tCvn T i ê u c h u ẩ n V i ệ t N a m TCVN 4836 : 1989 Thị t và sản phẩm thị t Phơng pháp xác đị nh hàm lợng clorua Hà Nội - 1989 T I ê u c h u ẩ n v I ệ t n a m tcvn 4836 : 1989 TCVN 4836 : 1989 2 Cơ quan biên soạn: Trung tâ m tiêu chuẩn chất lợng Cơ quan trì nh duyệ t: Tổ ng cục Tiêu Chuẩn - Đo lờng - Chất lợng. Cơ quan xé t duyệ t và ban hành: Uỷ ban Khoa học và kỹ thuật Nhà nớc Quyết đ ị nh ban hành số 702/QĐ ngày 25 tháng 12 năm 1989 TCVN 4836 : 1989 3 T I ê u c h u ẩ n v I ệ t n a m tcvn 4836 : 1989 ISO 1941 - 1981 Thị t và sản phẩm thị t. Phơng pháp xác đị nh hàm lợng clorua Meat and meat products. Determination of cloride content Tiêu chuẩn này quy đ ị nh phơ ng pháp chuẩn đ ể xác đ ị nh hàm lợng clorua của thị t và sản phẩm thị t Tiêu chuẩn này phù hợp với ISO 1941 - 1981. 1 Đị nh nghĩ a Hàm lợng clorua của thị t và sản phẩm thị t là hàm lợng clorua toàn phần đ ợc xác đ ị nh theo phơ ng pháp quy đ ị nh trong tiêu chuẩn này và đ ợc biểu thị bằng phần trăm khối lợng theo natri clorua. 2 Nguyên lý của phơ ng pháp Chiết xuất một lợng câ n với nớc nóng và kết tủa các protein. Sau khi lọc và axit hoá, thêm vào phần chiết một lợng d dung dị ch bạc nitrat và chuẩn đ ộ với dung dị ch kali thioxianat. 3 Hoá chất và thuốc thử Tất cả các hoá chất phải là tinh khiết phâ n tí ch. Nớc cất hoặ c nớc có đ ộ tinh khiết tơ ng đ ơ ng 3.1 Nitrobenzen 3.2 Dung dị ch axit nitric nồng đ ộ xấp xỉ 4 mol/ lí t (Có thể coi là " dung dị ch khoảng 4N" Trộn một thể tí ch axit nitric đ ậm đ ặ c (1.39 g/ml = 20 = 1.42 g/ml) với 3 thể tí ch nớc. 3.3 Dung dị ch kết tủa protein 3.3.1 Thuốc thử 1 TCVN 4836 : 1989 4 Hoà vào nớc 106 g kali hexaxi anoferat (II) trihidrat( K 4 Fe(CN) 6 . 3H 2 O), chuyển toàn bộ khối lợng đ ó sang bì nh đ ị nh mức dung tí ch 1000 ml và thêm nớc đ ến vạch mức. 3.3.2 Thuốc thử 2 Hoà 220 g kèm axetat [Zn(CH 3 COO). 2 2H 2 O] vào nớc và thêm 30 ml axit axetic băng. Chuyển toàn bộ khối lợng đ ó sang bì nh đ ị nh mức dung tí ch 100 ml và thêm nớc đ ến vạch mức. 3.4 Bạc nitrat (AgNO 3 ) dung dị ch thể tí ch chuẩn. c(AgNO 3 ) = 0,1 mol/1 (có thể coi là dung dị ch chuẩn 0,1 N) Hoà vào nớc 16.989 g AgNO 3 trớc đó đã đợc sấy khô 2 giờ ở nhiệt đ ộ 150 0 C và đ ể nguội trong bì nh hút ẩm. Chuyển toàn bộ sang bì nh đ ị nh mức dung tí ch 1000 ml và thêm nớc đ ến vạch mức. 3.5 Dung dị ch thể tí ch chuẩn kali thioxianat c (KSCN) = 0,1 mol/l ( có thể coi là dung dị ch chuẩn 0,1N) Hoà vào nớc khoảng 9,7 g KSCN. Chuyển toàn bộ khối lợng sang bì nh đ ị nh mức dung tí ch 1000 ml và thêm nớc đ ến vạch mức. Chuẩn dung dị ch chí nh xác đ ến 0,0001 mol/l với dung dị ch AgNO 3 ( 3.4) dùng dung dị ch sắ t (III) amoni sunfat làm chất chỉ thị ( 3.7). 3.6 Dung dị ch natri hiđ roxit 1 mol/l (có thể coi là dung dị ch 1N) 3.7 Sắ t (III) amoni sunfat [(NH 4 Fe(SO 4 ) 2 . 12 H 2 O] dung dị ch bão hoà ở nhiệt đ ộ phòng. 3.8 Than hoạt tí nh. 4 Thiế t bị Sử dụng các thiết bị thông thờng của phòng thí nghiệm và các thiết bị sau: 4.1 Máy xay thị t, loại dùng cho phòng thí nghiệm có lắ p một tấm đ ĩ a đ ợc khoan lỗ, các lỗ có đ ờng kí nh không lớn hơ n 4 mm. 4.2 Bì nh cầu đ ị nh mức 4.3 Bì nh nón, dung tí ch khoảng 250 ml 4.4 Buret, dung tí ch 25 hoặ c 50 ml 4.5 Pipet đ ị nh mức, dung tí ch 20 ml. 4.6 Máy đ o pH 4.7 Nồi đ un cách thuỷ 4.8 Câ n phâ n tí ch 5 Lấy mẫu 5.1 Lấy í t nhất 200g mẫu từ mẫu đ ại diện. TCVN 4836 : 1989 5 5.2 Bảo quản mẫu Nếu cần thiết, cần lu giữ mẫu sao cho không đ ợc làm h hỏng mẫu và làm thay đ ổ i thành phần của mẫu. 6 Cách tiế n hành 6.1 Chuẩn bị mẫu thử Làm đ ề u mẫu bằng cách cho mẫu đ i qua cối xay thị t í t nhất 2 lần và trộn. Cho đ ầy mẫu vào một bì nh có nút đ ậy kí n khí và bảo quản sao cho không đ ợc làm hỏng và làm thay đ ổ i thành phần của mẫu. Phâ n tí ch mẫu càng sớm càng tốt ngay sau khi làm đ ồng đ ề u mẫu, nhng không đ ợc quá 24 giờ. 6.2 Lợng mẫu câ n Câ n khoảng 10 g từ mẫu thử, chí nh xác đ ến 0,001 g (6.1) và chuyển sang bì nh nón (4.3). 6.3 Tách protein Thêm lần lợt 0,5 g than hoạt tí nh (3.8) và 100 ml nớc nóng vào lợng mẫu câ n (6.2). Đun nóng bì nh và phần mẫu chứa trong bì nh 15 phút trong nồi đ un cách thuỷ (4.7) và thỉ nh thoảng lắ c bì nh. Để bì nh chứa mẫu nguội đ ến nhiệt đ ộ phòng rồi lần lợt thêm vào 2 ml thuốc thử 1 (3.3.1) và 2 ml thuốc 2 (3.3.2), trộn kỹ sau mỗi lần thêm. Dùng dung dị ch natri hidroxit (3.6) đ iề u chỉ nh pH đ ến khoảng 7,5 đ ến 8,3 kiểm tra đ ộ pH bằng máy đ o pH (4.6). Để yên bì nh (có chứa mẫu) trong 30 phút ở nhiệt đ ộ phòng, sau đ ó chuyển toàn bộ khối lợng mẫu trong bì nh sang bì nh đ ị nh mức (4.2) và pha loãng với nớc đ ến vạch mức. Trộn kỹ và lọc qua giấy đ ã gấp nếp. Chú thí ch: Dị ch lọc có thể đ ợc sử dụng đ ể xác đ ị nh hàm lợng nitrat và nitrit. Nếu exit ascobic có mặ t trong mẫu thử với nồng đ ộ dới 0.1%, hoặ c nếu phần chiết là chỉ sử dụng đ ể xác đ ị nh clorua thì không cần thiết thêm than hoạt tí nh vào quá trì nh chuẩn bị nớc lọc. Hơ n nữa, việc đ iề u chỉ nh đ ộ pH là không cần thiết nếu chỉ đ ể thực hiện việc xác đ ị nh clorua. 6.4 Tiến hành xác đ ị nh Cho 20 ml dị ch lọc vào bì nh nón (4.3) bằng pipet và thêm vào đ ó 5ml dung dị ch axit nitric từ ống đ ong chia đ ộ ( 3.2) và 1 ml dung dị ch sắ t ( III) amoni sunfat ( 3.7) làm chất chỉ thị . Dùng pipet lấy 20 ml dung dị ch bạc nitrat ( 3.4) cho vào bì nh nón. Thêm vào 3ml nitro benzen ( 3.1) lấy từ ống đ ong chia đ ộ và trộn kỹ. Lắ c mạnh đ ể làm đ ông kết tủa. Chuẩn đ ộ dung dị ch trong bì nh nón với dung dị ch kali thioxi anat (3.5) cho đ ến khi xuất hiện màu hồng bề n vững. Chi lại thể tí ch dung dị ch kali thioxi anat đ ã dùng đ ể chuẩn đ ộ, chí nh xác tới 0.05 ml. 6.5 Thử trắ ng Tiến hành phé p thử trắ ng bắ t đ ầu từ mục 6.3 sử dụng cùng thể tí ch dung dị ch bạc nitrat ( 3.4). TCVN 4836 : 1989 6 6.6 Số phé p xác đ ị nh : tiến hành 2 phé p xác đ ị nh trên cùng một mẫu thử ( 6.1) 7 Trì nh bầy kế t quả Hàm lợng clorua của mẫu, tí nh theo natri clorua phần trăm khối lợng bằng: xc m VV xxc m xxVV 12 12 44,58 100 20 200 )(05844,0 = Trong đ ó: V 1 : là thể tí ch, tí nh bằng mililit, của dung dị ch kali thioxi anat ( 3.5) đ ã sử dụng hết trong khi xác đ ị nh ( 6.4) V 2 : là thể tí ch, tí nh bằng mililit, của dung dị ch kali thioxi anat ( 3.5) đ ã sử dụng hết trong khi làm phé p thử mẫu trắ ng ( 6.5); c là nồng đ ộ chí nh xác của dung dị ch kali thioxianat ( 3.5) tí nh bằng mol/l; m là khối lợng tí nh bằng gam của lợng câ n mẫu thử; Lấy kết quả trung bì nh số học của 2 phé p xác đ ị nh (6.6) với đ iề u kiện thoả mãn yêu cầu đ ộ lặ p lại ( xem 7.2) Báo các kết quả thử lấy chí nh xác đ ến 0,05 g cho 100g mẫu thử. 7.2 Độ lặ p lại Chênh lệch kết quả giữa hai phé p xác đ ị nh tiến hành đ ồng thời hoặ c tiếp nhau nhanh do cùng mọt ngời phâ n tí ch không đ ợc vợt quá 0,2 natri clorua cho 100 g mẫu thử. 8 Biên bản thử Biên bản thử cần chỉ ra phơ ng pháp đ ã sử dụng và kết quả thu đ ợc. Trong biên bản cũng cần đ ề cập tới bất cứ đ iề u kiện thao tác nào mà không đ ợc qui đ ị nh trong tiêu chuẩn này hoặ c coi nh tự ý, cũng nh bất cứ chi tiết nào mà có thể đ ã làm ảnh hởng tới kết quả. Biên bản thử cần bao gồm toàn bộ các chi tiết yêu cầu cần đ ể nhận biết mẫu thử một cách đ ầy đ ủ. . tCvn T i ê u c h u ẩ n V i ệ t N a m TCVN 4836 : 1989 Thị t và sản phẩm thị t Phơng pháp xác đị. đị nh hàm lợng clorua Hà Nội - 1989 T I ê u c h u ẩ n v I ệ t n a m tcvn 4836 : 1989 TCVN 4836 : 1989 2 Cơ quan biên soạn: Trung tâ m tiêu chuẩn chất lợng