Định tính flavonoid
Hòa tan cắn vào ethanol 900, lọc qua giấy lọc nếp gấp lấy dịch lọc đem làm các phản ứng:
Phản ứng với dung dịch kiềm loãng
Cho dịch lọc vào ống nghiệm, nhỏ vài giọt dung dịch NaOH 10% nếu thấy ống nghiệm có tủa đục màu vàng thì phản ứng dƣơng tính.
Kết quả: Phản ứng dƣơng tính (+).
Phản ứng Cyanidin
Cho vào 2 ống nghiệm mỗi ống khoảng 1ml dịch lọc. Ống thứ nhất thêm ít bột Magie kim loại rồi nhỏ từ từ vài giọt acid hydrocloric đậm đặc, ống thứ 2 để đối chiếu. Khi phản ứng xong quan sát nếu thấy ống 1 xuất hiện màu đỏ đậm hơn ống đối chiếu thì phản ứng dƣơng tính.
Kết quả: Phản ứng dƣơng tính (+).
Phản ứng với dung dịch sắt (III) clorid
Cho khoảng 1ml dịch lọc vào ống nghiệm nhỏ, thêm vài giọt dung dịch FeCl3 5%, lắc đều nếu thấy xuất hiện màu xanh đen thì phản ứng dƣơng tính.
Kết quả: Phản ứng dƣơng tính (+).
Sơ bộ kết luận: Cắn ethyl acetat có flavonoid.
Định tính coumarin
Hòa tan cắn vào ethanol 900, lọc qua giấy lọc nếp gấp lấy dịch lọc đem làm các phản ứng:
Phản ứng mở đóng vòng lacton:
Cho vào 2 ống nghiệm, mỗi ống 1ml dịch lọc. Ống 1 cho thêm 0,5ml NaOH 10% rồi đun cách thủy cả 2 ống (ống có coumarin thƣờng có màu vàng nhạt). Để nguội, thêm vào mỗi ống 4 ml nƣớc cất, nếu ống 1 trong hơn ống 2
nhƣng sau đó acid hóa mà đục hoặc có kết tủa nhƣ ống 2 thì phản ứng dƣơng tính.
Kết quả : Phản ứng âm tính (-).
Phản ứng chuyển dạng đồng phân cis-trans:
Nhỏ hai giọt dịch chiết ethanol lên giấy lọc, sau đó nhỏ tiếp lên 1 giọt NaOH 10%, để khô. Che nửa vết chất thử bằng một mảnh kim loại rồi soi dƣới ánh sáng tử ngoại trong khoảng 30 giây, bỏ vật che ra thấy nửa của vết chất thử không che có cƣờng độ màu sáng hơn nửa vết chất thử bị che thì phản ứng dƣơng tính.
Kết quả: Phản ứng âm tính (-).
Sơ bộ kết luận: Cắn ethyl acetat không có coumarin.
Định tính tanin:
Hòa tan cắn trong nƣớc nóng. Để nguội, lọc qua giấy lọc gấp nếp lấy dịch lọc. Cho vào 3 ống nghiệm nhỏ mỗi ống 2ml dịch lọc.
Ống 1: Thêm vài giọt sắt (III) chlorid 5% nếu thấy xuất hiện tủa màu xanh đen thì phản ứng dƣơng tính.
Ống 2: Thêm vài giọt chì acetat 10% nếu thấy xuất hiện tủa bông thì phản ứng dƣơng tính.
Ống 3: Thêm vài giọt gelatin 1% nếu thấy xuất hiện tủa bông trắng thì phản ứng dƣơng tính.
Kết quả: Phản ứng dƣơng tính (+).
Sơ bộ kết luận: Cắn ethyl acetat có tanin.
Nhận xét: Bằng các phản ứng hóa học thƣờng quy, kết quả cho thấy trong cắn phân đoạn ethylacetat của lá Sa kê có chứa nhóm chất flavonoid, tanin.