Thí nghiệm được tiến hành với mục đích tìm hiểu diễn biến quá trình ủ chất thải chăn nuôi gà và hiệu quả tiêu diệt mầm bệnh, là bước đầu trong mục tiêu xây dựng mô hình xử lý chất thải cho các trại chăn nuôi gia cầm quy mô vừa và nhỏ, sử dụng phân ủ làm phân bón nông nghiệp. Chất thải (lót chuồng) được thu thập từ 2 trại chăn nuôi gà thịt.
CHĂN NUÔI ĐỘNG VẬT VÀ CÁC VẤN ĐỀ KHÁC 13 14 15 16 virus gây bệnh Marek gà ni cơng nghiệp phía Bắc Việt Nam giải pháp nâng cao hiệu lực vaccine phòng bệnh Luận án Tiến sĩ Thú y Trường Đại học Nông lâm Thái Nguyên Ryan B., Joiner B.L and Ryan Jr.T.A (2000) Minitab statistical software Release 13 Duxbury Press Schat K.A and Xing Z (2000) Specific and nonspecific immune response to Marek’s disease virus Dev Imm., 24: 201-21 Schat K.A and Markowski-Grimsrud C.J (2001) Immune response to Marek’s disease virus infection Cur Top Mic Imm., 255: 91-20 Schat K.A and Nair V (2008) Marek’s disease in Saif Y.M., Fadly A.M., Glisson J.R., McDougald, Noland L.K, Snayne D.E Diseases of poultry, 12th Ed, Blackwell, USA, Pp 452-14 17 Suresh P., Rajeswar J.J., Sukumar K., Srinivasan P and Harikrishnan T.J (2013) Incidence of Marek’s disease in vaccinated flocks Int J Food, Agr Vet Sci., 3(1): 20002 18 Stephen W Walkden-Brown, Aminul Islam, Peter J Groves, Ambrosio Rubite, Sue M Sharpe and Susan K Burgess (2013) Development, Application, and Results of Routine Monitoring of Marek’s Disease Virus in Broiler House Dust Using Real-Time Quantitative PCR Avian Diseases, 57: 544-54 19 Sharma J.M and Stone H.A (1972) Genetic resistance to Marek’s disease Delineation of the response of genetically resistant chickens to Marek’s disease infection Avian diseases, 16: 894-06 Ủ SINH HỌC CHẤT THẢI CHĂN NUÔI GIA CẦM Hồ Thị Kim Hoa1, Lê Hữu Ngọc 1*, Dương Chánh Tây1, Nguyễn Thị Huệ 1, Vũ Thuận Thành1 Huỳnh Trung Tín1 Ngày nhận báo: 13/01/2021 - Ngày nhận phản biện: 20/01/2021 Ngày báo chấp nhận đăng: 05/02/2021 TÓM TẮT Thí nghiệm tiến hành với mục đích tìm hiểu diễn biến q trình ủ chất thải chăn ni gà hiệu tiêu diệt mầm bệnh, bước đầu mục tiêu xây dựng mơ hình xử lý chất thải cho trại chăn nuôi gia cầm quy mô vừa nhỏ, sử dụng phân ủ làm phân bón nơng nghiệp Chất thải (lót chuồng) thu thập từ trại chăn nuôi gà thịt Chất thải trại phân thành lơ thí nghiệm: Lơ phân nguyên liệu, suốt trình ủ không trộn phân; Lô 2, 4, trộn thêm sản phẩm vi sinh EM; Lô 5, 6, trộn thêm trấu; Lô 3, 4, đảo trộn tuần Chất thải nguyên liệu kiểm tra hàm lượng C N Số lượng số nhóm vi sinh vật điện Salmonella chất thải nguyên liệu mẫu phân lô kiểm tra Kết thí nghiệm cho thấy sau 2-3 ngày ủ, nhiệt độ đống phân tăng cao >50°C trì khoảng 55-65°C 21 ngày Nhờ vậy, số lượng vi khuẩn đường ruột giảm đáng kể Phân sau ủ 21 ngày không phát vi khuẩn gây bệnh Salmonella tất mẫu ủ, nhiều mẫu ủ khơng tìm thấy E coli Việc bổ sung thêm trấu trộn đống phân ủ tuần làm tăng trình phân huỷ sinh học chất thải, làm giảm mùi hôi phân nhanh chóng Việc bổ sung EM vào chất thải khơng cho thấy hiệu đáng kể lên q trình sinh nhiệt diệt khuẩn, không kết hợp với bổ sung trấu trộn đống phân Từ khóa: Composting, gia cầm, ủ phân hiếu khí, phân bón hữu ABSTRACT Composting poultry manure The experiment was conducted to study the process of poultry manure composting and its effect on killing pathogens This was a first step in the aim to develop a model of manure management for small and medium-scaled poultry farms and use of the compost as biofertilizers Manure/litter was collected from broiler farms The materials from each farm were divided into different treatments Treatment included raw manure and stayed unturned during 21-day composting An EM product was mixed with the materials in Treatment 2, 4, and 8; and rice husks were Trường Đại học Nơng Lâm Thành phố Hồ Chí Minh * Tác giả liên hệ: Lê Hữu Ngọc, Trường Đại học Nông Lâm TP Hồ Chí Minh; ĐT: 0918764211; Email: lhngoc@hcmuaf.edu.vn 76 KHKT Chăn nuôi số 263 - tháng năm 2021 CHĂN NUÔI ĐỘNG VẬT VÀ CÁC VẤN ĐỀ KHÁC added in Treatment 5, 6, and Composting piles in Treatment 3, 4, and were weakly turned The results showed that after to days of incubation, the temperature of the piles increased to >50°C and remained at 50-65°C until day 21 The number of manure bacteria remarkably decreased Salmonella was not detected from all 21-day compost samples, neither did E coli in samples of several treatments The addition of rice husks and weekly mixing compost piles helped to increase the biodegradation of manure and quickly reduce manure odor The addition of EM, without combination with rice husks and turning the pile, did not seem to produce a significant effect on the heat generation and microbial Keywords: Biofertilizer, composting, manure, poultry ĐẶT VẤN ĐỀ Theo Bộ Nông nghiệp Phát triển nông thôn, năm 2019 Việt Nam có đàn gia cầm phát triển tốt: sản lượng đạt 1,3 triệu tấn, tăng 15% so với năm 2018; thịt gia cầm ước đạt 1.278,6 nghìn tấn, tăng 16,5% sản lượng trứng đạt 13,3 tỷ quả, tăng 14% Cùng với phát triển kinh tế, chăn nuôi gia cầm làm tăng áp lực giải ô nhiễm môi trường từ chất thải chăn nuôi Phân gia cầm mơt nguồn phân bón hữu nơng nghiệp truyền thống giới Ngồi việc chứa hàm lượng cao khoáng đa lượng N, P, K, phân gia cầm chứa calcium, magnesium, sulfur vi khoáng (Zhang ctv, 2017) Ở Việt Nam, phân gia cầm sử dụng phổ biến làm phân bón rau màu ăn (Tran Thi Dan ctv, 2004; Nguyễn Trung Thịnh ctv, 2019) Tuy nhiên, phân chưa xử lý hợp lý trước bón cây, việc dùng phân gà/cút bón cịn nhiều nhược điểm, bị nhiễm khơng khí mùi hôi, ô nhiễm chất hữu cho đất nguồn nước Ngồi ra, phân gia cầm có chứa vi sinh vật ký sinh trùng, có nhiềm mầm bệnh cho gia cầm người Ủ phân hiếu khí (composting) cách xử lý phân hiệu Trong trình này, vi sinh vật – đặc biệt vi khuẩn nấm, chuyển chất hữu phân thành chất dễ hấp thu cho trồng, dùng phổ biến để lót đất (soil conditioning) nguồn phân bón sinh học (biofertilizer) q giá Phân sau ủ khơng cịn mùi có số lượng mầm bệnh giảm đáng kể (Parr ctv, 1994) KHKT Chăn nuôi số 263 - tháng năm 2021 Đề tài tiến hành với mục đích tìm hiểu diễn biến q trình ủ chất thải chăn nuôi gà hiệu tiêu diệt mầm bệnh để tối ưu hố quy trình ủ chất thải gia cầm - dễ áp dụng hiệu quả, làm mơ hình xử lý chất thải cho trại chăn nuôi quy mô vừa nhỏ VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Bố trí thí nghiệm Thí nghiệm (TN) lặp lại lần: Lần 1, nguyên liệu ủ chất thải chuồng gà (hay gọi phân) thu gom từ trại chăn ni gà TP Hồ Chí Minh, có thành phần gồm khoảng 85% phân gà, 10% trấu 5% mùn cưa; Lần 2, chất thải chuồng gà thu gom từ trại chăn ni gà Đồng Nai có thành phần gồm khoảng 85% phân gà 15% trấu Trước phân lô TN, mẫu chất thải thu để phân tích tiêu C N, số tiêu vi sinh vật Chất thải phân thành khối ủ (lơ), khối khoảng 100kg, có kích thước 1,2x0,7x0,5m Các lơ ủ phủ bạt (bằng nhựa) bố trí cách khoảng 1m Thí nghiệm chia thành nhiều lô để khảo sát tác dụng lên trình ủ phân yếu tố: 1) Bổ sung vi sinh vật hữu hiệu (EM, effective microorganisms); 2) Bổ sung 5kg trấu vào số lô để tăng tỷ lệ C cho phân tăng mức độ xốp thoáng đống phân; 3) Đảo trộn đống phân Mỗi đợt TN, chất thải chia thành lô ủ sau: Lô 1: Không đảo trộn (đối chứng) 77 CHĂN NUÔI ĐỘNG VẬT VÀ CÁC VẤN ĐỀ KHÁC Lô 2: Bổ sung EM, không đảo trộn Lô 3: Được đảo trộn Lô 4: Bổ sung EM, đảo trộn Lô 5: Bổ sung trấu Lô 6: Bổ sung trấu EM Lô 7: Bổ sung trấu, đảo trộn Lô 8: Bổ sung trấu, EM, đảo trộn Sản phẩm EM1 (EMRO, Việt Nam) pha theo hướng dẫn nhà sản xuất ủ với rỉ mật đường nước (1:1:18) 5-7ngày 25l dịch ủ trộn cho 100kg chất thải để ủ * Kiểm tra tính chất vật lý đống ủ Nhiệt độ độ ẩm tương đối (RH) lô ủ đo hàng ngày vào 16 Mỗi lần đo, dụng cụ đo cắm sâu khoảng 15cm (từ bề mặt đống ủ), vị trí khác đống ủ, sau số liệu tính trung bình cho lần đo Nhiệt độ đống ủ hàng ngày số trung bình lần đo ngày * Kiểm tra hàm lượng C N Các tiêu C N chất thải trước phân lô TN kiểm tra Mẫu gửi kiểm tra Trung tâm Công nghệ Quản lý Môi trường Tài nguyên, Đại học Nông Lâm TPHCM Hàm lượng C mẫu phân tích theo TCVN 8557:2010 N theo TCVN 9294:2012 * Kiểm tra tiêu vi sinh vật lô ủ Trước sau kết thúc ủ, mẫu phân thu thập để kiểm tra tiêu vi sinh vật trứng ký sinh trùng Mẫu để kiểm tra số lượng vi khuẩn nấm pha loãng cách lấy 25g mẫu cho vào 225ml nước muối sinh lý pha loãng thập phân nước muối sinh lý Tổng số vi khuẩn hiếu khí (TSVKHK) kiểm tra phương pháp trải mẫu (plate counting) Mẫu độ pha loãng liên tiếp cấy trải lên đĩa thạch PCA (plate count agar, Merk, 1.05463.0500) Mỗi mẫu cấy lặp lại hai lần Sau ủ 37oC 78 24 giờ, số lượng khuẩn lạc đĩa có 30-300 khuẩn lạc đếm Coliforms mẫu đếm phương pháp pha loãng tới hạn - MPN (most probable number) Mẫu pha loãng cấy ống canh lauryl tryptose broth (HiMedia, M080) có chứa ống durham, ủ 37oC/24 Các ống canh LTB có vi khuẩn mọc sinh cấy chuyển sang ống canh brilliant green bile broth (Merck, 1.05454.0500) có chứa ống durham, ủ 37oC/24 Quy trình kiểm tra đọc kết theo hướng dẫn TCVN 6404-2008 Vi Khuẩn E coli kiểm tra cách trải 0,1ml mẫu pha loãng lên đĩa thạch eosin methylene blue (Merck, 1.01347.0500), ủ 37oC/24 Các khuẩn khuẩn lạc có màu tím đen có ánh kim đếm Hai khuẩn lạc màu tím ánh kim từ đĩa kiểm tra với phản ứng IMViC (indole, methyl res, Voges Proskauer, citrate) để xác định E coli Sự diện vi khuẩn Salmonella mẫu kiểm tra theo TCVN 71852002 Cho 25g mẫu cho vào 225ml canh peptone đệm ủ 37oC/24 Sau đó, 1ml mẫu tăng sinh cấy chuyển vào canh Rappaport (Oxoid, CM0669), ủ 43oC/24 giờ; canh Tetrathionate (Oxoid, CM0029), ủ 37oC/24 Sau đó, canh khuẩn cấy chuyển sang môi trường xylose lysin deoxycholate (X.L.D., Oxoid, CM0469), ủ 37oC/24 Từ đĩa X.L.D., hai khuẩn lạc có màu hồng tâm đen cấy kiểm tra với môi trường TSI (triple sugar iron, Merck, 1.03915.0500) IMViC Cuối gốc vi khuẩn nghi ngờ Salmonella xác định phản ứng ngưng kết nhanh phiến kính với huyết đa giá Salmonella Viện Pasteur TPHCM Tổng số nấm mốc nấm men kiểm tra cách cấy trải 0,1ml mẫu pha loãng lên thạch sabouraud dextrose agar (Oxoid, CM0041), ủ 30oC/2-3 ngày Tất kiểm tra định lượng vi sinh vật lặp lại lần, kết tính trung bình trình bày theo đơn vị CFU (colony forming unit) 1g KHKT Chăn nuôi số 263 - tháng năm 2021 CHĂN NUÔI ĐỘNG VẬT VÀ CÁC VẤN ĐỀ KHÁC Trứng ký sinh trùng cầu trùng kiểm tra theo phương pháp phù 2g chất thải cho vào 10ml nước muối bão hoà, khuấy trộn lọc qua rây (khoảng 81 lỗ/cm2) Phần nước lọc cho đầy vào ống nghiệm, phiến kính mỏng đặt lên ống phải tiếp xúc với mẫu Mẫu để yên 30 phút Phiến kính mỏng áp lên kính soi kính hiển vi độ phóng đại 400x để tìm trứng ký sinh trùng Mỗi mẫu kiểm tra lần (triplicate) KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 3.1 Chỉ tiêu C/N Kết phân tích mẫu chất thải chuồng gà (chất thải nguyên liệu) trước ủ cho tỷ lệ C:N 16,7 (đợt 1) 22,7 (đợt 2) Mẫu chất thải trộn thêm trấu (dùng cho lơ 5, 6, 8) có tỷ lệ C:N 30,7 (đợt 1) 26,8 (đợt 2) Theo Parr ctv (1994), trình phân huỷ chất thải hữu cơ, vi sinh vật cần C cho lượng nguyên liệu tổng hợp - tăng sinh khối Chúng cần N để tổng hợp protein axít nucleic Quá trình phân huỷ chất hữu nhanh hiệu cao tỷ lệ C:N khoảng 15-35 Tỷ lệ thấp dẫn đến giải phóng ammonia mơi trường, tỷ lệ C:N cao làm giảm tốc độ phân huỷ sinh học 3.2 Độ ẩm nhiệt độ đống ủ Độ ẩm tương đối (RH) đống ủ đo hàng ngày vào 16 Độ ẩm đống ủ trì khoảng 50-60% Khi RH