3. Ý nghĩa khoa học và thực tiễn của đề tài
3.3.1. Kết quả phân tích kiểu nhân tỏi cô đơn
a. Mẫu rễ
Phân tích hình thái NST được tiến hành trên ảnh chụp hiển vi tiêu bản NST kì giữa tế bào đỉnh rễ đã phóng đại lớn. Ảnh chụp phóng đại của ít nhất 3 tế bào đang phân chia ở kì giữa với hình thái NST rõ được dùng để phân tích NST để xác định công thức kiểu nhân.Số liệu về chiều dài tương đối của cánh dài, cánh ngắn, chiều dài trung bình NST, tỉ lệ cánh được trình bày trong bảng 3.3, 3.4. Nhân đồ (Karyogram) và NST đồ (Idiogram) của NST được vẽ dựa trên số liệu trung bình chiều dài tương đối của mỗi NST thể trên hình 3.5, 3.6 và biểu đồ 3.1, 3.2. Các NST được sắp xếp và đánh số theo sự tăng dần của chiều dài trung bình NST.
Kết quả phân tích trên mẫu rễ cho thấy ở tỏi cô đơn tồn tại bộ NST gồm dạng tam bội và dạng tứ bội
18
Hình 3.5. Bộ NST tam bội ở mẫu rễ
Bảng 3.3. Các thông số hình thái dạng tam bội tỏi cô đơn trên mẫu rễ
NST q ± SE p ± SE L R Phân loại NST 1 2,45 ± 0,06 2,62 ± 0,08 5,07 1,07 m 2 2,23 ± 0,08 4,56 ± 0,06 6,79 2,04 Sm 3 2,84 ± 0,08 4,51 ± 0,08 7,35 1,59 m 4 3,79 ± 0,08 4,23 ± 0,06 8,02 1,12 m 5 2,39 ± 0,08 5,85 ± 0,08 8,24 2,45 Sm 6 3,17 ± 0,08 5,96 ± 0,08 9,13 1,88 Sm 7 3,62 ± 0,06 5,96 ± 0,08 9,58 1,65 m 8 5,34 ± 0,06 6,46 ± 0,08 11,8 1,21 m
Dạng tam bội gồm 24 chiếc NST trong đó có 5 cặp tâm cân (m) và 3 cặp tâm lệch giữa ( Sm).
19
Biểu đồ 3.1. Idiogram của dạng tam bội tỏi cô đơn trên mẫu rễ
0 2 4 6 8 10 12 1 2 3 4 5 6 7 8 Cánh ngắn Cánh dài
Hình 3.6. Karyogram dạng tam bội tỏi cô đơn trên mẫu rễ
- Dạng tứ bội:
20
Bảng 3.4. Các thông số hình thái NST dạng tứ bội tỏi cô đơn trên mẫu rễ
NST q ± SE p ± SE L R Phân loại NST 1 1,59 ± 0,04 1,96 ± 0,04 3,55 1,23 M 2 2,35 ± 0,06 3,67± 0,06 6,02 1,56 M 3 2,59 ± 0,08 4,88 ± 0,08 7,47 1,88 Sm 4 2,21 ± 0,08 5,30 ± 0,08 7,51 2,40 Sm 5 3,05 ± 0,08 5,51 ± 0,08 8,56 1,81 Sm 6 1,96 ± 0,08 6,68 ± 0,08 8,64 3,41 St 7 4,80 ± 0,08 5,43 ± 0,08 10,23 1,13 M 8 3,72 ± 0,04 6,68 ± 0,08 10,40 1,80 Sm
Dạng tứ bội gồm 32 chiếc NST trong đó có 3 cặp tâm cân (m), 4 cặp tâm lệch giữa (Sm) và 1 cặp tâm lệch mút (St).
Công thức kiểu nhân là: 4n = 32: 12m + 16Sm + 4St
21
Hình 3.8. Karyogram dạng tứ bội tỏi cô đơn trên mẫu rễ
b. Mẫu callus nuôi cấy mô
Phương pháp phân tích NST để xác định kiểu nhân tỏi cô đơn trên callus cũng được tiến hành tương tự như trên mẫu rễ.
Sử dụng 2 loại callus: + Callus mới phát sinh
+ Callus đã qua cấy chuyển nhiều lần
* Phân tích kiểu nhân tỏi cô đơn trên callus mới phát sinh
Các số liệu về chiều dài tương đối của NST, cánh dài, cánh ngắn và tỉ lệ cánh được thể hiện trong bảng 3.5, sơ đồ Idiogram và Karyogram của callus mới phát sinh được trình bày trên biểu đồ 3.3 và hình 3.10.
Kết quả phân tích cho thấy:
Callus mới phát sinh chỉ tồn tại bộ NST dạng tứ bội gồm 32 chiếc NST trong đó có 3 cặp tâm cân (m) và 5 cặp tâm lệch giữa (Sm).
22
Hình 3.9. Bộ NST tứ bội tỏi cô đơn trên callus mới phát sinh Bảng 3.5. Các thông số hình thái NST dạng tứ bội tỏi cô đơn trên callus mới
phát sinh NST q ± SE p ± SE L R Phân loại NST 1 1,88 ± 0,08 4,21± 0,04 6,09 2,24 Sm 2 2,42 ± 0,08 4,72± 0,04 7,14 1,95 Sm 3 3,38 ± 0,04 5,47 ± 0,08 8,85 1,62 m 4 2,63 ± 0,08 6,64 ± 0,08 9,27 2,52 Sm 5 4,88 ± 0,08 4,97 ± 0,08 9,85 1,10 m 6 3,47 ± 0,08 6,43 ± 0,08 9,90 1,85 Sm 7 4,22± 0,04 8,56 ± 0,08 12,78 2,03 Sm 8 6,22 ± 0,04 6,97 ± 0,08 13,19 1,12 m
Biểu đồ 3.3. Idiogram dạng tứ bội tỏi cô đơn trên callus mới phát sinh
0 2 4 6 8 10 12 14 1 2 3 4 5 6 7 8 Cánh ngắn Cánh dài
23
Hình 3.10. Karyogram dạng tứ bội tỏi cô đơn trên callus mới phát sinh * Phân tích kiểu nhân tỏi cô đơn trên callus qua cấy chuyển nhiều lần
Các số liệu về chiều dài tương đối của NST, cánh dài, cánh ngắn và tỉ lệ cánh được thể hiện trong bảng 3.6, 3.7, sơ đồ Idiogram và Karyogram của callus mới phát sinh và callus cấy chuyển nhiều lần được trình bày lần lượt trên các biểu đồ 3.4, 3.5 và các hình 3.12, 3.14.
Callus đã qua cấy chuyển nhiều lần phát hiện bộ NST ở 3 dạng: tứ bội, ngũ bội và thập bội.
- Dạng tứ bội
24
Bảng 3.6. Các thông số hình thái NST dạng tứ bội tỏi cô đơn trên callus qua cấy chuyển nhiều lần
NST q ± SE p ± SE L R Phân loại NST 1 1,59 ± 0,04 3,38 ± 0,04 4,97 2,13 Sm 2 2,84 ± 0,08 3,80 ± 0,08 6,64 1,34 m 3 2,21 ± 0,08 4,68 ± 0,06 6,89 2,12 Sm 4 2,08 ± 0,08 5,56 ± 0,08 7,64 2,67 Sm 5 3,55 ± 0,04 5,09 ± 0,06 8,64 1,43 m 6 3,21 ± 0,08 6,01 ± 0,08 9,22 1,87 Sm 7 2,55 ± 0,06 6,76 ± 0,08 9,31 2,65 Sm 8 3,13 ± 0,08 6,85 ± 0,04 9,98 2,19 Sm
Dạng tứ bội gồm 32 chiếc NST trong đó có 2 cặp tâm cân (m) và 6 cặp tâm lệch giữa (Sm)
Công thức kiểu nhân: 4n = 32: 8m + 24Sm
Biểu đồ 3.4. Idiogram dạng tứ bội tỏi cô đơn trên callus qua cấy chuyển nhiều lần
25
Hình 3.12. Karyogram dạng tứ bội tỏi cô đơn trên callus qua cấy chuyển nhiều lần
- Dạng ngũ bội:
Hình 3.13. Bộ NST ngũ bội ở callus cấy chuyển nhiều lần
Bảng 3.7. Các thông số hình thái NST dạng ngũ bội tỏi cô đơn trên callus qua cấy chuyển nhiều lần
NST q ± SE p ± SE L R Phân loại NST 1 1,49 ± 0,02 1,64 ± 0,03 3,13 1,10 m 2 1,77 ± 0,07 2,14 ± 0,07 3,91 1,21 m 3 1,94 ± 0,03 3,01 ± 0,07 4,95 1,55 m 4 2,20 ± 0,07 4,61 ± 0,07 6,81 2,10 Sm 5 1,90 ± 0,07 5, 18 ± 0,08 7,08 2,73 Sm
26
6 2,54 ± 0,08 6,15 ± 0,08 8,69 2,42 Sm
7 4,18 ± 0,07 4,61 ± 0,03 8,79 1,10 m
8 3,64 ± 0,07 5,38 ± 0,08 9,02 1,48 m
Dạng ngũ bội gồm 40 chiếc NST trong đó có 5 cặp tâm cân (m) và 3 cặp tâm lệch giữa (Sm)
Công thức kiểu nhân: 5n = 40: 25m + 15Sm
Biểu đồ 3.5. Idiogram dạng ngũ bội tỏi cô đơn trên callus qua cấy chuyển nhiều lần
Hình 3.14. Karyogram dạng ngũ bội tỏi cô đơn trên callus qua cấy chuyển nhiều lần
27 - Dạng thập bội 10n = 80
Do số lượng ảnh chụp tiêu bản còn chưa đáp ứng đủ số lượng và chất lượng nên chưa tiến hành phân tích kiểu nhân.
Hình 3.15. Bộ NST thập bội ở callus cấy chuyển nhiều lần
Trong quá trình phân tích kiểu nhân của các mẫu tỏi cô đơn như trên không phát hiện thấy dạng lưỡng bội ở tỏi cô đơn.