Sắc ký [17,18]là một họ các kĩ thuật hoá học phân tích là kỹ thuật phân bố rắn
lỏng dùng để tách các chất trong một hỗn hợp. Trong đó pha động là chất lỏng chứa chất cần phân tích đi ngang qua pha tĩnh là một lớp chất hấp phụ trơ (silicagen hoặc ôxit nhôm, tráng thành một lớp mỏng đều trên một nền phẳng như tấm kính, tấm nhôm,...). Khi các chất cần phân tích di chuyển qua hệ thống với tốc độ khác nhau, chúng sẽ được tách khỏi nhau theo thời gian. Một cách lí tưởng, mỗi thành phần đi qua hệ thống trong một khoảng thời gian riêng biệt, gọi là "thời gian lưu", thời gian này được đặc trưng bởi giá trị Rf .
(2.1)
Chất có độ phân cực thấp bị kéo lên cao hơn (có giá trị Rf lớn hơn); chất có độ phân cực cao (có giá trị Rf nhỏ hơn).
* Kĩ thuật đưa chất lên lớp mỏng: Lấy một lượng nhỏ cặn chiết hòa tan
bằng 2-3 giọt dung môi thích hợp (dung môi dễ bay hơi), sau đó dùng capila chấm chất lên lớp mỏng dưới dạng vệt tròn nhỏ. Triển khai với dung môi khi vệt chất đã hoàn toàn khô.
* Dung môi: Các hệ dung môi pha theo tỷ lệ phù hợp. Trộn đều rồi đổ vào
bình khai triển. Để yên dung môi đến khi bão hòa mới sử dụng * Phát hiện vệt
chất trên lớp mỏng:
• Phát huỳnh quang: Lớp mỏng được bức xạ bằng các bước sóng tử ngoại ngắn (254nm) và dài (366nm). Các chất phát huỳnh quang tạo ra các màu khác nhau.
- Thuốc thử vanilin/ axit sunfuric: khi phun trên lớp mỏng thường cho các vệt chất màu tím, tím hồng, tím đậm, đỏ, hồng, vàng, xanh…, chỉ ra sự có mặt của các tecpenoit hoặc flavanoit.
- Thuốc thử Dragendoff-Munier: Các vệt chất akcaloid trên thường cho màu da cam.
- Thuốc thử FeCl3 (FeCl3 5% trong etanol): Các vệt chất flavanoit thường cho màu xanh đen, nâu.
- Đốt cháy: phun axit sunfuric đặc được phun lên lớp mỏng , axit đề hidrat hóa các hợp chất hữu cơ thành các cặn than đen. Ưu điểm của phương pháp là có thể phát hiện được phần lớn các hợp chất hữu cơ.
Sắc ký lớp mỏng sử dụng thích hợp cho việc thăm dò để tách chất bằng sắc ký cột.