Nội dung của bài viết này là trình bày kết quả nghiên cứu tinh dầu của 3 loài trong họ Cam (Rutaceae) ở vườn quốc gia Bến En. Để nắm chi tiết hơn nội dung nghiên cứu, mời các bạn cùng tham khảo bài viết.
HỘI NGHỊ KHOA HỌC TOÀN QUỐC VỀ SINH THÁI VÀ TÀI NGUYÊN SINH VẬT LẦN THỨ THÀNH PHẦN HĨA HỌC TINH DẦU CỦA MỘT SỐ LỒI TRONG HỌ CAM (RUTACEAE JUSS.) Ở VƢỜN QUỐC GIA BẾN EN, TỈNH THANH HĨA Hồng Thị Nhung1, Trần Minh Hợi2,3 Trường THPT Vĩnh Lộc Viện Sinh thái Tài nguyên sinh vật, Viện Hàn lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam Học viện Khoa học Công nghệ, Viện Hàn lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam Hiện Việt Nam, thống kê khoảng 10.500 lồi thực vật bậc cao có mạch, có khoảng 657 lồi thuộc 357 chi 114 họ chứa tinh dầu (chiếm khoảng 6,3% tổng số loài; 15,8% tổng số chi 37,8% số họ) Họ Cam (Rutaceae Juss.) theo Nguyễn Tiến Bân có 28 chi với 127 lồi lồi Theo Bùi Thu Hà (2011) họ Cam (Rutaceae Juss.) Việt Nam biết có 26 chi với 108 loài, phân loài thứ Họ Cam (Rutaceae Juss.) coi họ tinh dầu có nhiều chi lồi chứa tinh dầu Tác giả thống kê 34 lồi có chứa tinh dầu họ Cam Vườn Quốc gia Bến En Bài báo trình bày kết nghiên cứu tinh dầu loài họ Cam (Rutaceae) VQG Bến En I PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Thu mẫu chƣng cất tinh dầu Mẫu để chưng cất tinh dầu phận riêng biệt (lá, thân, rễ, hoa, quả) Mỗi mẫu thu từ 1-2 kg tươi Mẫu ghi số hiệu (số hiệu trùng với số hiệu mẫu để định loại tên khoa học) lưu giữ Viện Sinh thái Tài nguyên sinh vật Sau thu hái, mẫu cắt nhỏ chưng cất phương pháp lôi nước có hồi lưu thiết bị Clevenger thời gian 2-4 áp suất thường theo Tiêu chuẩn Dược điển Việt Nam II (2002) Phƣơng pháp định lƣợng tinh dầu Tinh dầu phận khác định lượng theo phương pháp I Dược điển Việt Nam II (2002) Hàm lượng tinh dầu tính theo cơng thức Hàm lượng tinh dầu mẫu tươi Hàm lượng tinh dầu mẫu tươi tỷ lệ tính % khối lượng tinh dầu chứa mẫu so với khối lượng mẫu tươi Cơng thức tính: Hl (t) (%) = lượng tinh dầu thu (gam) x % Khối lượng mẫu chưng cất (g) = N (khối lượng tinh dầu) x 0,9 (tỷ trọng quy ước với tinh dầu nhẹ nước) x 100 M (khối lượng mẫu chưng cất) Tinh dầu làm khô Na2SO4 khan, đựng lọ tiêu chuẩn đậy kín, bảo quản 0-5oC trước đem phân tích Phƣơng pháp phân tích thành phần hố học tinh dầu 1357 TIỂU BAN TÀI NGUYÊN SINH VẬT Chuẩn bị mẫu phân tích cho sắc ký khí: Hồ tan 1,5 mg tinh dầu làm khơ Na2SO4 khan 1ml hexan tinh khiết loại dùng cho phân tích sắc ký + Sắc ký khí (GC) với đầu d FID: Được thực máy Agilent Technologies HP 6890N Plus với detectơ FID, cột mao quản HP-5MS chiều dài 30 m, đường kính (ID) = 0,25 mm, lớp phim mỏng 0,25m với khí mang hydro Nhiệt độ buồng bơm mẫu 250oC Nhiệt độ Detectơ 260oC Chương trình nhiệt độ 60oC (2 phút), tăng 4oC/phút 220oC, dừng nhiệt độ 10 phút + Sắc ký khí-khối phổ (GC MS): Được thực hệ thống thiết bị sắc ký khí khối phổ liên hợp Agilent Technologies HP 6890N/ HP 5973 MSD với cột tách điều kiện vận hành sắc ký nêu với Heli làm khí mang Việc xác định thành phần tinh dầu thực phương pháp sau: - Dựa giá trị số lưu giữ (Retention Index), xác định với dãy đồng đẳng nalkan điều kiện sắc ký - Dựa sắc ký nội chuẩn (co-injection) với chất chuẩn thương mại (của hãng SigmaAldrich, St Louis, MO, USA) với thành phần tinh dầu biết - Dựa phổ khối lượng, so sánh với phổ khối lượng tìm thấy ngân hàng liệu (NIST 08 Wiley 9th Version) so sánh với liệu tài liệu tham khảo (Adams R.P., 2001; Lawrence B.M., 2001) Tỉ lệ % thành phần tinh dầu tính tốn dựa diện tích chiều cao pic sắc ký (detector FID) mà không sử dụng yếu tố điều chỉnh Phƣơng pháp xử lí số liệu Số liệu xử lí phần mềm Microsoft Office Excel 2007 II KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN Thành phần hóa học tinh dầu số loài họ Cam (Rutaceae) VQG Bến En, tỉnh Thanh Hóa 1.1 Thành phần hóa học tinh dầu loài Quýt dại (Atalantia roxburghiana Hook.f.) Mẫu với số hiệu (HVC 375) dùng để chưng cất phân tích tinh dầu thu Khe Bu vào tháng năm 2014 Hàm lượng tinh dầu đạt 0,35% so với trọng lượng tươi Tinh dầu có màu vàng nhạt, nhẹ nước (bảng 1) Bảng Thành phần hóa học tinh dầu lồi Quýt rừng (Atalantia roxburghiana Hook.f.) TT Hợp chất RI Tỷ lệ % α-thujene 930 1,2 α-pinene 939 2,1 Camphene 953 0,1 976 Sabinene 36,9 β-myrcene 990 2,4 α-phellandrene 1006 0,3 δ -carene 1011 0,7 α-terpinene 1017 2,2 1358 HỘI NGHỊ KHOA HỌC TOÀN QUỐC VỀ SINH THÁI VÀ TÀI NGUYÊN SINH VẬT LẦN THỨ 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 o-cymene (Z)-β-ocimene (E)-β-ocimene γ-terpinene Cis sabinene hydrate α-terpinolene Alloocimene Terpinene-1-ol Terpinen-4-ol Geraniol Bornyl axetate Bicycloelemene α-cubebene α-ylangene α-copaene β-elemene α-gurjunene β-caryophyllene γ-elemene Aromadendrene α-humulene Ishwaran γ-muurolene Epi-bicyclosesquiphellandrene Zingiberene Bicyclogermacrene -curcumene δ-cadinene Selina-4(15), 7(11)-dien Germacren B (E)-nerolidol Spathoulenol Caryophyllene oxid 3,6-dimethylpiperazine-2,5-dione β-eudesmol Tổng 1024 1043 1052 1061 1070 1090 1128 1139 1177 1253 1289 1327 1351 1375 1377 1391 1412 1419 1437 1441 1454 1467 1480 1489 1494 1500 1516 1525 1534 1561 1563 1578 1583 1612 1651 0,5 0,1 0,5 3,7 0,3 0,9 0,1 0,1 0,7 0,1 0,1 3,7 0,1 0,1 0,2 0,6 2,7 6,1 1,0 1,3 1,3 0,6 0,5 1,7 1,5 2,7 1,7 0,5 0,2 0,5 0,6 0,6 0,4 7,6 0,8 90,0 Kết bảng cho thấy 43 hợp chất xác định, chiếm 90,0% tổng lượng tinh dầu Thành phần tinh dầu sabinen (36,9%), 3,6-dimethylpiperazin-2,5-dion (7,6%), βcaryophyllen (6,1%), γ-terpinen (3,7%), bicycloelemen (3,7%) So sánh với kết nghiên cứu Trần Huy Thái cs [4] nghiên cứu tinh dầu loài Quýt rừng Mê Linh, Vĩnh Phúc, cho biết xác định thành phần số chất β-pinen (4,59%), p-cymen (13,39%) γ-terpinen (40,6%) Như vậy, so với kết mà chúng tơi xác định loài (Quýt rừng) hai địa điểm khác có khác thành phần chất khác hàm lượng chúng 1359 TIỂU BAN TÀI NGUYÊN SINH VẬT 1.2 Thành phần hóa học tinh dầu lồi Bưởi bung gân (Macclurodendron oligophlebia (Merr.) Hartl.) Mẫu với số hiệu (HVC 432) dùng để chưng cất phân tích tinh dầu thu Khe Bu vào tháng năm 2014 Hàm lượng tinh dầu đạt 0,43% so với trọng lượng tươi Tinh dầu có màu vàng nhạt, nhẹ nước (bảng 2) Bảng Thành phần hóa học tinh dầu lồi Bƣởi bung gân (Macclurodendron oligophlebia (Merr.) Hartl.) TT Hợp chất RI 432L 939 α-pinene 17,5 Camphene 953 0,2 Sabinene 976 0,8 β-pinene 980 β-myrcene 990 0,6 α-phellandrene 1006 0,1 α-terpinene 1017 1032 1,4 Limonene (Z)-β-ocimene 1043 3,0 10 (E)-β-ocimene 1052 4,9 11 γ-terpinene 1061 0,2 12 α-terpinolene 1090 0,3 13 Linalool 1100 0,2 14 Alloocimene 1128 1,4 15 Camphor 1145 16 Neoalloocimene 1147 1,0 17 Borneol 1167 18 Terpinen-4-ol 1177 19 Decanal 1200 0,1 20 Bicycloelemene 1327 3,0 21 α-cubebene 1351 0,4 22 α-copaene 1377 3,1 23 β-elemene 1391 0,9 24 α-gurjunene 1412 0,3 1419 25 β-caryophyllene 15,5 26 β-gurjunene 1434 27 α-bergamotene 1435 1,5 28 Aromadendrene 1441 1,0 29 α-humulene 1454 2,4 30 γ-gurjunene 1477 0,8 31 Germacren D 1485 0,7 32 Eudesma-4(14),11-diene 1485 0,2 33 α-amorphene 1485 34 β-selinene 1486 35 Cadina-1,4-diene 1496 1,7 36 Bicyclogermacrene 1500 3,6 1360 432F 3,6 0,8 1,1 0,8 1,3 0,5 4,7 1,0 0,8 0,9 1,2 0,7 2,4 1,9 0,9 1,1 6,0 0,9 2,1 1,1 2,4 4,4 1,2 - HỘI NGHỊ KHOA HỌC TOÀN QUỐC VỀ SINH THÁI VÀ TÀI NGUYÊN SINH VẬT LẦN THỨ 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 α-muurolene (E,E)-α-farnesen δ-cadinene Cadina-1(2),4-diene γ-cadinene Calacorene selina-3, 7(11)-dien -agarofuran Spathoulenol Caryophyllene oxid Viridiflorol α-guaiol β-oplopenone Caryophyllenol β-eudesmol α-cadinol Bulnesol -bisabolol Calamenene Farnesol farnesyl acetate benzyl benzoate Phytol Tổng 1500 1508 1525 1539 1541 1546 1547 1551 1578 1583 1593 1600 1608 1611 1651 1654 1672 1685 1702 1718 1726 1760 2125 0,8 1,9 3,8 0,5 1,0 0,2 10,6 0,5 1,8 2,8 0,6 0,5 0,3 92,1 1,4 1,5 0,9 1,1 1,1 1,5 1,5 2,7 4,7 2,7 1,5 8,3 3,8 16,8 91,3 Qua bảng cho thấy, xác định 41 hợp chất, chiếm 92,1% tổng lượng tinh dầu α-pinen (17,5%), β-caryophyllen (15,5%), caryophyllen oxit (10,6%) thành phần tinh dầu (E)-β-ocimen (4,9%), cadina-1(2),4-dien (3,8%), bicyclogermacren (3,6%), α-copaen (3,1%), (Z)-β-ocimen (3,0%), bicycloelemen (3,0%) thành phần nhỏ Từ quả, 37 hợp chất xác định, chiếm 91,3% tổng lượng tinh dầu Thành phần tinh dầu benzyl benzoat (16,8%), farnesol (8,3%), β-caryophyllen (6,0%), limonen (4,7%), α-cadinol (4,7%) Khi so sánh với cơng trình cơng bố Nguyễn Viết Hùng cs (2016) có khác biệt thành phần chính, mẫu nghiên cứu đặc trưng α-pinen (17,5%), β-caryophyllen (15,5%); cơng trình cơng bố trước sabinen (23,4%), (E)-β-ocimen (10,1%), αpinen (9,3%) Như vậy, loài, điều kiện sinh thái khác thành phần hóa học tinh dầu khác 1.3 Dấu dầu chẻ ba (Tetradium trichophorum Lour.) Mẫu với số hiệu (HVC 433) dùng để chưng cất phân tích tinh dầu thu Đảo Thực vật vào tháng năm 2014 Hàm lượng tinh dầu đạt 1,22% so với trọng lượng tươi Tinh dầu có màu vàng nhạt, nhẹ nước (bảng 3) Bảng Thành phần hóa học tinh dầu loài Dấu dầu chẻ ba (Tetradium trichophorum Lour.) TT Hợp chất RI Lá 939 146 α-pinene 10,4 1361 TIỂU BAN TÀI NGUYÊN SINH VẬT 147 148 149 150 151 152 153 154 155 156 157 158 159 160 161 162 163 164 165 166 167 168 169 170 171 172 173 174 175 176 177 178 179 180 181 Camphene β-pinene β-myrcene n-nonane Limonene (Z)-β-ocimene (E)-β-ocimene linalool Alloocimene Neoalloocimene 2,6-dimethyl-3,5,7-octatriene-2-ol, E,E 2-undecanone Bicycloelemene α-cubebene α-copaene β-cubebene β-elemene β-caryophyllene Aromadendrene α-humulene germacren D α-amorphene Valencene Bicyclogermacrene (E,E)-α-farnesen δ-cadinene γ-cadinene Elemol Ledol (E)-nerolidol Spathoulenol caryophyllene oxid α-cadinol Farnesol benzyl benzoate Tổng 953 980 990 1000 1032 1043 1052 1100 1128 1147 1209 1291 1327 1351 1377 1388 1391 1419 1441 1454 1485 1485 1496 1500 1508 1525 1541 1550 1561 1563 1578 1583 1654 1718 1760 0,2 0,7 1,9 1,1 0,9 9,4 24,8 0,7 5,0 0,3 0,7 3,9 2,4 0,2 0,2 0,2 5,7 8,0 0,1 1,3 1,1 0,3 0,3 3,3 1,3 1,0 0,2 0,2 0,4 0,6 2,3 1,5 2,3 1,4 4,4 98,7 Kết bảng cho thấy, 36 hợp chất xác định từ lá, chiếm 98,7% tổng lượng tinh dầu Thành phần tinh dầu (E)-β-ocimen (24,8%), α-pinen (10,4%), (Z)-β-ocimen (9,4%), β-caryophyllen (8,0%) Các thành phần nhỏ β-elemen (5,7%), alloocimen (5,0%), benzyl benzoat (4,4%), 2-undecanon (3,9%), bicyclogermacren (3,3%) Đây loài lần phân tích thành phần hóa học tinh dầu III KẾT LUẬN Đã tiến hành xác định hàm lượng phân tích thành phần hóa học tinh dầu loài thuộc chi VQG Bến En Quýt gai (Atalanta), Bưởi bung (Maclurodendron), Dấu dầu 1362 HỘI NGHỊ KHOA HỌC TOÀN QUỐC VỀ SINH THÁI VÀ TÀI NGUYÊN SINH VẬT LẦN THỨ (Tetradium) Trong đó, loài Dấu dầu chẻ ba (Tetradium trichophorum Lour.) lần nghiên cứu thành phần hóa học tinh dầu Việt Nam Từ loài Quýt rừng (Atalantia roxburghiana Hook.f.) với thành phần tinh dầu sabinen (36,9%), 3,6-dimethylpiperazin-2,5-dion (7,6%), β-caryophyllen (6,1%), γterpinen (3,7%), bicycloelemen (3,7%) Bưởi bung gân (Macclurodendron oligophlebia (Merr.) Hartl.) đặc trưng αpinen (17,5%), β-caryophyllen (15,5%), caryophyllen oxit (10,6%) Trong với benzyl benzoat (16,8%), farnesol (8,3%), β-caryophyllen (6,0%), limonen (4,7%), α-cadinol (4,7%) thành phần Dấu dầu chẻ ba (Tetradium trichophorum Lour.) với thành phần từ (E)-β-ocimen (24,8%), α-pinen (10,4%), (Z)-β-ocimen (9,4%), β-caryophyllen (8,0%) TÀI LIỆU THAM KHẢO Adams R P., 2001 Identification of essential oil components by Gas Chromatography/ Quadrupole mass spectrometry, Allured Publishing Corp Carol Stream, IL Nguyễn Tiến Bân (Chủ biên), 2003 Danh lục lồi thực vật Việt Nam, tập Nxb Nơng nghiệp Bộ Y tế, 2002 Dược điển Việt Nam II Lawrence B M., 2001 Progress in Essential oils, Perfumer & Flavorist, 26: 44-57 Đỗ Tất Lợi, 1985 Cây tinh dầu Việt Nam, Nxb Y học Tp Hồ Chí Minh Trần Huy Thái, Trần Minh Hợi, Nguyễn Quang Hƣng, Vũ Thị Mỵ Nguyễn Thị Hiền, 2003 Thành phần hóa học tinh dầu Quýt rừng Mê Linh, Vĩnh Phúc Tạp chí Dược liệu, số 6, tập 8, trang 189-190 Zhang J, Feng G, Luo Y., 1999 Analysis of chemical constituents in the essential oil from Evodia fargesii by GC/MS, Zhong Yao Cai., 22(1): 30-31 CHEMICAL COMPOSITION OF ESSENTIAL OILS FROM SOME SPECIES OF RUTACEAE JUSS IN BEN EN NATIONAL PARK, THANH HOA PROVINCE Hoang Thi Nhung, Tran Minh Hoi SUMMARY The present work reports the chemical composition of essential oil from some Rutaceae species from Ben En National Park The principal components of leaf essential oil of Atalantia roxburghiana Hook.f are sabinene (36.9%), 3,6-dimethylpiperazin-2,5-dione (7.6%), βcaryophyllene (6.1%), γ-terpinene (3.7%) and bicycloelemene (3.7%) The leaf essential oil of Macclurodendron oligophlebia (Merr.) Hartl is characterized by α-pinene (17.5%), βcaryophyllene (15.5%), caryophyllene oxit (10.6%) In fruit essential oil of M oligophlebia, benzyl benzoate (16.8%), farnesol (8.3%), β-caryophyllene (6.0%), limonene (4.7%) and αcadinol (4.7%) are principal components Leaf essential oil of Tetradium trichophorum Lour has principal components: (E)-βocimene (24.8%), α-pinene (10.4%), (Z)-β-ocimene (9.4%), β-caryophyllene (8.0%) The chemical composition of essential oils from this species is studied for the first time 1363 ... VÀ THẢO LUẬN Thành phần hóa học tinh dầu số loài họ Cam (Rutaceae) VQG Bến En, tỉnh Thanh Hóa 1.1 Thành phần hóa học tinh dầu loài Quýt dại (Atalantia roxburghiana Hook.f.) Mẫu với số hiệu (HVC... tích thành phần hóa học tinh dầu III KẾT LUẬN Đã tiến hành xác định hàm lượng phân tích thành phần hóa học tinh dầu lồi thuộc chi VQG Bến En Quýt gai (Atalanta), Bưởi bung (Maclurodendron), Dấu dầu. .. phân tích tinh dầu thu Khe Bu vào tháng năm 2014 Hàm lượng tinh dầu đạt 0,43% so với trọng lượng tươi Tinh dầu có màu vàng nhạt, nhẹ nước (bảng 2) Bảng Thành phần hóa học tinh dầu lồi Bƣởi bung