4. í nghĩa khoah ọc và thực tiễn của ủề tài
2.3. Nội dung và phương phỏp nghiờn cứu
2.3.1. Thớ nghiệm ủồng ruộng 2.3.1.1. Bố trớ thớ nghiệm
- Bố trớ cỏc dải thớ nghiệm với kớch thước 15 x 1,2m, cú lưới võy quanh ủể
trồng cõy vừng “sạch” và sử dụng cho việc nuụi "sõu sạch".
- Tiến hành thả trưởng thành sõu hại vào trong ụ thớ nghiệm ủó bố trớ ngoài
Trường ðại học Nụng nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ nụng nghiệp ...29
2.3.1.2. Phương phỏp ủiều tra
- ðể xỏc ủịnh thành phần sõu hại vừng và thành phần cụn trựng ký sinh sõu hại vừng chỳng tụi ủiều tra trờn sinh quần ruộng vừng ở Nghi Lộc, Nghệ An vào vụ xuõn và vụ hố thu năm 2010 theo phương phỏp ủiều tra tự do, mỗi tuần một lần. Thu thập tất cả những loài sõu hại và cỏc pha sõu hại bị nghi ký sinh về
nuụi tiếp ủể theo dừi. Mỗi ủợt thu 20 - 30 cỏ thể loài sõu hại chớnh, một phần
ủược xử lý ngõm mẫu ướt ủể phõn loại; một phần ủược nuụi tiếp ủể theo dừi hiện tượng bị ký sinh. Trường hợp mật ủộ sõu quỏ thấp hoặc quỏ cao, số lượng cỏ thể
thu thập cú thể thay ủổi. Ghi chộp số cỏ thể của từng loài sõu hại bị ký sinh, từng loài cụn trựng ký sinh. Ghi chộp số cỏ thể vũ húa trưởng thành ong ký sinh
Elasmus sp. ðếm số cỏ thểủực, cỏi của ong Elasmus sp theo từng thỏng theo dừi. - ðiều tra diễn biến mật ủộ sõu hại chớnh và tỷ lệ ký sinh chỳng tụi tiến hành
ủiều tra theo phương phỏp 5 ủiểm chộo gúc, diện tớch mỗi ủiểm ủiều tra là 1m2 (Theo Viện Bảo vệ thực vật, 1997).
- Tỡm hiểu mối quan hệ giữa giai ủoạn sinh trưởng cõy vừng - sõu cuốn lỏ
Antigastra catalaunalis - tỷ lệ ký sinh, chỳng tiến hành ủiều tra mật ủộ sõu cuốn lỏ Antigastra catalaunalis theo từng giai ủoạn sinh trưởng của cõy, thu thập sõu về nuụi ủể tiếp tục theo dừi tỷ lệ ký sinh.
2.3.2. Thớ nghiệm trong phũng 2.3.2.1. Bố trớ thớ nghiệm
- Cỏc thớ nghiệm nghiờn cứu sinh học của ong ký sinh Elasmus sp. ủều
ủược nuụi trong ống nghiệm (kớch thước: ϕ: 1,5cm, L: 10cm), hộp nhựa (kớch thước: ϕ: 8 - 10cm, L: 10 - 12cm), phớa trờn miệng hộp nhựa ủược bọc kớn bằng vải màn. Toàn bộống nghiệm, hộp nhựa thớ nghiệm ủược ủặt trờn giỏ cú kớ hiệu riờng. Nhiệt - ẩm kế ghi số liệu hàng ngày.
Trường ðại học Nụng nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ nụng nghiệp ...30
- Thớ nghiệm nghiờn cứu sinh học của ong ký sinh Elasmus sp. ủược tiến hành ở ủiều kiện nhiệt ủộ phũng trong thỏng V (nhiệt ủộ 29,9◦C, 78%RH) và thỏng VI (nhiệt ủộ 31,7◦C, 67%RH).
- Nhõn nuụi sõu "sạch": Thả 5 - 10 cặp ngài sõu cuốn lỏ Antigastra catalaunalis vào hộp nhựa (kớch thước: ϕ: 12cm, L: 20cm), trong hộp cú 6 - 8 cành lỏ vừng. Khi ngài sõu cuốn lỏ Antigastra catalaunalis ủẻ trứng lờn lỏ vừng, thu cỏc lỏ vừng cú ổ trứng ủể nuụi sõu non sõu hại phục vụ cho cỏc thớ nghiệm.
- Nhõn nuụi ong ký sinh Elasmus sp.: Sau khi ong ký sinh Elasmus sp. vũ
hoỏ tiến hành cho 1 ủực và 3 cỏi ong ký sinh và 10 - 15 sõu cuốn lỏ vừng "sạch"
Antigastra catalaunalis tuổi 2 và tuổi 3 vào hộp nhựa trũn (kớch thước: ϕ: 8 - 10cm, L: 10 - 12cm). Trong hộp nhựa cú bụng thấm thức ăn bổ sung cho ong ký sinh Elasmus sp. ủược treo trờn thành hộp và 3 - 4 cành ngọn lỏ vừng dựng làm thức ăn cho sõu cuốn lỏ; phớa trờn miệng hộp nhựa ủược bọc kớn bằng vải màn.
Thời gian tiếp xỳc giữa ong ký sinh Elasmus sp. và sõu cuốn lỏ Antigastra catalaunalis là 24 giờ. Sau ủú bắt ong ký sinh Elasmus sp. ra và dựng ủể nhõn nuụi tiếp cho ủến khi ong ký sinh cỏi chết.
Khi quan sỏt thấy trứng ong ký sinh Elasmus sp. xuất hiện trờn sõu cuốn lỏ
Antigastra catalaunalis thỡ ta tỏch riờng sõu bị ký sinh ra và tiếp tục theo dừi.
2.3.2.2. Phương phỏp nghiờn cứu
- Thớ nghiệm tỡm hiểu vềủặc ủiểm hỡnh thỏi của ong ký sinh Elasmus sp.
Chỳng tụi thu trưởng thành của ong ký sinh Elasmus sp. sau khi vũ húa, cho ghộp ủụi trong từng ống nghiệm cú thức ăn bổ sung và ủặt sõu non vật chủ
tuổi 2 và tuổi 3 vào trong ủú. Thời gian cho tiếp xỳc giữa ký sinh - vật chủ là 24 giờ. Hàng ngày lấy vật chủủó bị ký sinh soi trờn kớnh hiển vi, ủo ủếm kớch thước và tớnh thời gian phỏt triển từng pha của ký sinh. Cụng việc ủược thực hiện cho
Trường ðại học Nụng nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ nụng nghiệp ...31
tới khi ấu trựng thành thục và húa nhộng. Cỏc pha phỏt triển của ký sinh ủược ủo
ủếm kớch thước với số lượng 30 vật chủủể tớnh thống kờ.
- Thớ nghiệm ảnh hưởng của yếu tố thức ăn ủến thời gian sống của trưởng thành ong ký sinh Elasmus sp.
Thớ nghiệm với 4 cụng thức, mỗi cụng thức thớ nghiệm lặp lại 4 lần. Số
ong thớ nghiệm cho mỗi lần nhắc lại là 8 con. Tổng số ong cho một cụng thức thớ nghiệm là 32 con.
I : Mật ong nguyờn chất. III: Mật ong 10%. II : Mật ong 50%. IV: Nước ló.
- Thớ nghiệm về vũng ủời ong ký sinh Elasmus sp.
Chỳng tụi tiến hành bố trớ thớ nghiệm ở ủiều kiện nhiệt ủộ phũng trong thỏng V với nhiệt ủộ 29,9◦C, 78%RH. Theo dừi và ghi lại những chỉ tiờu về cỏc pha phỏt triển của ong ký sinh Elasmus sp., số cỏ thể ong theo dừi là 30 con.
- Thớ nghiệm về tớnh thớch hợp tuổi vật chủ ủối với ong ký sinh
Elasmus sp.
Chỳng tụi cho trưởng thành ong ký sinh Elasmus sp. với tỷ lệ 1 ủực 3 cỏi tiếp xỳc với vật chủ ở từng tuổi riờng biệt trong từng ống nghiệm sạch. Số lượng vật chủ cho một lần nhắc lại là 10 vật chủ, tương ứng với một cụng thức thớ nghiệm là 40 vật chủ; sau ủú thả ký sinh trưởng thành vào. Mỗi tuổi vật chủ thớ nghiệm lặp lại 4 lần; thời gian tiếp xỳc là 24 giờ.
- Tỡm hiểu ảnh hưởng của cỏc mật ủộ ong ký sinh Elasmus sp. ủến hiệu quả ký sinh trong ủiều kiện nhiệt ủộ phũng thớ nghiệm
Thớ nghiệm ủược tiến hành như sau: Ong ký sinh Elasmus sp. mới vũ hoỏ tiến hành ghộp ủụi lần lượt theo số cặp 1 ủực 1 cỏi, 1 ủực 2 cỏi, 1 ủực 3 cỏi, 1
Trường ðại học Nụng nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ nụng nghiệp ...32 ủực 4 cỏi. Sau ủú cho lần lượt cỏc cặp ong ký sinh Elasmus sp. tiếp xỳc với 5, 10 sõu cuốn lỏ vừng "sạch" Antigastra catalaunalis trong hộp nhựa (kớch thước: ϕ: 8 - 10cm, L: 10 - 12cm). Hộp nhựa cú bụng thấm thức ăn bổ sung cho ong ký sinh
Elasmus sp. và 3 - 4 cành ngọn lỏ vừng làm thức ăn cho sõu, miệng hộp nhựa
ủược bọc kớn bằng vải màn. Thời gian tiếp xỳc giữa cỏc cặp ong ký sinh Elasmus
sp. và cỏc mật ủộ sõu hại là 24 giờ. Thớ nghiệm ủược tiến hành theo 8 cụng thức, mỗi cụng thức thớ nghiệm lặp lại 4 lần. Số cặp cụn trựng ký sinh Số sõu hại 1♂, 1♀ 1♂, 2♀ 1♂, 3♀ 1♂, 4♀ 5 sõu non CT11 CT21 CT31 CT41 10 sõu non CT12 CT22 CT32 CT42
Hỡnh 2.1. Cụng thức thớ nghiệm ảnh hưởng của cỏc mật ủộ ong ký sinh
Elasmus sp. ủến hiệu quả ký sinh trong ủiều kiện nhiệt ủộ phũng - Khả năng ủẻ trứng của ong Elasmus sp. lờn mỗi cỏ thể vật chủ
ðể tỡm hiểu số lượng trứng trong mỗi lần ủẻ của ong Elasmus sp. ngoại ký sinh tập ủoàn lờn mỗi vật chủ sõu cuốn lỏ Antigastra catalaunalis chỳng tụi tiến hành theo dừi trờn 30 vật chủ bị ong cỏi ký sinh; ủếm số lượng trứng trờn mỗi cỏ thể vật chủ bị ký sinh.