg). b: hàm lượng ghi trên nhãn của viên (mg).
Kết quả: cân lượng chuẩn mC = 24,80 mg cho Spic = 364,05. Kết quả định tính và định lượng được trình bày ở bảng 3.8 và hình 3.11, 3.12.
Bảng 3.8. Kết quả định lượng Felodipin trong viên giải phóng có kiểm soát
STT Lượng ghi trên nhãn (mg) Khối lượng cân chế phẩm thử (mg) Diện tích pic (mAU.s) Hàm lượng (%) 1 5 355,3 391,9 106,87 2 5 355,7 390,5 106,37 3 5 356,3 395,9 107,66 TB ± SD 106,97±0,65
Hình 3.11. Sắc ký đồ của mẫu chuẩn
Hình 3.12. Sắc ký đồ của mẫu định lượng
Nhận xét: từ hình 3.11 và 3.12 thấy thời gian lưu của mẫu thử tương ứng với thời gian lưu của mẫu chuẩn chứng tỏ pic trên sắc ký đồ mẫu định lượng là của felodipin.
Kết quả ở bảng cho thấy chế phẩm viên nén felodipin giải phóng có kiểm soát đạt quy định về hàm lượng theo qui định về hàm lượng Dược điển Việt Nam IV về chế phẩm viên nén có hàm lượng hoạt chất 5 mg là 90,0 – 110,0 % so với lượng ghi nhãn.