Nghiên cứu chế tạo hạt nano oxit sắt từ với lớp phủ tương thích sinh học gắn protein để ứng dụng trong chẩn đoán y sinh (tt)

Tóm tắt Vật liệu nano từ tính với tính chất đặc biệt, siêu thuận từ, giá trị bão hòa từ cực đại cao mở tiềm ứng dụng nhiều lãnh vực y sinh, mơi trường… Hạt nano từ tính chế tạo theo hai phương pháp bản: từ vật liệu khối nghiền nhỏ đến kích thước nano, hai hình thành hạt nano từ nguyên tử Trong nghiên cứu này, chọn phương pháp thứ hai - phương pháp đồng kết tủa Hạt nano Fe3O4 chế tạo phương pháp đồng kết tủa với kích thước hạt nano Fe3O4 khác nhau, hạt chức hóa chất phủ tetraethyl orthosilicate (TEOS), 3-Aminopropyltriethoxysilane (APTES), glutaraldehyde (GA) để hình thành cấu trúc Fe3O4/SiO2/NH2/CHO có chức gắn kết protein A Các kỹ thuật hiển vi điện tử truyền qua (TEM), nhiễu xạ tia X (XRD), từ kế mẫu rung (VSM), phổ hồng ngoại biến đổi Fourier (FTIR), phổ UV-Vis (UV-Vis) hiển vi điện tử huỳnh quang thực để xác định tính chất, hình dạng cấu trúc hạt nano Bằng phương pháp Bradford xác định hiệu suất gắn kết protein A cấu trúc Fe3O4/SiO2/NH2/CHO với kích thước hạt nano Fe3O4 khác Kết cho thấy hạt Fe3O4 kích thước nhỏ (10nm) cho hiệu suất gắn kết protein A tốt hạt Fe3O4 kích thước lớn (30nm) Tuy nhiên, hạt Fe3O4 với kích thước lớn (30nm) có từ độ bão hịa cao gần từ độ bão hòa Fe3O4 khối giữ tính siêu thuận từ i MỤC LỤC Tóm tắt……………………………………………………………………i Danh mục chữ viết tắt ……………………………………………… v Danh mục hình ……….………………………………………………….vi Lời cảm ơn……………………………………………………………… viii PHẦN I: MỞ ĐẦU 1 Tính cấp thiết đề tài: Tổng quan tình hình nghiên cứu ngồi nước 2.1 Tình hình nghiên cứu nước 2.2 Tình hình nghiên cứu ngồi nước Mục tiêu đề tài Đối tượng, phạm vi phương pháp nghiên cứu 4.1 Đối tượng: 4.2 Phạm vi nghiên cứu: 4.3 Phương pháp nghiên cứu kỹ thuật sử dụng PHẦN II: NỘI DUNG Chương 1: CHẾ TẠO HẠT NANO SẮT TỪ 1.1 Hạt nano 1.2 Hạt nano oxit sắt 1.3 Các phương pháp chế tạo hạt nano 1.4 Vật liệu, Thiết bị 15 1.5 Quy trình chế tạo hạt Fe3O4 phương pháp đồng kết tủa 17 ii 1.6 Thực nghiệm: Chế tạo hạt nano oxít sắt từ 18 Chương 2: CHỨC NĂNG HÓA BỀ MẶT HẠT NANO 21 2.1 Bao phủ bề mặt hạt nano chất silane 21 2.2 Quy trình bọc lớp tương thích sinh học 23 2.3 Thực nghiệm bọc lớp tương thích sinh học 24 Chương 3: GẮN PROTEIN LÊN HẠT NANO TỪ ĐÃ ĐƯỢC BỌC LỚP TƯƠNG THÍCH SINH HỌC 25 3.1 Linker 25 3.2 Hạt nano gắn với protein thông qua linker 26 3.3 Quy trình gắn protein A lên hạt nano từ 30 3.4 Gắn protein A lên hạt nano từ bọc lớp tương thích sinh học 31 3.5 Gắn biotin-FITC biotin 31 3.5 Các kỹ thuật phân tích 32 PHẦN III: KẾT LUẬN 33 Kết đề tài thảo luận 33 4.1.1 Tổng hợp hạt nano từ tính 33 4.1.2 Các hạt nano Fe3O4 hạt nano bọc lớp tương thích 34 4.1.3 Các hạt nano Fe3O4, hạt nano bọc lớp tương thích gắn với linker 37 4.1.4 Gắn protein A lên hạt nano, hạt nano gắn protein A gắn với biotin-FITC gắn với biotin 39 iii 4.1.5 Hiệu suất gắn kết protein A với hạt nano từ 42 4.2 Kết luận kiến nghị 42 Tài liệu tham khảo .44 Phụ lục 1………………………………………………………………….49 Phụ lục 2………………………………………………………………….50 Phụ lục 3………………………………………………………………….51 Phụ lục - Cơng trình cơng bố : .52 Tạp chí khoa học trường đại học trà vinh .52 iv DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT STT 10 11 12 13 14 15 16 17 Chữ 3– amino propyl triethoxysilane anti-Staphylococcus aureus enterotoxin A Biotin-fluorescein isothiocyanate Bovine serum albumin Enzyme - Linked ImmunoSorbent Assay, Fourier spectrum Glutaraldehyde Khoa học công nghệ Nghiên cứu Polymerase Chain Reaction Sodium Dodecyl Sulfate Transmission electron microscopy Tetraethyl orthosilicate Tetraethylammoniumhydroxide UV-Vis spectrum Vibrating sample magnetometer X-ray diffraction v Chữ viết tắt APTES anti-SEA biotin-FITC BSA ELISA FTIR GA KH&CN NCCB PCR SDS TEM TEOS TEAOH UV-Vis VSM XRD DANH MỤC HÌNH STT Hình Hình Hai cách chế tạo hạt nano: từ xuống từ lên Trang Hình Sơ đồ minh họa trình tạo hạt nano phương pháp laser ablation Hình Ba khả phát triển mầm thành hạt nano 11 Hình Cơ chế hình thành hạt nano 12 Hình Một số máy phục vụ thí nghiệm 17 Hình NaOH 2M đưa nhanh vào hỗn hợp dung dịch muối sắt 18 19 Hình NaOH 2M đưa nhỏ giọt vào hỗn hợp dung dịch muối sắt Hình Quá trình hình thành liên kết chất silane với hạt nano Hình Chức hóa bề mặt hạt nano Fe3O4 với APTES 23 10 Hình 10 Rung siêu âm Fe3O4 24 11 Hình 11 Hạt nano oxit sắt từ bao phủ lớp bảo vệ silane gắn với linker Hình 12 Một số linker thường gặp 25 27 14 Hình 13 Hạt nano gắn kết với protein thơng qua linker glutaraldehyde Hình 14 Phản ứng NHS ester với amine sơ cấp protein 15 Hình 15 Hạt nano gắn kết với protein thơng qua linker NHS ester 28 16 28 19 Hình 16 Phản ứng nhóm maleimide sulfhydryl có protein Hình 17 Hạt nano gắn kết với protein thơng qua linker NHS-PEGn – maleimide Hình 18 Hạt nano gắn kết với N3-Glycoprotein thơng qua linker NHS-Proparyl Hình 19 Giản đồ XRD hạt nano Fe3O4 20 Hình 20 Ảnh TEM hạt nano 35 21 Hình 21 Đường cong từ hóa hạt nano 36 22 Hình 22 Phổ FTIR hạt nano 37 12 13 17 18 vi 22 26 27 29 30 33 23 24 25 Hình 23 Sự thay đổi tỷ số cường độ NH2 Fe3O4 thay đổi lượng APTES phủ lên cấu trúc Fe3O4/SiO2 Hình 24 Ảnh hiển vi điện tử huỳnh quang hạt nano 38 Hình 25 Phổ UV-Vis dung dịch protein A trước sau gắn với Fe3O4/SiO2/NH2/CHO 41 vii 40 LỜI CẢM ƠN Trước hết, xin chân thành cám ơn Ban Giám hiệu, Phịng Khoa học Cơng nghệ, Khoa Khoa học Cơ bản, Trường Đại học Trà Vinh tạo điều kiện cho phép thực đề tài Tôi xin chân thành cám ơn q thầy Phịng Thí nghiệm Hóa –Sinh thuộc Khoa Khoa học Cơ bản, Trường Đại học Trà Vinh; Phòng Thí nghiệm Y – Sinh thuộc Khoa Khoa học Cơ bản, Trường Đại học Y Dược Thành Phố Hồ Chí Minh hỗ trợ thiết bị tạo điều kiện cho tơi để thực thí nghiệm đề tài Sau cùng, xin chân thành cám ơn Tiến sĩ Thi Trần Anh Tuấn, Tiến sĩ Nguyễn Tấn Tài - Khoa Khoa học Cơ bản, Trường Đại học Trà Vinh, Tiến sĩ Huỳnh Thanh Tuấn - Khoa Khoa học, Trường Đại học Cần Thơ có ý kiến góp ý khoa học đầy ý nghĩa để tơi hồn thành tốt báo cáo Xin chân thành cám ơn Trà Vinh, ngày 25 tháng 01 năm 2017 viii PHẦN I: MỞ ĐẦU Tính cấp thiết đề tài: Vật liệu nano từ tính với tính chất đặc biệt, siêu thuận từ, giá trị bão hòa từ cực đại cao mở tiềm ứng dụng nhiều lãnh vực y sinh (Pimpha, Chaleawlert-umpon 2011; Felton, Karmakar 2014), môi trường (Shen, Tang 2009; Peng, Wang 2011) Trong số ấy, vật liệu nano từ tính Fe3O4 với tính chất siêu thuận từ, giá trị bão hịa từ cực đại cao, độc, có khả tương thích sinh học tốt quan tâm cả, với ứng dụng y sinh, tách chiết tế bào (Pimpha, Chaleawlert-umpon 2011; Bai, Du 2014), xét nghiệm miễn dịch , dẫn truyền thuốc (Cleek, R L 1997) hình ảnh (Veiseh, Gunn 2010) Hạt nano Fe3O4 với nhiều kích thước khác phù hợp với ứng dụng đối tượng, kích thước tế bào 10 μm –100 μm, virus 20 nm–450 nm, protein nm–50 nm gene nm rộng, 10 nm–100 nm dài (Pankhurst, Q.A 2003) Ngồi ra, kích thước hạt giảm làm tăng diện tích bề mặt dẫn đến số protein gắn kết đơn vị khối lượng hạt thường cao ( Hu, B 2009) Hơn nữa, thay đổi kích thước tinh thể nano Fe3O4 làm thay đổi giá trị bão hịa từ cực đại, tính siêu thuận từ khả đáp ứng với từ trường hạt nano Fe3O4, yếu tố đặc biệt quan trọng ứng dụng (Andrade, Valente 2012) Hạt nano Fe3O4 sau chế tạo chúng có xu hướng kết tụ với tương tác lưỡng cực từ mạnh lực van der Waals (Shao, Xia 2008; Hou, Han 2013) Do vậy, hạt nano từ tính cần bao bọc chất khơng từ tính để tránh kết tụ, giảm lắng đọng, hạn chế oxi hóa hạt nano tạo bề mặt chúng có tính chất đặc thù phù hợp với ứng dụng (Chi, Yuan 2012) Protein A protein bề mặt tìm thấy thành tế bào khuẩn Staphylococcus aureus Theo nhà sản xuất Sigma protein A gắn kết với FITC, biotin, kháng thể vùng Fc Do vậy, protein A gắn với hạt nano Fe3O4 chức hóa bề mặt thơng qua protein A hạt nano gắn kết với kháng thể, FITC, biotin Và qua mở nhiều ứng dụng tách chiết chẩn đoán Trên sở đó, chúng tơi đề xuất hướng nghiên cứu chế tạo hạt nano oxit sắt từ (Fe3O4) với lớp phủ có khả thích nghi sinh học hút bám tốt protein A Các hạt nano oxit sắt từ gắn với protein A gắn với protein khác kháng thể, DNA, RNA, virut, vi khuẩn Khi hạt nano oxit sắt gắn kết với kháng thể, kháng thể liên kết đặc hiệu với kháng nguyên loại Bằng từ trường ngồi tập trung hạt nano oxit sắt lại chỗ nhờ tính chất siêu thuận từ Do đó, tập trung kháng nguyên lại hay nói theo cách khác làm tăng mật độ kháng nguyên chẩn đoán sớm số bệnh ung thư, sốt xuất huyết, phát khuẩn liên cầu lợn mẫu bệnh phẩm Tổng quan nghiên cứu 2.1 Tình hình nghiên cứu nước Nghiên cứu tổng hợp hạt nano từ tính với lớp phủ sinh học để phục vụ cho ứng dụng chẩn đốn xác bệnh người gia súc nhóm PGS Trần Hồng Hải Viện Vật lý TPHCM; nhóm thực xong đề tài NCCB Quỹ Nafosted tài trợ năm 2009 “Tổng hợp hạt nano từ tính với lớp phủ sinh học để phục vụ cho nghiên cứu y sinh học, đặc biệt ứng dụng để chẩn đốn xác bệnh người gia súc” Năm 2012, nhóm hồn thành đề tài nghiên cứu Đồng Nai: “Nghiên cứu tổng hợp hạt nano từ tính để ứng dụng chẩn đốn bệnh tiêu chảy cấp Ecoli O157:H7 ung thư cổ tử cung HPV18” (Hai, T H 2011) Nghiên cứu công nghệ chế tạo hạt nano vô ( hạt nano từ hạt nano vàng ) để sử dụng y học; nghiên cứu hiệu ứng đốt từ ứng dụng cho nhiệt trị ung thư điều trị khơng can thiệp nhóm GS Nguyễn Xn Phúc cộng Viện KH&CN Việt Nam Nhóm triển khai đề tài NCCB “Nghiên cứu số vấn đề đốt nóng hệ hạt nano tác động sóng điện từ’ đề tài nghiên cứu cấp nhà nước thuộc chương trình nghiên cứu định hướng ứng dụng ‘Nghiên cứu công nghệ chế tạo hạt nano vô cơ, hữu bọc lớp phủ tương thích sinh học dùng y học’”; 2.2 Tình hình nghiên cứu ngồi nước Keziban Can cộng (Can, K., Ozmen, M., & Ersoz, M 2009) cơng bố kết tổng hợp hạt Fe3O4: kích thước hạt thu vào khoảng nm -10 nm, độ từ hóa 55,3 emu/g Và, số kết nghiên cứu khác (Abid, J P 2002; Kim, D 2006) đạt kích thước hạt Fe3O4 từ nm – 14 nm, độ từ hóa vào khoảng 60 emu/g – 64 emu/g Các tác giả tổng hợp hạt nano từ Fe3O4 phương pháp đồng kết tủa Kích thước hạt vào khoảng nm – 20nm, độ từ hóa khoảng 55 emu/g – 68 emu/g, hình dạng tương đối cầu Một số yếu tố ảnh hưởng đến tính chất vật lý hạt như: nhiệt độ tổng hợp, thời gian tổng hợp, tốc độ khuấy, tỷ phần mol Fe3+/Fe2+, độ pH dung dịch Bin Hu cộng (Hu, B.2009), cố định Serratia marcescens lipase lên hạt nano từ Fe3O4 Tỷ lệ gắn lên đến 70% Xiuheng Xue cộng (Xue, X 2013), cố định thành công kháng huyết anti-Staphylococcus aureus enterotoxin A (anti-SEA) lên hạt nano từ bọc Chitosan, nhằm làm giàu phát SEA Tóm lại: Các cơng trình nghiên cứu tác giả cho thấy, gắn thành công số thực thể sinh học lên hạt nano từ bao phủ lớp thích nghi sinh học; kích thước hạt nano trần phạm vi: nm – 10 nm, 15 nm – 20 nm, 30 nm, 40 nm tùy loại thực thể sinh học; độ từ hóa sau phủ mức thấp 15 emu/g, cao 60 emu/g; tỷ lệ kết dính hạt nano với thực thể sinh học từ 40 – 90% Mục tiêu đề tài Chế tạo hạt nano oxit sắt từ tính có kích thước 8-20 nm, 20 nm40nm, độ từ hóa bão hòa 50-70 emu/g, siêu thuận từ Lớp phủ tương thích sinh học có nhóm chức NH2, CHO để liên kết đồng hóa trị với protein Gắn protein BSA lên hạt nano với tỷ lệ gắn kết 70% Cấu trúc nano áp dụng để gắn kết protein khác kháng thể, tách chiết DNA… để ứng dụng chẩn đoán Đối tượng, phạm vi phương pháp nghiên cứu 4.1 Đối tượng:  Hạt nano từ tính Fe3O4  Hạt nano từ Fe3O4 phủ lớp phủ tương thích sinh học  Hạt nano từ Fe3O4 phủ lớp phủ tương thích sinh học gắn kết protein A 4.2 Phạm vi nghiên cứu: Phịng thí nghiệm Vật lý, Phịng Thí Nghiệm Hóa, Khoa Khoa học Cơ trường Đại học Trà Vinh Phịng thí nghiệm Vật lý, Khoa Khoa học Cơ Đại học Y Dược Thành phố Hồ Chí Minh 4.3 Phương pháp nghiên cứu kỹ thuật sử dụng Nghiên cứu lý thuyết thực nghiệm trình: Tổng hợp hạt nano từ tính Fe3O4 phương pháp đồng kết tủa Sử dụng kỹ thuật khuấy có đếm tốc độ, mơi trường khí N2, nhiệt độ 800C, lắng nam châm sấy chân không 400C Tạo lớp phủ lên bề mặt hạt từ phương pháp hóa học (sol – gel) Sử dụng kỹ thuật khuấy kết hợp rung siêu âm nhiệt độ 40 0C mơi trường khí N2 Gắn kết thực thể sinh học lên hạt từ thông qua chế hấp thụ vật lý, hấp phụ hóa học, tạo liên kết nhóm chức Sử dụng kỹ thuật rung siêu âm kết hợp khuấy Ủ 400C máy ủ có lắc nhẹ Phương pháp định lượng dùng để xác định tính chất đặc trưng vật liệu, sản phẩm (XRD, SEM, TEM, FTIR, VSM…) Xác định tỷ lệ gắn kết thực thể sinh học lên hạt từ phương pháp Bradford số phương pháp khác Sử dụng phương pháp ELISA (Enzyme - Linked ImmunoSorbent Assay), PCR (Polymerase Chain Reaction) để phát protein có mẫu cần phân tích TÀI LIỆU THAM KHẢO [1] Abid, J P., Wark, A W., Brevet, P F., & Girault, H H (2002) Preparation of silver nanoparticles in solution from a silver salt by laser irradiation Chemical Communications, (7), 792-793 [2] Andrade, Â L., Valente, M A., Ferreira, J M., & Fabris, J D (2012) Preparation of size-controlled nanoparticles of magnetite Journal of Magnetism and Magnetic Materials, 324(10), 1753-1757 [3] Babes, L., Denizot, B., Tanguy, G., Le Jeune, J J., & Jallet, P (1999) Synthesis of iron oxide nanoparticles used as MRI contrast agents: a parametric study Journal of colloid and interface science, 212(2), 474-482 [4] Bradford, M M (1976) A rapid and sensitive method for the quantitation of microgram quantities of protein utilizing the principle of protein-dye binding.Analytical biochemistry, 72(1-2), 248-254 [5] Bull, E., Madani, S Y., Sheth, R., Seifalian, A., Green, M., & Seifalian, A M (2014) Stem cell tracking using iron oxide nanoparticles International journal of nanomedicine, 9, 1641 [6] Can, K., Ozmen, M., & Ersoz, M (2009) Immobilization of albumin on aminosilane modified superparamagnetic magnetite nanoparticles and its characterization Colloids and Surfaces B: Biointerfaces, 71(1), 154-159 [7 ] Chi, Y., Yuan, Q., Li, Y., Tu, J., Zhao, L., Li, N., & Li, X (2012) Synthesis of Fe O 4@ SiO 2–Ag magnetic nanocomposite based on small-sized and highly dispersed silver nanoparticles for catalytic reduction of 4-nitrophenol.Journal of colloid and interface science, 383(1), 96-102 [8] Cleek, R L., Ting, K C., Eskin, S G., & Mikos, A G (1997) Microparticles of poly (DL-lactic-co-glycolic acid)/poly (ethylene glycol) blends for controlled drug delivery Journal of controlled release, 48(2), 259-268 [9 ] Cui, Q., Hou, Y., Hou, J., Pan, P., Li, L Y., Bai, G., & Luo, G (2012) Preparation of functionalized alkynyl magnetic microspheres for the selective enrichment of cell glycoproteins based on click chemistry Biomacromolecules,14(1), 124-131 [10 ] Faraji, M., Yamini, Y., & Rezaee, M (2010) Magnetic nanoparticles: synthesis, stabilization, functionalization, characterization, and applications Journal of the Iranian Chemical Society, 7(1), 1-37 44 [11] Franzel, L., Bertino, M F., Huba, Z J., & Carpenter, E E (2012) Synthesis of magnetic nanoparticles by pulsed laser ablation Applied Surface Science, 261, 332-336 [12] Girginova, P I., Daniel-da-Silva, A L., Lopes, C B., Figueira, P., Otero, M., Amaral, V S., & Trindade, T (2010) Silica coated magnetite particles for magnetic removal of Hg 2+ from water Journal of colloid and interface science,345(2), 234-240 [13] Gruttner, C., Muller, K., & Teller, J (2013) Comparison of strain-promoted alkyne-azide cycloaddition with established methods for conjugation of biomolecules to magnetic nanoparticles IEEE Transactions on Magnetics,49(1), 172-176 [14] Hai, T H., Phuc, L H., Vinh, L K., Long, B D., Kieu, T., Bich, N., & Tam, N (2011) Immobilising of anti-HPV18 and E coli O157: H7 antibodies on magnetic silica-coated Fe3O4 for early diagnosis of cervical cancer and diarrhoea International Journal of Nanotechnology, 8(3-5), 383-398 [15] Hou, Y., Han, X., Chen, J., Li, Z., Chen, X., & Gai, L (2013) Isolation of PCR-ready genomic DNA from Aspergillus niger cells with Fe O 4/SiO microspheres Separation and Purification Technology, 116, 101-106 [16] Hu, B., Pan, J., Yu, H L., Liu, J W., & Xu, J H (2009) Immobilization of Serratia marcescens lipase onto amino-functionalized magnetic nanoparticles for repeated use in enzymatic synthesis of Diltiazem intermediate Process Biochemistry, 44(9), 1019-1024 [17] Kango, S., Kalia, S., Celli, A., Njuguna, J., Habibi, Y., & Kumar, R (2013) Surface modification of inorganic nanoparticles for development of organic– inorganic nanocomposites—a review Progress in Polymer Science, 38(8), 12321261 [18] Khodashenas, B., & Ghorbani, H R (2015) Synthesis of silver nanoparticles with different shapes Arabian Journal of Chemistry [19] Kim, D., Jeong, S., & Moon, J (2006) Synthesis of silver nanoparticles using the polyol process and the influence of precursor injection Nanotechnology,17(16), 4019-4024 [20] Klotz, M., Ayral, A., Guizard, C., Ménager, C., & Cabuil, V (1999) Silica coating on colloidal maghemite particles Journal of colloid and interface science, 220(2), 357-361 45 [21] LaMer, V K., & Dinegar, R H (1950) Theory, production and mechanism of formation of monodispersed hydrosols Journal of the American Chemical Society, 72(11), 4847-4854 [22] Liu, X., Ma, Z., Xing, J., & Liu, H (2004) Preparation and characterization of amino–silane modified superparamagnetic silica nanospheres Journal of Magnetism and Magnetic Materials, 270(1), 1-6 [23] Mascolo, M C., Pei, Y., & Ring, T A (2013) Room temperature coprecipitation synthesis of magnetite nanoparticles in a large pH window with different bases Materials, 6(12), 5549-5567 [24] Massart, R (1981) Preparation of aqueous magnetic liquids in alkaline and acidic media IEEE transactions on magnetics, 17(2), 1247-1248 [25] Melzak, K A., Sherwood, C S., Turner, R F., & Haynes, C A (1996) Driving forces for DNA adsorption to silica in perchlorate solutions Journal of colloid and interface science, 181(2), 635-644 [26] Minko, S (2008) Grafting on solid surfaces:“Grafting to” and “grafting from” methods In Polymer surfaces and interfaces (pp 215-234) Springer Berlin Heidelberg [27 ] Pan, B., Gao, F., & Gu, H (2004) Synthesis and characterization of surfacehyperbranched magnetite nanoparticle for bovine serum albumin immobilization China Particuology, 2(6), 261-265 [28] Pankhurst, Q A., Connolly, J., Jones, S K., & Dobson, J J (2003) Applications of magnetic nanoparticles in biomedicine Journal of physics D: Applied physics, 36(13), R167 [29] Paul, R C., Narula, R C., & Vasisht, S K (1977) Some compounds of iron (III) with bidentate bases Transition Metal Chemistry, 2(1), 152-154 [30] Pimpha, N., Chaleawlert-umpon, S., Chruewkamlow, N., & Kasinrerk, W (2011) Preparation of anti-CD4 monoclonal antibody-conjugated magnetic poly (glycidyl methacrylate) particles and their application on CD4+ lymphocyte separation Talanta, 84(1), 89-97 [31] Cleek, R L., Ting, K C., Eskin, S G., & Mikos, A G (1997) Microparticles of poly (DL-lactic-co-glycolic acid)/poly (ethylene glycol) blends for controlled drug delivery Journal of controlled release, 48(2), 259-268 [32] Rudashevskaya, E L., Breitwieser, F P., Huber, M L., Colinge, J., Müller, A C., & Bennett, K L (2013) Multiple and sequential data acquisition method: An improved method for fragmentation and detection of cross-linked peptides on a 46 hybrid linear trap quadrupole Orbitrap Velos mass spectrometer Analytical chemistry, 85(3), 1454-1461 [33] Shao, D., Xia, A., Hu, J., Wang, C., & Yu, W (2008) Monodispersed magnetite/silica composite microspheres: preparation and application for plasmid DNA purification Colloids and Surfaces A: Physicochemical and Engineering Aspects, 322(1), 61-65 [34] Shen, Y F., Tang, J., Nie, Z H., Wang, Y D., Ren, Y., & Zuo, L (2009) Preparation and application of magnetic Fe O nanoparticles for wastewater purification Separation and Purification Technology, 68(3), 312-319 [35] Stöber, W., Fink, A., & Bohn, E (1968) Controlled growth of monodisperse silica spheres in the micron size range Journal of colloid and interface science, 26(1), 62-69 [36] Tartaj, P., Morales, M P., Veintemillas-Verdaguer, S., Gonzalez-Carreño, T., & Serna, C J (2006) Synthesis, properties and biomedical applications of magnetic nanoparticles Handbook of magnetic materials, 16(5), 403-482 [37] Turcheniuk, K., Tarasevych, A V., Kukhar, V P., Boukherroub, R., & Szunerits, S (2013) Recent advances in surface chemistry strategies for the fabrication of functional iron oxide based magnetic nanoparticles Nanoscale,5(22), 10729-10752 [38] Vayssieres, L., Chanéac, C., Tronc, E., & Jolivet, J P (1998) Size tailoring of magnetite particles formed by aqueous precipitation: An example of thermodynamic stability of nanometric oxide particles Journal of colloid and interface science, 205(2), 205-212 [39] Veiseh, O., Gunn, J W., & Zhang, M (2010) Design and fabrication of magnetic nanoparticles for targeted drug delivery and imaging Advanced drug delivery reviews, 62(3), 284-304 [40] Wang, B., Wei, Q., & Qu, S (2013) Synthesis and characterization of uniform and crystalline magnetite nanoparticles via oxidation-precipitation and modified co-precipitation methods Int J Electrochem Sci, 8, 3786-3793 [41] Xue, X., Wang, J., Mei, L., Wang, Z., Qi, K., & Yang, B (2013) Recognition and enrichment specificity of Fe O magnetic nanoparticles surface modified by chitosan and Staphylococcus aureus enterotoxins A antiserum Colloids and Surfaces B: Biointerfaces, 103, 107-113 [42] Zhao, J., Milanova, M., Warmoeskerken, M M., & Dutschk, V (2012) Surface modification of TiO nanoparticles with silane coupling agents Colloids and surfaces A: Physicochemical and engineering aspects, 413, 273-279 47 [43] Zhu, J., Liu, S., Palchik, O., Koltypin, Y., & Gedanken, A (2000) Shapecontrolled synthesis of silver nanoparticles by pulse sonoelectrochemical methods Langmuir, 16(16), 6396-6399 [44] Zou, J., Peng, Y G., & Tang, Y Y (2014) A facile bi-phase synthesis of Fe O 4@ SiO core–shell nanoparticles with tunable film thicknesses RSC Advances, 4(19), 9693-9700 Trên Internet: [44] http://www.gitam.edu/eresource/nano/nanotechnology/topdow [ 45 ] https://www.thermofisher.com [ 46 ] https://www.thermofisher.com 48 ... lớp phủ có khả thích nghi sinh học hút bám tốt protein A Các hạt nano oxit sắt từ gắn với protein A gắn với protein khác kháng thể, DNA, RNA, virut, vi khuẩn Khi hạt nano oxit sắt gắn kết với. .. Tổng hợp hạt nano từ tính 33 4.1.2 Các hạt nano Fe3O4 hạt nano bọc lớp tương thích 34 4.1.3 Các hạt nano Fe3O4, hạt nano bọc lớp tương thích gắn với linker 37 4.1.4 Gắn protein. .. tính để ứng dụng chẩn đốn bệnh tiêu ch? ?y cấp Ecoli O157:H7 ung thư cổ tử cung HPV18” (Hai, T H 2011) Nghiên cứu công nghệ chế tạo hạt nano vô ( hạt nano từ hạt nano vàng ) để sử dụng y học; nghiên