... sử phát triển của côngnghệchuyểngen thực vật
Lịch sử phát triển côngnghệgen của thực vật chắc chắn có rất
nhiều sự kiện quan trọng
. Ở đây chỉ nêu lên những mốc có ý nghĩa
đặc
biệt nhằm ... phôi. Mặc dù có những thành công ban đầu, tiến triển của
công việc này vẫn còn chậm và việc
thu hồi các cây chuyểngen vẫn
đang còn gặp nhiều khó khăn. Công nghệ
chuyểngen ở đậu tương
đã có ... gen hoặc phải phá bỏ thành
tế bào để chuyểngen bằng phương pháp xung điện, siêu âm và vi
tiêm.
- Khả năng xâm nhập ổn định của gen vào genome không tỷ lệ
với sự
biểu hiện tạm thời của gen. ...
... triển của côngnghệchuyểngen vào thực vật bắt nguồn
từ những thành công của côngnghệchuyểngen vào động vật. Kể từ năm
1984, là lúc người ta bắt đầu tạo được cây trồng chuyểngen và đến ... Gen chuyển
Genchuyển (transgene) là gen ngoại lai được chuyển từ một cơ thể
sang một cơ thể mới bằng kỹ thuật di truyền.
Các genchuyển được sử dụng để tạo động vật, thực vật chuyểngen có
nguồn ... bào con.
2. Ðộng vật (Thực vật) chuyển gen
Ðộng vật (Thực vật) chuyểngen là động vật (thực vật) có gen ngoại lai
(gen chuyển) xen vào trong DNA genome của nó.
Gen ngoại lai này phải được truyền...
...
3. Genchuyển
Gen chuyển (transgene) là gen ngoại lai được chuyển từ một
cơ thể sang một cơ thể mới bằng kỹ thuật di truyền.
Các genchuyển được sử dụng để tạo động vật, thực vật
chuyển gen ...
con.
2. Ðộng vật (Thực vật) chuyểngen
Ðộng vật (Thực vật) chuyểngen là động vật (thực vật) có gen
ngoại lai (gen chuyển) xen vào trong DN A genome của nó.
Gen ngoại lai này phải được truyền ... dụng để chuyểngen ở động vật và thực
vật
1. Các vector sử dụng để chuyểngen ở động vật
1.1. Vector sử dụng để thêm gen
Phần lớn các vector sử dụng hiện nay để tạo động vật chuyển
gen bằng...
...
dòng
(trung
gian)
Plasmid vir
vật chủ liên
hợp
Vùng
tương
đồng
Ori
Plasmid
hỗ trợ
chuyển
gen
Marker
chọn
lọc của
vi
khuẩn
Biên
T-DNA
Marker
chọn lọc
của
thực vật
Nos /
ocs ...
pTiB6S3-SE
(GV3111)
pGV3850-SE
(C58C1)
pGV2260
(C58C1)
LIH
LIH
LIH
gen Ap
r
gen Ap
r
pBR322
(Col E1)
pBR322
pBR322
pBR322
pBR322
pR64drdll
pGJ23...
... A.rhizogenes và sẽ tái bản ổn định miễn là sự chọn lọc được duy
trì. Sau đó nhiễm A.rhizogenes mang vector nhị thể với thực vật sẽ
làm chuyển T-DNA từ vector nhị thể cùng với T-DNA của
A.rhizogenes ... vector nhị thể cùng với T-DNA của
A.rhizogenes vào genome thực vật (Shalin, 1986; Simpson, 1986).
Các gen này khi chuyển vào genome thực vật được định vị ở giữa
các trình tự biên của vector nhị ... bản ở genome động vật là các vùng xác định không tốt. Một
số vùng đã được mô tả đặc điểm và được sử dụng để tái bản DNA
trong tế bào nuôi cấy và trong chuột chuyển gen. Như thế đoạn DNA
genome...
... protein. Cũng như thế, chuyểngen qua
liposome và sự biểu hiện của genchuyển là không vượt qua được
các phương pháp chuyểngen thông thường (như hệ thống virus), sự
biểu hiện genchuyển thường nhất ... động vật chuyểngen đồng hợp tử và
gen chuyển có mặt ở trong tất cả mọi tế bào. Ở giai đoạn này, phôi
mang genchuyển có thể được đông lạnh và được bảo quản cho các
quá trình cấy chuyển về ... tế bào nảy mầm
thành công có thể mang các đặc tính di truyền mới.
Hình 2.22: Chuyểngen bằng súng bắn gen
Phương pháp này có ưu điểm là thao tác dễ dàng, có thể
chuyển gen vào nhiều loại tế...
... việc định loại các loài sinh vật.
Tài liệu tham khảo chính
Makrides SC. 2003. Gene Transfer and Expression in
Mammalian Cells. Elsevier Science B. V. USA.
Louis-Marie H. 2003. Animal Transgenesis ... 2000. Genetics, The McGraw-Hill Companies, Inc. USA.
Winter PC, Hickey GI, Fletcher HL. 1998. Instant Notes
Genentics. Printed by Biddles Ltd, Guildford. UK.
1 0 9
Chương 3
Các phương pháp xác định ... để xác định sự hiện
diện, kích thước, số lượng bản sao, tính đồng dạng của DNA trong
một phức hợp. Ví dụ, Southern blot có thể được sử dụng để phát
hiện một gen đặc biệt ở trong một genome...
... dê
2. 2. Thỏ chuyển gen
Thỏ đã được sử dụng làm mô hình thực nghiệm trong các thí
nghiệm chuyển gen. Việc tạo ra thỏ chuyểngen thành công đã được
công bố vào năm 1985 với genchuyển là hormone ... vật chuyểngen (F
1
, F
2
, F
3
, )
để xác địnhgen lạ có di truyền hay không.
6. Tạo nguồn động vật chuyểngen một cách liên tục
Sau khi kiểm tra thấy gen ngoại lai đã được di truyền ổn định, ... vật chuyển gen, trong khi đó ở chuột là 10%.
2. 1. Chuột chuyển gen
Vào năm 1982, Palmiter và Brinster đã thành công trong việc
tạo ra động vật chuyểngen đầu tiên trên thế giới, bằng cách chuyển...
... W
<$>+
VJ3&9BL3@&('?
)2&$#&+
S}S
Chương 5
Công nghệchuyểngen ở Thực vật
I. Khái niệm chung
... 0/@-$PB
87B?0'`2&G&+
II. Một số nguyên tắc cơ bản của việc chuyển gen
'()*+
^K&*('-*-$=
Gn(0 ... t(&M2&E+†-&2$3
(P"83('h@F&Á+
Hình 5.2 : Ðu đủ chuyểngen kháng virus (trên)
và đu đủ đối chứng (dưới)
SUu
&SwwUVsxxyK*6-t
2&D.7!$(g#4%(6*=7$
#K*3...
... chuyển
Gen chuyển (transgene) là gen ngoại lai được chuyển từ một
cơ thể sang một cơ thể mới bằng kỹ thuật di truyền.
Các genchuyển được sử dụng để tạo động vật, thực vật
chuyển gen có nguồn ...
con.
2. Ðộng vật (Thực vật) chuyểngen
Ðộng vật (Thực vật) chuyểngen là động vật (thực vật) có gen
ngoại lai (gen chuyển) xen vào trong DN A genome của nó.
Gen ngoại lai này phải được truyền ... dụng để chuyểngen ở động vật và thực
vật
1. Các vector sử dụng để chuyểngen ở động vật
1.1. Vector sử dụng để thêm gen
Phần lớn các vector sử dụng hiện nay để tạo động vật chuyển
gen bằng...
...
Plasmid hỗ
trợ gây độc
Nguồn gốc
loại vật chủ
mở rộng
Dòng
vật chủ
Plasmid
hỗ trợ
chuyển gen
Marker
chọn
lọc
của
vi
khuẩn
Biên
T-DNA
Marker
chọn lọc
của
thực vật
Nos
/ocs...
...
Plasmid hỗ
trợ gây độc
Nguồn gốc
loại vật chủ
mở rộng
Dòng
vật chủ
Plasmid
hỗ trợ
chuyển gen
Marker
chọn
lọc
của
vi
khuẩn
Biên
T-DNA
Marker
chọn lọc
của
thực vật
Nos
/ocs...
... dụng để chuyểngen ở động vật và thực
vật
1. Các vector sử dụng để chuyểngen ở động vật
1.1. Vector sử dụng để thêm gen
Phần lớn các vector sử dụng hiện nay để tạo động vật chuyển
gen bằng ... được định rõ đặc
điểm nhờ các gen opine đặc trưng của chúng (De Paolis, 1985). Mặt
khác T
R
T-DNA còn chứa hai gen mã hóa cho sự tổng hợp auxin.
Các gen này tương đồng rất cao với các gen ...
nhiều do tiềm năng sử dụng của chúng trong liệu pháp gen.
Hình 1.9: Sử dụng vector retrovirus để tạo động vật chuyểngen
Genome virus mang gen ngoại lai được đưa vào tế bào tổng hợp protein
virus...
... protein. Cũng như thế, chuyểngen qua
liposome và sự biểu hiện của genchuyển là không vượt qua được
các phương pháp chuyểngen thông thường (như hệ thống virus), sự
biểu hiện genchuyển thường nhất ... động vật chuyểngen đồng hợp tử và
gen chuyển có mặt ở trong tất cả mọi tế bào. Ở giai đoạn này, phôi
mang genchuyển có thể được đông lạnh và được bảo quản cho các
quá trình cấy chuyển về ... động vật chuyểngen tạo thành là
những động vật chuyểngen thể khảm dòng mầm mang kiểu gen của
dòng tế bào này. Ở đây các tế bào gốc phôi được sử dụng như là một
phương tiện để chuyểngen (Mintz,...
... việc định loại các loài sinh vật.
Tài liệu tham khảo chính
Makrides SC. 2003. Gene Transfer and Expression in
Mammalian Cells. Elsevier Science B. V. USA.
Louis-Marie H. 2003. Animal Transgenesis ... để xác định sự hiện
diện, kích thước, số lượng bản sao, tính đồng dạng của DNA trong
một phức hợp. Ví dụ, Southern blot có thể được sử dụng để phát
hiện một gen đặc biệt ở trong một genome ... xảy ra tốt hơn.
+ Mồi phải đặc hiệu có nghĩa là nó phải đặc trưng cho trình tự
DNA cần được khuyếch đại, một mồi chỉ bám vào một vị trí nhất
định trên gen.
+ Không có nút cài tóc (hairpin loop):...