Tiến hành định tính xác định các nhóm chất hữu cơ có mặt trong lá Đu đủ rừng dựa vào các hiện tượng vật lý và các phản ứng hóa học đặc trưng sau:
Định tính saponin: quan sát hiện tượng tạo bọt và phân biệt 2 loại saponin dựa trên tính chất tạo bọt trong môi trường acid và kiềm.
Định tính flavonoid: sử dụng phản ứng cyanidin; phản ứng với FeCl3 5%; với dung dịch kiềm loãng NaOH 10% và hơi amoniac.
Định tính alcaloid: sử dụng các thuốc thử Mayer, Bouchardat và Dragendorff.
Định tính anthranoid dạng tự do và dạng toàn phần: sử dụng phản ứng với dung dịch kiềm loãng (phản ứng Borntraeger).
Định tính coumarin: sử dụng phản ứng mở - đóng vòng lacton; phản ứng với thuốc thử diazo; quan sát hiện tượng huỳnh quang và vi thăng hoa.
Định tính glycosid tim: sử dụng phản ứng Liebermann (khung steroid); phản ứng Legal (vòng lacton) và phản ứng Keller – Kiliani (đường 2,6 - desoxy).
Định tính tanin: sử dụng phản ứng với dung dịch FeCl3 5%; với dung dịch chì acetat 10% và với dung dịch gelatin 1%.
Định tính polysaccarid: sử dụng phản ứng với TT Lugol.
Định tính đường khử: sử dụng phản ứng với TT Fehling A + Fehling B.
Định tính acid hữu cơ: sử dụng phản ứng với bột Na2CO3.
Định tính chất béo: bằng cách quan sát hiện tượng vết mờ trên giấy lọc khi nhỏ dịch chiết lên miếng giấy lọc.
Định tính caroten: sử dụng phản ứng với H2SO4 đặc.
Định tính sterol: sử dụng phản ứng Liebermann- Burchard.
Kết quả định tính các nhóm chất trong lá Đu đủ rừng thu hái ở Hà Giang được trình bày ở bảng 3.1.
Bảng 3.1. Kết quả định tính các nhóm chất trong lá Đu đủ rừng TT Nhóm chất Kết quả định tính Kết luận
1 Saponin Triterpenoid (+++) Có saponin triterpenoid
2 Flavonoid - Không có
3 Alcaloid - Không có
4 Coumarin - Không có
5 Glycosid tim - Không có
6 Anthranoid - Không có
7 Tanin - Không có
8 Polysaccarid ++ Có
9 Đường khử +++ Có
10 Acid hữu cơ ++ Có
11 Chất béo ++ Có
12 Caroten - Không có
13 Sterol +++ Có
Ghi chú: (-) Phản ứng âm tính (++) Phản ứng dương tính rõ (+) Phản ứng dương tính (+++) Phản ứng dương tính rất rõ
Nhận xét: Trong lá cây Đu đủ rừng (Trevesia palmata Roxb ex Lind. Vis) có các nhóm chất: saponin triterpenoid, acid hữu cơ, đường khử, sterol, polysaccarid và chất béo. Trong đó saponin triterpenoid là nhóm chất chính.