- Nguồn rầy nâu: Thu rầy nâu bằng cách ñặt chậu lúa dưới bóng ñèn vào những ñêm cao ñiểm rầy vô ñèn, sau ñó ñem nuôi và nhân nguồn trong mùng lưới ở
nhà lưới của bộ môn Bảo Vệ Thực Vật, giống lúa ñược sử dụng làm thức ăn cho rầy là Jasmine-85 do phòng thí nghiệm NEDO cung cấp . Cứ 15 ngày gieo một ñợt lúa mới, riêng giai ñoạn nuôi rầy cánh ngắn 7-10 ngày gieo một ñợt và tăng lượng lúa gieo.
2.2.2.2 Chuẩn bị bố trí thí nghiệm
Trồng vào mỗi chậu sành nhỏ 4 cây lúa trước thí nghiệm 3 ngày ñể lúa ổn
ñịnh. Dùng bìa kiếng cứng khổ A4 quấn thành hình trụ có dán mép 1 cm làm lồng giữ rầy và chụp lên 4 cây lúa, phía trên lồng có ñậy vải mùng và cố ñịnh vải bằng dây thun, phía dưới gốc lúa có lót giấy thấm cách ly rầy và mặt ñất. Thả vào mỗi lồng lúa 30 con rầy trưởng thành và trước 2 ngày cho rầy ổn ñịnh mật số.
2.2.4 Bố trí thí nghiệm
2.2.4.1 Hiệu lực của 5 chế phẩm nấm xanh Metarhizium anisopliae ký sinh rầy nâu trong ñiều kiện phòng thí nghiệm, bộ môn Bảo Vệ Thực Vật, Khoa Nông nâu trong ñiều kiện phòng thí nghiệm, bộ môn Bảo Vệ Thực Vật, Khoa Nông Nghiệp và Sinh Học Ứng Dụng- Trường ðại học Cần Thơ
Thí nghiệm 1: Khảo sát hiệu lực của 5 chế phẩm ñối với thành trùng rầy nâu cánh dài từ ngày 5/1/2010 ñến ngày 13/1/2010.
Mục ñích: so sánh hiệu lực của 5 chế phẩm nấm xanh ñối với thành trùng rầy nâu cánh dài trong ñiều kiện phòng thí nghiệm.
Trước khi thí nghiệm tiến hành xác ñịnh mật số bào tử cho chế phẩm của từng
ñịa phương bằng lame ñếm hiệu Thoma.
Công thức tính mật số bào tử/g chế phẩm: Số bào tử/g = 4 x 106 x a x b
a: số bào tử trung bình/ô nhỏ nhất b: hệ số pha loãng
(theo Yasuhima Kunimi và Madoka Nakai, 2001)
Sau khi xác ñịnh mật số bào tử tiến hành pha dung dịch nấm có mật số 108
bào tử/ml.
Công thức pha loãng: C x V = C’x V’ Trong ñó: C: nồng ñộ dung dịch gốc V: thể tích dung dịch gốc C’: nồng ñộ dung dịch cần pha V’: thể tích dung dịch cần pha
- Pha 250 ml dung dịch chế phẩm nấm ở từng ñịa phương ở mật số bào tử là 108 bào tử/ml + chất bám dính cho mỗi nghiệm thức.
- Thí nghiệm ñược phun vào lúc chiều mát. Dùng bình phun nhỏ phun vào mỗi lồng 15 ml dung dịch chế phẩm nấm xanh.
- Thí nghiệm ñược bố trí hoàn toàn ngẫu nhiên gồm 6 nghiệm thức với 4 lần lặp lại. Mỗi lần lặp lại tương ứng 1 chậu lúa với 30 con thành trùng rầy nâu cánh dài.
- Nghiệm thức 1: phun dung dịch chế phẩm nấm Ma-ST. - Nghiệm thức 2: phun dung dịch chế phẩm nấm Ma-CT. - Nghiệm thức 3: phun dung dịch chế phẩm nấm Ma-VL. - Nghiệm thức 4: phun dung dịch chế phẩm nấm Ma-TG. - Nghiệm thức 5: phun dung dịch chế phẩm nấm Ma-AG. - Nghiệm thức 6: ðối chứng: nước cất thanh trùng.
Cả 6 nghiệm thức ñều có sử dụng chất bám dính là Tween 20.
Mỗi ngày dùng bình phun nhỏ phun nước cất thanh trùng ướt ñều phía bên ngoài lồng 2 lần nhằm tạo ẩm ñộ.
Ghi nhận chỉ tiêu
- Ghi nhận số rầy nâu sống và chết ở các ngày 3, 5, 7, 9 và 11 ngày sau khi phun. Ghi nhận nhiệt ñộ và ẩm ñộ khi lấy chỉ tiêu. Tính ñộ hữu hiệu bằng công thức Abbott (1925):
ðộ hữu hiệu (%) =
Trong ñó: C: Số rầy nâu sống ở nghiệm thức ñối chứng T: Số rầy nâu sống ở nghiệm thức phun chế phẩm. - Xử lý số liệu và thống kê số liệu bằng phần mềm EXCEL và MSTATC. Thí nghiệm 2: Khảo sát hiệu lực của 5 chế phẩm ñối với thành trùng rầy nâu cánh ngắn từ ngày 30/3/2010 ñến ngày 9/4/2010.
Mục ñích: so sánh hiệu lực của 5 chế phẩm nấm xanh ñối với thành trùng rầy nâu cánh ngắn trong ñiều kiện phòng thí nghiệm.
Cách tiến hành thí nghiệm:tương tự thí nghiệm 1
- Thí nghiệm ñược bố trí hoàn toàn ngẫu nhiên gồm 6 nghiệm thức với 4 lần lặp lại. Mỗi lần lặp lại tương ứng 1 chậu lúa với 30 con thành trùng rầy nâu cánh ngắn.
- Nghiệm thức 1: phun dung dịch chế phẩm nấm Ma-ST. - Nghiệm thức 2: phun dung dịch chế phẩm nấm Ma-CT. - Nghiệm thức 3: phun dung dịch chế phẩm nấm Ma-VL. - Nghiệm thức 4: phun dung dịch chế phẩm nấm Ma-TG. - Nghiệm thức 5: phun dung dịch chế phẩm nấm Ma-AG. - Nghiệm thức 6: ðối chứng: nước cất thanh trùng. Cả 6 nghiệm thức ñều có sử dụng Tween 20. 100 x C T C −
Ghi nhận chỉ tiêu: tương tự thí nghiệm 1.
- Xử lý số liệu và thống kê số liệu bằng phần mềm EXCEL và MSTATC.
2.2.4.2 Hiệu lực của 5 chế phẩm nấm xanh Metarhizium anisopliae ký sinh rầy nâu trong ñiều kiện nhà lưới, bộ môn Bảo Vệ Thực Vật, Khoa Nông Nghiệp và nâu trong ñiều kiện nhà lưới, bộ môn Bảo Vệ Thực Vật, Khoa Nông Nghiệp và Sinh Học Ứng Dụng- Trường ðại học Cần Thơ
Thí nghiệm 3: Khảo sát hiệu lực của 5 chế phẩm ñối với thành trùng rầy nâu cánh dài từ ngày 30/1/2010 ñến ngày 9/2/2010.
Mục ñích: so sánh hiệu lực của 5 chế phẩm nấm xanh ñối với rầy nâu cánh dài trong ñiều kiện nhà lưới ñể chọn ra chế phẩm có khả năng ký sinh mạnh.
Cách tiến hành thí nghiệm:tương tự thí nghiệm 1
- Thí nghiệm ñược bố trí khối hoàn toàn ngẫu nhiên gồm 6 nghiệm thức với 4 lần lặp lại. Mỗi lần lặp lại tương ứng 1 chậu lúa với 30 con thành trùng rầy nâu cánh dài.
- Nghiệm thức 1: phun dung dịch chế phẩm nấm Ma-ST. - Nghiệm thức 2: phun dung dịch chế phẩm nấm Ma-CT. - Nghiệm thức 3: phun dung dịch chế phẩm nấm Ma-VL. - Nghiệm thức 4: phun dung dịch chế phẩm nấm Ma-TG. - Nghiệm thức 5: phun dung dịch chế phẩm nấm Ma-AG. - Nghiệm thức 6: ðối chứng: nước cất thanh trùng. Cả 6 nghiệm thức ñều có sử dụng Tween 20.
Ghi nhận chỉ tiêu: tương tự thí nghiệm 1.
- Xử lý số liệu và thống kê số liệu bằng phần mềm EXCEL và MSTATC. Thí nghiệm 4: Khảo sát hiệu lực của 5 chế phẩm ñối với thành trùng rầy nâu cánh ngắn từ ngày 31/3/2010 ñến ngày 10/4/2010.
Mục ñích: so sánh hiệu lực của 5 chế phẩm nấm xanh ñối với rầy nâu cánh ngắn trong ñiều kiện nhà lưới.
- Thí nghiệm ñược bố trí khối hoàn toàn ngẫu nhiên gồm 6 nghiệm thức với 4 lần lặp lại. Mỗi lần lặp lại tương ứng 1 chậu lúa với 30 con thành trùng rầy nâu cánh ngắn.
- Nghiệm thức 1: phun dung dịch chế phẩm nấm Ma-ST. - Nghiệm thức 2: phun dung dịch chế phẩm nấm Ma-CT. - Nghiệm thức 3: phun dung dịch chế phẩm nấm Ma-VL. - Nghiệm thức 4: phun dung dịch chế phẩm nấm Ma-TG. - Nghiệm thức 5: phun dung dịch chế phẩm nấm Ma-AG. - ðối chứng: nước cất thanh trùng.
Cả 6 nghiệm thức ñều có sử dụng Tween 20.
Ghi nhận chỉ tiêu: tương tự thí nghiệm 1.
- Xử lý số liệu và thống kê số liệu bằng phần mềm EXCEL và MSTATC.
2.2.5 Tính tỷ lệ (%) rầy nâu nhiễm nấm trở lại
- Thu rầy nâu chết ở các nghiệm thức, ñể vào các ñĩa petri theo từng nghiệm thức. Các ñĩa petri có lót giấy thấm và gòn thấm nước tạo ẩm ñộ.
- Ủ các ñĩa có rầy nâu chết trong ñiều kiện phòng thí nghiệm, 7 ngày sau ñem ra quan sát dưới kính lúp ñể tính tỷ lệ nhiễm nấm trở lại.
- Tỷ lệ nhiễm nấm trở lại ñược tính bằng:
Tỷ lệ (%) nhiễm nấm = (a/b) x 100 Trong ñó a: rầy nâu có nhiễm nấm.
CHƯƠNG 3
KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN
3.1 Hiệu lực chế phẩm nấm xanh trong ñiều kiện phòng thí nghiệm
3.1.1 Thí nghiệm 1: Khảo sát hiệu lực của 5 chế phẩm ñối với thành trùng rầy nâu cánh dài
Từ kết quả bảng 3.1 cho thấy ở tất cả các nghiệm thức chế phẩm nấm xanh
ñều có hiệu lực gây chết rầy nâu cao, tăng nhanh qua các thời ñiểm và hoàn toàn khác biệt so với ñối chứng ở mức ý nghĩa 5%.
Ở thời ñiểm 3 NSKP, Ma-ST (41,31%) và Ma-CT (43,90%) có hiệu lực cao và không khác biệt ý nghĩa qua phân tích thống kê nhưng 2 nghiệm thức này hoàn toàn khác biệt với Ma-VL (21,48 %), Ma-TG (27,60%), Ma-AG(25,67%).
Bảng 3.1 ðộ hữu hiệu của 5 chế phẩm nấm xanh ñối với thành trùng rầy nâu cánh dài trong ñiều kiện phòng thí nghiệm, bộ môn Bảo Vệ Thực Vật.
T= 28,6 0C và RH= 72,2% Nghiệm thức ðộ hữu hiệu (%) ở các thời ñiểm 3 NSKP 5 NSKP 7 NSKP 9 NSKP 11 NSKP Ma-ST 41,31 a 78,50 a 93,25 a 99,04 a 100 a Ma-CT 43,90 a 77,60 a 92,02 a 98,96 a 100 a Ma-VL 21,48 b 59,75 bc 73,27 b 88,55 ab 97,61 ab Ma-TG 27,60 b 73,79 ab 83,82 ab 95,87 ab 100 a Ma-AG 25,67 b 53,62 c 74,13 b 87,98 b 96,64 b ðC 0,00 c 0,00 d 0,00 c 0,00 c 0,00 c CV(%) 18,96 13,64 15,24 11,68 5,04 Mức ý nghĩa * * * * *
Ghi chú: Trong cùng một cột, các trung bình có mẫu tự theo sau giống nhau thì không khác biệt ý nghĩa qua phân tích thống kê bằng phép thử Duncan.
Ở thời ñiểm 5 NSKP, Ma-TG có hiệu lực tăng rất nhanh so với thời ñiểm 3 NSKP (từ 27,60% tăng lên 73,79%), không khác biệt ý nghĩa qua phân tích thống kê với Ma-ST(78,50%) và Ma-CT (77,60%).
Tại thời ñiểm 7 và 9 NSKP, hiệu lực gây chết ở các nghiệm thức vẫn tăng nhanh. Ma-ST và Ma-CT vẫn giữ hiệu lực cao, Ma-ST (93,25% lên 99,04%), Ma- CT (92,02% tăng lên 98,96%) và Ma-VL (73,27% tăng lên 88,85%), Ma-TG (83,82% tăng lên 95,87%), Ma-AG (74,13% tăng lên 87,98%).
Ở 11 NSKP, có 3 nghiệm thức có ñộ hữu hiệu ñạt 100% là Ma-ST,Ma-CT và Ma-TG khác biệt ý nghĩa qua phân tích thống kê với Ma-AG (96,64%) nhưng không khác biệt với Ma-VL (97,61%).
Tóm lại, Ma-ST và Ma-CT có hiệu lực cao, tăng nhanh và ñều qua các thời
ñiểm, ñến 11 NSKP ñạt ñược hiệu lực cao nhất 100%. Ở tất cả các thời ñiểm, Ma- AG ñều khác biệt ý nghĩa qua phân tích thống kê với Ma-ST và Ma-CT. Ở các thời
ñiểm 3, 5, 7 NSKP, Ma-VL khác biệt ý nghĩa với 2 nghiệm thức có hiệu lực cao là Ma-ST và Ma-CT nhưng ở các thời 9, 11 NSKP thì không khác biệt. Riêng Ma-TG có hiệu lực tăng nhanh qua các thời ñiểm và ñến 11 NSKP thì ñạt hiệu lực 100%. Do ñó, Ma-ST, Ma-CT và Ma-TG có hiệu lực cao còn Ma-VL và Ma-AG có hiệu lực thấp hơn.
Qua các thời ñiểm thì hiệu lực của các nghiệm thức có sự khác biệt chứng tỏ
rằng cùng một chủng nấm ký sinh trên cùng một loại côn trùng nhưng ñược phân lập từ 5 ñịa phương khác nhau sẽ cho hiệu quả ký sinh và gây chết rầy nâu khác nhau.
Bảng 3.2Tỷ lệ (%) rầy nâu nhiễm nấm trở lại trong ñiều kiện phòng thí nghiệm, Bộ môn Bảo Vệ Thực Vật T = 25 0C, H = 83,5%. Nghiệm thức Tỷ lệ (%) rầy nâu nhiễm nấm trở lại ở các thời ñiểm 10 NSKP 12 NSKP 14 NSKP 16 NSKP 18 NSKP Ma-ST 71,15 75,00 76,99 77,31 77,50 Ma-CT 72,73 73,68 74,11 76,47 76,67 Ma-VL 34,48 49,33 63,44 65,14 66,10 Ma-TG 66,67 69,23 70,19 74,14 75,00 Ma-AG 55,88 59,42 63,83 64,81 66,67 ðC 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00
Ghi chú: Số liệu quan sát thực tế, không lặp lại.
Từ bảng 3.2 cho thấy tỷ lệ rầy nâu có nhiễm nấm tăng theo thời gian ở tất cả
các nghiệm thức. Trong ñó, Ma-ST có tỷ lệ nhiễm nấm trở lại cao hơn (77,50%), kế ñến Ma-CT (76,67%) và Ma-TG (75,00%). Ma-VL có tỷ lệ nhiễm nấm trở lại thấp nhất (66,10%). Tuy Ma-ST có tỷ lệ nhiễm nấm cao nhất nhưng tăng chậm chỉ 6% ( từ 71,15% lên 77,50%), tăng ít nhất là Ma-CT 4% (từ 72,73% lên 76,67%). Mặc dù tăng chậm nhưng vào 10 NSKP các nghiệm thức ñều có tỷ lệ nhiễm nấm trở lại cao Ma-ST (71,15%), Ma-CT (72,73%), Ma-VL (34,48%), Ma-TG (66,67%), Ma-AG (55,88%). Ở thời ñiểm 10 NSKP, Ma-VL có tỷ lệ nhiễm nấm thấp (34,48%) nhưng tăng khá nhanh vào những ngày sau ñó ñến 18 NSKP có tỷ lệ 66,10% (tăng 32%).
3.1.2 Thí nghiệm 2: Khảo sát hiệu lực của 5 loại chế phẩm ñối với thành trùng rầy nâu cánh ngắn
Từ kết quả bảng 3.3 cũng cho thấy ở tất cả các nghiệm thức chế phẩm nấm xanh
ñều có hiệu lực gây chết rầy nâu cao, tăng nhanh qua các thời ñiểm và hoàn toàn khác biệt so với ñối chứng ở mức ý nghĩa 5%.
Ở thời ñiểm 3 NSKP, Ma-VL (34,25%) và Ma-AG (30,98%) có hiệu lực thấp và có khác biệt ý nghĩa qua phân tích thống kê với Ma-CT (56,38%) có hiệu lực cao hơn, kếñến là Ma-ST (43,68%) và Ma-TG (49,63%).
Ở các thời ñiểm 5 NSKP, 3 nghiệm thức có hiệu lực cao và không khác biệt nhau là Ma-ST (76,73%), Ma-CT (74,79%), Ma-TG (66,64%) nhưng có khác biệt ý nghĩa qua phân tích thống kê với Ma-VL (41,27%) và Ma-AG (38,84%).
Bảng 3.3 ðộ hữu hiệu của 5 chế phẩm nấm xanh ñối với thành trùng rầy nâu cánh ngắn trong ñiều kiện phòng thí nghiệm, bộ môn Bảo Vệ Thực Vật.
T= 32,70C và RH= 58,7% Nghiệm thức ðộ hữu hiệu (%) của ở các thời ñiểm 3 NSKP 5 NSKP 7 NSKP 9 NSKP 11 NSKP Ma-ST 43,68 ab 76,73 a 88,82 a 98,15 a 100 a Ma-CT 56,38 a 74,79 a 86,93 ab 99,00 a 100 a Ma-VL 34,25 b 41,27 b 56,02 c 75,87 b 96,00 b Ma-TG 49,63 ab 66,64 a 81,23 ab 97,07 a 100 a Ma-AG 30,98 b 38,84 b 61,89 bc 82,71 b 94,91 b ðc 0,00 c 0,00 c 0,00 d 0,00 c 0,00 c CV(%) 22,46 19,93 21,93 9,00 5,16 Mức ý nghĩa * * * * *
Ghi chú: Trong cùng một cột, các trung bình có mẫu tự theo sau giống nhau thì không khác biệt ý nghĩa qua phân tích thống kê bằng phép thử Duncan.
Vào các thời ñiểm 7, 9, 11 NSKP thì Ma-ST, Ma-CT, Ma-TG có hiệu lực cao, tăng nhanh và ñều, cả 3 có hiệu lực tương ñương nhau, cùng ñạt hiệu lực cao nhất 100% vào thời ñiểm 11 NSKP và luôn có khác biệt ý nghĩa qua phân tích thống kê với 2 nghiệm thức còn lại. Riêng tại thời ñiểm 7 NSKP, không có sự khác biệt rõ giữa nhóm có hiệu lực cao và nhóm có hiệu lực thấp hơn, còn Ma-ST (88,82%) có khác biệt ý nghĩa qua phân tích thống kê với 2 nghiệm thức Ma-VL (56,02%) và Ma-AG (61,89%).
Tóm lại Ma-ST, Ma-CT và Ma-TG có hiệu lực gây chết rầy nâu cao hơn Ma- VL và Ma-AG.
Tuy nhiên, thời gian bố trí thí nghiệm thử hiệu lực chế phẩm ñối với rầy nâu cánh ngắn có ñiều kiện nhiệt ñộ cao và ẩm ñộ thấp không phù hợp cho nấm xanh phát triển do ñó hiệu lực ký sinh và gây chết của nấm xanh ở thí nghiệm 2 chậm