Khóa luận phân tích thành phần stipuleanosid r2 có trong các bộ phận của cây sâm vũ diệp

ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI KHOA Y DƯỢC ======  ====== TRẦN THỊ NGỌC HÀ PHÂN TÍCH THÀNH PHẦN STIPULEANOSID R2 TRONG CÁC BỘ PHẬN CỦA CÂY SÂM VŨ DIỆP (Panax bipinnatifidus Seem.) KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC NGÀNH DƯỢC HỌC Hà Nội - 2019 ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI KHOA Y DƯỢC =======  ====== Người thực hiện: TRẦN THỊ NGỌC HÀ PHÂN TÍCH THÀNH PHẦN STIPULEANOSID R2 TRONG CÁC BỘ PHẬN CỦA CÂY SÂM VŨ DIỆP (Panax bipinnatifidus Seem.) KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC (NGÀNH DƯỢC HỌC) Khóa: QH2014.Y Người hướng dẫn: GV.TS NGUYỄN HỮU TÙNG Hà Nội - 2019 PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterm MỤC LỤC U LỜI CẢM ƠN VN Danh mục ký hiệu tên viết tắt Danh mục bảng arm ac y, Danh mục hình vẽ đồ thị ĐẶT VẤN ĐỀ CHƯƠNG – TỔNG QUAN Ph 1.1 Tổng quan Sâm Vũ Diệp 1.1.1 Tên khoa học an d 1.1.2 Đặc điểm thực vật 1.1.3 Đặc điểm phân bố sinh thái M ed ici ne 1.1.4 Thành phần hóa học 1.1.5 Tính vị, cơng .8 1.1.6 Tác dụng dược lý 1.1.7 Công dụng of 1.2 Tổng quan Saponin 1.3 Tổng quan Stipuleanosid R2 10 Sc ho ol 1.4 Tổng quan số nghiên cứu phân tích định tính định lượng thành phần hóa học Sâm Vũ Diệp 11 CHƯƠNG - ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 14 t@ 2.1 ĐỐI TƯỢNG NGHIÊN CỨU 14 2.1.1 Nguyên liệu 14 rig h 2.1.2 Dung mơi, hóa chất 14 2.1.3 Thiết bị 14 Co py 2.2 PHƯƠNG PHÁP 15 2.2.1 Phương pháp chiết xuất Sâm Vũ Diệp 15 `2.2.2 Phương pháp phân tích TLC 16 PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterm 2.2.3 Phương pháp định lượng Stipuleanosid R2 HPLC 17 U CHƯƠNG - KẾT QUẢ 25 VN 3.1 Chiết xuất saponin từ phận lá, thân, rễ Sâm Vũ Diệp 25 3.2 Định tính TLC thành phần Stipuleanosid R2 phận Sâm arm ac y, Vũ Diệp 25 3.3 Định tính thành phần Stipuleanosid R2 cao chiết từ phận Sâm Vũ Diệp HPLC 26 3.4 Định lượng Stipuleanosid R2 phận Sâm Vũ Diệp Ph HPLC 27 CHƯƠNG - BÀN LUẬN 29 an d 4.1 Về chiết xuất xác định thành phần saponin có phận Sâm Vũ Diệp 29 M ed ici ne 4.2 Về định lượng sơ thành phần Stipuleanosid R2 phận Sâm Vũ Diệp HPLC 29 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 31 TÀI LIỆU THAM KHẢO 33 Co py rig h t@ Sc ho ol of PHỤ LỤC 35 PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterm LỜI CẢM ƠN U Trong thời gian tiến hành nghiên cứu hồn thiện đề tài khóa luận, VN nhận hướng dẫn, hỗ trợ giúp đỡ tận tình tâm huyết thầy cô, anh chị trước Khoa Y Dược-ĐHQGHN với ủng hộ bạn bè người thân gia đình Qua đây, tơi xin trân trọng gửi lời cảm ơn chân arm ac y, thành tới người ln bên cạnh, dìu dắt, dạy ủng hộ tơi q trình thực khóa luận Trước hết, tơi xin bày tỏ lịng biết ơn sâu sắc đến PGS.TS Dương Thị Ly Hương, T.S Nguyễn Hữu Tùng - Khoa Y Dược ĐHQGHN, thầy cô dành thời Ph gian để trực tiếp hướng dẫn, bảo tận tình, truyền đạt cho tơi kinh nghiệm quý báu động viên suốt trình hồn thiện khóa luận Tơi an d xin cảm ơn sâu sắc tới anh Nguyễn Hoàng Việt ; chị Đặng Thị Ngần - Khoa Y Dược ĐHQGHN, người tiền bối bên cạnh suốt q trình thực nghiệm labo, giúp tơi khắc phục sai sót hay vượt qua khó M ed ici ne khăn thất bại qúa trình thí nghiệm Tôi xin gửi lời cảm ơn đến Ban chủ nhiệm Khoa, thầy cô Khoa Y Dược, đặc biệt mơn Hóa dược Kiểm nghiệm thuốc tạo điều kiện cho thực khóa luận of Tơi xin chân thành cảm ơn tập thể Dược học khóa QH.2014.Y, đặc biệt bạn Nông Mỹ Hoa, Nguyễn Thị Hồng Nhung, Cao Thị Phương Thảo, Bùi Thị Sc ho ol Thanh Vân đồng hành suốt thời gian nghiên cứu Và cuối cùng, xin gửi lời cảm ơn đến gia đình thân yêu bạn bè bên ủng hộ tơi q trình học tập, phấn đấu để đạt thành tích ngày Co py rig h t@ hôm Hà Nội, ngày 09 tháng 05 năm 2019 Sinh viên Trần Thị Ngọc Hà PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterm Danh mục ký hiệu tên viết tắt Tên đầy đủ EtOH Ethanol HPLC Sắc ký lỏng hiệu cao HPLC-DAD Sắc ký lỏng hiệu cao đầu dò mảng diod MeOH Methanol LOD Giới hạn phát LOQ Giới hạn định lượng RDS Độ lệch chuẩn tương đối SVD Sâm vũ diệp Sắc ký lớp mỏng Tài liệu tham khảo M ed ici ne TLTK TPHH Thành phân hóa học TT rig h t@ Sc ho ol of UV Co py VN arm ac y, Ph an d TLC UV-DAD U Ký hiệu Thuốc thử Tử ngoại UV-detector aray diode PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterm Danh mục bảng U Bảng 1.1 Các thành phần hóa học nghiên cứu Sâm Vũ Diệp VN Bảng 1.2 Điều kiện sắc ký kết phân tích định tính, định lượng acid oleanolic dược liệu Sâm Vũ Diệp 12 arm ac y, Bảng 1.3 Chương trình pha động chạy HPLC-DAD .13 Bảng 2.1 Chương trình dung môi chạy HPLC-DAD 18 Bảng 3.1 Hàm lượng cắn phân đoạn chiết xuất từ thân rễ Sâm Vũ Diệp 25 Bảng 3.2 Hàm lượng cắn phân đoạn chiết xuất từ thân Sâm Vũ Diệp 25 Ph Bảng 3.3 Tính thích hợp hệ thống sắc ký 19 an d Bảng 3.4 Kết khảo sát khoảng tuyến tính stipuleanosid R2 .20 Bảng 3.5 Kết khảo sát độ lặp lại phương pháp 21 M ed ici ne Bảng 3.6 Khảo sát độ thu hồi 22 Bảng 3.7 Kết định lượng stipuleanosid R2 thân rễ SVD 27 Co py rig h t@ Sc ho ol of Bảng 3.8 Kết định lượng stipuleanosid R2 thân SVD 28 PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterm Danh mục hình vẽ đồ thị U Hình 1.1 Đặc điểm hình thái Sâm Vũ Diệp VN Hình 1.2 Đặc điểm thực vật vùng phân bố Sâm Vũ Diệp Hình 1.3 Cấu trúc hóa học 10 saponin tách từ rễ SVD .5 arm ac y, Hình 1.4 Cấu trúc hóa học β-sitosterol, oleanolic acid daucosterol Hình 1.5 Cấu trúc hóa học Stipuleanosid R2(a) Aralosid A methyl(b) ester Hình 1.6 Thành phần saponin thuộc nhóm triterpenoid có Sâm Vũ Diệp.10 Ph Hình 1.7 Cơng thức cấu tạo Stipuleanosid R2 11 an d Hình 2.1 Mẫu dược liệu Sâm Vũ Diệp 14 Hình 2.2 Sơ đồ quy trình chiết 16 M ed ici ne Hình 2.3 Dịch lọc rễ, thân, SVD 16 Hình 3.1 Sắc ký đồ dung dịch mẫu trắng, mẫu chuẩn mẫu thử 19 Hình 3.2 Đồ thị biểu diễn đường chuẩn stipuleanosid R2 21 Hình 3.3 Kết TLC Stipuleanosid R2 phận dược liệu Sâm Vũ Diệp 26 of Hình 3.4 Sắc ký đồ HPLC stipuleanosid R2 (A) mẫu cao thân Sc ho ol rễ (B), thân (C) Sâm Vũ Diệp (Panax bipinnatifidus Seem.) 26 Co py rig h t@ Hình 3.5 Sắc ký đồ cao tổng thân SVD 28 PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterm ĐẶT VẤN ĐỀ U Sâm Vũ Diệp (Panax bipinnatifidus Seem., họ Nhân sâm - Araliaceae) VN thuốc quý phân bố Trung Quốc dãy núi Hoàng Liên Sơn Tây Bắc nước ta [9] Gần Sâm Vũ Diệp (SVD) hóa bước đầu trồng thử nghiệm số địa phương Hà Giang, Lào Cai Về mặt y học, arm ac y, SVD sử dụng làm thuốc bổ thành phần số thuốc truyền thống dân tộc vùng núi Tây Bắc Theo tài liệu nghiên cứu trước [2,12] cho thấy dược liệu SVD sử dụng phần thân rễ, chứa hàm lượng lớn saponin-Stipuleanosid R2-thành phần hoạt chất mang lại tác dụng Ph dược lý giá trị sử dụng dược liệu quý y học Tuy nhiên, chưa có cơng bố thức thành phần saponin phận mặt đất an d SVD Do đó, việc tập trung nghiên cứu thành phần saponin phận SVD định lượng thành phần có ý nghĩa quan trọng việc ứng dụng dược liệu SVD thực tiễn Vậy liệu phận khác mặt đất M ed ici ne SVD (lá, thân, hoa) có chứa thành phần saponin phần (dưới mặt đất) thân rễ hay không? Nếu có hàm lượng bao nhiêu? Có thể sử dụng phận thay dược liệu SVD không? Để trả lời câu hỏi trên, đồng thời đóng góp vào việc nghiên cứu cách có hệ thống saponin xây dựng tiêu chí định tính, định lượng, sở liệu hóa thực vật tiêu chuẩn hóa dược liệu SVD; chúng tơi thực đề tài of “Phân tích thành phần Stipuleanosid R2 có phận Sâm Vũ Sc ho ol Diệp” tiếp nối nghiên cứu bước đầu thành phần hóa học thân rễ SVD “Nghiên cứu thành phần saponin có thân rễ SVD trồng Sa Pa”-luận văn thạc sĩ Nguyễn Thị Thu Thủy [12], với mục tiêu định tính bước đầu định lượng thành phần stipuleanosid R2 phận Sâm Vũ Diệp gồm: Co py rig h t@ thân (trên mặt đất), thân rễ PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterm CHƯƠNG – TỔNG QUAN U 1.1 Tổng quan Sâm Vũ Diệp VN 1.1.1 Tên khoa học Sâm Vũ Diệp có tên khoa học Panax bipinnatifidus Seem [1], SVD thuộc arm ac y, chi Sâm (Panax L), họ Ngũ gia bì (Araliaceae) [2] 1.1.2 Đặc điểm thực vật Sâm Vũ Diệp thân thảo sống nhiều năm, ưa bóng đặc biệt ưa ẩm Thân rễ dài có nhiều đốt vết sẹo thân rụng hàng năm để lại Thân khí Ph sinh mảnh, cao 20 - 30 cm, thường đơn độc, mọc thẳng, rỗng giữa, có vạch dọc, an d thường lụi vào mùa đông, mọc chồi thân từ tháng đến đầu tháng dương lịch Lá kép chân vịt, gồm - mọc vịng Lá chét - (ít 3) thuôn, dài 2,5 - 14 cm, rộng 1,5 - cm, gốc trịn, đầu thn thành mũi nhọn, xẻ thùy of M ed ici ne khơng đều, mép có cưa, có lơng [1] Sc ho ol Hình 1.1 Đặc điểm hình thái Sâm Vũ Diệp 1.1.3 Đặc điểm phân bố sinh thái Trong tự nhiên, SVD phân bố Trung Quốc, Ấn Độ Nepan (vùng cận t@ Hymalaya) dãy núi Hoàng Liên Sơn, Tây Bắc nước ta [1] Sa Pa-Việt Nam điểm phân bố cuối SVD phía nam Năm 1973, phát núi Hàm Rồng, sát thị trấn Sa Pa, độ cao 1600 m Hiện vùng phân bố rig h SVD bị thu hẹp dần, từ độ cao khoảng 1800 m trở lên, coi cực [1] Gần SVD hóa bước đầu trồng thử nghiệm số Co py địa phương Hà Giang Lào Cai [18] PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterm Tiêm riêng biệt dung dịch mẫu thử, mẫu thử lặp lại lần, ghi nhận U sắc ký đồ ghi lại đáp ứng chất cần phân tích VN Nồng độ stipuleanosid R2 dung dịch thử xác định dựa cơng thức: C (µg/ml) = a H x arm ac y, S-b 100 Với S diện tích pic stipuleanosid R2; a,b hệ số phương trình đường chuẩn y = ax+b, H độ tinh khiết chất đối chiếu (%) Ph Hàm lượng stipuleanosid R2 dược liệu xác định dựa cơng Trong đó: x M ed ici ne X (%) = C x 10 x 100 an d thức: m x 1000000 100 x H 100-a M: khối lượng dược liệu (g) X: hàm lượng stipuleanosid R2 dược liệu (%) đường chuẩn (µg/ml) of C: Nồng độ stipuleanosid R2 dung dịch thử, xác định Sc ho ol a: độ ẩm dược liệu (%) H: hiệu suất chiết (%)  Xử lý số liệu t@ + Tập hợp kết loại bỏ giá trị thơ theo test Dixon Co py rig h + Tính giá trị trung bình: + Tính độ lệch chuẩn: 23 PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterm VN U + Tính độ lệch chuẩn tương đối: Trong đó: arm ac y, X : giá trị trung bình hàm lượng hợp chất xi : giá trị hàm lượng hợp chất mẫu thứ i n : số thử nghiệm sử dụng để tính giá trị trung bình hàm lượng hợp chất Ph SD: độ lệch chuẩn Co py rig h t@ Sc ho ol of M ed ici ne an d RSD: độ lệch chuẩn tương đối 24 PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterm CHƯƠNG - KẾT QUẢ U 3.1 Chiết xuất saponin từ phận lá, thân, rễ Sâm Vũ Diệp khơ trình bày bảng 3.1 Lần đo Hàm ẩm thân (%) 7,52 7,81 7,92 Trung bình 7,75 RSD 2,6 arm ac y, Bảng 3.1 Hàm ẩm nguyên liệu thu từ phận VN Hiệu suất cắn phân đoạn so với cắn toàn phần so với nguyên liệu Hàm ẩm thân rễ (%) 7,72 M ed ici ne an d Ph 7,93 7,78 7,81 1,3 Bảng 3.2 Hiệu suất chiết phận Bộ phận Khối lượng Khối lượng cao Hiệu suất nguyên liệu (g) tổng EtOH (g) chiết(%) 450 57 12,67 95,9 19,18 500 Sc ho ol Thân rễ of Thân 3.2 Định tính TLC thành phần Stipuleanosid R2 phận Sâm Vũ Diệp Tiến hành chạy sắc ký TLC để định tính chất Stipuleanosid R2 cao t@ chiết từ phân SVD hệ dung môi triển khai Sau phun thuốc thử rig h dung dịch H2SO4 10% (TT) EtOH, sấy 120°C đến vết Quan sát vết xuất ánh sáng thường, so sánh giá trị hệ số di chuyển Rf so với chất Co py đối chiếu Stipuleanosid R2 [20], thu kết sau: 25 arm ac y, VN U PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterm Hình 3.3 Kết TLC Stipuleanosid R2 phận dược liệu Sâm Vũ Diệp Ph 1: mẫu cao tổng thân an d 2: mẫu cao tổng thân rễ 3: chất chuẩn Stipuleanosid R2 Nhận xét: kết TLC cho thấy vết sắc ký Stipuleanosid R2 xuất M ed ici ne cao chiết phần thân thân rễ SVD 3.3 Định tính thành phần Stipuleanosid R2 cao chiết từ phận Co py rig h t@ Sc ho ol of Sâm Vũ Diệp HPLC Hình 3.4 Sắc ký đồ HPLC stipuleanosid R2 (A) mẫu cao thân rễ (B), thân (C) Sâm Vũ Diệp (Panax bipinnatifidus Seem.) 26 PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterm Nhận xét: U Sử dụng chương trình phân tích HPLC phần 2.2.3.a cho VN thấy chất tinh khiết stipuleanosid R2 mẫu cao toàn phần thân rễ, thân SVD Kết phân tích HPLC minh họa Hình 3.2 cho thấy sắc ký đồ phận thân rễ, thân xuất pic có thơng số thời gian lưu nằm arm ac y, khoảng thời gian lưu tương ứng chất chuẩn stipuleanosid R2 (tR = 15,565-15,85 phút) với thông số độ tinh khiết pic chồng phổ UV sở chế độ qt phổ đầu dị DAD Bên cạnh tín hiệu khác tương đồng bao gồm tín hiệu tR = 16,616 thân rễ tR=16,166 phút cho thấy Ph tương đồng thành phần saponin chưa xác định phận rễ, thân an d 3.4 Định lượng Stipuleanosid R2 phận Sâm Vũ Diệp HPLC M ed ici ne Qua kết định tính TLC HPLC kết từ nghiên cứu trước [6,8,12] cho thấy thành phần SVD saponin khung oleanan, có hợp chất quan trọng stipuleanosid R2 Do chúng tơi tiến hành xác định hàm lượng stipuleanosid R2 để góp phần đánh giá SVD theo kế hoạch nghiên cứu đề Kết thu trình bày sau Bảng 3.7 Kết định lượng stipuleanosid R2 thân rễ SVD Khối lượng Nồng độ Diện tích Hàm lượng Stipuleanosid cao pic R2 nguyên liệu khô (g) (mg/ml) (mAU*s) (%) 500 10 721,829 0,559 500 10 748,681 0,581 500 10 735,082 0,570 Trung bình 0,57 ± 0,01% RSD (%) 2,0 Co py rig h t@ Sc ho ol nguyên liệu of STT 27 PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterm U b) Định lượng stipuleanosid R2 thân SVD Nồng độ cao Diện tích pic Hàm lượng Stipuleanosid R2 (g) (mg/ml) (mAU*s) nguyên liệu khô (%) 450 50 1451,157 450 50 1502,325 450 50 1441,055 0,259 an d Trung bình arm ac y, Khối lượng nguyên liệu Ph STT VN Bảng 3.8 Kết định lượng stipuleanosid R2 thân SVD 0,257 0,26 ± 0,006% Hình 3.5 Sắc ký đồ cao tổng thân SVD Co py rig h t@ Sc ho ol of M ed ici ne RSD 0,265 28 2,3 PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterm CHƯƠNG - BÀN LUẬN U 4.1 Về chiết xuất xác định thành phần saponin có phận VN Sâm Vũ Diệp Với qui trình chiết xuất SVD phương pháp chiết hồi lưu đơn giản, arm ac y, nhiệt độ 70o dung môi ethanol thu cắn toàn phần, phương pháp chiết hồi lưu có ưu điểm làm tăng tốc độ chiết, chiết kiệt hoạt chất nguyên liệu Kết thu 95,9 g cao tổng EtOH thân rễ (H=19,18%) 57,6 g cao tổng EtOH thân (H=12,67%) Tiến hành phương pháp TLC cho thấy cắn thu sau trình chiết Ph xuất vết màu hồng sau chuyển sang màu tím cao chiết EtOH lá, thân (trên mặt đất) thân rễ rõ rệt, đặc trưng dẫn xuất triterpen Trong an d đó, vết sắc ký hợp chất Stipuleanosid R2 lên rõ rệt cao tổng M ed ici ne phần thân, thân rễ SVD Kết phân tích TLC sơ cho thấy phận thân SVD có chứa thành phần saponin tương tự với phần thân rễ này; đặc biệt thành phần Stipuleanosid R2 Thành phần hóa học thuốc-saponin/ginsenosid lồi Panax thường phức tạp gồm nhiều thành phần việc xác định xác thành phần địi hỏi phân lập sắc ký xác cấu trúc hóa học phương pháp phổ Từ chúng tơi tiến hành sử dụng HPLC để nhằm xác định xác có mặt thành phần saponin khác of Stipuleanosid R2 cao chiết phận SVD Kết HPLC cho thấy sắc ký đồ phận thân rễ, thân xuất Sc ho ol pic có thơng số thời gian lưu tương ứng stipuleanosid R2 (tR = 15,56515,85 phút) với thông số độ tinh khiết pic chồng phổ UV sở chế độ quét phổ đầu dò DAD Đây kết sơ ban đầu cho thấy có mặt Stipuleanosid R2 xuất phận rễ, thân [6] t@ 4.2 Về định lượng sơ thành phần Stipuleanosid R2 phận Sâm Vũ Diệp HPLC rig h Sau tiến hành phân tích xác định hàm lượng Stipuleanosid R2 HPLC, kết sơ cho thấy hàm lượng Stipuleanosid R2 thân rễ 0,57 %; Co py thân 0,26 % với hàm ẩm nguyên liệu 7,8 %; hàm lượng stipuleanosid R2 cao chiết từ thân rễ SVD cao hàm lượng cao chiết từ thân Dựa kết này, sơ nhận định phận khác Sâm Vũ Diệp bao gồm thân giàu hoạt chất saponin đượctiến 29 PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterm hành nghiên cứu thêm thành phần hóa học để ứng dụng dược liệu thay U phần thân rễ SVD y học cổ truyền Việc tận dụng thêm phần mặt đất VN Sâm Vũ Diệp sử dụng triệt để giá trị phận thuốc giống loài Panax tiếng khác: Nhân Sâm (P.ginseng), Tam Thất (P.notoginseng) làm tăng thêm nguồn khai thác dược liệu; giúp tiết kiệm chi phí arm ac y, nghiên cứu bảo tồn nguồn dược liệu quý thuộc chi Panax Trên kết định tính định lượng sơ thành phần Stipuleanosid R2 phận SVD Kết mang tính chất tham khảo chưa có tính xác cao nghiên cứu cịn nhiều sai sót hạn chế Ph Cần tiến hành xây dựng thẩm định lại phương pháp nghiên cứu HPLC mẫu thân, rễ điều kiện phù hợp với phịng thí nghiệm để có kết ổn định Co py rig h t@ Sc ho ol of M ed ici ne an d xác 30 PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterm KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ U KẾT LUẬN VN Với kết thực nghiệm thu được, đề tài đạt mục tiêu đề là: định tính định lượng sơ thành phần stipuleanosid R2 phận arm ac y, thân, thân rễ Sâm Vũ Diệp Kết có ý nghĩa thực tiễn cơng tác kiểm nghiệm thuốc nói chung kiểm nghiệm dược liệu nói riêng, góp phần vào cơng tác thiết lập sở liệu hóa thực vật làm sở định hướng cho nghiên cứu hoạt tính sinh học đối tượng tiềm thuộc chi Panax Bên cạnh đó, đề tài cịn Ph góp phần định hướng sử dụng, khai thác dược liệu, cụ thể SVD cách sử dụng phận khác phần thân rễ (dưới mặt đất) để phân lập, tinh an d chế thành phần saponin Nhằm mục tiêu tiết kiệm thời gian nghiên cứu chi phí cho người dân nhu cầu sử dụng Sâm để chăm sóc sức khỏe M ed ici ne Tuy nhiên với hạn chế nghiên cứu, kết kết sơ ban đầu, mang tính chất tham khảo cần tiến hành nghiên thẩm định nghiên cứu kỹ để đưa nhận định khách quan xác định tính định lượng thành phần Stipuleanosid R2 KIẾN NGHỊ Đề tài phần nghiên cứu bước đầu đề tài cấp Nhà nước of thuộc chương trình Tây Bắc “Ứng dụng giải pháp khoa học công nghệ để Sc ho ol phát triển nguồn nguyên liệu tạo sản phẩm từ hai loài thuốc Sâm Vũ Diệp (Panax bipinnatifidus Seem.) Tam Thất hoang (Panax stipuleanatus H.Tsai et K.M.)” Khoa Y Dược-ĐHQGHN [6], đặt mục tiêu xác lập sở khoa học giải pháp cơng nghệ sinh học, hóa học dược học để phát triển sản phẩm từ hai loài Sâm Vũ Diệp Tam Thất hoang Luận văn t@ kết nghiên cứu sơ thành phần hóa học Sâm Vũ Diệp Với kết thu sai sót hạn chế gặp phải tiến hành rig h thực đề tài, nhóm nghiên cứu xin kiến nghị thực thêm phép thực nghiệm sau: Co py  Tiến hành thẩm định lại phương pháp HPLC cao chiết EtOH phận thân Sâm Vũ Diệp 31 PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterm  Triển khai phân lập tinh chế thêm hợp chất Stipuleanosid R2 U thân Sâm Vũ Diệp VN  Tiến hành nghiên cứu thêm thành phần hóa học thân SVD  Thiết lập thêm điều kiện cho chất đối chiếu Stipuleanosid R2 arm ac y, kết xác định lượng hàm lượng chất phận SVD xác ổn định  Xây dựng chất chuẩn stipuleanosid R2 từ Sâm Vũ Diệp  Tiến hành khảo sát động thái tích lũy, thay đổi thành phần hóa học theo Ph độ tuổi Co py rig h t@ Sc ho ol of M ed ici ne an d  Dựa kết nghiên cứu thành phần hóa học, cần tiếp tục nghiên cứu tác dụng sinh học loài 32 PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterm TÀI LIỆU THAM KHẢO U Tiếng Việt VN Đỗ Huy Bích cộng (2003), Cây thuốc Động vật làm thuốc Việt Nam Vol 2, Nhà xuất khoa học kỹ thuật arm ac y, Lê Đình Bích, Trần Văn Ơn (2007), Thực vật học tập 1, NXBYHHN Đỗ Văn Hào (2017), Nghiên cứu thành phần hóa học sâm vũ diệp thu hái Tây Bắc, Khoa Y Dược-ĐHQGHN Nguyễn Thị Huệ (2017), Phân tích acid oleanolic thành phần saponin Ph rễ sâm vũ diệp (Panax bipinnatifidus Seem.) thu hái Sa Pa, Khoa Y Dược-ĐHQGHN an d Nguyễn Thị Thu Hương, Lương Kim Bích, Đồn Thị Ngọc Hạnh (2005), "Nghiên cứu tác dụng sâm Việt Nam đinh lăng trí nhớ", Tạp chí M ed ici ne Dược liệu,, 10(6), pp 196-200 PGS.TS Dương Thị Ly Hương (2018), Ứng dụng giải pháp khoa học công nghệ phát triển nguồn nguyên liệu tạo sản phẩm từ loại thuốc Sâm Vũ Diệp (Panax bipinnatifidus) Tam Thất Hoang (Panax stipuleantanus) vùng Tây Bắc, Khoa Y Dược-ĐHQGHN Trần Công Luận, Lưu Thảo Nguyên, Nguyễn Tập (2009), "Nghiên cứu thành of phần hóa học số tác dụng dược lý hai loài sâm vũ diệp (Panax bipinnatifidus Seem.) tam thất hoang (Panax stipuleanatus Tsai et Feng)", Sc ho ol Tạp chí dược liệu, 14(1), pp 17-23 Dương Thị Phượng (2018), Định lượng Stripuleanosid R2 thân rễ Sâm vũ diệp, Khoa Y Dược-ĐHQGHN Nguyễn Văn Tập, Phạm Thanh Huyền, Lê Thanh Sơn ( 2006), "Kết t@ nghiên cứu phân bố, sinh thái sâm vũ diệp Tam thất hoang Việt Nam", rig h Tạp chí dược liệu 11(5), pp 177-180 10 Ngơ Vân Thu (1990), Hóa học Saponin, Khoa Dược – Trường Đại học Y Dược thành phố Hồ Chí Minh Co py 11 Ngơ Vân Thu, Trần Hùng (2011), Dược liệu học tập 1, NXB Y học – Bộ Y tế PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterm 12 Nguyễn Thị Thu Thủy, Nguyễn Hữu Tùng, Nguyễn Thế Tùng (2018), VN bipinnatifidus Seem) trồng Sa Pa, Đại học Dược Hà Nội U Nghiên cứu thành phần Saponin thân rễ Sâm Vũ Diệp (Panax 19 Nguyễn Văn Tập (2005), "Các loài thuộc chi Panax L Việt Nam", Tạp arm ac y, chí dược liệu, 10(3), pp 71-76 Tiếng Anh 13 Hu M, Ogawa K et Al (1995), "Triterpenoid glucuronide saponins from root bark of Aralia armata", Phytochemistry, 39, pp 179-184 14 H T Nguyen, et al (2011), "Oleanolic triterpene saponins from the roots of Ph Panax bipinnatifidus", Chem Pharm Bull (Tokyo), 59(11), pp 1417-1420 an d 15 Wang Dq, et al (1989), "Studies on saponins from the leaves of Panax japonicasvar bipinnatifidus (Seem.) Wu etFeng", Yao XueXueBao, 24(8), pp 16 Who (1997), A M ed ici ne 593-599 WHO guide to good manufacturing practice (GMP)requirements - Part 2: Validation, Word Health Organization Geneva 17 Zhang Y, Shi C et Al (2016), "Saponins from Panax bipinnatifidus Seem.: New strategy of extraction, isolation, and evaluation of tyrosinase inhibitory activity based on mathematical calculations", J Chromatogr B Analyt Technol of Biomed Life Sci,, 1039, pp 79-87 18 Zhitao Liang, et al (2009), "Determination of acid oleanolic and ursolic Sc ho ol acid in Oldenlandia diffusa and its substitute using high performance liquid chromatography", Journal of food and drug analysis, 17(2), pp 69-77 Co py rig h t@ 20 Stipuleanosid R2, http://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterm PHỤ LỤC Co py rig h t@ Sc ho ol of M ed ici ne an d Ph arm ac y, VN U Phụ lục - Phiếu kết giám định mẫu Co py rig h t@ Sc ho ol of M ed ici ne an d Ph arm ac y, VN U PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterm PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterm Co py rig h t@ Sc ho ol of M ed ici ne an d Ph arm ac y, VN U Phụ lục - Sắc ký đồ cao EtOH thân Sâm Vũ Diệp ... hiện: TRẦN THỊ NGỌC HÀ PHÂN TÍCH THÀNH PHẦN STIPULEANOSID R2 TRONG CÁC BỘ PHẬN CỦA CÂY SÂM VŨ DIỆP (Panax bipinnatifidus Seem.) KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC (NGÀNH DƯỢC HỌC) Khóa: QH2014.Y Người... of ? ?Phân tích thành phần Stipuleanosid R2 có phận Sâm Vũ Sc ho ol Diệp? ?? tiếp nối nghiên cứu bước đầu thành phần hóa học thân rễ SVD “Nghiên cứu thành phần saponin có thân rễ SVD trồng Sa Pa” -luận. .. chiết xuất xác định thành phần saponin có phận Sâm Vũ Diệp 29 M ed ici ne 4.2 Về định lượng sơ thành phần Stipuleanosid R2 phận Sâm Vũ Diệp HPLC 29 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ