BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM TP.HCM KHOA: CÔNG NGHỆ THỰC PHẨM TIỂU LUẬN PHÂN TÍCH LIPIT BẰNG GC GVHD : HVTH: Mã Số: TP.Hồ Chí Minh, Tháng 9 Năm 2021 MỤC LỤC I. GIỚI THIỆU CHUNG VỀ SẮC KÝ KHÍ (GC) 3 1. Định nghĩa 3 2. Nguyên lý hoạt động 3 3. Hệ thống GC 4 4. Ứng dụng của phương pháp sắc ký khí (GC) 6 II. PHÂN TÍCH LIPIT BẰNG SẮC KÝ KHÍ (GC) 7 1. Phân tích lipid bằng sắc ký khí 7 2. Phân tích cặn hữu cơ có nguồn gốc khảo cổ bằng phương pháp sắc ký khí nhiệt độ cao và sắc ký khí khối phổ 11 III. KẾT LUẬN 14 TÀI LIỆU THAM KHẢO 15 MỤC LỤC HÌNH Hình 1. Thiết bị sắc ký khí (GC) 4 Hình 3. Cột nhồi 5 Hình 4. Cột mao quản 6 Hình 5. Sắc ký đồ GC một phần của vùng 18:1, 19:1 và 18:2. Từ trên cùng: phân đoạn trans và cis 18:1 thu được từ hỗn hợp FAME cis 6, cis 9 và cis 1318: 1 sau hai lần brom hóa và khử liên tiếp, axit linoleic FAME được đồng phân hóa bởi PTSA, phân đoạn trans và cis là 19:1 thu được bằng cách phân đoạn FAME cis 1019:1 sau sáu phản ứng, và hỗn hợp FAME đối chứng GLC 463. 8 Hình 6. Sắc ký đồ GC của triacylglycerol chất béo trong sữa nguyên chất (TAG) được phân tích trên một cột mao quản hình ống hở cực ngắn. 9 Hình 7. Sắc ký đồ khí của dẫn xuất TMS của phytosterol thu được từ sữa được pha chế với cô đặc sterol được nhũ tương hóa 10 Hình 8. Sắc ký khí của các dẫn xuất TMS của bề mặt lipid thu được bằng phương pháp sắc ký khí nhiệt độ caokhối phổ. 11 Hình 8: Một phần (1033 phút) của sắc ký đồ của cặn còn lại trong chất nền của một tàu gốm mới, không tráng men và không tráng men sau khi nấu một con cá mú san hô đốm hoặc cá hồi san hô đỏ). Đỉnh cao nhất, ở 23,28 phút trong. EI +: điện tử tác động ion dương; TOF: máy phân tích khối lượng thời gian tắt đèn; TIC: tổng dòng ion (theo đơn vị tùy ý). 13 Hình 9: Xác định các đỉnh trên sắc ký đồ trong Hình 5 13 I. GIỚI THIỆU CHUNG VỀ SẮC KÝ KHÍ (GC) 1. Định nghĩa GC là viết tắt của Gas Chromatography, Sắc ký khí là một loại sắc ký phổ biến được sử dụng trong hóa học phân tích để tách và phân tích các hợp chất có thể hóa hơi mà không bị phân hủy. Các ứng dụng điển hình của GC bao gồm kiểm tra độ tinh khiết của một chất cụ thể hoặc tách các thành phần khác nhau của hỗn hợp (Harvey, 2000) 2. Nguyên lý hoạt động Nguyên tắc: dựa trên tính phân bố mẫu ở dạng khí giữa hai pha tĩnh và pha động Sắc ký khí là quá trình tách các hợp chất trong một hỗn hợp bằng cách bơm một mẫu khí hoặc lỏng vào pha động, thường được gọi là khí mang, và cho khí đi qua pha tĩnh. Pha động thường là khí trơ hoặc khí không phản ứng như heli, argon, nitơ hoặc hydro. Pha tĩnh là một lớp mỏng nhỏ của chất lỏng nhớt trên bề mặt của các hạt rắn ở một giá đỡ chất rắn trơ bên trong một mảnh thủy tinh hoặc ống kim loại được gọi là cột. Bề mặt của các hạt rắn cũng có thể hoạt động như pha tĩnh trong một số cột. Cột thủy tinh hoặc kim loại mà pha khí đi qua, được đặt trong tủ sấy nơi nhiệt độ của khí có thể được kiểm. Chất khí được cột sắc ký hấp thụ và dần dần tách khỏi cột đi theo dòng khí để ra ngoài theo từng chất riêng biệt. Chúng sẽ được ghi nhận bởi đầu dò ở bên ngoài. Từ đó, bộ phận liên kết với sắc ký khí là máy tính sẽ tiến hành phân tích. Máy sẽ xử lý các thông tin nhận được và hiển thị kết quả phân tích theo dạng biểu đồ sắc ký. Chúng ta sẽ biết được thành phần nhờ vào giá trị thời gian lưu thể hiện trên biểu đồ đó. Đây chính là kết quả tách các chất. Người ta có thể xác định được thành phần, nồng độ các chất nhờ vào kết quả này (Harvey, 2000). . Hình 1. Thiết bị sắc ký khí (GC) 3. Hệ thống GC 3.1. Nguồn cung cấp khí mang Có thể sử dụng bình chứa khí hoặc các thiết bị sinh khí (thiết bị tách khí N2 từ không khí, thiết bị cung cấp khí H2 từ nước cất,…). 3.2. Bộ lấy mẫu tự động. Bộ lấy mẫu tự động là thiết bị đưa mẫu tự động vào đầu vào. Có thể đưa mẫu vào bằng tay nhưng không còn phổ biến nữa. Chèn tự động cung cấp độ chính xác cao hơn và tối ưu hóa thời gian. Bộ lấy mẫu tự động cho các mẫu lỏng hoặc khí dựa trên một ống tiêm siêu nhỏ. Hình 2. Bộ lấy mẫu tự động 3.3. Lò cột Dùng để điều khiển nhiệt độ cột phân tích 3.4. Bộ tiêm mẫu Bộ phận tiêm mẫu dùng để đưa mẫu vào cột phân tích theo với thể tích bơm có thể thay đổi. Khi đưa mẫu vào cột, có thể sử dụng chế độ chia dòng (split) và không chia dòng (splitless) 3.5. Đầu dò. Đầu dò dùng để phát hiện các thành phần của hỗn hợp được tách ra khỏi cột sắc ký. Có hai loại máy dò chung: phá hủy và không phá hủy. Các thiết bị dò phá hủy thực hiện sự biến đổi liên tục của nước chảy ra cột (đốt cháy, bay hơi hoặc trộn với thuốc thử) với phép đo sau đó về một số đặc tính vật lý của vật liệu tạo thành (plasma, sol khí hoặc hỗn hợp phản ứng). Các máy dò không phá hủy đo trực tiếp một số đặc tính của chất tách khỏi cột (ví dụ hấp thụ UV) và do đó mang lại khả năng thu hồi chất phân tích cao hơn. Có nhiều loại đầu dò khác nhau tùy theo mục đích phân tích như đầu dò ion hóa ngọn lửa (FIDFlame Ioniation Detetor), đầu dò dẫn nhiệt (TCDThermal Conductivity Detector), đầu dò cộng kết điện tử (ECDElectron Capture Detector), đầu dò quang hóa ngọn lửa (FPDFlame Photometric Detector), đầu dò NPD (NPDNitrogen Phospho Detector), đầu dò khối phổ (MSMass Spectrometry) 3.6. Cột phân tích Có 2 loại cột: cột nhồi và cột mao quản. Cột nhồi (packed column): pha tĩnh được nhồi vào trong cột, cột có đường kính 24mm và chiều dài 23m. Hình 3. Cột nhồi Cột mao quản (capillary): pha tĩnh được phủ mặt trong (bề dày 0.20.5µm), cột có đường kính trong 0.10.5mm và chiều dài 30100m Hình 4. Cột mao quản 3.7. Bộ phận ghi nhận tín hiệu Bộ phận này ghi tín hiệu do đầu dò phát hiện. Đối với các hệ thống HPLC hiện đại, phần này được phần mềm trong hệ thống ghi nhận, lưu các thông số, sắc ký đồ, các thông số liên quan đến peak như tính đối xứng, hệ số phân giải,… đồng thời tính toán, xử lý các thông số liên quan đến kết quả phân tích. 3.8. In dữ liệu Sau khi phân tích xong, dữ liệu sẽ được in ra qua máy in kết nối với máy tính có cài phần mềm điều khiển. 4. Ứng dụng của phương pháp sắc ký khí (GC) Sắc ký khí được sử dụng để thay thế các phương pháp truyền thống để phân tách các chất đem lại hiệu quả chính xác hơn. Phương thức này được sử dụng với nhiều công dụng khác nhau. Trong đó, ứng dụng về mặt thực phẩm cũng là một yếu tố không thể bỏ qua khi nó rất gần gũi và thiết thực trong đời sống con người. Trước tiên, ứng dụng của sắc kỵ khí trong thực phẩm là một ứng dụng nổi bật của loại vật phẩm này mà chúng ta cần phải biết. Ứng dụng đầu tiên chính là phân tích được các chất hữu cơ phức tạp, amino axit có trong thức ăn. Ngoài ra, chúng ta cũng có thể phân tách được các thành phần chất béo, chất xơ,... Từ đó có thể lập được bảng kế hoạch dinh dưỡng để ăn uống hợp lý và khoa học rõ ràng. Một ứng dụng tuy rất đơn giản nhưng lại vô cùng cần thiết của sắc ký khí trong thực phẩm chính là sử dụng lại thức ăn đã qua chế biến. Thông thường, nếu không ăn hết thức ăn, chúng ta sẽ bọc lại và cho vào tủ lạnh. Tuy nhiên, đây không phải là một phương pháp bảo quản hoàn toàn tối ưu. Nó chỉ có thể giúp kéo dài độ tươi sống cũng như ngon lành của thực phẩm. Nhưng phương thức này không thể hạn chế ngăn chặn các loại vi khuẩn, sinh vật xâm nhập vào thực phẩm. Đây là lúc mà chúng ta cần dùng đến sắc ký khí để phân tách các chất. Nhờ đó mà người dùng mới có thể biết được thực phẩm có còn dùng được nữa hay đã đến lúc hết hạn sử dụng. Như thế, ứng dụng của sắc ký khí trong thực phẩm đóng vai trò quan trọng trong việc sử dụng thực phẩm. Chúng ta có thể điều chỉnh khẩu phần ăn, các loại thức ăn để đảm bảo sức khỏe của mình. Ngoài ra, nó cũng giúp cho người dùng biết được các thông tin cần thiết về các loại thực phẩm khác nhau. Từ đó có thể chọn ăn những loại thực phẩm cung cấp nhiều chất dinh dưỡng và phù hợp với tiêu chí này. II. PHÂN TÍCH LIPIT BẰNG SẮC KÝ KHÍ (GC) 1. Phân tích lipid bằng sắc ký khí (CruzHernandez and Destaillats, 2012) GCFID được sử dụng để phân tích các axit béo tự do (FFAs) và acylglycerol một phần như monoacylglycerol (MAG) hoặc diacylglycerol (DAG), và sterol sau khi tạo dẫn xuất. Loại phân tích này rất hữu ích để xác định đặc điểm thành phần của chất béo và dầu hoặc chất nhũ hóa và có thể được mở rộng sang cấu hình của triacylglycerol (TAG), sáp hoặc este sterol bằng cách sử dụng pha tĩnh không bền nhiệt. Ngoài phân tích các este axit béo với phát hiện FID, GC được sử dụng song song với khối phổ (MS) để phân tích cấu trúc của axit béo. Các kỹ thuật khác nhau đã được phát triển để xác định và định vị các liên kết đôi, vòng hoặc các nhóm khác. Phân tích định lượng hoặc cấu trúc của các lipid phức tạp hơn như glycerophospholipid hoặc TAG không thể thực hiện được bằng GC và yêu cầu sử dụng các kỹ thuật sắc ký lỏng. 1.1. Điều chế axit béo metyl este FAME có thể được điều chế từ các lipid cô lập, hoặc trực tiếp bằng cách kết hợp chiết xuất và quá trình chuyển hóa trong quy trình một bước. Các chất xúc tác được sử dụng phổ biến nhất là axit clohydric (HCl), một chất xúc tác axit, được yêu cầu khi có một lượng đáng kể axit béo tự do (FFA), este, ank1enyl ete, amin và glycoside (trừ ete) trong mẫu cần phân tích. Dung dịch HClmetanol (1 2 M) chuyển đổi gốc plasmalogen (ank1enyl ete) trong chất béo thành đimetylaxetal (DMA) và quá trình metyl hóa được hoàn thành trong vòng vài phút ngoại trừ sphingolipit. Một phương pháp thay thế đã được đề xuất để có hiệu quả với hiệu suất FAME> 96% khi toluen, metanol và 8% dung dịch HCl được thêm liên tiếp vào các mẫu lipid. 1.2. Phân tích độ phân giải cao của đồng phân vị trí Đồng phân vị trí Mặc dù đã cải thiện độ phân giải bằng cách sử dụng cột có độ phân cực cao 100 m, việc tách một số axit béo như đồng phân hình học 18: 1 vẫn là một thách thức đối với các pic chồng lên nhau. Một số axit béo không được phân tách hoặc phân giải, ngay cả khi việc phân giải tốt nhiều axit béo được thực hiện bằng cách sử dụng các cột và điều kiện sắc ký khác nhau; do đó, cần phải có có một chương trình GC tối ưu để xác định tất cả các đồng phân cis và trans trong chất nền lipid có những hạn chế của nó Ví dụ: các đồng phân trans 18:1 từ 6t đến 11t18:1 không được GC phân giải tốt bằng cách sử dụng chương trình nhiệt độ điển hình và sự phân giải của các đồng phân trans18:1 còn lại là 12t đến 16t18:1 có thể chồng lên nhau nhiều tùy thuộc vào nồng độ tương đối của đồng phân 9c18:1 chính, tải mẫu được áp dụng vào GC và chương trình nhiệt độ được sử dụng. Việc đánh giá thấp các đỉnh này đôi khi được báo cáo do phân tích sai hoặc không đầy đủ. Hình 5. Sắc ký đồ GC một phần của vùng 18:1, 19:1 và 18:2. Từ trên cùng: phân đoạn trans và cis 18:1 thu được từ hỗn hợp FAME cis 6, cis 9 và cis 1318: 1 sau hai lần brom hóa và khử liên tiếp, axit linoleic FAME được đồng phân hóa bởi PTSA, phân đoạn trans và cis là 19:1 thu được bằng cách phân đoạn FAME cis 1019:1 sau sáu phản ứng, và hỗn hợp FAME đối chứng GLC 463. 1.3. Phân tích axit béo tự do Các axit béo tự do (FFA) xuất hiện trong các loại mẫu khác nhau và các phương pháp dựa trên GC khác nhau đã được phát triển để phân tích chúng. Trong các sản phẩm thực phẩm như pho mát, FFA chuỗi ngắn còn được đặt tên là FFA hoạt tính tạo mùi thơm (4:0 đến 10:0) có thể được phân tích bằng GC bằng cách sử dụng vi phân pha rắn (SPME) và phát hiện FID hoặc MS. Các phương pháp này có thể được sử dụng để phân tích sự phát triển của hương thơm phô mai chứa chủ yếu là FFA chuỗi ngắn, nhưng không thích hợp để phân tích FFA chuỗi dài hoặc trung bình phổ biến nhất do giới hạn của kỹ thuật SPME. Đối với FFA dài hơn, chẳng hạn như 12:0 đến axit béo chuỗi rất dài (ví dụ: 24:0), FFA nên được tạo dẫn xuất trước khi phân tích. Có thể sử dụng nhiều loại dẫn xuất khác nhau như trimetylsilyl este TMS, metyl hoặc etyl este. Hầu hết các phương pháp yêu cầu tinh chế FFA từ các chất chiết xuất từ lipid. Quá trình metyl hóa FFA có thể đạt được bằng cách sử dụng bo triflorua, dung dịch metanol của axit clohydric hoặc axit sulfuric, hoặc diazomethane. Methyl hóa bằng cách sử dụng diazomethane tạo ra các mẫu rất sạch, nhưng vì lý do an toàn, trimethylsilyldiazomethane là thuốc thử được ưa chuộng hơn 1.4. Phân tích axit glycerol Acylglycerol là các este axit béo của glycerol và bao gồm TAG, DAG và MAG. Việc tách TAG bằng GC có thể đạt được khi sử dụng điều kiện nhiệt độ cao (> 3000C). Kỹ thuật này cho phép phân tách tốt TAG theo số lượng nguyên tử cacbon của chúng nhưng bị hạn chế về độ phân giải do một số lý do như nhiệt độ cần thiết để rửa giải TAG, độ bền nhiệt của chúng cũng như độ bền nhiệt của pha tĩnh trong các điều kiện đó. Bất kể những hạn chế này, phân tích GC của TAG theo số carbon của chúng có thể được thực hiện để đánh giá. Ví dụ, tính xác thực của chất béo sữa, một sắc ký đồ điển hình của chất béo sữa TAG được thể hiện trong Hình Hình 6. Sắc ký đồ GC của triacylglycerol chất béo trong sữa nguyên chất (TAG) được phân tích trên một cột mao quản hình ống hở cực ngắn. 1.5. Phân tích sterols, sterol esters và steryl glycosides Cholesterol hoặc sterol có nguồn gốc thực vật như campesterol, stigmasterol, và bsitosterol được GC phân tích dưới dạng TMS hoặc các dẫn xuất khác của chúng. Cần tách phần không xà phòng hóa khỏi dịch chiết lipid để tách sterol; bước này cũng cho phép thủy phân các este steryl và phần thu được có thể được phân tích sau quá trình silyl hóa. Epicoprostanol thường được sử dụng như một chất chuẩn nội và sắc ký đồ điển hình của công thức phytosterol trong chế độ ăn uống được thể hiện trong Hình Phương pháp luận này được sử dụng để mô tả đặc điểm của sterol trong các tình hình khác nhau như mô tả đặc tính của dầu thực vật, tính xác thực của thành phần, kiểm tra chất lượng của các sản phẩm thực phẩm được tăng cường sterol thực vật, dinh dưỡng lâm sàng hoặc sinh học lâm sàng. Các este sterol có thể được phân tích trực tiếp mà không cần thủy phân trước gốc acyl và tạo dẫn xuất TMS như được chỉ ra đối với các este cholesteryl trong lipid huyết tương. GC cũng có thể được sử dụng để phân tích glycoside acyl steryl. Hình 7. Sắc ký đồ khí của dẫn xuất TMS của phytosterol thu được từ sữa được pha chế với cô đặc sterol được nhũ tương hóa 1.6. Phân tích các lớp Lipid Các phương pháp có sẵn để phân tích FFA, sterol, sáp, MAG, DAG, TAG, hoặc các chất béo khác bằng GCFID hoặc GCMS sau quá trình silyl hóa. Một số phương pháp đã được phân tích đồng thời các lớp lipid này trong các loại chất nền khác nhau. Cần có một chương trình nhiệt độ rộng để rửa giải các dẫn xuất TMS nhẹ như glycerol triTMS và TAG cao phân tử. Phương pháp chuẩn cho chất nhũ hóa dựa trên MAG và DAG cũng có thể được sử dụng để tách glycerol, FFA, MAG, DAG và TAG trong các mẫu phức tạp như dầu thô. Để xác định định lượng các lớp lipid trung tính sau khi silyl hóa, nên sử dụng chất chuẩn nội cho mỗi lớp lipid vì hệ số đáp ứng của các lớp khác nhau có thể khác nhau đáng kể. Các sắc ký đồ thu được có thể rất phức tạp bằng cách phân tích sản phẩm chưng cất bằng máy khử mùi. Do đó, ngoài các lớp phong phú nhất như FFA, MAG, DAG và TAG, các chất tan trong mỡ khác như vitamin E, sterol và hydrocacbon cũng sẽ có trong mẫu. Việc sử dụng hỗn hợp các chất chuẩn tinh khiết là rất hữu ích để xác định các lớp lipid khác nhau và giảm thiểu các vấn đề nhận dạng. Hình 8. Sắc ký khí của các dẫn xuất TMS của bề mặt lipid thu được bằng phương pháp sắc ký khí nhiệt độ caokhối phổ. 2. Phân tích cặn hữu cơ có nguồn gốc khảo cổ bằng phương pháp sắc ký khí nhiệt độ cao và sắc ký khí khối phổ (Evershed và cộng sự, 1990) 2.1. Chuẩn bi mẫu. Tách mẫu Bước đầu tiên để nghiên cứu lipid cổ trong đồ gốm cổ là tách chúng ra khỏi nền gốm bằng cách chiết chúng trong dung môi thích hợp, ví dụ như trong hỗn hợp 2:1 (theo thể tích) của cloroform (CHCl3) và metanol (CH3 OH). Lipid sẽ dễ dàng hòa tan trong chất này nhưng vì những dung môi này chỉ có thể chiếm một lượng cố định, nên tỷ lệ chất béo trong dung dịch có thể khác với tỷ lệ chất béo trong cặn. Xử lý mẫu Cặn khô được hấp thụ một lượng nhỏ, ví dụ 100 μ trong dung môi. Điều này có thể giống như được sử dụng cho quá trình chiết hoặc một phương pháp được coi là phù hợp hơn cho các bước tiếp theo trong phân tích, chẳng hạn như etylaxetat (CH3COOC2H5), axetylaxetat hoặc isooctan. Thêm kali hoặc natri hydroxit (tương ứng là KOH hoặc NaOH) vào huyền phù sẽ xà phòng hóa chất béo do đó làm tăng nồng độ axit béo tự do. Ngoài ra, quá trình xà phòng hóa có thể được thực hiện ở giai đoạn trước với bột gốm còn còn lại. Việc bổ sung một lượng đã biết của hợp chất đã biết, chất chuẩn nội, sẽ cho phép tính gần đúng nồng độ của các hợp chất được tìm thấy trong cặn khi chiều cao ở đỉnh của nó trên sắc ký đồ được so sánh với chiều cao của các phân tử trong mẫu. tiêu chuẩn nội bộ không tạo điều kiện cho phân tích định tính. Lưu ý rằng bất kỳ xử lý bổ sung nào đối với mẫu sẽ làm tăng khả năng nhiễm bẩn. Để nhiều lipid đi qua máy sắc ký khí, nên làm cho chúng ít phân cực hơn và bền nhiệt hơn bằng cách thay thế hydro hoạt tính của nhóm COOH bằng một nhóm không phân cực, một quá trình được gọi là quá trình tạo dẫn xuất. 2.2. Phương pháp. Các phương pháp thường được sử dụng bao gồm ester hóa (metyl hóa) và silyl hóa Trong quá trình este hóa, hydro hoạt hóa được thay thế bằng nhóm metyl (CH3) biến các axit béo thành metyl ester của axit béo (FAME). Thay thế hydro hoạt hóa bằng nhóm trimetylsilyl (TMS) (Si (CH3)3) được gọi là quá trình silyl hóa. Một số lượng lớn các chất tạo dẫn xuất có sẵn trên thị trường, bao gồm cả methanolic HCl và diazomethane để este hóa, và N, Obis (trimethylsilyl) trifluoroacetamide (BSTFA), có hoặc không có 1% trimethylchlorsilane (TMCS), để khử trùng mẫu. Để các phản ứng này xảy ra, cần phải đun nóng mẫu, thường đến 60°C trong thời gian một giờ, điều này sẽ đồng thời kích thích các phản ứng không mong muốn, bao gồm cả quá trình oxy hóa. Để giảm thao tác với mẫu, cặn có thể được chiết xuất thành tác nhân vừa xà phòng hóa vừa tạo dẫn xuất mẫu trong khi nó bay hơi trong máy sắc ký khí, chẳng hạn như tetramethylamoni hydroxit (TMAH) hoặc trimethyltrifluorotolylammonium hydroxit (TMTFTH). 2.3. Phân tích bằng sắc ký khí (GC) 1 μl mẫu được bơm vào đầu vào mẫu được làm nóng đến nhiệt độ cao cố định (200300°C). Dung môi, mẫu và phụ gia (như chất tạo dẫn xuất dư và chất chuẩn nội) sẽ nhanh chóng bốc hơi và được khí mang lên cột. Một cửa ra thay đổi cho phép điều chỉnh lượng mẫu thực sự đi qua cột. Để có được độ phân giải tối đa, các mẫu có nồng độ cấu tử cao được tách thành một phần đi lên cột và một phần thoát ra khỏi thiết bị mà không cần phân tích. Các mẫu có hàm lượng cấu tử thấp, sẽ bao gồm nhiều mẫu khảo cổ, có thể được đưa vào cột không tách rời. Hình 8: Một phần (1033 phút) của sắc ký đồ của cặn còn lại trong chất nền của một tàu gốm mới, không tráng men và không tráng men sau khi nấu một con cá mú san hô đốm hoặc cá hồi san hô đỏ). Đỉnh cao nhất, ở 23,28 phút trong. EI +: điện tử tác động ion dương; TOF: máy phân tích khối lượng thời gian tắt đèn; TIC: tổng dòng ion (theo đơn vị tùy ý). Hình 9: Xác định các đỉnh trên sắc ký đồ trong Hình 5 2.4. Kết quả Mỗi đỉnh trên sắc ký đồ đại diện cho ít nhất một phân tử trong mẫu và một phổ khối có thể được tạo ra từ mỗi đỉnh này. Mặc dù trường hợp này hiếm khi xảy ra, các đỉnh sắc ký có thể đại diện cho nhiều hơn một phân tử nếu độ phân giải của cột GC không đủ để phân tách chúng. Các phân tử được phát hiện trong cặn hữu cơ trong đồ gốm cổ chỉ là những phân tử còn lại trong nền gốm, hòa tan trong dung môi chiết, tồn tại trong quá trình chuẩn bị mẫu, đi qua máy sắc ký khí và ion hóa trong khối phổ. Như thể hiện trong hình 5 và 6, nhiều phân tử thỏa mãn các tiêu chí này. Tuy nhiên, một số phải được coi là kết quả của sự nhiễm bẩn mẫu Một cách tiếp cận khác để giải thích các tàn dư hữu cơ khảo cổ học là so sánh sự phong phú của các axit béo được thu hồi với các axit béo còn lại. Đôi khi có thể thu được kết quả với một tỷ lệ đơn giản, chẳng hạn như C16:0C18: 0 (tỷ lệ axit palmiticstearic, tỷ lệ PS), hoặc sau khi vẽ hai tỷ lệ trong biểu đồ hai chiều, ví dụ C16:1C18:1 so với (C15:0 + C17:0)C18:0 trên thang logarit kép III. KẾT LUẬN Lipid trong thực phẩm chứa nhiều loại axit béo khác nhau về độ dài chuỗi, mức độ không bão hòa, vị trí và cấu hình của các liên kết đôi và sự hiện diện của các nhóm chức năng đặc biệt. Sắc ký khí mao quản cung cấp khả năng tách axit béo tuyệt vời. Cột mao quản silica nung chảy với pha tĩnh có độ phân cực trung bình và pha tĩnh methylsilicone không phân cực tách thành công hầu hết các axit béo tự nhiên. Các ứng dụng đặc biệt, chẳng hạn như tách hỗn hợp axit béo cistrans phức tạp và axit béo mạch vòng, yêu cầu các điều kiện sắc ký cụ thể, bao gồm việc sử dụng cột mao quản rất dài hoặc nhiều pha tĩnh phân cực hơn. Các phương pháp tạo dẫn xuất để điều chế các este axit béo cũng cần được tối ưu hóa để thu được kết quả định lượng chính xác. Bài báo này xem xét các kỹ thuật tạo dẫn xuất, cột mao quản và pha tĩnh thường được sử dụng trong sắc ký khí của axit béo trong thực phẩm. TÀI LIỆU THAM KHẢO CRUZHERNANDEZ, C. DESTAILLATS, F. 2012. Analysis of lipids by gas chromatography. Gas chromatography. Elsevier, Waltham, 529544. EVERSHED, R. P., HERON, C. GOAD, L. J. 1990. Analysis of organic residues of archaeological origin by hightemperature gas chromatography and gas chromatographymass spectrometry. Analyst, 115, 13391342. HARVEY, D. 2000. Modern analytical chemistry, McGrawHill New York. SHANTHA, N. NAPOLITANO, G. E. 1992. Gas chromatography of fatty acids. Journal of Chromatography A, 624, 3751.