Luận văn thạc sĩ nghiên cứu đặc điểm sinh học của nấm đông trùng hạ thảo tuyết (isaria tenuipes) phân bố ở việt nam

i LỜI CẢM ƠN Để hồn thành chương trình đào tạo cao học trường Đại học Lâm nghiệp, nhằm vận dụng kiến thức học vào thực tiễn, làm quen với công tác nghiên cứu khoa học khả tổng hợp phân tích vấn đề, tác giả tiến hành thực Luận văn tốt nghiệp cao học Trong q trình thực hồn thiện luận văn, tác giả nhận nhiều quan tâm, giúp đỡ đóng góp cán Phịng nghiên cứu Bảo vệ Thực vật rừng – Viện Khoa học Lâm nghiệp Việt Nam, Khoa đào tạo sau Đại học - Trường Đại học Lâm nghiệp, từ gia đình bạn bè đồng nghiệp Tác giả xin chân thành cảm ơn ủng hộ, giúp đỡ Đặc biệt tác giả muốn gửi lời cảm ơn sâu sắc tới PGS TS Phạm Quang Thu, người thầy trực tiếp hướng dẫn khoa học tận tình quan tâm, tạo điều kiện thuận lợi truyền đạt kiến thức quý báu suốt q trình thực Luận văn hồn thiện sở tham khảo nhiều tài liệu có liên quan ý kiến đóng góp nhiều nhà chun mơn nỗ lực tác giả Tuy nhiên khả năng, điều kiện thời gian hạn chế, chủ đề nghiên cứu hoàn toàn nên luận văn khơng tránh khỏi thiếu sót Tác giả mong nhận ý kiến đóng góp, xây dựng nhà khoa học bạn bè đồng nghiệp để Luận văn hoàn thiện Xin chân thành cảm ơn! Hà Nội, tháng năm 2013 Tác giả ii MỤC LỤC Trang Trang phụ bìa Lời cảm ơn i Mục lục ii Danh mục bảng .iv Danh mục hình v ĐẶT VẤN ĐỀ Chương TỔNG QUAN VẤN ĐỀ NGHIÊN CỨU 1.1 Nghiên cứu nước 1.1.1 Nghiên cứu phân loại nhóm nấm Đơng trùng hạ thảo nấm Đông trùng hạ thảo tuyết (Isaria tenuipes) .2 1.1.2 Nghiên cứu thành phần hóa học I tenuipes 1.1.3 Nghiên cứu giá trị dược liệu nấm Đông trùng hạ thảo .4 1.1.4 Nghiên cứu nuôi trồng thể giá thể nuôi cấy sinh khối hệ sợi 1.2 Nghiên cứu nước 1.2.1 Nghiên cứu thành phần lồi lồi nấm ký sinh trùng nấm đông trùng hạ thảo 1.2.2 Nghiên cứu giá trị dược liệu .8 1.2.3 Nghiên cứu nuôi trồng thể giá thể nuôi cấy sinh khối hệ sợi Chương MỤC TIÊU - ĐỐI TƯỢNG - NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 11 2.1 Mục tiêu nghiên cứu 11 2.2 Đối tượng nghiên cứu 11 2.3 Nội dung nghiên cứu 11 2.3.1 Phân lập chủng nấm Isaria tenuipes Việt Nam 11 2.3.2 Đặc điểm sinh học hệ sợi nuôi cấy khiết 11 2.3.3 Nghiên cứu hoạt tính chủng nấm 11 iii 2.3.4 Nghiên cứu khả hình thành thể giá thể nhân tạo 11 2.4 Phương pháp nghiên cứu 12 2.4.1 Phương pháp phân lập 12 2.4.2 Đặc điểm sinh học hệ sợi nuôi cấy khiết 12 2.4.3 Phương pháp nghiên cứu hoạt tính kháng khuẩn, kháng nấm bênḥ chủng nấm Isaria tenuipes 14 2.4.4 Phương pháp nghiên cứu khảnăng hiǹ h thành thểquảtrên giáthể nhân taọ 15 Chương KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 16 3.1 Nghiên cứu đặc điểm hiǹ h thái, giải phẫu vàđặc điểm sinh trưởng chủng nấm Isaria tenuipes 16 3.1.1 Kết quảđiều tra, phân lâpp̣ vànghiên cứu đăcp̣ điểm sinh trưởng chủng nấm Isaria tenuipes taị vườn Quốc gia Ba Vi.̀ 16 3.1.2 Nghiên cứu đặc điểm hình thái, giải phẫu nấm Isaria tenuipes 19 3.2 Nghiên cứu đặc điểm sinh học hệ sợi nấm điều kiện nuôi cấy khiết .20 3.2.1 Nghiên cứu xác định môi trường dinh dưỡng tối ưu cho nhân sinh khối hệ sợi .20 3.2.2 Nghiên cứu xác định nhiêt độ không khí tối ưu cho q trình nhân sinh khối hệ sợi .25 3.2.3 Nghiên cứu ảnh hưởng pH môi trường đến sinh trưởng hệ sợi 29 3.3 Phương pháp nghiên cứu hoạt tính kháng khuẩn, kháng nấm bênḥ chủng nấm Isaria tenuipes 33 3.3.1 Bước đầu đánh giá hoạt tính kháng khuẩn nấm Isaria tenuipes 33 3.3.2 Bước đầu đánh giá hoạt tính kháng nấm nấm Isaria tenuipes 36 3.4 Nghiên cứu đánh giá khả hình thành thể giáthểnhân taọ .40 3.4.1 Nghiên cứu đánh giá khả hình thành thể giá thểlỏng 40 3.4.2 Nghiên cứu nuôi trồng thể nấm Isaria tenuipes nhộng tằm 50 KẾT LUẬN - TỒN TẠI - KIẾN NGHỊ 54 TÀI LIỆU THAM KHẢO iv DANH MỤC CÁC BẢNG TT 1.1 1.2 1.3 3.1 3.2 3.3 Thành phần sinh hoá nguyên tenuipes Thành phần acid amin nấ tenuipes Thành phần tenuipes Đặc điểm kết phân lập c Kết xác định môi trường di sợi nấm Isaria tenuipes Xác định nhiệt độ không khítối ưu nấm Sinh trương cua nấm I tenuipes 3.4 3.5 3.6 3.7 3.8 3.9 ̉̉ Đường kính vịng ức chế khu tenuipes Đường kính vịng ức chế nấm F tenuipes Xác định môi trường dinh dưỡn nấm Isaria tenuipes Kết xác định nhiệt độ không k thể Kết xác định nhiệt độ không k thể 3.10 Kết nghiên cứu khả h Isaria tenuipes giá thể nhộ v DANH MỤC CÁC HÌNH TT 3.1 Hệ sợi nấm BV2 3.2 Hệ sợi nấm BV4 3.3 Hệ sợi nấm BV5 3.4 Hệ sợi nấm BV6 3.5 Hệ sợi nấm BV11 3.6 Hệ sợi nấm BV16 3.7 Hệ sợi nấm BV17 3.8 Thể nấm 3.9 Bào tử vơ tính Sinh trương 3.10 3.11 ̉̉ Sư ̣khac vềđô ̣dầy ̉́ Trọng lương ̣ tươi ̣sơị cac m 3.12 Trong ̣ lương ̣ khô ̣sơị cac m 3.13 3.14 Sinh trương cua nấm thang nh ̉̉ 3.15 Trong ̣ lương ̣ tươi hệ sơi cac n 3.16 Trong ̣ lương ̣ khô hệ sợi cac n 3.17 3.18 Hê s ̣ ơị nấm nuôi cấy môi tr Hê s ̣ ơị nấm nuôi cấy môi tr 3.19 Trọng lượng tươi hệ sợi ởpH m 3.20 Trọng lượng khơ hệ sợi ởpH mơ 3.21 Đường kính vịng ức chế khu tenuipes vi 3.22 3.23 3.24 Khả kháng khuẩn Bacillus tenuipes Khả kháng khuẩn nấm chứng Đường kính vịng ức chế nấm F tenuipes 3.25 Khả kháng nấm nấm I 3.26 Thểquảnấm ởCT2,CT4 3.27 Thểquảnấm ởCT5 Trong ̣ lương ̣ 3.28 khac ̉́ Trong ̣ lương ̣ khô thể cac 3.29 3.30 Thể nấm thang nhiệt Trong ̣ lương ̣ 3.31 Trong ̣ lương ̣ 3.32 3.33 Thể nấm I tenuipes cá 3.34 Trọng lượng khô thể ởpH m 3.35 Trọng lượng khô thể ởpH m 3.36 Hê s ̣ ơị nấm I tenuipes 3.37 Thểquảnấm I tenuipes 3.38 Thể nấm sau 20 ngày 3.39 Thể nấm sau 30 ngày 3.40 Thể nấm sau 35 ngày 3.41 Thu hoạch thể nấm Phụ biểu 36: Tests of Between-Subjects Effects Dependent Variable: Trọng lượng tươi Source Corrected Model Intercept k CT t CT * t Error Total Corrected Total Phụ biểu 37: Duncana Phụ biểu 38: Tests of Between-Subjects Effects Dependent Variable: Trọng lượng khô Source Corrected Model Intercept k CT t CT * t Error Total Corrected Total Phụ biểu 39: Duncana V Ảnh hưởng pH tới sinh trưởng thể nấm Isaria tenuipes Phụ biểu 40: Tests of Between-Subjects Effects Dependent Variable: Thời gian Source Corrected Model Intercept k CT pH CT * pH Error Total Corrected Total Phụ biểu 41: p Duncana S Phụ biểu 42: Tests of Between-Subjects Effects Dependent Variable:Số lượng Source Corrected Model Intercept k CT pH CT * pH Error Total Corrected Total Phụ biểu 43: pH a Duncan Sig Phụ biểu 44: Tests of Between-Subjects Effects Dependent Variable: Chiều dài Source Corrected Model Intercept k CT pH CT * pH Error Total Corrected Total Phụ biểu 45: pH Duncan a Sig Phụ biểu 46: Dependent Variable: Trọng lượng tươi Source Corrected Model Intercept k CT pH CT * pH Error Total Corrected Total Phụ biểu 47: pH Duncana Sig Phụ biểu 48: Tests of Between-Subjects Effects Dependent Variable: Trọng lượng khô Source Corrected Model Intercept k CT pH CT * pH Error Total Corrected Total Phụ biểu 49: Phân cấp trọng lượng khô pH Duncana Sig ... nấm đông trùng hạ thảo I tenuipes TT Bảng 1.3: Thành phần vitamin nấm Đông trùng hạ thảo I tenuipes STT 1.1.3 Nghiên cứu giá trị dược liệu nấm Đông trùng hạ thảo Nấm Đông trùng hạ thảo loại nấm. .. ĐỀ NGHIÊN CỨU 1.1 Nghiên cứu nước 1.1.1 Nghiên cứu phân loại nhóm nấm Đơng trùng hạ thảo nấm Đông trùng hạ thảo tuyết (Isaria tenuipes) .2 1.1.2 Nghiên cứu thành phần hóa học. .. tục nghiên cứu quy trình ni trồng nhân tạo loại nấm thần dược 2 Chương TỔNG QUAN VẤN ĐỀ NGHIÊN CỨU 1.1 Nghiên cứu nước 1.1.1 Nghiên cứu phân loại nhóm nấm Đơng trùng hạ thảo nấm Đông trùng hạ thảo