Mục đích của Luận án là nghiên cứu độc tính cấp và độc tính bán trường diễn của quả Dứa dại trên động vật thực nghiệm. Nghiên cứu tác dụng chống tổn thương gan cấp, xơ gan và một số tác dụng liên quan của quả Dứa dại trên thực nghiệm. Mời các bạn cùng tham khảo!
BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y HÀ NỘI HOÀNG THÁI HOA CƯƠNG NGHIÊN CỨU ĐỘC TÍNH VÀ TÁC DỤNG CHỐNG VIÊM GAN, XƠ GAN CỦA QUẢ DỨA DẠI (Pandanus odoratissimus L.f.) TRÊN THỰC NGHIỆM LUẬN ÁN TIẾN SĨ Y HỌC HÀ NỘI - 2021 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y HÀ NỘI HOÀNG THÁI HOA CƯƠNG NGHIÊN CỨU ĐỘC TÍNH VÀ TÁC DỤNG CHỐNG VIÊM GAN, XƠ GAN CỦA QUẢ DỨA DẠI (Pandanus odoratissimus L.f.) TRÊN THỰC NGHIỆM Chuyên ngành : Dược lý độc chất Mã số : 62720120 LUẬN ÁN TIẾN SĨ Y HỌC Người hướng dẫn khoa học: PGS.TS Vũ Thị Ngọc Thanh PGS.TS Nguyễn Duy Thuần HÀ NỘI - 2021 i LỜI CẢM ƠN Trong trình học tập nghiên cứu hoàn thành luận án này, nỗ lực phấn đấu thân, nhận nhiều giúp đỡ tận tình thầy, cô bạn đồng nghiệp Tôi xin trân trọng cảm ơn Đảng ủy, Ban giám hiệu, phòng Đào tạo sau đại học Trường Đại học Y Hà Nội Đảng ủy, Ban giám hiệu Trường Đại học Y Dược Thái Nguyên tạo điều kiện cho tham gia học tập nghiên cứu suốt thời gian qua Xin trân trọng cảm ơn Thầy Cô giáo, anh chị em kỹ thuật viên Bộ môn Dược lý Trường Đại học Y Hà Nội tạo điều kiện giúp đỡ tơi q trình học tập thực luận án Xin trân trọng cảm ơn PGS TS Nguyễn Trọng Thông, PGS TS Nguyễn Trần Thị Giáng Hương, PGS TS Phạm Thị Vân Anh tận tình hướng dẫn bảo cho suốt trình học tập Bộ mơn Đặc biệt tơi xin dành biết ơn sâu sắc tới PGS TS Vũ Thị Ngọc Thanh PGS TS Nguyễn Duy Thuần, hai Thầy Cơ hướng dẫn tận tình bảo suốt q trình học tập nghiên cứu giúp tơi hồn thành luận án Cuối tơi xin bày tỏ lịng kính trọng biết ơn sâu sắc tới gia đình, bạn bè đồng nghiệp giúp đỡ, động viên vật chất tinh thần suốt q trình học tập nghiên cứu Hồng Thái Hoa Cương ii LỜI CAM ĐOAN Tơi Hồng Thái Hoa Cương, nghiên cứu sinh khóa 32 Trường Đại học Y Hà Nội, chuyên ngành Dược lý độc chất xin cam đoan: Đây luận án thân trực tiếp thực hướng dẫn PGS.TS Vũ Thị Ngọc Thanh PGS.TS Nguyễn Duy Thuần Cơng trình khơng trùng lặp với nghiên cứu khác công bố Việt Nam Các số liệu thông tin nghiên cứu hồn tồn xác, trung thực khách quan, xác nhận chấp thuận sở nơi nghiên cứu Tơi xin hồn tồn chịu trách nhiệm trước pháp luật cam kết Hà Nội, ngày 25 tháng năm 2021 Người viết cam đoan Hoàng Thái Hoa Cương iii MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN i LỜI CAM ĐOAN ii DANH MỤC BẢNG vi DANH MỤC HÌNH ix DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT xiii ĐẶT VẤN ĐỀ CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Bệnh lý viêm gan, xơ gan 1.1.1 Khái niệm 1.1.2 Nguyên nhân 1.1.3 Cơ chế bệnh sinh .5 1.1.4 Chẩn đoán viêm gan mạn, xơ gan 10 1.1.5 Điều trị viêm gan mạn, xơ gan 15 1.2 Mơ hình nghiên cứu thuốc có tác dụng chống viêm gan cấp, xơ gan thực nghiệm 20 1.2.1 Mơ hình nghiên cứu thuốc có tác dụng chống viêm gan cấp 20 1.2.2 Mô hình nghiên cứu thuốc có tác dụng chống xơ gan 26 1.3 Một số thuốc thuốc y học cổ truyền nghiên cứu để điều trị viêm gan .28 1.4 Tổng quan Dứa dại 30 1.4.1 Phân loại thực vật phân bố Dứa dại .30 1.4.2 Thành phần hóa học Dứa dại 31 1.4.3 Công dụng Dứa dại 32 1.4.4 Một số thuốc có Dứa dại 33 1.4.5 Nghiên cứu tác dụng sinh học 34 CHƯƠNG ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 38 2.1 Nguyên liệu nghiên cứu .38 2.2 Thuốc, hóa chất, máy thiết bị phục vụ nghiên cứu .39 iv 2.2.1 Thuốc hóa chất phục vụ nghiên cứu 39 2.2.2 Máy thiết bị phục vụ nghiên cứu 40 2.3 Động vật thực nghiệm 41 2.4 Phương pháp nghiên cứu 41 2.4.1 Nghiên cứu độc tính 42 2.4.2 Nghiên cứu tác dụng chống viêm gan, xơ gan Dứa dại 43 2.4.3 Nghiên cứu số tác dụng dược lý liên quan đến tác dụng chống viêm gan, xơ gan .46 2.5 Xử lý số liệu .52 CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 53 3.1 Nghiên cứu độc tính cấp độc tính bán trường diễn .53 3.1.1 Độc tính cấp 53 3.1.2 Độc tính bán trường diễn PĐE chiết xuất từ Dứa dại .53 3.2 Đánh giá tác dụng chống viêm gan, xơ gan CTP PĐE chiết xuất từ Dứa dại .69 3.2.1 Tác dụng chống viêm gan cấp mơ hình gây viêm gan PAR liều cao 69 3.2.2 Tác dụng chống xơ gan CTP PĐE 81 3.3 Kết số tác dụng dược lý liên quan đến tác dụng chống viêm gan, xơ gan Dứa dại 91 3.3.1 Kết nghiên cứu tác dụng lợi mật Dứa dại 91 3.3.2 Đánh giá tác dụng chống viêm cấp CTP PĐE 93 3.3.3 Tác dụng chống viêm mạn CTP PĐE mơ hình gây u hạt thực nghiệm amiant 96 3.3.4 Tác dụng chống oxy hóa in vitro CTP PĐE chiết xuất từ Dứa dại 97 CHƯƠNG 4: BÀN LUẬN 99 4.1 Độc tính CTP PĐE chiết xuất từ Dứa dại 100 4.1.1 Độc tính cấp CTP PĐE .100 4.1.2 Độc tính bán trường diễn PĐE 102 4.2 Tác dụng chống viêm gan cấp CTP PĐE chiết xuất từ Dứa dại .111 4.2.1 Bàn luận mơ hình nghiên cứu 111 v 4.2.2 Tác dụng bảo vệ gan .114 4.2.3 Tác dụng làm tăng phục hồi tổn thương gan 116 4.3 Tác dụng chống xơ gan mơ hình gây xơ gan CCl4 118 4.3.1 Bàn luận mơ hình nghiên cứu 118 4.3.2 Tác dụng chống xơ gan mơ hình gây xơ gan CCl4 CTP PĐE119 4.4 Một số tác dụng dược lý liên quan đến tác dụng chống viêm gan, xơ hóa gan Dứa dại 125 4.4.1 Tác dụng lợi mật CTP PĐE .125 4.4.2 Tác dụng chống viêm cấp CTP PĐE 129 4.4.3 Tác dụng chống viêm mạn CTP PĐE 133 4.4.4 Tác dụng chống oxy hóa in vitro 135 KẾT LUẬN 141 KIẾN NGHỊ 143 TÀI LIỆU THAM KHẢO 144 DANH MỤC CÁC CÔNG TRÌNH KHOA HỌC ĐÃ ĐƯỢC CƠNG BỐ CĨ LIÊN QUAN ĐẾN LUẬN ÁN .162 PHỤ LỤC 163 vi DANH MỤC BẢNG Bảng 1.1 Hệ thống điểm Knodell - Ishak viêm gan mạn 11 Bảng 1.2 Phân độ viêm gan theo HAI 12 Bảng 1.3 Phân loại xơ gan theo Child-Pugh 15 Bảng 1.4 Các chất độc với gan dùng để gây tổn thương gan thực nghiệm chuột cống trắng 22 Bảng 3.1 Ảnh hưởng PĐE đến thể trọng chuột 54 Bảng 3.2 Ảnh hưởng PĐE đến số lượng hồng cầu máu chuột 55 Bảng 3.3 Ảnh hưởng PĐE đến hàm lượng huyết sắc tố máu chuột 56 Bảng 3.4 Ảnh hưởng PĐE đến thể tích trung bình hồng cầu máu chuột 56 Bảng 3.5 Ảnh hưởng PĐE đến số lượng bạch cầu máu chuột 57 Bảng 3.6 Ảnh hưởng PĐE đến công thức bạch cầu máu chuột 58 Bảng 3.7 Ảnh hưởng PĐE đến số lượng tiểu cầu máu chuột 59 Bảng 3.8 Ảnh hưởng PĐE đến hoạt độ AST (GOT) máu chuột 60 Bảng 3.9 Ảnh hưởng PĐE đến hoạt độ ALT (GPT) máu chuột 60 Bảng 3.10 Ảnh hưởng PĐE đến nồng độ bilirubin toàn phần máu chuột 61 Bảng 3.12 Ảnh hưởng PĐE đến nồng độ cholesterol máu chuột 62 Bảng 3.13 Ảnh hưởng PĐE đến nồng độ creatinin máu chuột 63 Bảng 3.14 Hình thái vi thể gan chuột sau tuần uống mẫu thử 64 Bảng 3.15 Hình thái vi thể thận chuột sau tuần uống mẫu thử 66 Bảng 3.16 Hình thái vi thể gan chuột sau tuần ngừng uống mẫu thử 67 Bảng 3.17 Hình thái vi thể thận chuột sau tuần ngừng uống mẫu thử 68 Bảng 3.18: Ảnh hưởng CTP PĐE lên hoạt độ AST, ALT huyết chuột bị gây độc PAR 69 Bảng 3.19: Ảnh hưởng CTP PĐE lên hình ảnh mô bệnh học gan chuột bị gây độc PAR 70 vii Bảng 3.20: Ảnh hưởng CTP PĐE lên hoạt độ AST ALT huyết chuột sau gây độc PAR ngày 74 Bảng 3.21: Ảnh hưởng CTP PĐE lên hình ảnh mô bệnh học gan chuột sau gây độc PAR ngày 75 Bảng 3.22: Ảnh hưởng CTP PĐE lên hoạt độ AST ALT huyết chuột sau gây độc PAR ngày 78 Bảng 3.23: Ảnh hưởng CTP PĐE lên hình ảnh mô bệnh học gan chuột sau gây độc PAR ngày 79 Bảng 3.24 Ảnh hưởng CTP PĐE đến trọng lượng tương đối gan chuột mơ hình gây xơ gan thực nghiệm CCl4 81 Bảng 3.25 Ảnh hưởng CTP PĐE đến hoạt độ ALT máu chuột mơ hình gây xơ gan thực nghiệm CCl4 82 Bảng 3.26 Ảnh hưởng CTP PĐE đến hoạt độ AST máu chuột mơ hình gây xơ gan thực nghiệm CCl4 83 Bảng 3.27 Ảnh hưởng CTP PĐE đến nồng độ albumin máu chuột mơ hình gây xơ gan thực nghiệm CCl4 83 Bảng 3.28 Ảnh hưởng CTP PĐE đến nồng độ cholesterol toàn phần máu chuột mơ hình gây xơ gan thực nghiệm CCl4 84 Bảng 3.29 Ảnh hưởng CTP PĐE đến nồng độ bilirubin toàn phần máu chuột mơ hình gây xơ gan thực nghiệm CCl4 85 Bảng 3.30 Ảnh hưởng CTP PĐE đến số lượng bạch cầu máu chuột mơ hình gây xơ gan thực nghiệm CCl4 85 Bảng 3.31 Ảnh hưởng CTP PĐE đến số lượng hồng cầu hàm lượng huyết sắc tố máu chuột mơ hình gây xơ gan thực nghiệm CCl4 86 Bảng 3.32 Ảnh hưởng CTP PĐE đến hàm lượng hydroxyprolin (Hyp) gan chuột mơ hình gây xơ gan thực nghiệm CCl4 87 viii Bảng 3.33 Ảnh hưởng CTP PĐE đến lượng collagen type IV gan chuột mơ hình gây xơ gan thực nghiệm CCl4 87 Bảng 3.34: Ảnh hưởng CTP PĐE đến mơ bệnh học gan chuột mơ hình gây xơ gan thực nghiệm CCl4 88 Bảng 3.35 Ảnh hưởng CTP PĐE đến trọng lượng dịch mật túi mật chuột sau gây độc ngày 91 Bảng 3.36 Ảnh hưởng CTP PĐE đến trọng lượng dịch mật túi mật chuột sau gây độc ngày 92 Bảng 3.37 Độ tăng thể tích chân chuột sau gây viêm 93 Bảng 3.38 Mức độ ức chế phản ứng phù CTP PĐE Dứa dại 94 Bảng 3.39 Ảnh hưởng CTP PĐE lên thể tích dịch rỉ viêm, số lượng bạch cầu hàm lượng protein dịch rỉ viêm 95 Bảng 3.40 Trọng lượng trung bình u hạt thực nghiệm 96 Bảng 3.41 Khả dọn gốc tự DPPH CTP PĐE 97 Bảng 3.42 Kết dọn gốc tự anion superoxid của CTP PĐE 97 ... DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y HÀ NỘI HOÀNG THÁI HOA CƯƠNG NGHIÊN CỨU ĐỘC TÍNH VÀ TÁC DỤNG CHỐNG VIÊM GAN, XƠ GAN CỦA QUẢ DỨA DẠI (Pandanus odoratissimus L.f.) TRÊN THỰC NGHIỆM Chuyên... L.f.) thực nghiệm? ?? với mục tiêu: Nghiên cứu độc tính cấp độc tính bán trường diễn Dứa dại động vật thực nghiệm Nghiên cứu tác dụng chống tổn thương gan cấp, xơ gan số tác dụng liên quan Dứa dại. .. đến tác dụng chống viêm gan, xơ gan Dứa dại 91 3.3.1 Kết nghiên cứu tác dụng lợi mật Dứa dại 91 3.3.2 Đánh giá tác dụng chống viêm cấp CTP PĐE 93 3.3.3 Tác dụng chống viêm