1.6.1. Phơng pháp thu hái và bảo quản mẫu cây :
Trong cây, tinh dầu ở trạng thái tự do, nó có thể đợc tạo thành và tập trung những tế bào trong giống nh tế bào khác của cây hoặc lớn hơn. Nhng thờng tinh dầu ở trạng thái tự do đợc tập trung cao ở những cơ quan bài tiết, chẳng hạn ở lông bài tiết của các cây thuộc họ hoa môi, tập trung dới lớp Cution trong túi bài tiết liệt sinh ở các cây họ Cúc…
Trong cùng một loại cây thành phần tinh dầu của những bộ phận khác nhau có thể khác nhau tuỳ theo điều kiện sinh sống, điều kiện thu hái. ở vùng khí hậu nhiệt đới, hàm lợng tinh dầu cao hơn những vùng khí hậu khác.
Về phân bố, tinh dầu có trong tất cả các bộ phận của cây nhiều nhất ở ngọn nhng cũng có trong thân, vỏ rễ, hạt, củ. Thờng vào thời kỳ sắp và trong ra hoa hàm l- ợng tinh dầu trong cây là lớn nhất, chính vì vậy cần tiến hành trong thu hái mẫu trong thời kỳ này là tốt nhất.
Việc lấy và bảo quản mẫu cây có ảnh hởng đến chất lợng và hàm lợng tinh dầu, tuỳ vào loại cây, có loại phải cất lúc tơi, không đợc để khô vì tinh dầu sẽ giảm đi. Nhiệt độ và ánh sáng cũng làm thay đổi hàm lợng và tính chất của một số tinh
dầu. Vì vậy tốt nhất cây đợc thu hái vào buổi sáng sớm hoặc lúc chiều tối ( khi trời mát mẻ ). Mẫu lấy đợc cho vào các túi bóng màu nâu sẫm, cố gắng không để dập nát. Để lu giữ mẫu cây phải :
+ Chụp ảnh các mẫu cây
+ Chọn những cây, những cành có hoa đẹp làm tiêu bản [2] 1.6.2. Phơng pháp định lợng tinh dầu :
Các bộ phận thân, lá của cây đợc cắt nhỏ cho vào bình cầu 2 lít, lắp ống sinh hàn ngợc, nối với bình hứng có chia độ đến 0,1ml ( phù hợp với tiêu chuẩn Dợc điển Việt Nam I ).
Thời gian định lợng tinh dầu từ 2 đến 4h tuỳ từng loại cây. Khi đun thêm 15 phút không thấy thể tích tinh dầu tăng thêm thì thôi. Để nguội đọc lấy thể tích tinh dầu.
Tỷ lệ % của tinh dầu đợc tính theo công thức : a x 100
X% =
b
a : Thể tích tinh dầu tính bằng ml
b : Khối lợng nguyên liệu đã trừ độ ẩm tính bằng gam.
Tinh dầu đợc làm khô bằng Na2SO4 khan, đợc đựng trong các lọ tiêu chuẩn đậy kín và giữ nhiệt độ 0 – 50C trớc khi đem phân tích [3].
2.7.3 – Phơng pháp xác định thành phần hoá học của tinh dầu :
Thành phần hoá học củatinh dầu đợc xác định bằng phơng pháp sắc ký khí ( GC ) và sắc khí – phối phổ ký liên hợp ( GC/MS ).
Chơng II