Luận văn Thạc sĩ Hoá học: Nghiên cứu thành phần hóa học cây Na rừng (Kadsura induta) họ Schisandraceae ở Sa pa – Lào Cai

Mục tiêu nghiên cứu của luận văn nhằm phân lập và xác định cấu trúc hoá học của các chất phân lập được trong thân cây Na rừng bằng các phương pháp vật lý, hoá học hiện đại. Mời các bạn cùng tham khảo!

ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN

TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM

LƯỜNG THỊ DUNG

NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HÓA HỌC CÂY NA RỪNG

(KADSURA INDUTA) HỌ SCHISANDRACEAE

Ở SAPA – LÀO CAI

LUẬN VĂN THẠC SỸ HOÁ HỌC

Thái Nguyên – 2013

ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN

TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM

LƯỜNG THỊ DUNG

NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HÓA HỌC CÂY NA RỪNG

(KADSURA INDUTA) HỌ SCHISANDRACEAE

Ở SAPA – LÀO CAI

Chuyên ngành: Hoá hữu cơ

Mã số: 60440114

LUẬN VĂN THẠC SỸ HOÁ HỌC

NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC:

TS Phạm Thị Hồng Minh

Thái Nguyên – 2013

LỜI CẢM ƠN

Bản luận văn này được hoàn thành tại phòng Hoạt chất Sinh học, Viện Hóa học - Viện Khoa học và Công nghệ Việt Nam

Tôi xin chân thành bày tỏ lòng cảm ơn sâu sắc của mình tới

TS Phạm Thị Hồng Minh, TS Nguyễn Quyết Tiến, cùng tập thể các anh

chị Phòng Hoạt chất Sinh học - Viện Hóa học và PGS.TS Phạm Văn Thỉnh những người thầy đã chỉ ra hướng nghiên cứu, hướng dẫn tận tình, động viên và giúp đỡ từng bước đi của tôi trong quá trình nghiên cứu thực hiện luận văn

Xin chân thành cảm ơn Phòng Hoạt chất Sinh học, Phòng Nghiên cứu Cấu trúc phân tử -Viện Hóa học đã nhiệt tình giúp đỡ và tạo mọi điều kiện thuận lợi để tôi hoàn thành các kế hoạch nghiên cứu

Nhân dịp này, tôi cũng xin trân trọng cảm ơn Ban Giám hiệu, Ban Lãnh đạo, các thầy cô trong Khoa Hóa, Khoa Sau đại học - Trường Đại học Sư phạm Thái Nguyên, Ban Giám hiệu Trường THPT Quỳnh Nhai- Quỳnh Nhai- Sơn La

đã tạo mọi điều kiện thuận lợi cho tôi hoàn thành bản luận văn này

Tôi xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới Bố, Mẹ tôi, những người thân trong gia đình và các đồng nghiệp đã giúp đỡ, động viên tôi rất nhiều trong quá trình thực hiện luận văn

Thái Nguyên, tháng 4 năm 2013

Tác giả

Lường Thị Dung

LỜI CAM ĐOAN

Tôi xin cam đoan đây là công trình nghiên cứu của riêng tôi, các số liệu, kết quả nêu trong luận văn này là trung thực và chưa từng được ai công bố trong bất kỳ công trình nào khác

Tác giả

Lường Thị Dung

MỤC LỤC

Trang Lời cam đoan

Lời cảm ơn

Mục lục i

Danh mục chữ viết tắt ii

Danh mục bảng biểu iii

Danh mục hình vẽ iv

Danh mục sơ đồ v

MỞ ĐẦU 1

NỘI DUNG 3

Chương 1 TỔNG QUAN CÁC THỰC VẬT CHI KADSURA VÀ THÀNH PHẦN HOÁ HỌC CỦA NÓ 3

1.1 Khái quát về các thực vật chi Kadsura 3

1.2 Những nghiên cứu hóa thực vật về chi kadsura 5

1.2.1 Các hợp chất sesquitecpenoit 5

1.2.2 Các hợp chất tritecpenoit khung lanostan 6

1.2.2.1 Các hợp chất lanostan 6

1.2.2.2 Các hợp chất secolanostan 8

1.2.3 Các hợp chất tritecpenlactone 9

1.2.4 Các hợp chất lignan 12

1.2.4.1 Hợp chất lignan 12

1.2.4.2 Các hợp chất cyclolignan 14

1.2.4.3 Các hợp chất oxocyclolignan 21

1.3 Những nghiên cứu hóa học loài Kadsura induta 23

1.3.1 Các hợp chất tritecpenoit 23

1.3.2 Các hợp chất lignan 24

1.3.3 Các hợp chất cyclolignan 25

1.4 Tình hình nghiên cứu và sử dụng thực vật Kadsura induta 27

1.4.1 Những nghiên cứu về cây Kadsura induta trong nước 27

1.4.2 Cây Kadsura induta 27

1.4.2.1 Đặc điểm thực vật học, phân bố 27

1.4.2.2 Đặc điểm sinh thái 28

1.4.3 Những ứng dụng của cây Kadsura induta trong y học cổ truyền Việt Nam28 Chương 2 PHẦN THỰC NGHIỆM 29

2.1 Đối tượng nghiên cứu 29

2.1.1 Thu mẫu cây, xác định tên khoa học và phương pháp xử lý mẫu 29

2.1.2 Phương pháp phân tích, phân lập các hợp chất từ dịch chiết 30

2.1.3 Phương pháp khảo sát cấu trúc hoá học các chất 30

2.2 Dụng cụ, hoá chất và thiết bị nghiên cứu 30

2.2.1 Dụng cụ, hoá chất 30

2.2.2 Thiết bị nghiên cứu 31

2.3 Thu nhận các dịch chiết từ cây Na rừng (kadsura induta) 31

2.3.1 Thu nhận các dịch chiết 31

2.3.2 Khảo sát định tính các dịch chiết 34

2.3.2.1 Phát hiện các hợp chất sterol 34

2.3.2.2 Phát hiện các ancaloit 34

2.3.2.3 Phát hiện các flavonoid 34

2.3.2.4 Phát hiện các cumarin 34

2.3.2.5 Định tính các glucosid tim 35

2.3.2.6 Định tính các saponin 35

2.4 Phân lập và tinh chế các chất 36

2.4.1 Cặn dịch chiết n-hexan của thân cây Kadsura induta (KlH) 36

2.4.1.1 Chất (KIH 14) 37

2.4.1.2 Axit schizandronic (KIH 78) 37

2.4.1.3 19-methylen,1,2,3,14-tetra

methoxy,6-benzoyl,9-propanoyl-15,16-2.4.1.4 Schizanrin F (KIH 245) 38

2.4.1.5 Hợp chất (KlH 345) 39

2.4.2 Cặn dịch chiết etylaxetat của thân cây Kadsura induta (KlE) 39

2.4.3 Cặn dịch chiết n-hexan của lá cây Kadsura induta (KIH) 40

2.4.3.1 Chất (KIH 5) 40

2.4.3.2 Chất (KIH 13) 40

Chương 3 THẢO LUẬN KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 41

3.1 Phát hiện các nhóm chất của cây Kadsura induta 41

3.2 Phân lập và nhận dạng các chất từ dịch chiết 41

3.2.1 Các chất steroit 41

3.2.2 Hợp chất tritecpenoit: axit schizandronic (KIH 78) 42

3.2.3 Hợp chất dibenzocyclooctadienlignan 51

3.2.3.1 Schizanrin F (TKIH245) 51

3.2.3.2 19-methylen,1,2 ,3,14-tetra methoxy,6-benzoyl,9-propanoyl-15,16-cyclolignan (TKIH 180) 60

3.2.4 Hợp chất flavonoit: Luteolin-7-O-β-D-glucopyranoside (TKIE46) 63

KẾT LUẬN 68

DANH MỤC CÔNG TRÌNH CÔNG BỐ 69

TÀI LIỆU THAM KHẢO 70

PHỤ LỤC .- 1-

DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT DÙNG TRONG LUẬN VĂN

 Các phương pháp sắc ký

CC : Column Chromatography SKLM : Sắc ký lớp mỏng

 Các phương pháp phổ

ESI-MS : Electrospray Ionization Mass Spectroscopy FT-IR : Fourier Transform Infrared Spectroscopy NMR : Nuclear Magnetic Resonance

1H-NMR : 1H-Nuclear Magnetic Resonance 13

C-NMR : 13C- Nuclear Magnetic Resonance DEPT : Distortionless Enhancement by Polarisation Transfer COSY : Correlated Spectroscopy

HMQC : Heteronuclear Multiple - Quantum Coherence HMBC : Heteronuclear multiple - Bond Correlation

DANH MỤC CÁC BẢNG

Trang

Bảng 1.1 Một số hợp chất phân lập được từ loài K ananosma 5

Bảng 1.2 Một số hợp chất tritecpen phân lập được từ loài Kadsura ananosma 6

Bảng 1.3 Một số hợp chất tritecpen phân lập từ những loài khác 7

Bảng 1.4 Một số hợp chất tritecpen phân lập được dạng seco 8

Bảng 1.5 Một số hợp chất tritecpen phân lập từ cây K heteroclita và K longipedunculata 9

Bảng 1.6 Một số hợp chất tritecpen lacton cầu epoxide tại vị trí C19 10

Bảng 1.7 Một số hợp chất tritecpen lacton khác phân lập từ cây K.longipedunculata 11

Bảng 1.8 Một vài hợp chất cyclolignan có nhóm thế OCH3 ở vị trí C-14 15

Bảng 1.9 Một vài hợp chất cyclolignan có nhóm thế hydroxy ở vị trí C-14 17

Bảng 1.10 Một vài hợp chất cyclolignan không đóng vòng tại C12-13 20

Bảng 1.11 Một vài hợp chất cyclolignan không đóng vòng tại C12-13, thế ở vị trí C-6 và C-9 21

Bảng 1.12 Một vài hợp chất oxocyclolignan phân lập được từ loài K.coccinea 22

Bảng 1.13 Hợp chất oxocyclolignan phân lập từ rễ cây K Longipedunculata 22

Bảng 1.14 Một vài hợp chất oxocyclolignan phân lập được từ cây K Longipedunculata 23

Bảng 2.1: Khối lượng các cặn chiết thu được từ thân cây Na rừng (Kadsura induta) 33

Bảng 2.2 : Khối lượng các cặn chiết thu được từ lá cây Na rừng (Kadsura induta) 33

Bảng 2.3 :Kết quả định tính các nhóm chất trong thân Na rừng (Kadsura induta) 36

DANH MỤC CÁC SƠ ĐỒ VÀ HÌNH

Trang

Sơ đồ 2.1: Sơ đồ ngâm chiết mẫu thân cây Na rừng (Kadsura induta) 32

Sơ đồ 2.2: Sơ đồ ngâm chiết mẫu lá cây Na rừng (Kadsura induta)… 32

Hình 2.1 Hoa và lá cây Na rừng (Kadsura induta) 29

Hình 3.1.1 Phổ IR của KIH 78 44

Hình 3.1.2 Phổ MS của KIH 78 45

Hình 3.1.3 Phổ 1H-NMR của KlH 78 46

Hình 3.1.4: Phổ 13C-NMR của KlH 78 47

Hình 3.1.5: Phổ DEPT của KlH 78 48

Hình 3.1.6: Phổ HMBC của KlH 78 49

Hình 3.1.7: Phổ HSQC của KlH 78 50

Hình 3.2.1 Phổ IR của KIH 245 53

Hình 3.2.2 Phổ MS của KIH 245 54

Hình 3.2.3 Phổ 1H-NMR của KIH 245 55

Hình 3.2.4 Phổ 13C-NMR của KIH 245 56

Hình 3.2.5 Phổ 13C-DEPT của KIH 245 57

Hình 3.2.6 Phổ HMBC của KIH 245 58

Hình 3.2.7 Phổ HSQC của 245 59

Hình 3.2.8 Phổ 1H-NMR của KIE 46 65

Hình 3.2.9 Phổ 13C-NMR của KIE 46 66

Hình 3.2.10 Phổ 13C-DEPT của KIE 46 67

MỞ ĐẦU

Việt Nam là quốc gia thuộc vùng khí hậu nhiệt đới nên được thừa hưởng nguồn thực vật thiên nhiên vô cùng phong phú và đa dạng sinh học với nhiều loại dược liệu quí Kết quả điều tra của viện Dược liệu đã cho biết nguồn tài nguyên thực vật Việt Nam có rất nhiều loài thực vật bậc cao, bậc thấp và nấm lớn được dùng làm thuốc Nhiều cây thuốc có giá trị sử dụng cao, có khả năng khai thác trong tự nhiên, nhiều loài thực vật khác đang được thị trường dược liệu quan tâm nằm trong danh mục cây thuốc và vị thuốc thiết yếu của Bộ

Y tế Hiện nay lĩnh vực hóa hợp chất thiên nhiên chủ yếu ứng dụng những kiến thức y học cổ truyền trong việc phát hiện các hoạt chất có giá trị Chính vì vậy, việc nghiên cứu về thành phần hóa học và hoạt tính sinh học các cây thuốc nhằm làm cơ sở khoa học cho việc sử dụng hợp lý, hiệu quả, tiêu chuẩn hóa cây thuốc cũng như hiện đại hóa bài thuốc cổ truyền mang tầm quan trọng Nhiều hợp chất thiên nhiên có hoạt tính sinh học phân lập được từ cây cỏ ứng dụng trong nhiều ngành công nghiệp và nông nghiệp, chúng được dùng để sản xuất thuốc chữa bệnh, thuốc bảo vệ thực vật, làm nguyên liệu cho ngành công nghiệp thực phẩm, mỹ phẩm Công nghệ tổng hợp hóa dược ngày nay đã phát triển mạnh mẽ tạo ra nhiều loại biệt dược khác nhau được sử dụng trong công việc phòng chống và chữa bệnh nhờ đó giảm tỷ lệ tử vong đi rất nhiều, song những đóng góp của các thảo dược không vì thế mà mất đi vị thế trong Y học Những kết quả nghiên cứu khoa học trong nhiều năm qua đã cho thấy các hợp chất thiên nhiên vẫn được coi là nguồn cấu trúc mới để tạo ra các dược phẩm mới, chúng vẫn được coi là nguồn nguyên liệu trực tiếp hay gián tiếp cung cấp những chất đi ban đầu, hay là một trong những định hướng cho công nghệ bán tổng hợp nhằm tìm kiếm những dược phẩm mới cho việc điều trị các chứng bệnh thông thường cũng như các bệnh nan y

Hiện nay chi Kadsura đang được nhiều nhà khoa học ở Trung Quốc và

một số nước châu Á quan tâm đến vì những tác dụng và lợi ích của chúng Tại

Việt Nam, một số loài thực vật thuộc chi Kadsura họ Schisandraceae được sử

dụng theo kinh nghiệm của nhân dân địa phương dùng để điều trị một số bệnh

về tiêu hóa, chống viêm nhiễm, làm thuốc bổ trị bệnh suy nhược, an thần, điều

tị bệnh phong thấp….Tuy nhiên những nghiên cứu về các loài thực vật thuộc chi này ở Việt Nam hầu như còn rất ít

Nhằm góp phần tìm hiểu về thành phần hóa học của thực vật thuộc chi

Kadsura ở Việt Nam, đề tài: “Nghiên cứu thành phần hóa học cây Na rừng

(Kadsura induta) họ Schisandraceae ở Sa pa – Lào Cai” nhằm xác định cấu trúc của một số hợp chất phân lập được từ cây Kadsura induta là nội dung

chính của luận văn

NỘI DUNG

Chương 1 TỔNG QUAN CÁC THỰC VẬT CHI KADSURA

VÀ THÀNH PHẦN HOÁ HỌC CỦA NÓ

1.1 Khái quát về các thực vật chi Kadsura

Các thực vật chi Kadsura thuộc họ Ngũ vị (Schisandraceae) trên thế giới

có khoảng 13 loài [53], gặp phổ biến ở các vùng ôn đới, nhiệt đới của Đông và Đông Nam Á cũng như Caribe

Theo Võ Văn Chi ở Việt Nam có 4 loài thực vật thuộc chi Kadsura [3]

Còn Phạm Hoàng Hộ đã nghiên cứu mô tả được 5 loài thuộc chi này [4] Theo những nghiên cứu gần đây nhất của nhà thực vật học Nguyễn Tiến Bân thì có

khoảng 6 loài thực vật thuộc chi Kadsura [1]

Mới đây các nhà thực vật học của viên sinh thái và tài nguyên sinh vật đã

phát hiện một loài Kadsura bổ sung thêm vào hệ thực vật ở Việt Nam là

Kadsura induta [5a], tuy nhiên giá trị sử dụng chưa được biết đến

Nhiều loài cây thuộc chi Kadsura được sử dụng trong y học dân gian

nhiều dân tộc, ở các nước Châu Á và Đông Nam Á Ở Trung Quốc đông y sử

dụng thân và rễ cây Na leo (Kadsura heteroclita) chữa phong thấp tê đau, viêm

loét dạ dày tá tràng cấp và mạn tính, phụ nữ đau bụng sau khi sinh nở Ngoài ra quả Na leo còn được dùng để chữa thận hư, đau lưng, ho, viêm họng, viêm phế quản, thần kinh suy nhược [1], [5], [20]

Hạt của loài Kadsura coccinea ở Trung Quốc là một vị thuốc dân gian

được dùng để điều trị bệnh viêm dạ dày, rối loạn tiêu hóa, tê thấp, viêm khớp Những nghiên cứu về hóa học của hạt đã cho biết trong đó có chứa kadsulignans A, B và các hợp chất ligan như: schisantherins L, M, N, O và acetylschisantherin L [10] Ngoài ra dịch chiết từ cây Kadsura coccinea được

dùng để điều trị ung thư, bệnh ngoài da và làm thuốc giảm đau [15], [19]

Ở phía nam Trung Quốc loài Kadsura interior là thực vật đặc hữu

được sử dụng trong y học cổ truyền để điều trị bệnh thiếu máu và rối loạn hooc mon nữ [8]

Ở phía nam nước Nhật, nhân dân sử dụng quả của loài Kadsura japonica

để chữa ho, và còn làm thuốc bổ [35]

Thân và rễ cây Kadsura longipedunculata ở Trung Quốc được người ta

sử dụng chữa phong thấp tê đau, viêm loét dạ dày tá tràng cấp và mạn tính, phụ

nữ đau bụng sau khi sinh nở Ngoài ra rễ và vỏ cây này còn dùng để chữa viêm loét dạ dày, tá tràng, bệnh thấp khớp, viêm khớp, chữa kinh nguyệt không đều

và rối loạn hoocmon nữ [25], [7]

Ở nước ta có một vài loài thuộc chi Kadsura dùng trong y học dân gian Cây nắm cơm hay Ngũ vị nam có tên khoa học Kadsura coccinea được nhân dân lấy

quả dùng làm thuốc an thần, gây ngủ Rễ chữa viêm ruột mãn tính, viêm dạ dày, ruột cấp tính và hành tá tràng, chữa phong thấp, tổn thương do ngã và chữa sản hậu, phần vỏ, thân, rễ dùng làm thuốc bổ, kích thích tiêu hóa, giảm đau [5]

Loài Kadsura roxburghiana với tên gọi Dây răng ngựa cũng thuộc chi

Kadsura được nhân dân sử dụng rễ và thân chữa cam sài trẻ em, kích thích tiêu

hóa, làm mạnh gân cốt, chữa động kinh, tê thấp Phần dây trị kiết lỵ, lá chữa mụn bắp chuối [5]

Cây ngũ vị nam có tên khoa học Kadsura longipedunculata được nhân

dân dùng làm thuốc bổ như: quả làm thuốc trị suy nhược và liệt dương, hạt được dùng thay vị Ngũ vị [4], [5]

Từ vỏ cây Kadsura induta người ta đã phân lập và xác định cấu trúc của

11 chất bao gồm 8 lignan và 3 tritecpenoit [51] Còn từ quả loài này đã phân lập và xác định cấu trúc của 10 chất chủ yếu là các hợp chất lignan Gần đây một số nhà khoa học nước ngoài công bố về kết quả nghiên cứu hoạt chất các

chất phân lập được từ loài Kadsura induta cho biết có tác dụng chống virus

Kadsura induta được chứng minh ở nồng độ 100µg/ml có tác dụng chống virus

viêm gan B invitro [51]

1.2 Những nghiên cứu hóa thực vật về chi kadsura

Cho đến nay đã có khoảng hầu hết các loài thực vật thuộc chi Kadsura

được nghiên cứu hoá thực vật [7], đã phân lập và nhận dạng được 233 chất, chủ yếu là các hợp chất tritecpenoit, lignan cùng với các dẫn xuất của lignan

1.2.1 Các hợp chất sesquitecpenoit

Một vài sesquitecpenoit tìm thấy trong thực vật chi Kadsura có kiểu khung eudesmen và guaiane

Sesquitecpenoit khung eudeusmen (1)

Hợp chất eudesmanetriol phân lập được từ loài K ananosma

R 1 R 2

Ký hiệu Nguồn

Tài liệu dẫn

C6H5COO Gluc 1.3 K ananosma [7]

Ngoài ra còn một vài sesquitecpen khác phân lập được từ loài K

Japonica như

(1.4) (1.5)

1.2.2 Các hợp chất tritecpenoit khung lanostan

1.2.2.1 Các hợp chất lanostan

Trong số các chất đã phân lập được từ 13 loài thuộc chi Kadsura thì có 21 hợp

chất tritecpen phân lập chủ yếu từ 2 loài Kadsura heteroclita và Kadsura ananosma

R 1

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10

13 14 15 16 17 18

19

20

23 24 25 26 27

30

R2

(2) Bảng 1.2 Một số hợp chất tritecpen phân lập được

từ loài Kadsura ananosma

Vị trí nhóm thế Tên chất

R 1 R 2

Ký hiệu Nguồn

Tài liệu dẫn

R 1

O OH 1

2 3 4 5 6 7 8

9 10

11 12

13 14 15 16 17 18

19

20 23 25

26 27

Ký

Tài liệu dẫn

S sphenanthera

K ananosma K.longipedunculata

[7], [24]

3-hydroxylanosta-9(11),24Z-dien-26-oic axit OH H

[49] 12-hydroxy-3-oxolanosta-

8,24-dien-26-oic axit O OH 2.9 K heteroclita [7] 12-axetoxy-3-oxolanosta-

8,24-dien-26-oic axit O OCOCH3 2.10 K heteroclita

[7], [49] 12-hydroxy-3-oxolanosta-

9(11),24-dien-26-oic axit O OH 2.11 K heteroclita

[7], [49] 12-axetoxy-3-oxolanosta-

9(11),24-dien-26-oic axit O OCOCH3 2.12 K heteroclita [49]

1.2.2.2 Các hợp chất secolanostan

O

R2

1 2 3

4 5 6 7 8

9 10

11 12

13 14 15 16 17 18

19

20 21

Ký

Tài liệu dẫn

1 2 3

4 5 6 7 8

9 10

11 12

13 14 15 16

17 18

O O

O O

10 19

6

(3.3)

Polysperlactone A (6,7-didehydro)

O O

10 19

Bảng 1.7 Một số hợp chất tritecpen lacton khác phân lập từ cây

K.longipedunculata [23]

Vị trí nhóm thế Tên chất

Một số hợp chất tritecpenlacton phân lập được từ loài K

longipedunculata với các nhóm thế khác nhau ở vị trí C16 [7], [21]

Từ loài K.coccinea cũng phân lập được một số triterpenlactone [34]:

O

OH

O

O HO

O

O

CH O

HO O

O

O O

HO

O O

O HO

O

O O

OGluc

4',7-Dihydroxy-3'-methoxy-3,4-methylenedioxy-9,9'-epoxylignan

glucopyranoside -3,4-methylenedioxy-9,9'-epoxylignan

O

O

O O OH

(4.4)

Kadsuralignan H Các hợp chất cyclolignan rất đa dạng được phân thành từng nhóm như các hợp chất nhóm thế ở vị trí C-14 là nhóm thế OCH3, hydroxy (OH) , hay vị trí C-12 và C-13 có cầu peoxide (-O-CH2-O-)

Dưới đây là đại diện một số hợp chất cyclolignan có vị trí nhóm thế ở

C-14 là nhóm -OCH3

(5) Bảng 1.8 Một vài hợp chất cyclolignan có nhóm thế OCH 3 ở vị trí C-14

Vị trí nhóm thế Tên chất

Ký

Tài liệu dẫn

Kadsuphilin A

(7-O-E-cinnamoyl) CH3 CH3 CH3 5.12 K phillipines [7]

Một số hợp chất cyclolignan có nhóm thế ở vị trí C-14 là OH

Bảng 1.9 Một vài hợp chất cyclolignan có nhóm thế hydroxy ở vị trí C-14

Vị trí nhóm thế Tên chất

Schizanrin B

(7-O-(2-methylbutanoyl)) CH3 CH3 CH3 5.14 K matsudai

[7], [31]

Schizanrin C

(7-hexanoyl) CH3 CH3 CH3 C5H11COO 5.15 K matsudai

[7], [31]

Schizanrin D (7-tigloyl) CH3 CH3 CH3 5.16 K matsudai [7],

[31]

Schizanrin E

[7], [31]

Schizanrin N CH3 CH3 CH3 O 5.18 K japonica [7]

K

longipedunculata

[36] [23] Benzoyl-binankadsurin

O

longipedunculata

[36] [23] Longipedunin A H CH3 CH3

O

longipedunculata

[36] [23]

Longipedunin B H CH3 CH3 C2H5COO 5.25 K

longipedunculata

[36] [23]

longipedunculata

[36] [23]

Heteroclitin C

longipedunculata

[36] [23]

7 8 9 10

11 12 13 14 15 16 1

2 3

Một vài lignan phân lập từ loài Kadsura interrior, Schisandra propinqua

có hoạt tính anti virus và anti-HIV như interiotherin A-D [8], [9], [39]

O

H3CO

H 3 CO

O O

H O

O O

Interiorin

O

O O

O O

H O

OCH3O

H3C

CH3C H

O

Một số hợp chất cyclolignan không đóng vòng tại vị trí C12-13

Bảng 1.10 Một vài hợp chất cyclolignan không đóng vòng tại C12-13

Vị trí nhóm thế Tên chất

Ký

Tài liệu dẫn

9 10

11 12

13 14

15 16

17 18

R3

Bảng 1.11 Một vài hợp chất cyclolignan không đóng vòng tại C12-13,

thế ở vị trí C-6 và C-9 [7]

Vị trí nhóm thế Tên chất

Ký hiệu Nguồn

(6)

Bảng 1.12 Một vài hợp chất oxocyclolignan phân lập được từ loài K.coccinea

Vị trí nhóm thế Tên chất

R

Ký hiệu Nguồn Tài liệu dẫn

7 8

9 10

11 12

13 14

15 16

17 18 19

OR2OH O

Bảng 1.13 Hợp chất oxocyclolignan phân lập từ rễ cây

O

H3C

CH3H

O

7 8

9 10

11 12

13 14

15 16

17 18 19

OR2OH

O

H3C

CH3H

O

6.8

1.3 Những nghiên cứu hóa học loài Kadsura induta

Các nhà khoa học Trung Quốc nghiên cứu vỏ cây, thân, quả cho biết các chất phân lập được chủ yếu là các tritecpenoit, lignan cùng với các dẫn xuất lignan [50], [51]

1.3.1 Các hợp chất tritecpenoit

Từ cây K induta người ta đã phân lập được một số tritecpenoit như:

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10

11

12 13 14 15 16 17 18

19

26 27

11 12 13 14 15 16 17 18

19

20

23 24 25 26 27

30

HO

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10

13 14 15 16 17 18

30

O

O

MeO

O O

OMe

HO

OCH 3

OH 3

1 2 3 4

5' 6' 7'

8' 9'

O O

H3CO

H3CO OH

O O

O O

O O

H3CO

O O

O O

1

2

3 4

5

6 7

8 9

1'

2' 3'

4' 5' 6'

7' 8'

Kadsurindutin H

5,8-epoxy-6,7-dimethylenedioxy-1,3-cyclooctadiene [12]

OH

O O

O O

H 3 CO

H 3 CO

O O

OH

O O

O O

H3CO

H3CO

OH

O O

O O

1.4 Tình hình nghiên cứu và sử dụng thực vật Kadsura induta

Ở mục 1.2 đề cập đến những nghiên cứu hoá thực vật của chi Kadsura đã chỉ

ra thành phần hóa học bao gồm các tritecpenoit, lignan và dibenzocyclooctadienlignan với cấu trúc rất phong phú và đa dạng [15], [45]

Các nhà khoa học Trung quốc đã phân lập và xác định được cấu trúc của

11 hợp chất từ thân cây K.induta trong đó có 08 lignan và 03 tritecpenoit Từ quả loài K.induta người ta cũng đã phân lập và nhận dạng được cấu trúc của 10

hợp chất Trong đó kadsulignan L và neokadsuranin có hoạt tính chống lại

virus viêm gan B in vitro với hiệu quả ức chế lần lượt ở khoảng 36,5% và

32,6% tại nồng độ 100g/ml, còn kadsurindutin A cũng chỉ ra kết quả có tác dụng ức chế virus viêm gan B với hiệu quả ức chế khoảng 35,4% tại nồng độ 200g/ml hơi cao hơn so với chất chuẩn lamivudin [51]

1.4.1 Những nghiên cứu về cây Kadsura induta trong nước

Cây Na rừng (Kadsura induta ) là loài thực vật có ở Việt Nam, nhân dân

hay dùng thân, rễ cây này để chữa một số bệnh

Cho đến nay ở Việt Nam chưa có tài liệu nghiên cứu nào công bố về thành phần hóa học của cây này

1.4.2 Cây Kadsura induta

1.4.2.1 Đặc điểm thực vật học, phân bố

Cây Ngũ vị nam có tên khoa học là Kadsura induta thuộc họ Ngũ vị

Schisandraceae Ngoài ra cây còn tên khác theo địa phương là cây Na rừng, nắm cơm, Ngũ vị tử nam [3]

Cây mọc ở rải rác ở các ven rừng, dựa suối, ở độ cao khoảng 700-1500m

ở một số tỉnh phía bắc nước ta

Cây được phân bố ở các vùng Lạng Sơn, Sa pa – Lào Cai Trên thế giới cây này chỉ có ở phía Nam Trung Quốc [5]

1.4.2.2 Đặc điểm sinh thái

1 Dạng cây: Là loại cây dây trườn nhánh thòng, không lông

2 Lá: Lá đơn, mọc so le, dài 7-11cm, rộng 2,5-5,5cm, đầu nhọn, mép có răng

thưa, cứng, dai, mặt trên màu lục xám, mặt dưới màu trắng sáng, có chấm vàng

3 Hoa:Hoa đơn tính, mọc ở nách lá; cuống hoa dài Bao hoa 8-17 bản

hình chuỳ tròn, màu trắng và vàng nhạt Trong hoa đực, nhị họp lại thành hình cầu; trong hoa cái, các lá noãn rời dính trên một trục hoa ngắn thành hình đầu

4 Quả: Quả kép hình cầu tròn gồm nhiều quả thịt nom giống quả Na, khi

chín màu vàng phớt hồng

1.4.3 Những ứng dụng của cây Kadsura induta trong y học cổ truyền Việt Nam

Cây Na rừng, Dây nắm cơm hay còn gọi là ngũ vị tử nam, có tên khoa

học (Kadsura induta) được sử dụng làm thuốc bổ, trị suy nhược và liệt dương

Phần rễ cây dùng trị bệnh viêm ruột, viêm loét dạ dày và hành tá tràng, phong thấp, đòn ngã xưng đau Dây lá và quả còn dùng làm thuốc hoạt huyết, tiêu thũng [3]

Chương 2 PHẦN THỰC NGHIỆM

Cây Na rừng, hay cây Nắm cơm thuộc họ Ngũ vị , có tên khoa học Kadsura

induta họ Schisandraceae là loài mới được phát hiện thấy ở phía Bắc Việt Nam

nên chưa có tài liệu nào đề cập về tác dụng của loại này

Nhiệm vụ của luận văn là phân lập và xác định cấu trúc hoá học của các chất phân lập được trong thân cây Na rừng bằng các phương pháp vật lý, hoá học hiện đại

2.1 Đối tượng nghiên cứu

2.1.1 Thu mẫu cây, xác định tên khoa học và phương pháp xử lý mẫu

Hình 2.1 Hoa và lá cây Na rừng (Kadsura induta)

Nguyên liệu để nghiên cứu là thân Na rừng Mẫu tươi được thu hái vào tháng 8/2012 ở Sa Pa – Lào Cai được rửa sạch

Mẫu cây đem nghiên cứu được ThS Bùi Văn Thanh Viện Sinh thái và Tài nguyên Sinh vật, Viện Khoa học và Công nghệ Việt Nam giám định tên

khoa học là Kadsura induta thuộc họ Ngũ vị (Schisandraceae)

Bộ phận mẫu được thái nhỏ sau đó hong khô ở nơi thoáng mát hoặc sấy

ở nhiệt độ 500C - 600C tới khi khô giòn Mẫu khô đem nghiền nhỏ, cho vào bình ngâm chiết với metanol ở nhiệt độ phòng cho đến khi nhạt màu

Sau khi cất loại dung môi dưới áp suất giảm, cặn chiết thu được đem chiết lần lượt bằng dung môi có độ phân cực tăng dần (n-hexan, điclometan, etyl axetat, metanol)

Việc phân lập các chất ra khỏi hỗn hợp của chúng được kết hợp những phương pháp khác nhau: dùng dung môi có độ phân cực tăng dần để phân ly các chất có độ phân cực gần như nhau làm cho hỗn hợp ban đầu đơn giản hơn, sau đó dùng cách kết tinh phân đoạn hoặc tách trên sắc ký cột lặp lại nhiều lần

v.v để được chất tinh khiết

2.1.2 Phương pháp phân tích, phân lập các hợp chất từ dịch chiết

Để phân tích và phân tách hỗn hợp các chất cũng như phân lập các hợp chất cần sử dụng phối hợp các phương pháp sắc ký như:

- Sắc ký lớp mỏng (SKLM)

- Sắc ký cột thường

2.1.3 Phương pháp khảo sát cấu trúc hoá học các chất

Các chất phân lập được ở dạng tinh khiết là đối tượng để khảo sát các đặc trưng vật lý: màu sắc, dạng thù hình, Rf, điểm nóng chảy, đo hoạt tính quang học v.v khi các chất đủ sạch sẽ tiến hành ghi các phổ hồng ngoại (FT-IR), phổ cộng hưởng từ hạt nhân proton (1H-NMR), cacbon-13 (13C-NMR), HSQC, HMBC, DEPT với các kỹ thuật một chiều (1D-NMR) và hai chiều (2D-NMR) tuỳ theo chất cụ thể

2.2 Dụng cụ, hoá chất và thiết bị nghiên cứu