Bài viết trình bày xác định độ không đảm bảo đo của xét nghiệm TSH, FT3, FT4 trên máy miễn dịch Cobas E801 bằng phương pháp tiếp cận từ trên xuống dưới (top - down), sử dụng công thức tính của Nordtest. Đồng thời ứng dụng độ không đảm bảo đo trong phiên giải kết quả xét nghiệm.
Tạp chí y dợc học quân số - 2021 ĐÁNH GIÁ ĐỘ KHÔNG ĐẢM BẢO ĐO CỦA XÉT NGHIỆM TSH, FT3, FT4 TRÊN MÁY COBAS E801 BẰNG CÔNG THỨC NORDTEST VÀ ỨNG DỤNG TRONG VIỆC PHIÊN GIẢI KẾT QUẢ XÉT NGHIỆM Nguyễn Hải Phương1, Nguyễn Thị Thu Hà1, Nguyễn Đoàn Dũng1 Nguyễn Thị Thanh Hương1, Phạm Thị Thanh Thủy1 TĨM TẮT Mục tiêu: Xác định độ khơng đảm bảo đo xét nghiệm TSH, FT3, FT4 máy miễn dịch Cobas E801 phương pháp tiếp cận từ xuống (top - down), sử dụng công thức tính Nordtest Đồng thời ứng dụng độ khơng đảm bảo đo phiên giải kết xét nghiệm Đối tượng phương pháp: Nghiên cứu hồi cứu đánh giá độ không đảm bảo đo xét nghiệm TSH, FT3, FT4 Khoa Sinh hóa, Bệnh viện Phụ sản Trung ương từ 12/2020 5/2021 Kết quả: Độ không đảm bảo đo mở rộng xét nghiệm TSH, FT3, FT4 8%, 9% 10% Kết luận: Áp dụng cơng thức Nordtest phương pháp thích hợp khả thi cho phòng xét nghiệm y tế đánh giá độ không đảm bảo đo xét nghiệm Thông tin cung cấp cho nhà lâm sàng tin tưởng vào kết xét nghiệm bệnh nhân * Từ khóa: Độ lệch chuẩn SD; Hệ số biến thiên CV; Độ tái lặp phòng xét nghiệm uRw; Độ chệch bias; Căn bậc hai độ chệch RMSbias; Độ khơng đảm bảo đo giá trị bình thường u(Cref); Độ không đảm bảo đo độ chệch u(bias); Độ không đảm bảo đo chuẩn kết hợp uc; Độ không đảm bảo đo mở rộng U Determining the Uncertainty of Measurement for TSH, FT3, FT4 Run on Cobas E801 Using Nordtest Calculation and its Application into Laboratory Result Interpretation Summary Objectives: To determine the uncertainty of measurement for TSH, FT3, FT4 run on Cobas E801 by a top-down approach using Nordtest calculation; also to put its application into the interpretation of test results Subjects and methods: A retrospective study to assess the uncertainty of measurement of TSH, FT3, FT4 at the Department of Biochemistry, National Hospital of Obstetrics and Gynecology from December 2020 to May 2021 Result: The extended uncertainty of TSH, FT3, FT4 were 8%, 9%, and 10%, respectively Conclusion: Estimating the uncertainty of measurement using Nordtest calculation is an adaptive and possible approach, which provides clinicians with confidence in test results * Keywords: Standard Deviation SD; Coefficient of variation CV; Within laboratory reproducibility uRw, Bias; Root mean square of biases RMSbias Uncertainty of the nominal value, u(Cref); Uncertainty component for bias; Combined standard uncertainty uc; Expanded uncertainty U Bệnh viện Phụ sản Trung ương Người phản hồi: Nguyễn Hải Phương (drhaiphuongnguyen@gmail.com) Ngày nhận bài: 27/7/2021 Ngày c chp nhn ng: 03/8/2021 59 Tạp chí y dợc häc qu©n sù sè - 2021 ĐẶT VẤN ĐỀ Kết xét nghiệm phần thiếu trình đưa định lâm sàng Do đó, độ khơng đảm bảo đo trở nên ngày có giá trị xét độ xác kết xét nghiệm Nghiên cứu phân tích độ khơng đảm bảo đo xét nghiệm TSH, FT3, FT4 ứng dụng chúng việc giải thích kết xét nghiệm Tất phép đo phòng thí nghiệm có sai số định độ khơng đảm bảo đo ngụ ý mức độ dao động có kết xét nghiệm Giá trị thực đại lượng đo nằm ranh giới không chắn với mức khả nêu Mục 5.5.1.4 tiêu chuẩn ISO 15189 quy định phòng xét nghiệm xác định phép đo độ không đảm bảo đo với phương pháp đo Độ không đảm bảo đo đánh giá cách tiếp cận từ lên (bottom up) theo hướng dẫn GUM [6], từ xuống (top - down) theo hướng dẫn EURACHEM/CITAC [3] số phương pháp khác Trong cách tiếp cận từ lên, tất thành phần độ không đảm bảo đo xem xét đưa tính tốn Trong đó, phương pháp từ xuống sử dụng liệu từ giá trị nội kiểm ngoại kiểm Như vậy, phòng thí nghiệm y tế, phương pháp từ xuống thích hợp cho người sử dụng Ở Việt Nam, ngày có nhiều phịng xét nghiệm y tế tham gia thực xây dựng chất lượng phòng xét nghiệm theo tiêu chuẩn ISO 15189 Tuy nhiên, số lượng nghiên cứu công bố việc thực đánh giá độ đảm bảo đo xét nghiệm Vì vậy, chúng tơi tiến hành đề tài nhằm: 60 Áp dụng cơng thức Nordtest để tính độ không đảm bảo đo xét nghiệm TSH, FT3, FT4 máy miễn dịch tự động Cobas E801 sử dụng độ khơng đảm bảo đo để giải thích số kết xét nghiệm ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Đối tượng nghiên cứu - Xét nghiệm đánh giá chức tuyến giáp bao gồm TSH, FT3, FT4 máy miễn dịch tự động Cobas E801 - Địa điểm thời gian nghiên cứu: Nghiên cứu tiến hành Khoa Sinh hóa, Bệnh viện Phụ sản Trung ương từ 12/2020 - 5/2021 Phương pháp nghiên cứu Nghiên cứu hồi cứu, sử dụng phương pháp tính tốn Nordtest dựa hướng dẫn tổ chức EURACHEM/CITAC với liệu thu từ kết nội kiểm ngoại kiểm phòng xét nghiệm Phịng xét nghiệm sử dụng hóa chất nội kiểm PreciControl Universal mức (Hãng Roche) Đối với nội dung thử nghiệm thành thạo, phòng xét nghiệm đăng ký sử dụng chương trình ngoại kiểm Randox Khoảng tham chiếu xét nghiệm tham khảo từ hướng dẫn sử dụng kèm theo kit hóa chất Phương pháp tính tốn [1] bao gồm cơng thức sau: - Bước 1: Tính độ khơng đảm bảo đo phòng xét nghiệm uRw từ kết nội kiểm: CV nồng độ bình thường = (SD nồng độ bình thường /Mean nồng độ bình thường ) * 100 CV nồng độ bệnh lý = (SD nồng độ bệnh lý /Mean nồng độ bệnh lý ) * 100 T¹p chÝ y dợc học quân số - 2021 uRw = CV gộp = ((n nồng 1)(CV nồng độ bình thường )2 + (n 1)(CV nồng độ bệnh lý )2 )/(n nồng n nồng độ bệnh lý - 2)) ½ RMSbias = ((∑ (bias2 )/số tháng) ½ nồng độ bệnh lý độ bình thường + độ bình thường - Bước 2: Đánh giá độ không đảm bảo yếu tố từ phòng xét nghiệm u(bias) kết ngoại kiểm: u(Cref)= (%CV/số tháng) 1/2 u(bias) = (RMSbias + u(Cref) ) ½ - Bước 3: Tính độ khơng đảm bảo đo chuẩn kết hợp uc độ không đảm bảo đo mở rộng U uc = (uRw + u(bias)2)½ bias%=(x-X)/X*100 U = k*uc = 2*uc KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ BÀN LUẬN Đặc điểm hiệu xét nghiệm Bảng 1: Đặc điểm hiệu xét nghiệm TSH FT3 FT4 µIU/mL pmol/L pmol/L Miễn dịch bắt cặp Miễn dịch bắt cặp Miễn dịch bắt cặp 18 phút 18 phút 18 phút Có Khơng Khơng Đơn vị tính Phương pháp xét nghiệm Thời gian thực xét nghiệm Có thể pha lỗng Trong xét nghiệm đánh giá chức tuyến giáp, có xét nghiệm TSH pha lỗng q trình thực quy trình xét nghiệm Đối với mẫu định lượng FT3, FT4, người sử dụng pha loãng mẫu Do tầm quan trọng việc đo lường hormone liên quan đến chức giáp trạng TSH, FT3, FT4, tổ chức đưa phương pháp xét nghiệm chuẩn hóa cho xét nghiệm Phòng xét nghiệm sử dụng phương pháp xét nghiệm miễn dịch ECLIA máy Cobas E801 Xét nghiệm TSH chuẩn hóa theo tiêu chuẩn tham chiếu IRP WHO thứ số 80/558 Xét nghiệm FT3 FT4 chuẩn hóa thẩm tách cân [2] Các thơng số thu đánh giá độ không đảm bảo đo từ phòng xét nghiệm kết nội kiểm Bảng 2: Các thơng số đánh giá phịng xét nghiệm TSH Nội dung FT3 FT4 Nồng độ bình thường Nồng độ bệnh lý Nồng độ bình thường Nồng độ bệnh lý Nồng độ bình thường Nồng độ bệnh lý 116 116 117 117 116 116 Trung bình 1,331 7,821 5,367 22,895 14,185 37,879 SD 0,03 0,19 0,19 0,54 0,55 1,26 CV % 2,46 2,46 3,49 2,36 3,89 3,33 n uRw % 2,46 2,98 3,62 61 T¹p chÝ y dợc học quân số - 2021 Trong tháng, từ 12/2020 - 5/2021, xét nghiệm TSH nhỏ (2,82%), phòng xét nghiệm thu 116 kết xét nghiệm FT3 FT4 lớn (lần lượt nội kiểm mức xét nghiệm TSH 3,25% 2,82%) FT4, 117 kết nội kiểm mức xét nghiệm FT3 Cỡ mẫu nội kiểm để tính tốn dựa nồng độ bình thường bệnh lý hormone đủ lớn, đảm bảo điều kiện thu thập liệu nội kiểm tối thiểu tháng khuyến cáo AACB [4] Sử dụng liệu từ Độ không đảm bảo đo kết hợp độ không đảm bảo đo mở rộng xét nghiệm Bảng 4: Độ không đảm bảo đo xét nghiệm Tên xét nghiệm TSH FT3 FT4 uc % 3,74 4,41 4,85 U% 10 phép đo nội kiểm, áp dụng vào công thức tính theo hướng dẫn Nordtest phịng xét nghiệm thu thông số SD, CV uRw Xét nghiệm TSH theo phương pháp miễn dịch bắt cặp có uRw nhỏ Tuyến tính với giá trị thành phần (2,46%) Hai loại xét nghiệm FT3 FT4 uRw u(bias), độ không đảm bảo đo theo phương pháp miễn dịch cạnh tranh có mở rộng U% xét nghiệm TSH 8% uRw lớn (lần lượt 2,98% 3,62%) nhỏ nhất, hai xét nghiệm FT3 FT4 Các thông số thu đánh lớn 9% 10% Cùng sử dụng giá độ không đảm bảo đo từ phương pháp tiếp cận từ xuống, theo phòng xét nghiệm khác kết Hikmet, U% xét nghiệm TSH, FT3, ngoại kiểm FT4 thực máy Siemen Advia Bảng 3: Các thơng số đánh giá liên phịng xét nghiệm Centaur XP Phịng Xét nghiệm Hóa sinh, Bệnh viện Trường Đại học Ankara, Thổ Nhĩ Kỳ tương ứng 15,01%, 15,92% TSH FT3 FT4 RMSbias % 2,79 3,24 3,22 u(Cref) % 0,43 0,24 0,30 u(bias) % 2,82 3,25 3,23 24,04% [5] Kết lớn kết nghiên cứu Việc xác định độ không đảm bảo đo mở rộng cho phép xét nghiệm phức tạp cần có liệu đủ lớn kết xét nghiệm quần thể nên Tương tự nội kiểm, giá trị ngoại nghiên cứu không so sánh kiểm lấy vòng tháng kết nghiên cứu với độ không đảm Kết thu cho thấy u(bias) bảo đo cho phép khuyến nghị [7] 62 Tạp chí y dợc học quân số - 2021 Áp dụng độ không đảm bảo đo phiên giải kết xét nghiệm Bảng 5: Áp dụng độ khơng đảm bảo đo phân tích khoảng tham chiếu Nội dung Khoảng tham chiếu U tính theo số thực Khoảng giá trị theo U TSH FT3 FT4 Giới hạn Giới hạn Giới hạn Giới hạn Giới hạn Giới hạn 0,274 4,20 3,1 6,8 12 22 ± 0,02192 ± 0,036 ± 0,279 ± 0,612 ± 1,2 ± 2,2 2,821 - 3,379 6,188 - 7,412 10,8 - 13,2 19,8 - 24,2 0,252 - 0,296 4,164 - 4,236 Phương pháp tiếp cận từ lên để tính tốn độ khơng đảm bảo đo đưa ban đầu GUM [6] thường khó áp dụng phòng xét nghiệm y tế Theo hướng dẫn EURACHEM/CITAC [3], chứng minh phương pháp tiếp cận từ xuống, sử dụng công thức Nordtest tiến hành định kỳ khơng u cầu phép toán thống kê phức tạp, cần liệu từ kết nội kiểm ngoại kiểm Phương pháp cho phép kết hợp nhiều thông số phép đo SD, CV, uRw, bias%, RMSbias, u(Cref) để góp phần đánh giá phân tán thực tế giá trị xét nghiệm Khi nhận kết xét nghiệm BN với kết TSH 2,0 µIU/mL độ khơng đảm bảo đo U 8%, bác sĩ lâm sàng hiểu kết thực BN nằm phạm vi 2,0 ± 0,16 µIU/mL Nói cách khác, kết thực BN nằm khoảng giá trị 1,84 - 2,16 µIU/mL Độ không đảm bảo đo nhỏ, khoảng giá trị hẹp, kết thực gần với số liệu công bố phiếu kết quả, mức độ tin tưởng vào kết cao Đặc biệt, trường hợp nhà lâm sàng phải so sánh kết xét nghiệm BN với mốc giá trị mang tính định chẩn đoán, hay gặp kết nằm ranh giới giới hạn giới hạn khoảng tham chiếu phòng xét nghiệm đưa Ví dụ: Khoảng tham chiếu xét nghiệm FT4 huyết 12 - 22 pmol/L Nếu BN có kết xét nghiệm FT4 phiếu xét nghiệm 24,0 pmol/L độ không đảm bảo đo U = 10%, kết thực BN nằm phạm vi 24,0 ± 10% pmol/L, tức nằm khoảng giá trị 21,6 26,4 pmol/L Nếu kết thực 21,6, BN có nồng độ hormone FT4 bình thường bị phân loại vào nhóm có bệnh với nồng độ FT4 huyết cao Sự khác biệt đáng kể nguyên nhân độ khơng đảm bảo đo cần phịng xét nghiệm y tế ứng dụng để tăng cường quản lý chất lượng, đồng thời đưa khuyến cáo cho bác sĩ lâm sàng trường hợp cần thiết 63 Tạp chí y dợc học quân số - 2021 KẾT LUẬN Độ không đảm bảo đo xét nghiệm TSH, FT3, FT4 máy Cobas E801 Khoa Sinh hóa, Bệnh viện Phụ sản Trung ương 8%, 9%, 10% Theo đó, áp dụng việc phân tích khoảng tham chiếu, độ khơng đảm bảo đo giới hạn giới hạn xét nghiệm có giá trị TSH (± 0,02192; ± 0,036), FT3 (± 0,279; ± 0,612), FT4 (± 1,2; ± 2,2) EURACHEM/CITAC 2012 Available at: https://www.eurachem.org/images/stories/Guides/ pdf/QUAM2012_P1.pdf Accessed Aug 2018 G.H White, I Farrance (on behalf of the AACB Uncertainty of Measurement Working Group) Uncertainty of Measurement in quantitative medical testing - A laboratory implementation guide Cli Biochem Rev 2004; 25, Suppl (ii), S1-S23 TÀI LIỆU THAM KHẢO Hikmet Can Cubukcu, Omer Yavuz & Erdinc Devrim Uncertainty of measurement for 14 immunoassay analytes: application to laboratory result interpretation Scandinavian Journal of Clinical and Laboratory Investigation 2019; 79:1-2, 117-122 Bertil Magnusson, Teemu Näykki, Håvard Hovind, Mikael Krysell, Eskil Sahlin Handbook for calculation of measurement th uncertainty in environmental laboratories ed Nordtest Report TR 537 2017 JCGM GUM Guide to the expression of uncertainty in measurement 1st ed JCGM 2020 Available at: https://www.bipm.org/documents/ 20126/2071204/JCGM_GUM_6_2020.pdf/d4e 77d99-3870-0908-ff37-c1b6a230a337 Accessed July 2020 Ekins R.P Measurement of free hormones in blood Endocr Rev 1990; 11(1):5-46 EURACHEM/CITAC Guide Quantifying rd Uncertainty in Analytical Measurement ed 64 Rainer Haeckel, Werner Wosniok, Ebrhard Gurr and Burkhard Peil Permissible limits for uncertainty or measurement in laboratory medicine Clin Chem Lab Med 2015 ... không đảm bảo đo kết hợp độ không đảm bảo đo mở rộng xét nghiệm Bảng 4: Độ không đảm bảo đo xét nghiệm Tên xét nghiệm TSH FT3 FT4 uc % 3,74 4,41 4,85 U% 10 phép đo nội kiểm, áp dụng vào cơng thức. .. nghiệm TSH, FT3, FT4 ứng dụng chúng việc giải thích kết xét nghiệm Tất phép đo phịng thí nghiệm có sai số định độ không đảm bảo đo ngụ ý mức độ dao động có kết xét nghiệm Giá trị thực đại lượng đo. .. độ đảm bảo đo xét nghiệm cịn Vì vậy, chúng tơi tiến hành đề tài nhằm: 60 Áp dụng công thức Nordtest để tính độ khơng đảm bảo đo xét nghiệm TSH, FT3, FT4 máy miễn dịch tự động Cobas E801 sử dụng