Cân chính xác azithromycin chuẩn tương ứng với khoảng 125,0 mg azithromycin khan cho vào bình định mức dung tích 200ml, thêm khoảng 150ml ethanol 96° lắc kỹ cho tan, bổ sung ethanol vừa đủ tới vạch. Thu được dung dịch gốc có chứa 0,625 mg/ml azithromycin.
Tiến hành pha dãy các dung dịch chuẩn có nồng độ khác nhau từ dung dịch gốc trên theo bảng 2.3.
Bảng 2.3. Chuẩn bị dãy dung dịch chuẩn.
Dung dịch chuẩn 1 2 3 4 5 6
Số ml dung dịch gốc 10 15 20 25 30 40
Thêm ethanol 96° vừa đủ 50,0 ml lắc đều
Dùng 2ml mỗi dung dịch trên, tiến hành theo quy định như mục 2.2.2.2, dịch chiết thu được đem đo quang tại bước sóng 417nm (Song song tiến hành một mẫu trắng).
o.a < 0.6 ộ> c CD -Q I 0.4 -Q < 0.2 ~ 1 r— ỵ — ' 1 ' T~ r_ 1 1 '1 r~~T T“ T ~ r~~T ' I r— 7 1 r r~ 1 1 I r — r — r - Y — , T >-1-r— 360 380 __ 400 420 ___440____ 460_____4 8 0____ 500_____ 520 Wavelength
Hình 2.5. Phổ hấp thụ của các dung dịch chất màu thu được từ các dung dịch chuẩn
Kết quả khảo sát tương quan hồi quy tuyến tính của azithromycin được trình bày ở bảng 2.4.
Bảng 2.4. Kết quả xác định khoảng tuyến tính của phương pháp
Dung dịch 1 2 3 4 5 6 Nồng độ (ụg/ml) 5 7,5 10 12,5 15 20 Độ hấp thụ 0,19235 0,32837 0,44429 0,57950 0,72496 0,97011 Thông số thống kê
Phương trình hồi quy: y = 0,052 lx - 0,0675 Hệ số tương quan: r = 0,9993
Trong đó: y là độ hấp thụ, X là nồng độ (ụg/ml)
Nhận xét: Bảng 2.4 cho thấy có sự tương quan tuyến tính rõ rệt giữa độ hấp thụ quang và khoảng nồng độ khảo sát của azithromycin tại bước sóng phân tích.
0 5 10 15 20 25
Độ hấp thụ
Hình2.6. Đồ thị biễu diễn sự phụ thuộc tuyến tính giữa độ hấp thụ và nồng độ azithromycin.