Bài viết đưa ra một số biện pháp kỹ thuật cho quy trình trồng và chăm sóc cây con lan Giả hạc Di Linh gieo hạt trong vườn ươm một cách hiệu quả làm tiền đề cho các nghiên cứu liên quan tới việc trồng và chăm sóc một số loại lan Giả hạc gieo hạt khác trong tương lai.
Tạp chí Khoa học Đại học Huế: Khoa học Tự nhiên Tập 130, Số 1A, 107–115, 2021 pISSN 1859-1388 eISSN 2615-9678 MỘT SỐ BIỆN PHÁP KỸ THUẬT TRỒNG VÀ CHĂM SÓC CÂY LAN GIẢ HẠC DI LINH (Dendrobium anosmum DL.) TỪ CÂY CON IN VITRO Nguyễn Thị Diễm1*, Nguyễn Thị Oanh1, Hồ Thanh Tâm2,3, Nguyễn Hữu Thọ4, Nguyễn Thị Kim Cúc1 Viện Công nghệ sinh học, Đại học Huế, Tỉnh lộ 10, Phú Thượng, Phú Vang, Thừa Thiên Huế, Việt Nam Viện Sáng kiến Sức khoẻ Toàn cầu, Trường Đại học Duy Tân, 254 Nguyễn Văn Linh, Thanh Khê, Đà Nẵng, Việt Nam Khoa Dược, Trường Đại học Duy Tân, 254 Nguyễn Văn Linh, Thanh Khê, Đà Nẵng, Việt Nam Khoa Nông Lâm nghiệp, Trường Cao đẳng Cơ điện, Xây dựng Nông lâm Trung Bộ, QL1A, Cát Hanh, Phù Cát, Bình Định, Việt Nam * Tác giả liên hệ Nguyễn Thị Diễm (Ngày nhận bài: 09-07-2020; Ngày chấp nhận đăng: 10-08-2020) Tóm tắt Hoa lan Giả hạc Di Linh (Dendrobium anosmum DL.) nhân giống thành cơng phịng thí nghiệm phương pháp gieo hạt Trong nghiên cứu này, giống với chiều cao cm với 7–8 thật thích ứng tốt với giá thể xơ dừa trấu hun (tỷ lệ 1:1, v/v) giai đoạn bầu ươm Tỷ lệ sống 100% tỷ lệ 43,33% sau 28 ngày phòng bệnh chế phẩm sinh học Olicide 9DD Phân hoá học NPK (30-30-10) vitamin B1 hai nhóm phân phù hợp cho sinh trưởng giai đoạn bầu ươm Sau 120 ngày, chiều cao thân 7,02 cm; hệ số nhân kie 1,40 kie/thân; chiều cao thân kie 4,76 cm; số thân kie 5,47 lá/kie Cây trồng sang chậu sinh trưởng tốt giá thể xơ dừa vụn thơng (tỷ lệ 1:1, v/v) bón phân hoá học phân hữu với chiều cao thân kie 11,88 cm 11,91cm số thân kie 11,00 lá/kie 11,20 lá/kie sau 120 trồng Từ khoá: bầu ươm, Dendrobium anosmum DL., Giả hạc Di Linh, gieo hạt, giá thể, phân bón Cultivation of Dendrobium anosmum Di Linh from in vitro seedlings Nguyen Thi Diem1, Nguyen Thi Oanh1, Ho Thanh Tam2,3, Nguyen Huu Tho4, Nguyen Thi Kim Cuc1 Institute of Biotechnology, Hue University, Road 10, Phu Thuong, Phu Vang, Thua Thien Hue, Vietnam Institute of Global Health Innovations, Duy Tan University, 254 Nguyen Van Linh St., Thanh Khe, Da Nang, Vietnam Faculty of Pharmacy, Duy Tan University, 254 Nguyen Van Linh St., Thanh Khe, Da Nang, Vietnam College Electro-Mechanics, Construction and Agro-Forestry of Central Vietnam, QL1A, Cat Hanh, Phu Cat, Binh Dinh, Vietnam * Correspondence to Nguyen Thi Diem (Received: 09 July 2020; Accepted: 10 August 2020) Abstract In vitrro Dendrobium anosmum DL propagated from seeds is used in this study to determine the plant's ability to grow, develop, and flower after propagation The seedlings with a height of cm DOI: 10.26459/hueunijns.v130i1A.5907 107 Nguyễn Thị Diễm CS and 7–8 leaves grow best on the coconut fiber/husk (1:1 ratio v/v) medium in the nursery stage The rate of seedlings survival is 100%, and the rate of new leaves is 43.33% after 28 days when protecting against diseases with probiotics Olicide 9DD NPK (30-30-10) and vitamin B1 are the most suitable fertilizer for plant growth in the nursery stage After 120 days, plants have the following parameters: stem height 7.02 cm, 1.40 nodes/stem, node height 4.76 cm, and 5.47 leaves/node The growth is best on coconut fiber/pine bark (1:1, v/v) medium with chemical or organic fertilizer After 120 days of cultivation, plants are 11.88 and 11.91 cm high with 11.00 and 11.20 leaves/node, respectively Keywords: Dendrobium anosmum DL., Di Linh seedling, medium, fertilizer Mở đầu nghiên cứu hồn thiện quy trình trồng chăm sóc in vitro từ giai đoạn vườn ươm đến Lan giả hạc Di Linh (Dendrobium anosmum thương phẩm chưa thực Do DL.) có xuất xứ từ vùng Di Linh tỉnh Lâm vậy, thực nghiên cứu nhằm đưa Đồng Các màu hoa màu tím hồng số biện pháp kỹ thuật cho quy trình trồng trắng; ngồi ra, cịn có màu khác cánh hồng chăm sóc lan Giả hạc Di Linh gieo hạt nhạt, hồng thẫm cánh trắng lưỡi tím Cây có vườn ươm cách hiệu làm tiền đề cho đặc điểm nở hoa vào mùa xuân đặc biệt vùng nghiên cứu liên quan tới việc trồng chăm sóc huyện Di Linh lan nở vào dịp Tết số loại lan Giả hạc gieo hạt khác tương Ngun Đán [1] Chính mà giống lan lai ưa chuộng bị khai thác tràn lan nhằm phục vụ nhu cầu sưu tầm người dân dẫn đến giống lan rừng ngày cạn kiệt rừng tự nhiên [2, 3] Nguyên liệu phương pháp 2.1 Nguyên liệu Dựa tảng công nghệ sinh học thực Cây lan Giả hạc Di Linh gieo hạt vật phát triển thời gian qua, nhà phòng thí nghiệm Tế bào, Viện Cơng nghệ sinh khoa học nhân giống thành công nhiều giống học, Đại học Huế (quả lan tháng tuổi lấy từ lan quý Đặc biệt, nhiều giống lan nghiên cứu nuôi lan Giả hạc Di Linh, Huyện Di Linh, Tỉnh Lâm cấy gây cảm ứng protocorm, nhân nhanh, tạo rễ Đồng) sử dụng để gieo hạt Cây cao cm từ hạt thực Cụ thể, giống Dendrobium vớicó 7–8 thật candum gieo hạt in vitro thành công vào năm 2010 [4] Gần nhất, Phan Thị Thu Hiền 2.2 Thời gian địa điểm Nguyễn Văn Định thành công nhân giống in vitro lan đai châu đỏ (Rhynchostylisgigantea L.) từ Các thí nghiệm tiến hành vườn hạt, nghiên cứu nhân giống in vitro lan Kim ươm phịng Phịng thí nghiệm Tế bào, Viện điệp nhóm nhà khoa học thuộc Đại học Huế [5, Công nghệ sinh học, Đại học Huế từ ngày 15-9- 6] Quá trình nghiên cứu nhân giống lan Giả hạc Di 2019 đến ngày 15-6-2020 Linh phương pháp gieo hạt chúng tơi thực thành cơng phịng thí nghiệm 2.3 Phương pháp nhằm phục vụ nhu cầu người chơi lan đề Lan trồng nhà trồng với thiết kế trì lồi hoa bối cảnh lan rừng giảm nhiệt cho để đảm bảo nhiệt độ dao động suy giảm (kết chưa công bố) từ 18 đến 35 °C Nhà trồng xây dựng Mặc dù có nhiều nghiên cứu nhân giống bóng cây, che lưới lan mái để giảm ánh sáng in vitro tạo số lượng lớn con, việc trực tiếp từ mặt trời, lắp đặt hệ thống phun sương, 108 pISSN 1859-1388 eISSN 2615-9678 Tạp chí Khoa học Đại học Huế: Khoa học Tự nhiên Tập 130, Số 1A, 107–115, 2021 có gió thơng thống, khơ ráo, khơng đọng nước ngẫu nhiên, tiêu quan sát thực đo Nhà có mái che nilon trắng để tránh nước mưa trực đếm ngày/lần, liên tục 28 ngày Các tiếp vào Không sử dụng hệ thống điều hoà tiêu gồm tỷ lệ sống, tỷ lệ nhiễm nấm tỷ lệ nhiệt độ Chế độ tưới nước áp dụng công thức Khi trời nắng 35 °C, tưới đủ ẩm lần/ngày vào buổi sáng 2.5 chiều trì nhiệt độ khoảng 25–34 °C; tưới nước lần/ngày vào buổi sáng buổi chiều; nhiệt độ 25 °C 2–3 ngày tưới nước lần vào buổi trưa Ảnh hưởng phân bón đến khả sinh trưởng bầu ươm Các trồng giá thể khác thí nghiệm 1, sau trồng tháng bón thúc phân để phát triển chiều cao thân Phân dùng làm thí nghiệm chia làm ba nhóm 2.4 Ảnh hưởng giá thể thuốc phòng bệnh đến khả sinh trưởng bầu ươm gồm: nhóm phân hố học, nhóm phân vi sinh Giá thể để có bốn cơng thức chăm sóc hoa Lan [7] Nhóm phân vi sinh nhóm xây dựng dựa tài liệu Kỹ thuật trồng và nhóm phân hữu Nhóm phân hóa học thiết kế dựa tài liệu Kỹ thuật trồng phân hữu thiết kế chăm sóc hoa Lan [7] kết hợp tham khảo nghiên cứu công bố chăm sóc trồng lan Gấm [8], lan Đai Châu [9], lan Trần Mộng Xuân [10] Các công thức bao gồm Xơ dừa/trấu hun tỷ lệ 1:1 (v/v) (CT1); xơ dừa/dớn tỷ lệ 1:1 (CT2); xơ dừa/vụn thông tỷ lệ 1:1 (CT3); dớn (CT4) Xơ dừa vụn thông ngâm đãi ba lần trước trồng Nhóm phân hố học (Nhóm 1) gồm phân bón 30-30-10 (NPK) vitamin B1, liều lượng theo hướng dẫn nhà sản xuất; nhóm phân vi sinh (Nhóm 2) sử dụng chế phẩm GE (Gabbage enzyme) vitamin B1; nhóm phân bón hữu (Nhóm 3) sử dụng phân giun quế vitamin B1 để loại thải, chất chát chất thơm (tanin lignin) Đối với phân Nhóm Nhóm 3, liều lượng xơ dừa chất nhựa vụn thông; sử dụng mL/L nước 10% (w/v) chất ảnh hưởng không tốt trực tiếp đến [7] theo kết triển khai Phịng thí nghiệm Cây rửa môi trường dinh dưỡng Tế bào, Viện Công nghệ Sinh học, Đại học Huế thạch vịi nước chảy để loại bỏ tồn mơi Các cơng thức thí nghiệm bón phân trường thạch bám vào rễ Cây sau trồng tuần lần cách phun qua Trong đó, vào cốc chuyên dụng chứa giá thể cách cho phân bón loại 30-30-10 (NPK) vitamin B1 toàn phần rễ xuống giá thể, phần giao dạng lỏng thương mại Thái Lan; chế phẩm GE thân rễ (gốc) vị trí ngang với bề mặt giá thể chiết từ loại trái chín cắt nhỏ với 10% Để phòng trừ bệnh hại cho sau trồng nước mía ngun chất lít nước trước tuần, phun chế phẩm sinh học loại sử dụng ba tháng; phân giun quế 10% ngâm thương mại chuyên dụng cho lan (Olicide 9DD từ điều kiện sục khí 24 tách nước để Trung tâm Nghiên cứu ứng dụng Tiến Bộ, Kỹ phun Thuật Phân Bón Dinh Dưỡng Cây Trồng, Việt Nam) với nồng độ theo hướng dẫn nhà sản xuất Phun định kỳ 10 ngày/lần Các công thức đối chứng công thức không phun chế phẩm phịng bệnh (ĐC) Mỗi cơng thức thí nghiệm lặp lại lần, lần 30 cây, thí nghiệm bố trí Các cơng thức bón phối hợp với phân tan chậm Nhật với tỷ lệ N/P/K/Mg tương đương 6:40:6:15 qua rễ với liều lượng cho Thuốc Olicide 9DD phun phịng bệnh cho thí nghiệm này, phun đồng công thức, định kỳ 10 ngày lần DOI: 10.26459/hueunijns.v130i1A.5907 109 Nguyễn Thị Diễm CS Mỗi nhóm thí nghiệm có ba lần lặp lại 2.7 lần lặp lại 15 cây, bố trí ngẫu nhiên Chỉ tiêu sinh trưởng theo dõi 20 ngày/lần, liên tiếp vòng 120 ngày Các tiêu theo dõi bao gồm số mới, chiều cao thân, hình thái thân, số kie (thân mọc sau đứng ngọn) Các số liệu thí nghiệm xử lý phần mềm Excel office 365 (phiên 16.36), phần mềm xử lý SPSS (p < 0,05) với phương pháp nhân tố hai nhân tố ANOVA số kie Các tiêu quan sát theo dõi mắt thường đo đếm thước đo toán học Chiều cao thân tính giao điểm thân rễ đến thân nơi mang Xử lý số liệu Kết thảo luận 3.1 Ảnh hưởng giá thể thuốc phòng bệnh lên khả sinh trưởng bầu ươm cuối Sau rửa môi trường thạch, 2.6 Ảnh hưởng giá thể phân bón lên sinh trưởng trồng chậu thương phẩm Giả hạc Di Linh gieo hạt đủ tiêu chuẩn (Hình 1) trồng vào giá thể khác Sau 28 ngày bầu, tiêu quan sát thu thập Sau 150 ngày bầu ươm (Biểu đồ 1) Cây có tỷ lệ sống đạt 90% đối chuyển sang chậu để trồng thương với công thức giá thể có phun phịng bệnh với phẩm Chậu trồng loại chậu nhựa riêng biệt chế phẩm sinh học Olicide 9DD, cụ thể tỉ lệ sống thương mại chuyên trồng lan Giá thể để trồng lên tới 100% CT1 (Hình 2) 93,93% cơng thương phẩm, kỹ thuật chăm sóc bón phân, thức cịn lại (CT2, CT3 CT4) Kết cao phun phịng bệnh dựa kết hai thí khác biệt có ý nghĩa thống kê so với nghiệm đầu Thí nghiệm bố trí ngẫu nhiên có ba công thức không phun chế phẩm (ĐC) dao động từ lần lặp lại lần lặp lại 15 Các tiêu 73,33% CT2, 76,67% CT4 86,67% CT1 gồm chiều cao thân số đo đếm 20 CT3 Kết không tương đồng với kết ngày/lần vịng 120 ngày nghiên cứu lồi Đai châu đỏ; tỷ lệ sống gieo hạt bầu ươm giá thể dớn xơ dừa tỷ lệ 1:1 (CT2) cao (98,41%) [5] Biểu đồ Ảnh hưởng giá thể chế phẩm sinh học Olicide 9DD lên khả sinh trưởng bầu ươm (CT1: Xơ dừa/trấu hun tỷ lệ 1:1; CT2: Xơ dừa/dớn tỷ lệ 1:1; CT3: Xơ dừa/vụn thông tỷ lệ 1:1; CT4: dớn Giá trị trung bình ± SEM; n = 30 Các chữ giống cho biết khơng có khác biệt có ý nghĩa thống kê (p < 0,05, Tukey HSD); tỉ lệ: v/v) 110 pISSN 1859-1388 eISSN 2615-9678 Tạp chí Khoa học Đại học Huế: Khoa học Tự nhiên Tập 130, Số 1A, 107–115, 2021 Theo số nghiên cứu giá thể bầu ươm cho gieo hạt lan gấm lan Nhất Điểm Hồng giá thể tốt dớn mút (CT4) với tỷ lệ sống 100 97,78% [8, 11] Các kết cho thấy loại lan khác thích nghi với loại giá thể khác Kết thí nghiệm cho thấy phun phịng bệnh có tỉ lệ nhiễm nấm gây bệnh thấp (