tử ngoại.
• Khảo sát bước sóng định lượng Quinin suựat:
Chúng tôi tiến hành khảo sát bước sóng định lượng Quinin sulfat trên Quinin sulfat chất đối chiếu do Viện kiểm nghiệm cung cấp.
Cân chính xác khoảng 15mg Quinin sulfat cho vào bình định mức 200ml, thêm 150ml dung dịch HC1 0,1N, lắc kỹ khoảng 20 phút, thêm dung dịch H ơ 0,1N vừa đủ tới vạch, lắc đều. Lọc, bỏ 20ml dịch lọc đầu. Hút chính xác 20ml dịch lọc tiếp theo cho vào bình định mức 50ml, thêm dung dịch HC1 0,1N vừa đủ tới vạch và lắc đều. Lấy chính
xác 10ml dịch vừa thu được cho vào bình định mức 50ml và làm vừa đủ đến vạch bằng dung dịch HC1 0,1N, lắc đều.
Quét phổ hấp thụ của dung dịch thu được ở bước sóng từ 200nm đến 400nm với mẫu trắng là dung dịch HC1 0,1N.
Report Date: 10:22:30, 04/29/2003
2 5 0 nrp
Abs
Hình 4: Phổ hấp thụ của Quinin sulfat trong môi trường acid HC1 0,1N.
Nhận xét: Quinin sulfat trong môi trường acid HC1 0,1N có cực đại
hấp thụ tại bước sóng 250nm. Vì vậy phép định lượng được tiến hành tại bước sóng này.
• Khảo sát thòi gian đo ảnh hưởng tới độ hấp thụ của Quinin suựat:
Qui trình tiến hành tương tự như phần khảo sát độ lặp lại của Quinin sulfat trên viên nén bao đường Antigrip F, SKS: 050801. Sau đó tiến hành đo độ hấp thụ của dung dịch Quinin sulfat ở các thời gian khác nhau ta có kết quả được ghi ở bảng 6.
Bảng 6: Ảnh hưởng của thời gian đo tới độ hấp thụ của Quinin sulfat. Quinin sulfat
STT m (mg) E5’ E15’ E25’ E35’ E45’
1 146,0 0,455 0,454 0,454 0,454 0,454
2 145,8 0,441 0,441 0,441 0,441 0,441
Report Date: 10:20:19, 04/29/2003
Hình 5: Đồ thị ảnh hưởng của thời gian đo tới độ hấp thụ của Quinin.
Nhận xét. Từ đồ thị nhận thấy, để ổn định chúng tôi tiến hành đo độ
hấp thụ của dung dịch Quinin sulfat trong khoảng thời gian sau khi pha từ 10 đến 40 phút.
• Khảo sát khoảng tuyến tính E-C:
Chúng tôi tiến hành khảo sát sự phụ thuộc tuyến tính giữa nồng độ chất cần định lượng với độ hấp thụ tương ứng trên chất đối chiếu Quinin sulfat với các nồng độ biến thiên từ 4 -ỉ- 16p.g/ml ở bước sóng 250nm. Kết quả thu được được ghi ở bảng 7.
Bảng 7: Sự phụ thuộc giữa độ hấp thụ (E) và nồng độ dung dịch Quinin sulfat (C) trong môi trường acid HC1 0,1N.
Quinin sulfat
STT Nồng độ (|ug/ml) E Phương trình hồi qui
1 4 0,307 y = 0,0732x + 0,0074 r = 0,9997 2 6 0,442 3 8 0,597 4 10 0,732 5 12 0,882 6 14 1,024 7 16 1,190 Report Date: 15:07:36, 04/17/2003 ^l3S Standard Calibration
Hình 6: Đồ thị sự phụ thuộc E - c trong môi trường acid HC1 0,1N.
Nhận xét: Dựa vào đồ thị ta thấy, trong khoảng nồng độ biến thiên từ 4 -j- 16|ig/ml thì độ hấp thụ tuyến tính vói nồng độ dung dịch.
• Khảo sát khả năng chiết tách Quinin suựat ra khỏi hỗn hợp: (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
Chúng tôi tiến hành khảo sát khả năng chiết tách Quinin sulfat ra khỏi hỗn hợp chứa Paracetamol và Quinin sulfat dựa trên nguyên tắc: Dùng dung dịch NaOH 0,1N để chuyển Quinin sulfat thành Quinin bazơ tan trong Cloroform, còn Paracetamol trong dung dịch NaOH 0,1N tạo muối Phenolat không tan trong Cloroform. Để khảo sát hệ số chiết tách, chúng tôi tiến hành trên chất đối chiếu Paracetamol và Quinin sulfat do Viện kiểm nghiệm cung cấp. Dung dịch thử và dung dịch chuẩn Quinin sulfat được pha theo qui trình sau:
- Dung dich thử: Cân chính xác khoảng 75mg Paracetamol và 15mg
Quinin sulfat cho vào bình định mức 200ml, thêm 150ml nước cất, lắc kỹ khoảng 30 phút, thêm nước cất tới vạch, lắc đều. Lọc, bỏ 20ml dịch lọc đầu. Hút chính xác 20ml dịch lọc tiếp theo cho vào bình gạn, thêm 10ml dung dịch NaOH 0,1N, lắc kỹ. Chiết 3 lần với Cloroform, mỗi lần 20ml. Để cho tách lớp, chuyển lớp Cloroform (có chứa Quinin bazơ) vào bình gạn khác đã chứa sấn lOml nước cất. Dịch chiết Cloroform mỗi lần được rửa bằng cùng 10ml nước cất ở trên. Cho bay hơi Cloroform đến cạn. Hoà tan cắn bằng dung dịch HC1 0,1N và chuyển vào bình định mức 50ml, thêm dung dịch HC1 0,1N cho vừa đủ và lắc đều. Lấy chính xác 10ml dịch thu được cho vào bình định mức 50ml và làm vừa đủ đến vạch bằng dung dịch HC10,1N, lắc đều.
- Dung dịch chuẩn Quinin sulfat: Cân chính xác khoảng 15mg Quinin
sulfat cho vào bình định mức 200ml, thêm 150ml nước cất, lắc kỹ khoảng 30 phút, thêm nước cất vừa đủ tới vạch, lắc đều. Lọc, bỏ 20ml dịch lọc đầu. Hút chính xác 20ml dịch lọc tiếp theo cho vào bình gạn, thêm 10ml dung dịch NaOH 0,1N, lắc kỹ. Chiết 3 lần với Cloroform,
mỗi lần 20ml. Để cho tách lớp, chuyển lớp Cloroform (có chứa Quinin bazơ) vào bình gạn khác đã chứa sẵn 10ml nước cất. Dịch chiết Cloroform mỗi lần được rửa bằng cùng lOml nước cất ở trên. Cho bay hơi Cloroform đến cạn. Hoà tan cắn bằng dung dịch HC1 0,1N và chuyển vào bình định mức 50ml, thêm dung dịch HC1 0,1N vừa đủ tới vạch và lắc đều. Lấy chính xác 10ml dịch vừa thu được cho vào bình định mức 50ml và làm vừa đủ đến vạch bằng dung dịch HC1 0,1N, lắc đều.
Tiến hành đo mật độ quang của dung dịch thử và dung dịch chuẩn Quinin sulfat ở bước sóng 250nm, trong cuvet lcm, mẫu trắng là dung dịch HC1 0,1N.
Tỉ lệ phần trăm Quinin sulfat chiết được được tính theo công thức:
Dt X Mc % = ---
Dc X Mx Trong đó:
. Mc, Mx lần lượt là khối lượng cân Quinin sulfat trong mẫu chuẩn và mẫu thử (mg).
. Dc, Dxlần lượt là độ hấp thụ đo được của mẫu chuẩn và mẫu thử. Kết quả khảo sát khả năng chiết tách được ghi trong bảng 8:
Bảng 8: Kết quả khảo sát khả năng chiết tách Quinin sulfat. Quinin sulfat STT Chuẩn Thử % Chiết được Mc (mg) Dc Mx (mg) Dx 1 14,9 0,435 15,0 0,449 102,53 2 14,9 0,436 15,7 0,452 98,39 3 15,8 0,470 15,5 0,463 100,42 4 15,8 0,470 15,7 0,470 100,64 5 15,3 0,454 15,5 0,460 100,01 6 15,3 0,453 15,8 0,476 101,75 Tính thống kê Giá trị trung bình X 100,62
Đô lêch chuẩn s - ì —---
II / 7 - 1
1,44
Sai số chuẩn s x = -Ẹ= 0,59
. x ^ s, A C í / Sỵ 'ta'100
Sai sô tương đối A % = ỷ 1,51
n = 6; p = 0,95; ta = 2,57
Nhận xét: Kết quả cho thấy, khả năng chiết tách Quinin sulfat ra
khỏi hỗn hợp bằng phương pháp trên là tốt, tỷ lệ phần trăm chiết được là: 100,62 ± 1,51%.
• Khảo sát độ lặp lại:
Chúng tôi sử dụng viên nén bao đường Antigrip F, SKS: 050801 để khảo sát độ lặp lại và độ đúng của phương pháp. Dung dịch thử và dung dịch chuẩn Quinin sulfat được pha theo qui trình sau:
- Dung dịch thử: Viên được loại bỏ lớp bao màu. Cân 20 viên, tính khối
lượng trung bình của viên, rồi nghiền thành bột mịn. Cân chính xác một lượng bột tương ứng với khoảng 15mg Quinin sulfat (khoảng 0,14g bột viên) cho vào bình định mức 200ml, thêm 150ml nước cất, lắc kỹ khoảng 30 phút, thêm nước cất tới vạch, lắc đều. Lọc, bỏ 20ml dịch lọc đầu. Hút chính xác 20ml dịch lọc tiếp theo cho vào bình gạn, thêm lOml dung dịch NaOH 0,1N, lắc kỹ. Chiết 3 lần với Cloroform, mỗi lần 20ml. Để cho tách lớp, chuyển lớp Cloroform (có chứa Quinin bazơ) vào bình gạn khác đã chứa sẵn 10ml nước cất. Dịch chiết Cloroform mỗi lần được rửa bằng cùng lOml nước cất ở trên. Cho bay hơi Cloroform đến cạn. Hoà tan cắn bằng dung dịch HC1 0,1N và chuyển vào bình định mức 50ml, thêm dung dịch HC1 0,1N cho vừa đủ và lắc đều. Lấy chính xác 10ml dịch thu được cho vào bình định mức 50ml và làm vừa đủ đến vạch bằng dung dịch HC1 0,1N, lắc đều.
- Dung dịch chuẩn Quinin sulfat: Tiến hành tương tự như phần khảo sát
khả năng chiết tách Quinin sulfat. Tiến hành đo tương tự như trên. Hàm lượng Quinin sulfat trong viên được tính theo công thức sau:
Dx X Mc
X (mg/viên) = --- X M X c Dc X Mx (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
Trong đó:
. Dc, Dt lần lượt là mật độ quang của dung dịch chuẩn và thử.
. Mc, Mx lần lượt là khối lượng chất chuẩn và thử đem định lượng (mg). . M là khối lượng trung bình của viên Antigrip F (M = 0,2938g).
. c là hàm lượng phần trăm Quinin sulfat đối chiếu. Kết quả khảo sát được ghi ở bảng 9.
Bảng 9: Kết quả khảo sát độ lặp lại trên viên nén Antigrip F, SKS: 050801.
Quinin sulfat STT Chuẩn Thử X(mg/viên) Mc (mg) Dc Mt (mg) Dx 1 15,3 0,454 146,3 0,450 28,93 2 15,3 0,454 146,9 0,463 29,65 3 15,3 0,454 145,7 0,446 28,79 4 15,9 0,470 150,0 0,473 29,77 5 15,9 0,469 146,5 0,454 29,32 6 15,9 0,470 145,4 0,445 28,89 Tính thống kê Giá trị trung bình X 29,23
Đô lêch chuẩn s= ] — - - - -
v Y V n - \
0,42 Sai số chuẩn sx = -j=
yjn 0,17
Sai số tương đối Ả% - ỵ 1,49
n = 6; p = 0,95; ta=2,57
Nhận xét: Kết quả trên cho thấy phương pháp có độ lặp lại tốt. Hàm
• Khảo sát độ đúng của phương pháp:
Khảo sát độ đúng bằng cách thêm chuẩn. Thêm vào lượng bột viên đấ biết rõ hàm lượng, một lượng xác định chất đối chiếu Quinin sulfat bằng khoảng 8mg sao cho nồng độ hoạt chất tương ứng không nằm ngoài khoảng nồng độ ở phần khảo sát khoảng tuyến tính E - c. Sau đó tiến hành tương tự như phần khảo sát độ lặp lại của Quinin sulfat.
Kết quả khảo sát được ghi ở bảng 10.
Bảng 10: Kết quả khảo sát độ đúng trên viên nén Antigrip F, SKS: 050801.
Quinin sulfat STT Lượng thêm vào
(mg) Lượng tìm thấy (mg) % Tìm lại 1 8,00 7,82 97,75 2 8,00 7,85 98,13 3 8,00 7,89 98,63 4 8,00 8,07 100,88 5 8,00 7,98 99,75 Độ đúng 99,03
Nhận xét: Phương pháp trên có độ đúng cao 99,03%. Như vậy các kết quả
định lượng có độ chính xác cao.
• Khảo sát ảnh hưởng của tá dược và Paracetamol tới độ hấp thụ của Quirtin sulfat:
Chuẩn bị 3 mẫu thử, mỗi mẫu: cân khoảng 15mg Quinin sulfat; 3 mẫu trắng, mỗi mẫu: cân khoảng 75mg Paracetamol và thêm vào toàn bộ lượng tá dược (tính theo khối lượng Quinin sulfat để dập viên). Sau đó tiến hành tương tự như trên.
Kết quả khảo sát được ghi ở bảng 11.
B ản gll: Ảnh hưởng của tá dược và Paracetamol tới độ hấp thụ của dung dịch Quinin sulfat. Mẫu Độ hấp thụ 1 2 3 Thử 0,461 0,458 0,452 Trắng 0,003 0,002 0,002
Nhận xét. Tá dược và Paracetamol ảnh hưởng không đáng kể tới độ
hấp thụ của dung dịch Quinin sulfat. Như vậy phương pháp trên là đặc hiệu.