Nghiên cứu pheromone giới tính của sâu đục trái bưởi citripestis sagittiferella moorexác định cấu trúc hoá học, tổng hợp và đánh giá hiệu quả ngoài đồng TT

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ TÓM TẮT LUẬN ÁN CHUYÊN NGÀNH BẢO VỆ THỰC VẬT Mã ngành: 62 62 01 12 TRẦN TRỌNG DŨNG NGHIÊN CỨU PHEROMONE GIỚI TÍNH CỦA SÂU ĐỤC TRÁI BƯỞI CITRIPESTRIS SAGITTIFERELLA MOORE (LEPIDOPTERA: PYRALIDAE) XÁC ĐỊNH CẤU TRÚC HOÁ HỌC, TỔNG HỢP VÀ ĐÁNH GIÁ HIỆU QUẢ NGOÀI ĐỒNG CẦN THƠ, 2021 LUẬN ÁN ĐƯỢC THỰC HIỆN TẠI TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ Người hướng dẫn: PGs Ts Trần Vũ Phến Luận án bảo vệ Hội Đồng Đánh Giá Luấn Án Trường Đại học Cần Thơ ……………………… vào ngày ………./…………/2021 Luận án tham khảo tại: Thư viện Quốc gia Việt Nam Trung tâm Học liệu – Đại Học Cần Thơ DANH MỤC NHỮNG BÀI BÁO ĐÃ CÔNG BỐ Trần Trọng Dũng, Phạm Văn Sol, Châu Nguyễn Quốc Khánh, Trần Vũ Phến Lê Văn Vàng, 2017.Tình hình gây hại, đặc điểm hình thái sinh học sâu đục trái Citripestis sagittiferella gây hại bưởi Đồng sông Cửu long Tạp chí Khoa học Trường Đại học Cần Thơ Số tạp chí ISSN: 1859-2333 Số chun đề: Nơng nghiệp (Tập 52): 64-69 Tran Trong Dung, Duong Kieu Hanh, Le Van Vang, 2018 Selective synthesis of (9Z,11E)-9,11-tetradecadienyl acetate compound, a sex pheromone component of the citrus fruit borer, Citripestis sagittiferella Moore (Lepidoptera: Pyralidae), damaging pomelo fruits in the Mekong Delta of Vietnam International Journal of Emerging Technology and Advanced Engineering Website: www.ijetae.com Số tạp chí: E-ISSN 2250–2459, ISO 9001:2008 Certified Journal, 8(12):1-4 Tran Trong Dung, Duong Kieu Hanh, Le Van Vang, 2019 Synthesis of (E)- and (Z)-11-tetradecenyl acetates, two sex pheromone components of the citrus fruit borer (Citripestis sagittiferella Moore), damaging pomelo fruits in the Mekong Delta of Vietnam International Journal of Emerging Technology and Advanced Engineering Website: www.ijetae.com Số tạp chí E-ISSN 2250–2459, ISO 9001:2008 Certified Journal, 9(1):1-4 Trần Trọng Dũng, Phạm Văn Sol, Dương Kiều Hạnh, Châu Nguyễn Quốc Khánh Lê Văn Vàng, 2019 Hiệu tinh dầu sả dầu tỏi làm giảm gây hại sâu đục có múi Citripestis sagittiferella (Lepidoptera: Pyralidae) Effectiveness of Lemon Grass Essential and Garlic oil in Reducing the Damage of The Citrus Fruit Borer Citripestis sagittiferella (Lepidoptera: Pyralidae) Tạp chí Bảo vệ thực vật Số tạp chí: ISSN 235400719: (282): 17-23 Tran Trong Dung, Duong Kieu Hanh, Trieu Phuong Linh, Dinh Thi Chi, Tran Thanh Thy, Le Van Vang, Tran Vu Phen, 2021 Preliminary Identification of The Sex Pheromones of Citrus Furit Borer (Citripestis sigittifererlla Moore) Inhabiting the Mekong Delta of Vietnam International Journal of Plant, Animal and Environmental Science ISSN: 2231 – 4490, 11(1): 194-205 Chương 1: GIỚI THIỆU 1.1 Tính cấp thiết luận án Cây có múi trồng từ lâu đời, có phân bố rộng khắp từ Bắc đến Nam mang lại hiệu kinh tế cao so với nhiều loại trồng khác Tuy nhiên, gần việc canh tác số loại có múi, đặc biệt bưởi gặp số khó khăn xuất số loại dịch hại Sâu đục trái bưởi (Citripestis sagittiferella) xem loài dịch hại nguy hiểm làm giảm suất giá trị thương phẩm bưởi Bên cạnh đó, việc phịng trừ (chủ yếu phun thuốc hóa học) gặp số khó khăn dư lượng thuốc bảo vệ thực vật cao trái Ngồi ra, đặc tính sâu đục trái công vào bên trái nên hiệu phun thuốc nhìn chung khơng cao thuốc khó tiếp xúc với ấu trùng Hiện nay, hướng nghiên cứu ứng dụng sinh học phòng trừ quan tâm; đó, việc ứng dụng pheromone giới tính chất quấy rối khác tỏ tiềm việc phịng trừ sâu đục trái bưởi Vì vậy, đề tài “Nghiên cứu pheromone giới tính sâu đục trái bưởi Citripestis sagittiferella Moore (Lepidoptera: Pyralidae) xác định cấu trúc hoá học tổng hợp đánh giá hiệu ngồi đồng” tiến hành nhằm khảo sát tình hình gây hại, đặc điểm hình thái, sinh học, ứng dụng pheromone giới tính chất quấy rối việc phòng trừ sâu đục trái bưởi 1.2 Mục tiêu nghiên cứu 1.2.1 Mục tiêu tổng quát Nghiên cứu tình hình gây hại, đặc điểm sinh học ứng dụng hóa chất tín hiệu nhằm góp phần thay thuốc bảo vệ thực vật để quản lý ngài sâu đục trái bưởi Citripestis sagitiferella ĐBSCL 1.2.2 Mục tiêu cụ thể - Xác định tình hình gây hại đặc điểm sinh học Citripestis sagitiferella ĐBSCL - Xác định cấu trúc hóa học tổng hợp thành phần pheromone giới tính sâu đục trái bưởi Citripestis sagitiferella - Đánh giá hiệu hấp dẫn pheromone giới tính Citripestis sagitiferella - Đánh giá hiệu tinh dầu tỏi tinh dầu sả việc làm giảm gây hại sâu đục trái bưởi 1.3 Đối tượng phạm vi nghiên cứu - Đối tượng nghiên cứu: Pheromone giới tính sâu đục trái bưởi Citripestis sagitiferella - Phạm vi nghiên cứu: Xác định cấu trúc hóa học, tổng hợp đánh giá hiệu ngồi đồng pheromone giới tính sâu đục trái bưởi Citripestis sagitiferella 1.4 Nội dung nghiên cứu Xác định pheromone giới tính sâu đục trái bưởi Citripestis sagitiferella: Được thực phịng thí nghiệm Sinh thái học Hóa chất, trường Đại học Nơng nghiệp Công nghệ Tokyo – Nhật Bản Tổng hợp pheromone giới tính thực phịng thí nghiệm Phịng trừ Sinh học thuộc Bộ mơn Bảo vệ Thực vật – Khoa Nông nghiêp – trường Đại Học Cần Thơ Đánh giá hiệu pheromone giới tính ngồi đồng: Được thực vườn bưởi Sóc Trăng, Hậu Giang, Vĩnh Long Cần Thơ Đánh giá hiệu lực tinh dầu sả tinh dầu tỏi: Được thực Sóc Trăng Do kết đánh giá hiệu lực pheromone đồng chưa mong đợi, cụ thể pheromone giới tính sâu đục trái bưởi chưa hấp dẫn thành trùng đực Nguyên nhân giả định thành phần pheromone chứa thành phần phụ khác chưa phát với máy móc, cơng nghệ, phương pháp Thực tế, nhiều nghiên cứu pheromone giới tính họ Pyralidae chưa thành cơng đánh giá hiệu lực hấp dẫn ngồi đồng Bên cạnh đó, tác giả tiến hành nghiên cứu chất quấy rối (cũng xem hóa chất tín hiệu) để bảo đảm khối lượng đề tài 1.5 Điểm luận án - Cung cấp thông tin khoa học đặc điểm hình thái, sinh học gây hại sâu đục trái bưởi vùng điều tra - Là cơng trình nghiên cứu xác định thành phần cấu trúc hóa học pheromone giới tính sâu đục trái bưởi đưa quy trình tổng hợp thành phần pheromone giới tính - Bước đầu xác định hiệu phòng trừ sâu đục trái bưởi của chất quấy rối (tinh dầu sả, tinh dầu tỏi) điều kiện đồng 1.6 Ý nghĩa luận án 1.6.1 Ý nghĩa khoa học luận án - Xác định tổng hợp thành phần pheromone giới tính sâu đục trái bưởi - Xác định đặc điểm hình thái, sinh học triệu chứng gây hại sâu đục trái bưởi 1.6.2 Ý nghĩa thực tiễn luận án - Đặt móng ban đầu cho việc điều chế mồi pheromone giới tính phịng trừ lồi dịch hại - Khẳng định tính khả thi biện pháp sinh học việc sử dụng hợp chất quấy rối tinh dầu sả chanh, tinh dầu tỏi phòng trừ sâu đục trái bưởi Chương PHƯƠNG TIỆN VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 3.1 Thời gian, địa điểm phương tiện Thời gian: Đề tài thực từ tháng 01/2015 đến tháng 12/2018 Địa điểm: - Phịng thí nghiệm Phịng trừ sinh học nhà lưới Bộ mơn Bảo vệ Thực vật, khoa Nơng nghiệp, Trường ĐHCT; phịng thí nghiệm Sinh thái hóa chất trùng trường Đại học Nông nghiệp Công nghệ Tokyo, Nhật Bản (Tokyo University of Agriculture and Technology, Japan) - Các vườn bưởi Năm roi xã Mỹ Hịa, huyện Bình Minh, tỉnh Vĩnh Long; xã Phú Hữu, huyện Châu Thành, tỉnh Hậu Giang thị trấn An Lạc Thôn, huyện Kế Sách, tỉnh Sóc Trăng Dụng cụ, thiết bị: - Bẫy pheromone bao gồm bảng dính, mái che (Takeda Chemical Ind Ltd.Osaka, Nhật Bản) - Tuýp cao su non (8 mm OD Aldrich Chemical Co Ltd) - Lọ thủy tinh, hộp nhựa Hóa chất: Các hóa chất cung cấp từ công ty Sigma Aldrich (USA), Merk (Đức), công ty Wako, Shin-etsu (Nhật) phịng Thí nghiệm Sinh thái học Hóa chất, trường Đại học Nơng nghiệp Cơng nghệ Tokyo - Nhật Bản Tinh dầu tỏi cung cấp công ty TNHH Tuệ Linh, tinh dầu sả cung cấp cơng ty hóa chất Cần Thơ Nguồn sâu đục trái bưởi: Trái bưởi bị nhiễm sâu đục trái thu từ vườn bưởi Năm roi huyện Bình Minh (Vĩnh Long), Châu Thành (Hậu Giang), Càng Long (Trà Vinh) Kế Sách (Sóc Trăng) chuyển trường Đại học Cần Thơ 3.2 Nội dung phương pháp nghiên cứu 3.2.1 Điều tra thực trạng canh tác nơng hộ Mục tiêu: Nhằm tìm hiểu trạng canh tác bưởi, đồng thời xác định hiểu biết nơng dân sâu đục trái tình hình gây hại sâu đục trái địa bàn khảo sát * Phỏng vấn nông hộ Việc điều tra thực phương pháp vấn 90 nông hộ canh tác bưởi tỉnh Hậu Giang, Sóc Trăng Vĩnh Long, tình hình gây hại sâu đục trái bưởi thông tin khác giống bưởi, sâu bệnh hại, biện pháp phòng trị nhận biết nông dân dịch hại vườn * Khảo sát vườn Tại hộ điều tra, sau vấn người trực tiếp chăm sóc vườn phiếu câu hỏi, tiến hành đánh giá tình hình gây hại sâu đục trái bưởi cách quan sát ghi nhận gây hại trực tiếp vườn Tỷ lệ trái bị hại (TLTBH) tính theo cơng thức TLTBH (%) = x 100 3.2.2 Điều tra thành phần côn trùng gây hại vườn bưởi diễn biến tỷ lệ gây hại sâu đục trái bưởi Mục tiêu: Xác định thành phần loài côn trùng gây hại diễn biến tỷ lệ gây hại sâu đục trái bưởi Khảo sát thực vườn bưởi gồm vườn bưởi Năm roi huyện Bình Minh, tỉnh Vĩnh Long vườn bưởi Da xanh thành phố Cần Thơ huyện Châu Thành, tỉnh Hậu Giang Sự diện, tần suất xuất (TSXH) côn trùng gây hại tỷ lệ gây hại sâu đục trái bưởi bưởi đánh dấu ghi nhận tuần/lần theo dõi liên tục suốt năm Trong TLTBH tính theo cơng thức Mục 3.2.1; đồng thời, TSXH tính theo cơng thức: TSXH (%) = x 100 TSXH chuyển đổi sang mức độ phổ biến (MĐPB) (Nguồn: Lương Thị Duyên ctv., 2015 có chỉnh sửa): - (-): khơng phổ biến (TSXH = 0) - (+): MĐPB thấp, TSXH ≤ 20% - (++): MĐPB trung bình, TSXH từ 20 – ≤50% - (+++): MĐPB cao, TSXH >50% 3.2.3 Khảo sát đặc điểm hình thái, sinh học sâu đục trái bưởi Trưởng thành sâu đục trái có múi thu thập từ vườn bưởi Năm Roi nhân ni phịng thí nghiệm Bộ mơn Bảo vệ Thực vật, Khoa Nông nghiệp, trường Đại học Cần Thơ Ghi nhận thời gian phát triển giai đoạn, mô tả hình dạng đo kích thước giai đoạn phát triển loài sâu đục 3.2.4 Ly trích pheromone giới tính ngài sâu đục trái bưởi Pheromone giới tính sâu đục trái bưởi ly trích theo quy trình mơ tả Lê Văn Vàng (2013) Dịch trích dán nhãn trữ điều kiện lạnh gởi đến Phịng thí nghiệm Hóa chất sinh thái học Trường Đại học Nông nghiệp Công nghệ Tokyo - Nhật Bản để phân tích Sắc ký khí – Điện râu đầu (GC-Electroantennographic detector, GC-EAD) Sắc ký khí - khối phổ (GC-MS) 3.2.4.1 Phân tích Sắc ký khí – Điện râu Nhằm định vị thành phần pheromone giới tính mẫu ly trích biểu đồ sắc ký khí, mẫu pheromone ly trích chất chuẩn tổng hợp phân tích máy GC-EAD 3.2.4.2 Phân tích Sắc ký khí – Khối phổ Phổ khối lượng (Mass spectrum) mẫu pheromone ly trích, chất chuẩn tổng hợp ghi nhận máy liên hợp Sắc ký khí – Khối phổ (GC HP 6890 - MS 5973) 3.2.5 Tổng hợp thành phần pheromone giới tính Citripestis sagittiferella 3.2.5.1 Tổng hợp thành phần pheromone giới tính chứa nối đôi phân tử (các hợp chất E11-14:OAc Z11-14:OAc) Các hợp chất (E)-11-tetradecenyl acetate (E11-14:OAc) (Z)-11tetradecenyl acetate (Z11-14:OAc) tổng hợp thông qua phản ứng Wittig với chất phản ứng ban đầu hợp chất thương mại 11-bromo-undecan-1-ol trình bày theo Hình 3.1 Hình 3.1 Con đường tổng hợp hợp chất E11-14:OAc Z11-14:OAc a) Dimethoxymethane/LiBr/p-TsOH; b) Triphenylphosphine/900C; c) propanal/nBuLi/THF; d) 0.5N HCl/MeOH; e) 15%AgNO3 in silica gel; f) Anhydride acetic/pyridine 3.2.5.2 Tổng hợp thành phần pheromone giới tính chứa hai nối đơi liên hợp phân tử (hợp chất Z9,E11-14:OAc) Thành phần pheromone chứa hai nối đôi phân tử, hợp chất (9Z,11E)-9,11-tetradecadienyl acetate (Z9,E11-14:OAc) tổng hợp theo sơ đồ Hình 3.2 a Br OH (1) BrPh3P OMOM (3) b Br (2) OMOM c OMOM (4) e d OH (5) f OAc Z9,E11-14:OAc Hình 3.2 Con đường tổng hợp hợp chất Z9,E11-14:OAc (nguồn: Uehara et al., 2013) a) Dimethoxymethane/LiBr/p-TsOH; b) Triphenylphosphine/900C; c) Pentanal/Sodium bis(trimethylsilyl)amide/THF; d) 0.5N HCl/MeOH; e) Tetracyanoethylene/THF; f) anhydride acetic/pyridine 3.2.5.3 Thẩm định cấu trúc hóa học mẫu tổng hợp Mẫu tổng hợp thành phần hóa học giai đoạn tổng hợp gởi đến phịng thí nghiệm Sinh thái học hóa chất, trường Đại học Nông nghiệp Công nghệ Tokyo – Nhật Bản để xác định phân tích GC-MS NMR (Nuclear magnetic resonance spectrometry) 3.2.6 Đánh giá khả hấp dẫn pheromone giới tính tổng hợp ngài Citripestis sagittiferella Pheromone giới tính tổng hợp pha lỗng dung mơi nhexane tinh khiết để tạo thành dung dịch pheromone giới tính nồng độ 10 mg/mL, dán nhãn trữ ngăn mát tủ lạnh đưa thử nghiệm Các thành phần pheromone giới tính tổng hợp thẩm định kỹ thuật phân tích phịng thí nghiệm trước thực trắc nghiệm sinh học (bioassay) phương pháp đánh giá điều kiện đồng Thời gian thực hiện: Từ tháng 4/2016-12/2016 Thí nghiệm 1: Xác định hàm lượng pheromone giới tính thích hợp mồi bẫy pheromone ngài Citripestis sagittiferella Mục tiêu: Tìm tỷ lệ phối trộn phù hợp thành phần pheromone có tác dụng hấp dẫn thành trùng đực mồi bẫy Địa điểm: Thí nghiệm bố trí vườn bưởi Vĩnh Long, Sóc Trăng Hậu Giang Cách bố trí: Thí nghiệm bao gồm thí nghiệm bố trí độc lập theo thể thức khối hoàn toàn ngẫu nhiên nhân tố với nghiệm thức hợp chất E11-14:OAc, Z11-14:OAc Z9,E11-14:OAc tương ứng với tỉ lệ phối trộn khác mô tả Bảng 3.1, lần lặp lại, lần lặp lại nghiệm thức tương ứng với bẫy pheromone Chỉ tiêu ghi nhận: Số lượng ngài Citripestis sagittiferella đực vào bẫy sau tuần/lần, tiêu theo dõi vòng tháng Bảng 3.1 Các tỷ lệ pheromone phối trộn thí nghiệm Hỗn Thành phần pheromone (mg/tuýp) hợp E11Z11-14:OAc E9,Z11T23 14:OAc 14:OAc 0,0 0,0 0,5 0,5 0,0 0,0 0,5 0,05 0,0 0,5 0,05 0,05 0,5 0,0 0,05 0,05 0,0 0,0 0,5 0,05 0,5 0,0 0,0 0,05 0,5 0,05 0,0 0,05 0,5 0,05 0,05 0,05 10 0,5 0,05 0,05 0,0 11 0,5 0,0 0,05 12 0,5 0,05 0,05 13 0,5 0,0 0,0 14 0,5 0,05 0,0 15 0,5 0,0 0,05 16 0,5 0,0 P23 0,0 Hỗn hợp Thành phần pheromone (mg/tuýp) E11Z11-14:OAc E9,Z11T23 P23 14:OAc 14:OAc 17 0,5 0,0 0,05 18 0,5 0,05 0,0 Đ/c dương 0 Đ/c âm 01 ngài chưa bắt cặp Ghi chú: T23: Z3,Z6,Z9-23; P23: Z3,Z6,Z9, Z12,Z15-23: H 3.2.7 Khảo sát ảnh hưởng tinh dầu sả tinh dầu tỏi lên gây hại sâu đục trái có múi Tinh dầu sả (1,4 g) tinh dầu tỏi (1,4 g) cho vào ba kiểu vật liệu chứa gồm: Tuýp Eppendorf (thể tích 1,5 mL), túi PE (polyethylene) zipper bên đặt miếng bơng gịn (~2 cm), túi PE thường bên đặt miếng bơng gịn (~2 cm) Nắp Eppendorf miệng túi PE zipper đậy kín lại, túi PE thường dùng lửa hơ để hàn miệng túi Thí nghiệm 1: Khảo sát tốc độ bay tinh dầu sả tinh dầu tỏi điều kiện vườn bưởi thí nghiệm Mục tiêu: Nhằm đánh giá tốc độ bay tinh dầu sả tinh dầu tỏi với loại vật liệu chứa khác Thí nghiệm bố trí theo thể thức khối hoàn toàn ngẫu nhiên với nghiệm thức (Bảng 3.2) lần lặp lại vườn trồng chuyên canh bưởi Năm roi có diện tích 15.000 m2 xã Xn Hịa, huyện Kế Sách, tỉnh Sóc Trăng Chất quấy rối cân ghi nhận khối lượng trước treo tán bưởi vào buổi chiều mát Khối lượng chất gây nhiễu cân ngày 16 ngày sau treo Bảng 3.2 Các nghiệm thức thí nghiệm khảo sát tốc độ bay tinh dầu sả chanh tinh dầu tỏi Nghiệm Mô tả thức Vật liệu chứa Chất quấy rối Ống Eppendorf Tinh dầu sả PE thường Tinh dầu sả PE zipper Tinh dầu sả Ống Eppendorf Tinh dầu tỏi PE thường Tinh dầu tỏi PE zipper Tinh dầu tỏi Thí nghiệm 2: Khảo sát ảnh hưởng tinh dầu sả tinh dầu tỏi lên gây hại sâu đục có múi Mục tiêu: Đánh giá hiệu lực tinh dầu tỏi tinh dầu sả chanh phòng trừ sâu đục trái bưởi 4.1.3 Nhận biết nông dân sâu đục trái bưởi, thời gian xuất hiện, cỡ trái bị gây hại thành phần côn trùng gây hại vườn Kết bảng 4.1 cho thấy 100% nông hộ vấn không nhận biết giai đoạn trưởng thành sâu đục trái bưởi Đa số nông hộ cho sâu đục trái xuất nhiều vào mùa nắng, tưới nước lên tán hạn chế sâu đục trái bưởi Cỡ trái bị hại phổ biến 5-10 cm Bảng 4.1 Nhận biết nông hộ sâu đục trái bưởi Thông tin ghi nhận Vĩnh Long Tỷ lệ nơng hộ (%) Hậu Sóc Giang Trăng Trung bình Nhận biết thành trùng - Khơng 100 100 100 100 - Có 0 0 Nhận biết ấu trùng - Khơng 0 0 - Có 100 100 100 100 Nhận biết trứng - Không 73,33 80 63,33 72,22 - Có 26,67 20 36,67 27,78 Xuất nhiều vào mùa - Mùa nắng 83,34 76,67 76,67 78,89 - Mùa mưa 3,33 3,33 6,66 4,45 - Không rõ 13,33 20 16,67 16,66 Giai đoạn trái bị hại nhiều - 10 cm 41,38 42 41,31 41,56 Tưới nước tán có hạn chế sâu đục trái bưởi - Không 26,67 36,67 16,67 26,67 - Có 73,33 63,33 83,33 73,33 4.1.4 Biện pháp phịng trị sâu đục trái bưởi Kết ghi nhận Bảng 4.2 cho thấy 100% nông hộ vấn áp dụng biện pháp phun thuốc trừ sâu để phịng trị sâu đục trái Trong đó, trung bình 86,67% nông hộ áp dụng biện pháp phun ngừa Các loại thuốc hóa học nơng dân sử dụng để phịng trị sâu đục trái gồm Yamida 10WP (Imidacloprid), Dragon 585EC (Cypermethrin + Chlorpyriphos Ethyl), Ascend 20SP (Acetamiprid), Fentox 25EC (Fenvalerate + Dimethoate), Vitashield 40 EC (Chlorpyriphos), Vibasu 10GR (Diazinon) 10 Bảng 4.2 Biện pháp phòng trị sâu đục trái bưởi nông hộ Tỷ lệ nông hộ (%) Thông tin ghi nhận Vĩnh Hậu Sóc Trung bình Long Giang Trăng Có phịng trị 100 100 100 100 Sâu đục trái bưởi đối tượng - Dễ phòng trị 76,67 63,34 60 66,67 - Khó phịng trị 23,33 36,66 40 33,33 Biện pháp phòng trị - Phun thuốc BVTV 100 100 100 100 Thời điểm phun thuốc - Phun ngừa 76,67 93,34 90 86,67 - Thấy trái bị hại 20 6,66 10 12,22 - Tỷ lệ cao 3,33 0 1,11 Khoảng cách lần phun (ngày/lần) -7 75 21,43 3,7 33,38 - 10 20,83 42,86 51,86 38,51 - >15 4,17 35,71 44,44 28,11 4.1.5 Tỉ lệ gây hại diễn biến gây hại sâu đục trái bưởi Citripestis sagittiferella 4.1.5.1 Tỉ lệ gây hại Citripestis sagittiferella bưởi Kết khảo sát (Bảng 4.3) cho thấy tỷ lệ trái bưởi bị đục từ 2,28%÷3,63% Trong Sóc Trăng có tỷ lệ trái bị hại nặng Giai đoạn trái có đường kính từ 5÷10 cm (khoảng 1,5÷3 tháng sau đậu trái) mẫn cảm sâu đục trái so với giai đoạn phát triển khác trái Bảng 4.3 Tỷ lệ trái bị hại (%) theo đường kính trái vườn khảo sát Vĩnh Long Kích thước trái Hậu Giang Số Tổng trái Tỉ lệ số trái bị % hại Sóc Trăng Số Tổng trái Tỉ lệ số trái bị % hại Tổng số trái Số trái bị hại Tỉ lệ % - 10cm 10.812 273 2,52 8.369 236 2,81 11.627 413 3,55 Tổng 23.440 535 2,28 24.296 666 2,74 24.939 907 3,63 11 4.1.5.2 Diễn biến tỉ lệ gây hại sâu đục trái Citripestis sagittiferella vườn bưởi A Diễn biến tỉ lệ gây hại sâu đục trái bưởi Citripestis sagittiferella thành phố Cần Thơ huyện Châu Thành, tỉnh Hậu Giang Tỉ lệ gây hại sâu đục trái vườn 25% tỉ lệ trái bị hại tăng giảm khơng ổn định, vườn có tỉ lệ trái bị hại cao từ cuối tháng 12/2017 đến đầu tháng 6/2018, cao từ cuối tháng 12/2017 đến cuối tháng 2/2018 tỉ lệ thấp từ đầu tháng đến đầu tháng 9/2018, tỉ lệ thấp vào tháng 6/2018 Tỉ lệ sâu đục trái giai đoạn mùa mưa (từ tháng đến tháng 12) thấp nhiều so với giai đoạn mùa khô (từ tháng giêng đến tháng 5) chứng tỏ tỉ lệ gây hại sâu đục trái phụ thuộc nhiều vào lượng mưa (Hình 4.1) Hình 4.1 Diễn biến tỷ lệ gây hại sâu đục trái bưởi Citripestis sagittiferella tỉnh Hậu Giang (HG) Thành phố Cần Thơ (CT) B Diễn biến tỉ lệ gây hại sâu đục trái Citripestis sagittiferella đường kính trái bị hại vườn bưởi Năm Roi xã Mỹ Hịa, huyện Bình Minh, tỉnh Vĩnh Long Kết khảo sát cho thấy suốt trình khảo sát từ ngày 25/11/2017 đến 24/11/2018 tất vườn điều tra bị sâu đục trái bưởi Citripestis sagittiferella gây hại khơng liên tục Nhìn chung tỉ lệ gây hại sâu đục trái bưởi Citripestis sagittiferella vườn có đường biểu diễn gần giống Diễn biến tỉ lệ trái bị sâu đục trái Citripestis sagittiferella gây hại có mối tương quan với diễn biến thời tiết Đặc biệt vào tháng 06/2018 không thấy có xuất gây hại sâu đục trái Nguyên vào thời điểm có lượng mưa ẩm độ khơng khí tăng, điều dẫn đến suy giảm tỷ lệ gây hại sâu đục trái bưởi (Vũ Bá Quan, 2014 (2); Lương Thị Duyên, 2015) 12 Hình 4.2 Diễn biến tỉ lệ gây hại Citripestis sagittiferella vườn bưởi Năm Roi xã Mỹ Hịa, huyện Bình Minh, Tỉnh Vĩnh 4.2 Đặc điểm hình thái, sinh Long học khả gây hại sâu đục trái có múi Citripestis sagittiferella 4.2.1 Đặc điểm hình thái sâu đục trái bưởi Citripestis sagittiferella Thành trùng: Thành trùng sâu đục trái Citripestis sagittiferella thuộc dạng ngài Khi vũ hóa, thành trùng có màu xám đen, sau chuyển dần sang màu nâu xám, cánh trước ửng màu vàng rơm (Hình 4.3) Thành trùng đực có kích thước nhỏ thành trùng Hình 4.3 Thành trùng đực thành trùng ngài Citripestis sagittiferella Về kích thước, thành trùng có chiều dài thể trung bình 12,17±0,77 mm chiều rộng sải cánh trung bình 25,7±1,17 mm Thành trùng đực có kích thước trung bình 11,97±0,74 mm chiều rộng sải cánh trung bình 25,6±1,11 mm (Bảng 4.4) Trứng: Trứng sâu đục trái Citripestis sagittiferella đẻ rải rác thành cụm vào ban đêm, có hình dạng dẹt gần trịn xếp chồng lên 13 giống vảy cá Đường kính trung bình trứng 1,25±0,04 mm Ấu trùng: Ấu trùng bao gồm tuổi qua lần lột xác, màu sắc, kích thước thời gian phát triển tuổi ấu trùng khác Nhộng: Nhộng thuộc dạng nhộng màng bao bọc kén tơ Chiều dài trung bình 11,35±0,55 mm chiều rộng trung bình 3,13±0,32 mm Bảng 4.4 Kích thước (mm) giai đoạn phát triển sâu đục trái bưởi Citripestis sagittiferella Kích thước trung bình (mm) Số cá thể quan sát (con) Dài Rộng Trứng 40 1,25±0,046 1,25±0,04 Ấu trùng tuổi 40 2,07±0,19 0,27±0,03 0,41±0,02 Ấu trùng tuổi 40 2,85±0,16 0,41±0,02 0,33±0,06 Ấu trùng tuổi 40 4,35±0,47 0,61±0,10 0,50±0,05 Ấu trùng tuổi 40 7,31±0,57 0,97±0,10 0,81±0,09 Ấu trùng tuổi 40 13,75±1,03 2,01±0,16 1,27±0,14 Nhộng 40 11,35±0,56 3,13±0,32 Thành trùng đực 30 Dài thân 11,97±0,74 Sải cánh 25,56±1,11 Dài thân 12,17±0,77 Sải cánh 25,73±1,17 Giai đoạn Thành trùng 30 Kích thước mảnh đầu 4.2.2 Đặc điểm sinh học sâu đục trái Citripestis sagittiferella 4.2.2.1 Vòng đời sâu đục trái Citripestis sagittiferella Trong điều kiện phịng thí nghiệm, vịng đời Citripestis sagittiferella trải qua gia đoạn gồm: Trứng, ấu trùng (gồm tuổi) thành trùng với chu kỳ sinh trưởng khoảng 28÷32 ngày (Hình 4.4) 4.2.2.2 Khả sống phát triển sâu đục trái Citripestis sagittiferella điều kiện phịng thí nghiệm Kết cho thấy sâu đục trái Citripestis sagittiferella có khả phát triển tốt Ấu trùng tiếp tục phát triển qua các tuổi đến giai đoạn nhộng với tỉ lệ hóa 14 nhộng đạt cao trung bình 79,98±3,21% Tỉ lệ vũ hóa tương đối cao, trung bình 70,33±5,15% Như vậy, điều kiện phịng thí nghiệm sâu đục trái có khả sinh trưởng tồn cao Hình 4.4 Vịng đời sâu đục trái bưởi Citripestis sagittiferella 4.2.3 Tập quán sinh sống triệu chứng gây hại Ngài sâu đục trái Citripestis sagittiferella vũ hóa bắt cặp vào lúc chiều tối Sau bắt cặp, ngài bắt đầu đẻ trứng Trứng thường đẻ vị trí từ 1/3 trái tính từ trái trở xuống, trứng đẻ thành cụm trái Ấu trùng tuổi sau nở đục nhanh vào lớp vỏ trái bưởi cạnh bên ổ trứng mà không cần di chuyển xa Ấu trùng tuổi bắt đầu đục sâu vào phần thịt trái bưởi, đường kính đục to hơn, vết thương sâu gây tạo điều kiện cho nấm bệnh xâm nhập gây thối rụng trái 15 Ấu trùng tuổi ăn mạnh, chúng ăn vào thịt trái bưởi, thải nhiều phân màu nâu đen Giai đoạn nơng dân dễ dàng nhận biết điều kiện đồng Ấu trùng tuổi ăn mạnh, thải phân khô dạng mọt cưa màu vàng nâu vị trí vết đục trái Ở điều kiện đồng, ấu trùng tuổi thường tìm thấy trái bị hại rụng xuống đất 4.3 Xác định pheromone giới tính ngài sâu đục trái bưởi Citripestis sagittiferella phân tích GC-EAD GC-MS 4.3.1 Phân tích GC-EAD mẫu pheromone ly trích mẫu chuẩn tổng hợp Kết phân tích GC-EAD mẫu pheromone ly trích từ ngài (1,0 FE) Citripestis sagittiferella mẫu chuẩn cho thấy, râu đầu ngài đực đáp ứng với thành phần: thành phần 1, (comp I, comp II, comp III); trùng khớp tương ứng với hợp chất E11-14:OAc; Z11-14:OAc Z9,E114:Oac Hình 4.5 Biểu đồ Sắc ký khí – Điện râu mẫu pheromone giới tính ly trích từ tuyến pheromone ngài Citripestis sagitiferella chất chuẩn tổng hợp 16 4.3.2 Phân tích GC-MS mẫu pheromone ly trích Kết phân tích GC-MS phát thành phần biểu đồ sắc ký tổng (TIC) hai đồng phân hình học E Z tetradecenyl acetate (Hình 4.6) Phổ khối lượng thành phần cho thấy tetradecadienyl actetate Hình 4.6 Kết phân tích GG-MS pheromone ly trích từ ngài (A) Biểu đồ Sắc ký tổng ion (total ion chromatogram), (B) phổ khối lượng thành phần (Comp I)(E11-14:OAc, Rt 13.292 min), (C) phổ khối lượng thành phần (Comp II) (Z11-14:OAc, Rt 13.497 min) (D) phổ khối lượng thành phần (Comp III) (Z9,E11-14:OAc, Rt 14.867 min) Ngoài ra, thời gian lưu thành phần lâu thành phần 1,37 phút (Hình 4.6A) nối đôi thành phần hợp chất mạch thẳng chứa nối đơi liên hợp (conjugated diene) Vị trí nối đơi thành phần xác định phân tích GC-MS với dẫn xuất DMDS xác nhận vị trí nối đôi thành phần nằm carbon 11 (C11) (Hình 4.7) Bên cạnh đó, chất tổng hợp E11-14:OAc, Z11-14:OAc Z9,E1114:OAc có phổ khối lượng thời gian lưu trùng hợp với phổ khối lượng thành phần 1, Kết định lượng E11-14:OAc pheromone trích xuất từ thành trùng đạt khoảng 7ng 17 Hình 4.7 Phân tích GC-MS pheromone ly trích từ 13 ngài xử lý với DMDS (A), Biểu đồ sắc ký tổng ion (B) phổ khối lượng dẫn xuất DMDS thành phần (Comp I) (Rt 31.12 min) 4.4 Tổng hợp thành phần pheromone giới tính Citripestis sagittiferella 4.4.1 Tổng hợp hợp chất E11-14:OAc Z11-14:OAc Các hợp chất (E)-11-tetradecenyl acetate (E11-14:OAc) (Z)-11tetradecenyl acetate (Z11-14:OAc) tổng hợp đường thông qua phản ứng Wittig với chất phản ứng ban đầu hợp chất thương mại 11-bromo-undecan1-ol trình bày Hình 3.1 4.4.1.1 Bromo-11-methoxymethoxy-undecane (hợp chất 2) Nhóm chức -OH hợp chất 11-bromo-undecan-1-ol (1) bảo vệ cách chuyển sang hợp chất 1-bromo-11-methoxymethoxy-undecane (2) (MOMther, 4,8 g; 16,2 mmol), đạt hiệu suất phản ứng 81,6% - Dữ liệu GC-MS: thời gian lưu (Rt) 15,82 phút; phổ khối lượng (MS, m/z): 45 (base); 61; 55; 69; 83; 95; 109; 123; 232 295 - Dữ liệu NMR: 1H NMR (ppm): 1,28 (14H, broad); 1,54-1,64 (2H, tt, J = 6,88; 6,67 Hz); 1,80-1,90 (2H, tt, J = 7,13; 7,18 Hz); 3,34 (3H, s); 3,37-3,41 (2H, t, J=6,88 Hz); 3,48-3,53 (2H, t, J=6,63 Hz) 4,61 (2H, s) 13C NMR (ppm): 26,18; 28,14; 28,72; 29,38; 29,39; 29,43; 29,51; 29,71; 32,81; 34,01; 55,06; 67,84 96,35 18 4.4.1.2 Các hợp chất (E)-11-tetradecen-1-ol MOM (Z)-11-tetradecen1-ol MOM ethers (4a 4b) Hỗn hợp hợp chất MOM-ether (2) (4,8 g; 16,2 mol) khuấy với triphenylphosphine (PPh3)/THF/butylLithium n-hexane (n-BuLi) tạo thành muối phosphonium Tiếp tục qua phản ứng Wittig bước xử lý khác, thu hỗn hợp hai đồng phân hợp chất 14-methoxymethoxy-tetradec-3-ene (4a 4b) (2,1 g; 8,19 mmol), đạt hiệu suất phản ứng 50,5% Dữ liệu GC-MS: Rt: 4a: 12,30 phút, 4b: 12,54 phút; mz: 45 (base); 55; 69; 82; 95; 111; 125; 135; 149; 224 256 4.4.1.3 Các hợp chất (E)-11-tetradecen-1-ol (Z)-11-tetradecen-1-ol (5a 5b) Các hợp chất 4a 4b, sau loại bỏ bảo vệ nhóm chức rượu MOM ether Thu hỗn hợp hợp chất Z11-14:OH E11-14:OH (1,51 g; 7,1 mmol) đạt hiệu suất 86,7% Tiếp tục tinh lọc cột sắc ký mở sử dụng hỗn hợp 15% AgNO3 silica gel làm pha tĩnh thu hợp chất Z1114:OH E11-14:OH với độ tinh khiết >98% (kiểm tra phân tích GC-MS) - Dữ liệu GC-MS: Rt: 5a: 12,30 phút; 5b: 12,54 phút; MS (mz): 41; 55 (base); 67; 82; 96; 109; 123; 137; 152; 222 240 - Dữ liệu NMR: 1H NMR (ppm): E11-14:OH: 1,27-1,32 (3H, t, J = 7,44 Hz); 1,60 (14H, broad); 1,85-1,94 (2H, m); 1,96 (1H, s); 2,27-2,37 (4H, m); 3,953,99 (2H, t, J = 6,66 Hz) 5,67-5,81 (2H, m) 13C NMR (ppm): 14,0; 25,60; 25,73; 29,16; 29,42; 29,50; 29,55; 29,59; 29,64; 32,57; 32,78; 63,06; 129,37 131,86; Z11-14:OH: 1H NMR (ppm): 1,10-1,14 (3H, t, J = 7,48 Hz); 1,44 (14H, broad); 1,69-1,78 (2H, m); 2,01 (1H, s); 2,15-2,25 (4H, m); 3,79-3,83 (2H, t, J = 6,57 Hz) 5,48-5,57 (2H, m) 13C NMR (ppm): 14,4; 20,5; 25,72; 27,9; 29,42; 29,52; 29,55; 29,59; 29,77; 31,1; 32,79; 63,03; 129,34 131,53 4.4.1.4 Các hợp chất (E)-11-tetradecenyl acetate (Z)-11-tetradecenyl acetate Hợp chất E11-14:OH (0,5 g; 2,4 mmol) hợp chất Z11-14:OH (0,5 g; 2,4 mmol) trải qua q trình acetyl hóa tinh lọc thu hợp chất E1114:OAc (hoặc Z11-14:OAc), đạt hiệu suất phản ứng 92,3% Dữ liệu GC-MS: Rt: 14,83 phút; MS (m/z): Rt: 12,3 phút (E11-14:OAc); 12,54 phút (Z11-14:OAc); MS (m/z): 43, 55, 68, 82 (base), 96, 109, 123, 138 194 - Dữ liệu NMR: E11-14:OAc: 1H NMR (ppm): 1,26-1,31 (3H, t, J = 7,36 Hz); 1,60 (14H, broad); 1,89-1,99 (2H, dt, J = 6,96; 7,01 Hz); 2,25-2,34 (4H, m); 2,37 (3H, s); 4,35-4,40 (2H, t, J = 6,71 Hz) 5,64-5,82 (2H, m) 13C NMR (ppm): 13,97; 20,98; 25,58; 25,89; 28,58; 29,13; 29,23; 29,47; 29,50; 29,62; 32,55; 64,64; 129,33; 131,85 171,23; Z11-14:OAc: 1H NMR (ppm): 0,77-0,82 (3H, t, J = 7,48 Hz); 1,11 (14H, broad); 1,43-1,52 (dt, J = 7,0; 6,9 Hz); 1,82-1,92 (4H, m); 1,89 (3H, s); 3,87-3,91 (2H, t, J = 6,8 Hz) 5,13-5,21 (2H, m) 13C NMR (ppm): 14,38; 20,49; 21,01; 25,89; 27,07; 28,58; 29,24; 29,26; 29,49; 29,52; 29,76; 64,67; 129,31; 131,52 171,28 19 4.4.2 Tổng hợp hợp chất Z9,E11-14:OAc Hợp chất (9Z,11E)-9,11-tetradecadienyl acetate (Z9,E11-14:OAc) tổng hợp đường tổng hợp trình bày Hình 3.4 4.4.2.1 1-Bromo-9-methoxymethoxy-nonane (2) Tương tự trình bày Mục 4.4.1.1, nhóm -OH bảo vệ cách chuyển sang hợp chất methoxymethyl (MOM) ether (2) (3,09 g; 11,6 mmol) đạt hiệu suất 86,6% - Dữ liệu GC-MS: Rt 13,71 phút; Phổ khối lượng (MS, m/z): 45 (base); 61; 55; 69; 81; 95; 109; 123; 235 267 - Dữ liệu NMR: 1H NMR (ppm): 1,29 (10H, broad); 1,52-1,62 (2H, tt, J = 6,88; 6,67 Hz); 1,79-1,88 (2H, tt, J = 7,13; 7,18 Hz); 3,35 (3H, s); 3,37-3,41 (2H, t, J = 6,88 Hz); 3,48-3,52 (2H, t, J = 6,63 Hz) 4,60 (2H, s) 13C NMR (ppm): 26,14; 28,12; 28,68; 29,28; 29,35; 29,70; 32,79; 33,97; 55,06; 67,80 96,36 4.4.2.2 (9Z,11E)-9,11-tetradecadien-1-ol MOM ether (4) Hợp chất (2) (3,09 g; 11,6 mmol) khuấy với triphenylphosphine tạo thành muối phosphonium Tiếp tục phản ứng Wittig số bước xử lý khác thu hợp chất (9Z,11E)-9,11-tetradecadien-1-ol MOM ether (4) (1,74 g; 6,83 mmol), đạt hiệu suất 58,9% - Dữ liệu GC-MS: Rt 14,02 phút; MS (m/z): 45 (base); 55; 67; 81; 96; 121; 135; 209 254 4.4.2.3 (9Z,11E)-9,11-tetradecadien-1-ol Hợp chất MOM ether (1,74 g; 6,83 mmol) loại bỏ bảo vệ nhóm chức rượu MOM ether thu hợp chất (9Z,11E)-9,11-tetradecadien-1-ol compound (Z9,E11-14:OH) (1,02 g, 4,84 mmol), đạt hiệu suất 70,8% Độ tinh khiết đồng phân sản phẩm đạt >99% (kiểm tra GC-MS) - Dữ liệu GC-MS: Rt 14,95 min; MS (m/z): 41, 55, 67 (base), 82, 95, 109, 121, 192 210 - Dữ liệu NMR: 1H NMR (ppm): 1,02-1,07 (3H, t, J = 7,52 Hz); 1,34 (12H, broad); 1,55-1,64 (2H, tt, J = 6,67 Hz, 6,79 Hz); 2,01 (1H, s); 2,11-2,24 (2H, td, J = 7,36 Hz; 7,26 Hz); 3,64-3,69 (2H, t, J = 6,71 Hz); 5,29-5,37 (1H, dt, J = 10,08 Hz, 7,52 Hz); 5,68-5,78 (1H, dt, J = 15,05 Hz, 6,58 Hz); 5,94-6,02 (1H, dd, J = 10,96 Hz, 10,88 Hz) 6,28-6,37 (1H, dd, J = 15,13 Hz; 15,09) 13C NMR (ppm): 13,66; 25,71; 25,88; 27,66; 29,17; 29,37; 29,46; 29,70; 32,77; 63,06; 124,66; 128,58; 130,13 136,17 4.4.2.4 (9Z,11E)-9,11-tetradecadienyl acetate Hợp chất Z9,E11-14:OH (1,02 g, 4,84 mmol) trải qua trình acetyl hóa tinh lọc, thu hợp chất Z9,E11-14:OAc) (1,09 g; 4,33 mmol), đạt hiệu suất 89,6% - Dữ liệu GC-MS: Rt 14,83 phút; MS (m/z): 43; 55; 61; 67 (base); 79; 95; 107; 121; 135; 149; 192 252 - Dữ liệu NMR: 1H NMR (ppm): 0,93-0,98 (3H, t, J = 7,48 Hz); 1,24 (12H, broad); 1,35-1,44 (2H, m); 1,98 (3H, s); 2,08-2,20 (2H; td; J = 6,53 Hz; 7,31 Hz); 3,673,72 (2H, t, J = 6,7 Hz); 4,90-4,98 (1H; dt; J = 10,79 Hz; 7,52 Hz); 5,29-5,39 (1H; dt; J = 15,10 Hz; 6,57 Hz); 5,55-5,63 (1H; dd; J = 10,92 Hz; 10,88 Hz) 5,90-5,98 (1H; dd; J = 13,72 Hz; 15,01) 13C NMR (ppm): 13,65; 21,02; 25,87; 27,63; 28,57; 29,13; 29,19; 29,35; 29,66; 31,10; 64,65; 124,65; 128,61; 130,07; 136,16 171,28 20 4.5 Hiệu hấp dẫn mồi pheromone giới tính tổng hợp ngài Citripestis sagittiferella điều kiện đồng Dựa kết xác định thành phần cấu trúc hóa học tổng hợp hóa học pheromone giới tính, hợp chất E11-14:OAc, Z11-14:OAc Z9,E1114:OAc điều chế thành mồi pheromone đánh giá hiệu hấp dẫn ngồi đồng Thí nghiệm tiến hành với phối trộn thành phần E1114:OAc, Z11-14:OAc Z9,E11-14:OAc với 17 tỷ lệ khác (Bảng 3.1) Kết từ Bảng 3.1 cho thấy hỗn hợp pheromone khơng có hiệu lực hấp dẫn ngài đực Hầu hết kết đánh giá đồng thành phần pheromone giới tính lồi thuộc tổng họ Pyraloidae cho hiệu hấp dẫn thấp, cụ thể trường hợp loài sâu đục trái đậu Etiella zinckenella (Tóth et al., 1996), lồi sâu đục dây khoai lang Omphisa anastomosalis (Wakamura et al., 2010), loài sâu đục trái Conogethes punctiferalis (Konno et al., 1982), loài sâu kéo màng Hellula undalis (Arai et al., 1982), điều thành phần pheromone sâu đục trái bưởi cịn có một vài thành phần phụ chưa phát với phương tiện, phương pháp phân tích 4.6 Hiệu số chất quấy rối đến gây hại sâu đục trái Citripestis sagittiferella vườn bưởi 4.6.1 Sự bay tinh dầu sả tinh dầu tỏi vật liệu chứa khác điều kiện đồng Kết bảng 4.5 cho thấy khối lượng bay hơi/ngày tinh dầu sả cao so với tinh dầu tỏi, khối lượng bay phụ thuộc vào vật liệu chứa Trong đó, bọc PE zipper có khối lượng suy giảm nhiều nhất, tiếp đến bọc PE thường sau ống eppendorf Tốc độ bay (g/ngày) tinh dầu sả tinh dầu tỏi vật liệu chứa tương đối ổn định Bảng 4.5 Khối lượng bay tinh dầu tỏi tinh dầu sả vật liệu chứa khác điều kiện đồng Vật liệu Bọc PE có dây kéo Bọc PE thường Ống Eppendorf Khối lượng ban đầu (g) 1,4 1,4 1,4 Khối lượng (g/ngày)* Tinh dầu tỏi Tinh dầu sả a 0,051 0,055a 0,008b 0,072a 0,077a 0,011b CV (%) 4,84 3,44 * Giá trị cột có chữ theo sau không khác biệt ý nghĩa 1% theo phép thử DUNCAN 21 Diễn biến tốc độ bay (Hình 4.8) cho thấy khối lượng chất quấy rối bay tăng dần theo thời gian thí nghiệm ba vật liệu chứa Trong đó, bọc PE dây kéo có khối lượng bay nhiều nhất, tiếp đến bọc PE thường sau ống Eppendorf Tốc độ bay có tương quan chặt chẽ với tỷ lệ trái bị hại với r = 0,81 Hình 4.8 Khối lượng bay tinh dầu tỏi tinh dầu sả vật liệu chứa khác theo thời gian thực thí nghiệm 4.6.2 Hiệu số chất quấy rối sâu đục trái bưởi Citripestis sagittiferella điều kiện đồng Kết đánh giá ảnh hưởng tinh dầu sả tinh dầu tỏi lên gây hại sâu đục trái cho thấy tinh dầu sả tinh dầu tỏi có hiệu việc làm giảm tỷ lệ trái bị đục Tỉ lệ trái bị hại nghiệm thức xử lý tinh dầu tỏi tinh dầu sả thấp có ý nghĩa so với nghiệm thức đối chứng không xử lý Giữa loại vật liệu chứa bọc PE cho hiệu cao so với ống Eppendorf Như vậy, tốc độ bay ≤0,011 g/ngày cho hiệu quấy rối thấp so với tốc độ bay từ 0,72÷0,77 g/ngày Phân tích tương quan tốc độ bay tỷ lệ trái bị hại cho hệ số tương quan cao với r = 0,81 chứng tỏ tiềm gia tăng hiệu phòng trừ cách cải tiến vật liệu chứa để làm gia tăng tốc độ bay tinh dầu sả tinh dầu tỏi 22 Bảng 4.6 Tỉ lệ trái bị hại vườn thí nghiệm sử dụng tinh dầu sả tinh dầu tỏi phịng trừ sâu đục trái bưởi Citripestis sagittiferella Sóc Trăng Hiệu Số Tỉ lệ (%) trái bị hại tuần trung Chất quấy trái sau treo Nghiệm thức bình (%) rối (1,4g) quan sát tuần tuần tuần b b 38,9b Ống Eppendorf Tinh dầu tỏi 269 3,3±0,6 3,1±1,5 3,5±0,6 b d bc b Bọc nilon thường Tinh dầu tỏi 256 0,7±0,6 2,9±0,9 3,0±1,4 59,3bc c bc b Bọc nilon dây kéo Tinh dầu tỏi 239 2,0±0,6 1,8±1,0 2,4±1,1 61,1bc b b b Ống Eppendorf Tinh dầu sả 311 4,0±0,3 3,1±0,4 3,1±0,6 37,0b b bc b Bọc nilon thường Tinh dầu sả 229 3,4±0,7 1,7±1,7 3,4±0,3 48,2bc c c b Bọc nilon dây kéo Tinh dầu sả 286 2,1±0,6 1,3±1,1 1,9±0,3 66,7c a a a Đối chứng 258 5,3±0,5 5,5±0,4 5,4±1,1 0a 23,08 CV (%) 19,60 53,19 26,94 ** Mức ý nghĩa ** * * Giá trị cột có chữ theo sau không khác biệt ý nghĩa theo phép thử DUNCAN.* Khác biệt mức ý nghĩa %; ** Khác biệt mức ý nghĩa 1% 4.6.3 Hiệu tinh dầu sả việc quản lý sâu đục trái bưởi Citripestis sagittiferella điều kiện đồng (điều kiện thực nghiệm diện rộng) Kết bảng 4.7 cho thấy giai đoạn bưởi tuần tuổi, vườn có treo túi tinh dầu sả (TDS) có tỉ lệ trái bị sâu hại thấp có ý nghĩa so với đối chứng Giai đoạn trái tuần tuổi, tỷ lệ trái bị hại nghiệm thức treo 20 túi tinh dầu sả/1.000 m2 có tỉ lệ trái bị hại thấp thấp có ý nghĩa nghiệm thức khơng phun thuốc Giai đoạn trái bưởi 11 tuần tuổi, treo 20 túi tinh dầu sả/1.000 m2 cho hiệu tương đương với đối chứng phun thuốc nông dân tỉ lệ trái bị hại thấp có ý nghĩa đối chứng không phun thuốc Điều chứng tỏ treo tinh dầu sả với mật số từ 20 túi tinh dầu sả/1.000 m2 trở lên quản lý có hiệu sâu đục trái vườn Bảng 4.7 Tỉ lệ trái bị hại vườn thí nghiệm sử dụng tinh dầu sả để quản lý sâu đục trái bưởi Citripestis sagittiferella vườn bưởi Năm roi huyện Kế Sách, tỉnh Sóc Trăng Số trái Tỉ lệ (%) trái bị hại tuần tuổi (tuần) Nghiệm thức quan 11 13 sát 10 túi (1,4 g TDS)/1.000 m2 426 2,26 ab 3,50 ab 4,75 c 4,06 ab 4,68 bc 20 túi (1,4 g TDS)/1.000 m2 397 2,03 ab 2,78 ab 2,82 a 3,12 a 2,54 b a a ab a Xử ký thuốc theo ND 459 1,56 2,15 3,05 2,33 1,64 a c c c c Không xử lý thuốc (Đ/C) 411 4,22 6,80 7,14 6,27 5,12 c CV (%) 39,15 25,62 70,02 40,25 52,89 39,15 Mức ý nghĩa * * * * * Giá trị cột có chữ theo sau không khác biệt ý nghĩa theo phép thử DUNCAN.* Khác biệt mức ý nghĩa % 23 Chương 5: KẾT LUẬN VÀ ĐỀ XUẤT 5.1 Kết luận Về tình hình sâu hại đặc điểm sinh học: Sâu đục trái bưởi xuất 100% nông hộ điều tra Sự gây hại sâu đục trái bưởi có xu hướng gia tăng vào mùa nắng giảm vào mùa mưa năm Thành trùng sâu đục trái Citripestis sagitiferella thuộc dạng ngài Kích thước thành trùng đực nhỏ thành trùng Trứng sâu đục trái Citripestis sagitiferella có hình dạng dẹt gần tròn xếp chồng lên giống vảy cá Ấu trùng sâu đục trái Citripestis sagitiferella gồm tuổi trải qua lần lột xác Nhộng thuộc lớp nhộng màng Vòng đời Citripestis sagitiferella trải qua giai đoạn kéo dài từ 28÷32 ngày Ngài sâu đục trái bắt cặp vào chiều tối Trứng thường đẻ vị trị từ 1/3 trái tính từ trái trở xuống Ấu trùng tuổi sau nở đục nhanh vào lớp vỏ trái bưởi cạnh bên ổ trứng mà không cần di chuyển xa Giai đoạn ấu trùng tuổi trở sau, thuốc hóa học khơng cịn tác dụng phịng trừ lồi dịch hại - Pheromone giới tính ngài Citripestis sagitiferella hỗn hợp hợp chất E11-14:OAc; Z11-14:OAc Z9,E11-14:OAc Hiệu suất trình tổng hợp hai hợp chất Z11-14:OH E11-14:OH 86,7% 89,6% hợp chất Z9,E11-14:OAc - Hiệu hấp dẫn mồi pheromone giới tính tổng hợp ngài Citripestis sagittiferella điều kiện đồng đạt thấp (gần tất nghiệm thức khơng có thành trùng đực vào bẫy) Tinh dầu sả chanh tinh dầu tỏi có hiệu làm giảm tỷ lệ gây hại sâu đục trái điều kiện ngồi đồng Trong đó, kiểu vật liệu chứa bọc PE zipper cho hiệu cao so với ống Eppendorf Kết thí nghiệm diện rộng tinh dầu sả chanh cho thấy nghiệm thức treo 20 túi tinh dầu sả chanh/1000m2 giai đoạn 11 tuần sau xử lý có tỷ lệ trái bị hại thấp có ý nghĩa (P ˂0,05) so với đối chứng khác biệt khơng có ý nghĩa (P ˂ 0,05) so với nghiệm thức xử lý thuốc theo nông dân 5.2 Đề xuất - Tiếp tục phối trộn thành phần với thành phần phụ khác xác định từ phận cánh, thân… nhằm gia tăng hiệu lực đồng pheromone sâu đục trái bưởi Citripestis sagittiferella - Bước đầu giới thiệu tập huấn chuyển giao kỹ thuật cho nông dân đặc biệt vùng chuyên canh cách áp dụng tinh dầu tỏi đặc biệt tinh dầu sả phòng trừ sâu đục trái bưởi diện rộng - Các số liệu nghiên cứu ứng dụng Luận án bổ sung vào tư liệu giảng dạy Bảo vệ thực vật cho trường cao đẳng, đại học sau đại học - Trình diễn mơ hình sử dụng tinh dầu sả tinh dầu tỏi vườn bưởi chuyên canh giúp người nông dân nhận thức việc hạn chế sử dụng thuốc trừ sâu hóa học thay hóa chất tín hiệu, có hiệu kinh tế, an tồn cho mơi trường sinh thái người 24 ... hóa học, tổng hợp đánh giá hiệu ngồi đồng pheromone giới tính sâu đục trái bưởi Citripestis sagitiferella 1.4 Nội dung nghiên cứu Xác định pheromone giới tính sâu đục trái bưởi Citripestis sagitiferella:... hại sâu đục trái bưởi 1.3 Đối tượng phạm vi nghiên cứu - Đối tượng nghiên cứu: Pheromone giới tính sâu đục trái bưởi Citripestis sagitiferella - Phạm vi nghiên cứu: Xác định cấu trúc hóa học, tổng. .. hại sâu đục trái bưởi vùng điều tra - Là cơng trình nghiên cứu xác định thành phần cấu trúc hóa học pheromone giới tính sâu đục trái bưởi đưa quy trình tổng hợp thành phần pheromone giới tính