Lấy bệnh phẩm là phân, chất chứa ựường tiêu hóa hoặc dịch ngoáy ổ nhớp, dịch ngoáy khắ quản ựối với gia cầm sống. Lấy bệnh phẩm là não, gan, lách, phổi của gà bệnh mới chết. Bệnh phẩm ựược nghiền với nước sinh lý thành huyễn
dịch 1/10, xử lý kháng sinh (20% thể tắch), ựể kháng sinh tác ựộng ở nhiệt ựộ phòng trong 1 - 2 giờ, ly tâm 1000 vòng/ phút /10 phút và lấy nước trong ở trên.
- Gây bệnh cho gà: yêu cầu gà khỏe mạnh, không nằm trong vùng có dịch và chưa tiêm vacxin. Tiêm 1 ml vào dưới da hay bắp thịt. Mỗi mẫu ựem tiêm cho 2 - 3 gà. Sau 3 - 5 ngày sẽ xuất hiện các dấu hiệu ựầu tiên của bệnh. Sau 7 - 10 ngày gà chết mổ khám thấy bệnh tắch giống như của gà mắc bệnh ngoài tự nhiên.
- Gây bệnh cho phôi: dùng phôi gà 9 - 11 ngày tuổi, tốt nhất lấy phôi gà của ựàn gà SPF (Specific Pathogen Free) hoặc gà không có kháng thể Newcastlẹ Mỗi mẫu tiêm 0,2 ml/phôi/5 phôi; tiêm vào xoang niệu mô. Phôi chết sau 4 - 7 ngày, ựể lạnh ở 4oC rồi thu hoạch lấy nước trứng, kiểm tra bằng phản ứng ngưng kết hồng cầu (Hemagglutinin test - HA), nếu bệnh phẩm có virus, phản ứng HA dương tắnh. Kiểm tra bệnh tắch của phôị
- Gây nhiễm cho môi trường tế bào: có thể sử dụng nhiều loại môi trường tế bào nhưng phương pháp gây nhiễm vào môi trường tế bào xơ phôi gà một lớp ựược sử dụng phổ biến. Nếu bệnh phẩm có virus, sau 72 giờ gây nhiễm, virus gây bệnh tắch tế bàọ Căn cứ vào các chỉ số ựể xác ựịnh ựộc lực của virus. Lấy dịch nuôi cấy tế bào làm phản ứng HA sẽ cho kết quả dương tắnh.