Ebook Di truyền và chọn giống động vật: Phần 2 - Trường Đại Học Quốc Tế Hồng Bàng

+ Hiện tượng đa hình trong*quá trình phát triển cá thể: Là hiện tượng bát gặp các cấu trúc khác nhau trong quá trình phát triển cá thê- 0 giai đoạn phát triển[r]

D I T R Ư Y Ể N N H Ó M M Á U V À T Í N H Đ A H Ì N H D I T R Ư Y Ể N C Á C T Í N H T R Ạ N G H Ó A S I N H

ở Đ Ộ N G V Ậ T

5.1 DI TR U YỀN NHÓM MÁU Ở Đ Ộ N G VẬT

Xác định nhóm m áu nghiên cứu di truyền các nhóm máu động vật có ý nghĩa quan trọng việc tìm hiểu q u ỵ l u ậ t di t r u y ề n p d ụ n g c h ú n g t r o n g n g h i ê n c ứ u q u a n hệ họ hàng, nguồn gốc, vai trò chúng đốì với tiêu nảng s u ấ t c h ấ t lượng s ả n p h ẩ m

5.1.1 L ịc h s n g h iê n c ứ u

Đ ầu th ế kỷ XIX người ta bắt đầu phương pháp truyền máu ồ người Trong thời kỳ đầu, phương pháp truyền máu có nhiều trường hợp gây nên tượng người bệnh bị chết sau khi t r u y ề n H iệ n tượng n y x ẩy r a n g a y k h i lấ y m u c ủ a cha, m ẹ truyền cho ngược lại.

N ă m 1900, L a n d s t e i n e r , m ộ t b c sĩ người áo d e m m u người k h c n h a u tr ộ n v o t h ấ y có m ộ t sô t r n g hợp m u bị đòng t h n h c ụ m lớn t r o n g k h i m ộ t sơ t r n g hợp k h c lại k h ô n g t h ấ y x ảy T đó, L a n d s t e i n e r cho r ằ n g m u c ủ a người k h ô n g c h ỉ có m ộ t loại S a u ơng t ì m r a n h ó m m u c ủ a người

một nhóm 'i nhóm máu A, B AB o mà biết đến ngày nay.

N ghiên cửu vê quy luật di truyền nhóm máu với cơng trình Dungern E Von Hirszfeld L vào năm 1910. Theo tác giả này, nhóm máu ABO người di truyền theo định luật Mendel Những cơng trình về sau phát nhóm máu người alen I \ In ĩ° quy định Trên cd sở quy luật di truyền nhóm máu A B, người ta tiếp tục xác định nhóm máu khác người phát hiện các hệ thống nhóm-máu MN, Rh, Le, Kid, Kell

Đồng thời, sau bắt dầu việc nghiên cứu nhóm máu ỏ động vật Từ năm 1900, Ehrlich p Morgenroth J đã phát thấy sai khác cá thể nhóm máu dê. Erwin M.R cộng nghiên cứu nhóm máu ỏ bồ câu, gà, cừu, bò

Trong năm gần đây, phát triển nhanh chóng là ngành di truyền học miễn dịch động vật, dó người ta đi sâu vào tính da hình yếu tố máu Nghiên cứu nhỏm máu động vật ngày trở thành lĩnh vực thiếu dược ngành sinh v ậ t học đại cưrtng, chăn nuôi, thú ý

5 C ác p h n g p h p n g h iê n c ứ u n h ó m m u

Người ta thường dùng kháng thể khác nhau, đó có kháng thể tụ nhiên thường kháng thê m iễn dịch để nghiên cứu kháng nguyên nhóm máu Có hai loại kháng thể là:

a K h n g thê tự nhiên: Là loại kháng thể có săn huyết

thanh máu không cần qua đường gây miễn dịch.

cẩu B Các kháng thể a (! có sẵn huyết của m u n ên gọi k h n g h u y ế t t h a n h

Khi nghiên cửu người ta dùng hai phương pháp phương p h p n g n g k ế t p h ả n ứng t i ê u huyết)

- P h n g p h p n g n g k ế t: Nguyên tắ c c ủ a p h n g p h p nãy chơ kháng thể a trộn lẫn vói kháng nguyên A trộn kháng thể [3 với kháng nguyên B Trong trường hợp xẩy ra tượng ngưng kết tạo cụm máu đông lại.

Nếu ta cho kháng th ể a sau lấy máu người nào dó trộn vào người nhóm máu A AB (có kháng ngun A) xẩy tượng ngưng kết Tương tự cho trộn kháng the người nhóm máu B AB bị ngưng kết.

- P h ả n ứ n g tiê u huyết: Ví d ụ d ù n g tr o n g trư n g hợp n g h iê n u n h ó m m u R h c ủ a người

N guyên tắc: Nếu kháng thể kháng Kir gặp kháng ngun Rh+ có bơ thể kèm thêm xẩy tượng tan vỡ hồng cẩu hay gợi tượng tiêu huyết.

b K h n g th ế m iễ n d ịc h

Kháng thể miễn dịch loại kháng thể khơng có tự nhiơn mà phải gây phản ứng miễn dịch.

Ferguson (19-11) lấy hồng cầu máu động vật cho t if'm vào đ ộ n g v ậ t n h ậ n để g â y m iễn dịch N ế u v ậ t cho v vật n h ậ n th u ộ c c ù n g m ộ t loài g â y đ n g m i ễ n dịch N ê u v ậ t cho v vật nhận khác loài gây dị m iễn dịch Bằng phương pháp này người ta tạ o k h n g t h ổ đơn giá đa giá

Vi dụ: Để tạo kháng th ể đơn giá (ì bị người ta tiến hành n h sau:

h a i n y có k h n g n g u y ê n A s a u m ột thời g i a n ở bò c i thứ hai xẩy phản ứng m iễn dịch chống lại k h án g nguyên lạ B c Lấy máu bị thứ hai có phản ứng m iễn dịch đem lv t â m lấy h u y ế t t h a n h th ì t r o n g h u y ế t t h a n h n y <’ó kháng thể kháng B c

Giả sử bị thứ ba máu có hồng cầu m ang kháng n g u y ê n c L ấ y h n g c ầ u bò t h ứ b a t r ộ n với h u y ế t t h a n h có kháng thể B kháng thể c có phản ứng ngưng k ế t k h n g n g u y ê n c k h n g t h ể k h n g c sẽ x ẩ y ra N phản ứng ngưng kết hồn tồn tách phần k ết tủa, phần h u y ế t t h a n h đ e m t h t r ê n c h ỉ c h ứ a k h n g t h ể B

Bước thử xem bò khác gọi bỏ thứ tư xem có kháng nguyên B hay khơng Lấy giọt máu bị cái thứ tư đưa lên lam kính, bổ xung giọt bổ thể (huyết thanh tươi c ủ a th ỏ h a y c h u ộ t h o n g ) t r ộ n tiếp h a i g iọ t k h n g t h ể kháng B có vào N ếu có tượng ngưng kết xảy va thì chứng tỏ bị thứ tư có kháng ngun B Đ ó phương pháp ch ế thuốc thử kháng nguyên đơn giản Trong trường hdp này kháng thể đơn giá B Muôn phát tấ t kháng nguyên ta phải tạo tấ t kháng thể đơn giá Việc làm này tôn m ất nhiều thời gian Sau ngưỡi ta tìm cách tạo kháng thể đa giá Kháng thể đa giá hỗn hợp kháng thể phản ứng ngưng kết với hai hay nhiều loại kháng nguyên.

Phương pháp tạ o kháng thể đa sau: L hồng cáu c ủ a n h iề u động v ậ t k h c n h a u t i ê m cho m ộ t đ ộ n g v ậ t n h ậ n Trong thể động vật nhận tạo kháng th ể chống lại t ấ t k h n g n g u y ê n lạ L ấ y m u đ ộ n g v ậ t n h ậ n táich lấy p h n h u y ế t t h a n h T r o n g h u y ế t t h a n h n y k h n g t h ể tía giá

Cách xác định sau: Dùng kháng thể đa giá cho phản ứng ngưng kết với máu bố thực mẹ Theo ngun tác, sẽ khơng phản ứng ngưng kết tiếp với hồng cầu Nếu p h ả n ứ n g n ^ n g k ế t v ẫn t i ế p tục x ẩ y r a t h ì b ố m ta gọi bô t h ự c ờ t r ê n b ố giả T t a s u y r a bô t h ự c h ay bô giả để ứ ng đụnỉĩ t rong xác định huyết thống dộng vật nói chung.

5.1.3 C ác h ệ th ô n g d i tr u y é n n h ó m m u d ộ n g v ậ t

Người ta quan niệm, hệ thống di truyền nhóm máu tập hợp các nhóm máu ctược quy định kháng nguyên alen của locut điêu khiển tổng hợp nên Mỗi hệ thống di truyền nhóm máu bao gồm kháng nguyên hồng cầu di truyền theo quy luật định Các kháng nguyên thuộc hộ thông nhóm máu khác nhau, di truyền độc lập vói nhau ( t r m ột sô t r n g hợp đ ặc biệt) Mỗi hệ t h ố n g n h ó m m u có t h ể cỏ nhiều alen xác định Mỗi alen quy định kháng nguyên h n g c đ ộ n g vật, s ố a l e n c ủ a m ộ t locut có t h ể r ấ t lớn Ví d ụ đơi vổi hệ thơng nhóm máu B bị có th ể tối 164 alen (theo Irwin M.R, 1958) có th ể tới 300 alen (theo Stormont, c 1961).

Người ta thường dùng chữ la tinh A, B, c , sô 1, 2, 3 và dấu hiệu khác để viết ký hiệu nhóm máu động vật Tùy thuộc vào tác giả tìm hệ thống nhóm máu đặt ký hiệu khác Ví dụ: nhóm máu bò thường dùng chữ cái A, B, c sa u A', B' trường hợp A khác A'

B n g n h ó m m u m ộ t s ô l o i d ộ n g v ậ t

Loài động vặt

S ố hệ thống (locut)

Các h ệ thống gổm

trên alen

S ô aỉen lớn nhất trong

mỗi ỉocut

Tảc giả

Đại gia sú c có sừng

11 7 300 (locut B)

35 (locut C)

Stormont 2.

Cừu 7 3 52 (locut B)

R asm usen B.A

Lợn 10 4 5

r . Andresen E.

Ngựa 6 1 5 ị 1 Franks D

Thỏ 1 1 3 Cohen c

Gà 10

h :

6 21 Ị Briỉes W.E Gilrmour

D G Chó

7 1 3 Suisia cộrg s ự

+ Ký hiệu kháng nguyên (nhóm máu)

V Một k h i niệm khác ký hiệu nhóm máu n h ó m

pheno Nhóm pheno nhóm di truyền liên kết sô kháng nguyên theo tổ hợp khác n h a u Ví dụ: nhóm pheno B.GhUU quy đtịnh bởi alen nhóm máu thường tổ hợp với nhau.

+ N h ó m m u đại gia sú c có s n g

Cho đôn n a y đại gia s ú c có s n g n ghiê n c ứ u n h ó m máu rộng rãi đầy đủ nhát.

N ă m 1944, F erg u so n công bô k ế t q u ả p h t h iện k h n g nguyên hồng cầu đại gia súc, biểu thị cl ữ oái A, B, c , D, E, F, H, I z Theo kết phân tích di truvỂn thì các khárig ngun nói đượố' quy định yếu tỏ Ui

'i'heo Storm ont, 1962 nhổm máu ỏ đại gia súc cỏ sừng là 11 hộ th ô n g n h ó m m u với 85 y ếu tô m u ( k h n g n g u y ê n ) ký hiệu A B, (/, F- V J L M, N s , z R'- S' tơ hợp có 369 nhóm pheno.

Hệ th ố n g A: gồm có 10 alen Một số alen sơ’ khơng có ở nhiều giống bị gặp Ví dụ: alen aM gặp bò Zebu  n Dộ, a len a A,u' z có ci bị J e c s a y

Hệ th ông B: Gồm có 300 alen quy định tổ hợp khác

nhau 50 yếu tố kháng nguyên.

Hệ thông F-V: Trước người ta cho ràng, hệ thống

tn>r>íĩ hệ thơng đơn giản Gần đây, người ta thấy tính chất pbứ< tạ p cấu trúc di truyền hệ thơng

IjOCUt F-V có alen A len F F quy d ị n h k h n g n g u y ê n F a lon Kx quy đ ị n h k h n g n g u y ê n V Các bị có t h ể t r n g t h i dồng hợp t ủ F f F f , F ' F ' h a y d n g dị hợp t F fF v tư n g t ự như nhóm máu MN ỏ người.

+ N hóm m u lợn:

Nhóm máu ỏ lợn phát nghiên cứu từ năm 1913 Đôn I960, người ta phát 14 hộ thống nhóm máu ỏ lợn ký hiệu A, B, c , E, F, G H, I, J, K, L, M N o với 30 yếu tố kháng nguyên Nhiêu hệ thống nhóm máu dãy alen quy định Một sơ hệ thống phức tạp locut B ỏ đại gia súc có sừng Ví dụ, hệ thống nhóm máu B cỏ yếu tô kháng nguyên B:, Bbilo alen B Bb quy định Hệ thống nhóm máu L có 4 u tơ kháng ngun L;1, Lh, Le, Lj alen quy dịnh lả L“ L"l?Lh.Lhc.Lr L ẳ.

+ N hóm m u gà:

kháng thể Năm 1940, Briles W.E Gilm our D G (Anh) công bố 10 locut nhóm máu gà Cho đến phát gà có 14 hệ t h ố n ẹ nhóm máu, ký h iệu là A, B, c D, E, H, I, J, K, L, N, p, Hi và Vh có 60 yếu tố kháng nguyên Trong hộ thông t r ê n có hệ th ố n g gen n ằ m t r ê n n h iễ m sắc t h ể th n g

(autosome) quy dinh, có hai hộ thống liên kết là A E Tần sô trao đổi chéo locut 1%.

Trong hệ thống nhóm máu, gà mang dãy alen từ các hệ J, K, p có alen, đến hệ thống H, L, N có hai alen và có hệ thơng tối 20 alen hệ thống B (cũng hệ thống phức tạp nhất).

K h n g n g u y ê n n h ó m m u di t r u y ề n ổn đ ị n h cho t h ế hệ T u y n h iê n , người t a c ũ n g tìm t h ấ y ở có kháng ngun khơng có bố mẹ trình đột biến, tương tác gen gây nên Điều ý tượng xây với tần số thấp.

+ Đặc điểm di t r u y ề n nh ó m m u đ ộ n g v ậ t người

Sự di truyền hộ thống nhóm máu người động vật tuân theo số đặc điểm sau:

- Các a le n k h n g n g u y ê n m u có t h ể di t r u y ề n theo kiểu đồng trội tức chúng biểu kiểu hình Ví dụ: hai alen r ' I ” c ủ a hệ t h ố n g nhóm m u ABO c ủ a người t r u y ề n theo kiểu đồng trội Hoặc di truyền theo kiểu trội- lặn Vi dụ alen IA, I" với 1° người.

- Các k h n g n g u y ê n n h ó m m u c h ị u kiểm t r a di t r u y ề n của alen hệ thống gen.

- Các hộ t hống nhóm máu di truyền dộc lập liên kết. - Thê hộ mang alen nhóm máu cha mẹ thực. + Ỷ nghĩa nghiên cứu di truyền nhóm máu

Việc xác định nghiên cứu đặc diêm di truyền nhóm máu có tầm ứng dụng lớn việc chăn ni, chọn lọc nhân giông gia súc, gia cầm Những ứng dụng nhóm máu chủ yếu là:

- Kiểm tra nguồn gốc bố.

Ở lợn gia súc lớn dùng hộ thống nhóm máu để kiểm tra dịng bơ trường hợp nghi ngờ, kiểm tra lai lịch gia súc tạo giống dòng xuất nhập dộng vật hoặc xác định đực giông sử đụng để thụ tinh Trong trường hợp hệ thống nhóm máu B ỏ bị có tới 300 alen khác nên có rất nhiều kiểu tể hợp phức tạp xảy ra, xác suất để hai gia súc giống thấp Người ta tính sơ xác suất ỏ vật giống ở bò Jecsay Đan Mạch 0,05%, ở bò đỏ Đan Mạch 0,39%.

Do sử dụng rộng rãi việc thụ tinh nhân tạo cần phải có phương pháp khách quan, xác để kiểm tra dịng bơ Trong thụ tinh nhân tạo nhiều phái phơi 2, lần cho mỗi bị phối lần sau sử dụng phải tinh trùng bò đực khác so vối lân đầu Vì thế, cần phải xác định bố thực bê dã đẻ Nguyên tác yếu tơ máu có cá th ể đời tất nhiên phải ỏ hai bơ mẹ nó.

- Xác tlịnh liên quan nhóm máu bệnh.

thai Nguyên nhân bệnh tiêu huyết liên quan đến sự không phù hợp nhóm máu Rherus (Rh) mẹ thai nhi. Trường hợp bệnh xẩy người bô Rh+ mọ Rh Bỏ sẽ truyền cho nhóm m áu Rh+ Trong thời kỳ phát triển của thai, kháng nguyên Rh+ vào máu mẹ Cơ thê mẹ sẽ sinh kháng thể kháng lại R h \ Kháng th ể Rh+ lại qua thai bào vào máu thai gây tượng tiêu huyết bào thai Thời kỳ dầu, lần mang thai đầu lượng kháng thể cịn nên khơng gây hiệu thật nghiêm trọng cho thai nhi Đứa có thê sinh l a và mắc bệnh vàng da thiếu máu Nhưng lần m ang thai sau lượng kháng thể máu mẹ nhiều làm cho sự tiêu huyết mạnh dẫn dến thai nhi bị chết, quái thai.

ỏ lợn ngựa có bệnh tiêu huyết Một sơ kháng ngun máu gây nên bệnh vàng da tiêu huyết lợn con và ngựa mói đẻ Người ta cho rằng, có khơng phù hụp trong hệ thống nhóm máu bố mẹ Khác với người, ỏ lợn và ngựa lúc sinh bình thường Sự việc xuất hiện khi lợn ngựa bú sữa đầu mẹ.

Lý lợn ngựa mạch máu mẹ thai có phần tách biệt nhau, ngàn trỏ trao đơi kháng thể cách tụ Vì vậy, kháng thể không truyền từ mẹ vào lại được tích lũy sữa đầu mẹ đến mức mà làm tiơu huyết vật non bú sữa đầu Trường hợp này, kháng thể từ mẹ có thổ hấp thu qua dày trong vòng 24 - 36 giò sau dẻ Vậy nên phát ỏ mẹ có hiện tượng phải dùng tay vát bỏ sữa đầu vòng 36 giờ đầu cho con bú sữa mẹ khác Sau thịi hạn dó, có thể trả lại cho mẹ đẻ chúng ni bình thường mà khơng gây hậu cả.

Người ta dùng nhóm máu để xác định trạng thái đồng hợp tử clị hợp tử (có thể trứng hay khác trứng) gia súc sinh (lơi Việc chẩn đốn gặp khó khăn tướng độc biệt phát, ỏ lồi gia súc có sừng mà Owen R D gọi là thể khảm hồng cầu.

Năm 1945, Owen nghiên cứu cặp bê sinh dôi (cả đực cái do sinh dôi khác trứng) xác nhận phần lớn chúng có cùng loại máu Ong củng chứng m inh rằng, sinh dôi khác trứng mà co loại máu chúng m ang hỗn hợp hai loại hồng cầu. Hiện tượng (lược gọi th ể khảm hồng cầu Sau đó, người ta phát khoảng 90% gia súc có sừng sinh đơi đểu có mang hệ nối mạch máu thòi kỳ phát triển bào thai, tạo nên trao (loi tế bào m áu nguyên thủy Nhửng tê bào máu này sông bảo tồn mơ tạo máu vật chủ tức !à thai sinh đôi Các cá th ế sinh đôi lớn lên sẽ cùng sinh hai loại hồng cầu, loại ứng với kiểu gen đặc ti ling thân m ột loại khác ứng với kiểu gen của con vật sin h đôi Vấn đề không dáng kổ hai vật sinh (lôi sông sin h sả n bình thường Trên thực tế, 90% bê c.-ii từ cập sinh dơi khác giới khảm hồng cầu lại thuộc clí.ing trung giới khơng có khả sinh sản I)o vậy, cần xác đinh nhóm máu bê non cho phép đánh giá khả năng sinh sản bê sinh đỏi Phần lớn bê từ cặp sinh đòi khác vô sinh.

- Sử dụng mối tương quan nhóm máu tính

trạng kinh t ế.

trạng kinh t ế dựa mơi tương quan nhóm máu với tính trạng sản xuất Nhiều kiểu gen nhóm máu khác có liên quan đến tính trạng sản xuất Ví dụ, ở gà có nhóm máu khác nhau dẫn dến khác vê sức đẻ trứng Các tô hợp khac nhau nhóm máu ỏ giơng gà khác sị dẫn đên kết quả ưu th ế lai Năm 1967, Mc Dermicl thấy ràng alen B Nvà B; ở gà alen giá trị Nếu lai kinh t ế tạo gà hướng trứng nơn lai bố dị hợp tử B2B,4 mẹ dị hựp tử Nhìn chung, người ta thấy rõ kiểu gen nhóm máu khác đều có liên quan đến tiêu kinh tế Từ việc sử dụng môi tương quan nhóm máu với tính trạng kinh tế người ta Xííc định hiệu hậu tượng ưu thê lai và giao phôi cận huyết lai tạo hay chủng dộng vật Sử dụng nhóm máu để xác định dịng bơ giúp cho phân biệt nguồn gốc lai chủng, giơng lồi khác Đây hướng nghiên cứu cỏ triển vọng là trong thời kỳ kỹ thuật sinh học phương tiện phân tíeh ngày dại.

5.1.4 H ịa h p tơ c h ứ c - k h n g n g u y ê n h ò a hơ p tổ ch ứ c Từ lâu, người ta mong muốn thay th ế mỏ cơ quan, tổ chức người cho người khác nhàm cứu sống một số người bệnh Trong thực phương pháp phần lũn các trường hợp m iếng ghép bị thể người nhận loại thải Sự loại thải liên quan đến kháng nguyên hòa hợp tổ chức (Histocompability) Loại kháng nguyên hịa hợp tổ chức khơng nằm hồng cầu mà nằm bạch cầu Nếu hai người con vật có kháng ngun hịa hợp tổ chức H giống có thể ghép phận quan cho ngược lại miếng ghép, phận cd quan ghép bị vật nhận thải.

khái- rhùrig gây việc tạo kháng thể mạnh Kháng nguyên H gon tròi hòa hdp tổ chức xác định Khi nghiên cứu trơn chuột người ta tìm thấy ỏ chuột có 14 locut gen hịa hợp tơ chức Trong sơ có locut Hị nhiễm sắc thể sô locut H2 ở

nhiễm sắc thể số loeut H nhiễm sắc th ể số loeut H, ở nhiễm sắc thể Y quan trọng cả.

Nguyên tắc ghép thể có kiểu gen hịa hợp tơ chức Nếu dị gen (khác gen) ghép mơ khơng thành cóng.

SiK'11 (1953) đ ã d a qui l u ậ t g h é p mô khối u hai dòng t h u ầ n c ủ a c h u ộ t n h sau:

Ví dụ, ghép mơ hai dịng A B là:

9 AA BB đ đ

F, +

AA AB BB

Dây trường hợp dòng A B khác gen hòa hợp tổ chức Điều giải thích trường hợp ghép bơ mẹ cho ơng bà cháu có trường hợp có trường hợp lại khơng ghcp được.

chức bạch cầu chủ yếu Kháng nguyên hai sublocus nằm nhiễm sác thể s ố ỏ người Mỗi sublocus qui định tổng hợp khoảng 20 loại khảng nguyên hòa hợp tổ chức.

Theo D ausset (1974), phát tới 33 alen hai sublocus số tỏ hợp kháng nguyên hòa hợp tổ chức lên tối trên 3500 loại kháng ngun.

5.2 TÍNH ĐA HÌNH DI TRUYỀN, CỦA CÁC TÍNH TRẠNG HĨA SINH ĐỘ NG VẬT

Các tính trạng hóa sinh tính trạng mn xác định nó người ta phải dùng phương pháp phân tích hóa học hỏa sinh học Hướng nghiên cứu di truyền học hóa sinh ngày càng phát triển mạnh mẽ tấ t đối tượng vi sinh vật thực vật, động vật người Trong năm gần dây nhò cài tiến các kỷ thuật phân tích hóa sinh ngày dại, xác, có kết hợp máy phân tích tự động với máy vi tinh dã rút ngắn nhiều thời gian phân tích tính trạng tỏi hàng trăm, hàng nghìn lần.

N ghiên cứu tính đa hình di truyền hemoglobin, protein, huyết máu, protein sữa 1'ir/ym trong máu mô quan dược tiến hành từ lâu.

Năm 1955, Sm ithies o chứng minh tính đa dạng (li truyền protein huyết máu dộng vật ô n g dùng hai phương pháp là: Phương pháp miễn dịch học phát hiện nhóm y- globulin, nhóm p~ lipoprotein |4ư<)ng pháp diện (li đã phát hemoglobin, haptoglobin, transterin.

protein máu, mô quan, sữa trứng enzym trong máu dịch thể.

5.2.1 C ác h iể u h e m o g lo b in d ộ n g v t

Bằng phương pháp điện di giấy, gen tinh bột người ta xác định tính ' đa hình di truyền kiểu hemoglobin (Hb) động vật làm cđ sở cho chọn giống, tạo giống (lộng vật.

Hemoglobin có trọng lượng phân tử 64.500 Cấu tạo phân lử rủa hemoglobin gồm chuỗi polypeptit chuỗi cx 2 chuỗi p.

Cấu tạo chung p h ân tử heoglobin m inh họa ỏ hình 5.1.

Hinh 5.1 Sơ đố cảu trúc phân tử hemoglobin.

Hiện tượng đa hình phân tử hemoglobin biểu da hình trong trình phát triển cá thể tượng đa hình di truyền.

liên quan đến độ thành thục sinh dục Vì vậy, người ta sử dụng chỉ tiêu để đánh giá phẩm giống gia súc.

Có ba loại hemogobin khác q trình phát triển cá thể bị vã sô động vật khác:

- Hemoglobin phôi có cấu trúc bơn chuỗi polypeptit £ (£,) hoặc (p2e2 kiểu a 2e2.

- Hemoglobin thai (HbF) lúc thai - tuần tuổi di sau sinh 8- 10 tuần Cấu trúc gồm hai chuỗi a hai

chuỗi Y (a 2y-2)

- H em oglobin gia súc trưởng th ành (HbA) xuất sau khi sin h , tỷ lệ thấp, sau thay dần d giai đoạn muộn hơn Cấu trúc phân tử HbA gồm hai chuỗi polipeptit a hai chuỗi p (a

2p2)-Sự thay th ế HbF HbA tùy thuộc vào giông động vật và có liên quan đến độ thành thục sinh dục.

Ví dụ, bị Hà Lan lang trắng đen lúc sinh H1)F chiêm 75,5% HbF m ất di hồn tồn 110 ngày tuổi Bị sửa Catroma HbF 105 ngày tuổi Ở Việt Nam theo Phan Cự Nhân (1970) bò lai Sind lúc ngày tuổi HbF chiếm 60- 65% và m ất ở 100 ngày tuổi.

Hemoglobin phôi thai ở lợn có hai dạng tương tự (’> bị. Sự thav th ế Hb phôi thai HbA giống lợn khác nhau cũng có liên quan đến độ thành thục sinh dục ở lợn.

truyền theo kiểu đồng trội Khi điện di hemoglobin bị trên giấy ngưrii ta kiểu sau (hình 5.2)

Khi nghiên cứu kiểu hemoglobin gia súc khác nhau cho thây, cừu có kiểu hemoglobin dược quv định lxii cặp alen locut gen Trên điện di kiểu hemoglobin HbAHbA có cấu tử chạy nhanh, kiểu HbBHbB có cấu tử chạy chậm Dạng dị hợp tử HbAHbB có cấu tử tương ứng Kiểu HbA dặc trưng cho cừu vùng núi cao, HbB đặc trưng cho cừu vùng thung lũng, ngựa phát kiểu hemoglobin ỏ bò lợn thấy có kiểu hemoglobin.

(1: Đ ống hợp tỬHbAHbA; 2: Đ ồng hợp tỬHbBHbB; 3: Dị hợp tỬHbAHbB) - H i ệ n tượng da h ì n h (li t r u y ề n

Đa hình di truyền tượng dó bát gặp nhiều kiểu hem oglobin ỏ gia súc khác với tần số kiểu Hb lì quan th ể khác loài khác Hiện tượng này nhân tố đột biến, chọn lọc tác dộng, chủ yếu (lo dột biến gen gây ra.

Ở bị ngồi kiểu hemoglobin HbA HbB HbAB người ta còn phát kiểu Hb khác HbC ở bò châu Phi bò Ân Độ Ngồi ra, ở bị châu Phi cịn có dạng HbA2, HbAr, (Theo Osterhoff, 1964, O sterhoff Van Hađen, 1965).

l

Khi nghiên cứu thành phần axit amin HbA HbB bò, người ta thấy chúng có thành phần axit am in giống nlủiu nhưng khác sai khác tố hợp axit am in trong chuỗi po'ypeptit Trong phân tử Hb, vị trí glixin dược thay th ế serin, lizin; ỏ vị trí thay th ế histidin

Ở bò Việt Nam bị Hà Lan lang trắng đen nhập nội có kiểu HbA 100%, bị Sind th u ần có kiểu HbA HbB, bị vàng Việt Nam có alen H b \ Hbl! Hbr kiểu hình (Phan Cự Nhân, Đặng Hữu Lanh, 1985).

- Ý nghĩa việc nghiên cứu tia hình hemoglobin:

Nghiên cứu đa hình hemoglobin góp phần số vấn để chăn nuôi xác định nguồn gõc động vật ni Vì hemoglobin tính trạng ổn định vê mặt di truyền mỗi quần thể có tần số alen tương ứng, dó có th ể dựa vào dó mu xác định nguồn gốc dộng vật Ví dụ bị Jecsay có kiểu HbR, nhưng kiểu HbB lại gặp bị Tây Âu lại thường gặp <i bò u châu Á, châu Phi Do vậy, người ta dự đốn bị Jecsay bát nguồn từ An Độ di rư sang châu Au châu Phi.

Mặt khác, kiểu hemoglobin có liên quan đến sức san xuất dộng vật Pinco B V (1968) phát mối liên quan giữa kiểu Hb với sức sản xuất bò sữa Cụ th ể bò có Hl>B và HbAB có hàm lượng mỡ sữa cao bị có HbA.

ơ Việt Nam, bị lai Sincl có hằm lượng mờ sữa cao (5-6%) cũng có dạng HbB chủ yếu Tần s ô a le n HbB 0,913.

Bỏ có HbA lại có sản lượng sữa cao hờn, sức chống bệnh cao hơn HbB Do vậy, sử dụng kiểu Hb gia súc non đổ phán doán trước hàm lượng mỡ sữa sản lượng sừa giai đoạn non.

khá sớm thành thục sinh dục So sánh hai lồi bị Jecsay và bị Hà Lan thấy rằng, bị Jecsay có q trình thay thê HbF bàng HbA sớm có thời gian thành thục sớm so với bò Hà Lãn.

V lợn sơ s i n h k h ô n g p h t h i ệ n t h ấ y HbF, có t h ể t h a y t h ế 1 ỉl)F b Ìg HbA xảy giai đoạn trước đó.

5.2.2 T in h đ a h ỉn h p r o te in h u y ế t th a n h m u

Protein huyết máu hỗn hợp chất khác nhau. Người ta cỉã sâu chứng m inh vai trò quan trọng tiểu phần huyết tnanh vơi q trình trao đổi chất liên quan của chúng với t .11 tiêu kinh t ế khác.

a Thành pin protein huyết tha nh gia súc động vật khác

Tùy theo phương pháp xác định thành phần protein huyết thanh mà ta số tiểu phần (cấu tử) khác nhau.

Phường pháp điện di giấy tách protein huyết bò, lợn dược -1 tiểu phần là: anbumin tiểu phần chạy nhanh vồ phía cực dương, tiểu phần a -plobulin, p-g]obulin y-globulin.

Kết phân tích điện di protein huyết các piống bò Việt Nam, bò lai Sind, bò Vàng tách dược tiểu phần mô tả trên.

Sơ dồ tiểu phần protein huyết bò lai Sind như hình 5.3.

Kết phân tích protein huyết trâu Việt Nam cho thấy, huyết trâu tách làm tiểu phần như

kết qua phân tích trâu ỏ nước ngồi.

Khi phân tích protein huyết gel tinh bột thủy phân, gel polyacrylamid số cấu từ lớn tiểu phần ở giấy tách nhiều phần nhỏ tiền anbumin, anbumin, hậu anbumin a,-globulin,Ọ ;-globulin, P-globulin, Y,-globulin, y2-globulin

I

L V ÌĨI U I

Hình 5.3 S đố tiểu phẩn protein huyết bò (Phan Cự Nhản, 1968) I anbumin; II a- globulin; III p-globulin; IV Ỵ- globulin

Anbumin huyết đóng vai trị giữ áp lực thẩm thấu keo, vận chuyển liên kết axit béo, vitamin Hàm lượng anbumin gia súc có sừng chiếm 30-45%, lợn 25- 35% (theo Afonxki, 1965, Kundakhin, 1977) bò Vàng Việt Nam hàm