Thông tin tài liệu
ĐAI HỌC QUỐc: (ỈIA HÀ NÓI TRƯỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC Tự NHIÊN N G H I Ê N CỨU Đ I Ể U C H Ế C H Ấ T C Ộ N G H Ợ P MIẺN DỈCII L E C T I N - S E P H A R O S E D Ù N G T R O N G C H A N Đ O Ả N K H Ả N ( ; 11II; VÀ K H Á N G N G U Y Ê N M Ộ T s ố B Ệ N H UNG T H l ỉ M ã sô : Q T 0 Chủ trì dê tài : IHỈS.'1'S Đỗ Ngọc Liên Các cán tì tam gia: NCS T h c sĩ Ngu vẻn Vãn Lợi Tiên sĩ N gu yễ n Hạnh Phúc T h c sĩ N gu yễ n Thị Th an h Loan Học viên T h c sĩ Trần Thị Phưong Liên Tiến sĩ T rư ơn g Văn Châu IIẢ NỘI TI1ÁNG 5- 2001 LỜI C Ả M ƠN Ch ún gcr lỏi xin chán thành cám ơn Ban Giám dốc Ban Khoa hoe Còng nuliệ - Đại học Quốc gia Hà Nội Ban Giám hiệu, Ban Chu nhiệm Khoa Sinh học, phịng Khoa học Cơng nghệ Đào tạo sau Đại học, phòng Tài vụ trường Đại học Khoa học Tự nhiên, Đại học Quốc gia Hà Nội xét cluvệt, cung cấp kinh phí tạo điểu kiện tốt đê Ihực đẽ lài nghièn cứu khoa học Chúng xin cảm ơn ban lãnh đạo quan phoi họp nghiên cứu nhu' Bộ mơn Hóa Sinh, trường Đại học Dược Hà Nội, c 01141 ty Dược phẩm Trung ương I, Viện Vệ sinh Dịch tễ Trung ương Hà Nội cát' bệnh viện 108, bệnh viên Bạch Mai bệnh viện K Hà Nội Cuối cùng, ng xin tướng nhó' biêì ơn bệnh nhân dan g SOI1U khuất đóng góp họ cho nghiên cứu bước đâu với muc đích tót dẹp chân đoán sớm bệnh nghèo đế kéo dài thoi gian sống hữu ích cho người IỈẢNÍỈ CÁC C H Ữ VIẾT T Ắ T VẢ KÝ HIÊU ADN : Axit Deoxyribo Nucleic AFP : Alpha Fetoprotein BSA Bovine Se rum Alburnin Con A Con G leclin từ hạt đậu c ensiíonnis c gladiata 11?• h\ : Human Se rum Albmnin kDa : Kilodalton HLA : Human Leucocyte Antigen ELiSA : Enzyme Linked Immunosorbent EBV : Epstein Ban Virus HĐ TS : Hoạt độ tổng sô 1IĐR : Hoạt độ riêng lu : Immunoglobulin, globiilin miễn dịch (IgA, IgG, IgM, IgD, IgE) OD : Optical Density PBS : Phosphate Buíícrcd saline vSDS - P A G E : Sođium Dodecyl Sulíate - Polyacrylamide gel ElectroỊihdrcsis CìTP : Guanozin Tri Photphat MHC : Main Hislocompatibility Complex Phức Assay hệ phù họp ló chức chủ yêu TCR : T - C c l l Rcceptor TN F : T umour Necrosis Factor Yếu tố hoại tử ung U TBM TBG : Ung thư biểu mô tế bào gan (HCC) LỈTNH : Ung thư nỗn hồng (Human Yolk sac T u m o m ) thu' M Ở ĐẦ U Ung thư bệnh hiểm nghèo loài người T h e o thơng kc cua Parkmg (1998), tồn giới có khoảng triệu người chắn đố n m;ìe bènli « tlur trong~ năm có triệu chết bênh O người o J () Viòl Nam lừ 1993, theo GS Phạm Thụy Liên - chuyên gia vế ung lim co 1111 70,000 người bị bệnh ung thư tổng số 71 triệu dân lúc đó, nghĩa khống ngàn dân có I người bị ung thư Đó tỉ lệ cao Sang đáu thô kỳ 21, nén kinh tê công nghiệp ngày phát Irièn nan nhiễm mịi trường tăng lẻn, bệnh truyền nhiễm phát triển moi ho' ngại lất lớn đòi với sức khoé cộng đổng, hoàn cánh nước t;i Ung thu cán phương pháp diều trị Việc bệnh phức tạp nguyên nhân bệnh sinh kiểm soát phát sớm đê điều tiị có thơ’ làm giám tỷ lệ tu' vong kéo dài thời gian sống bệnh nhân Mục đích đề tài này, điều kiện hạn chê kinh phí ehúiiịi loi vẩn gắng vận dụng kiến thức thành tựu tiến giới liong lình vực này, kếl hợp với hợp lác nước qu ốc tế bước đâu lưa chọn sơ lectin tinh chê lừ nguồn thực vật Việt Nam , “ nghiên cứu điều c h ế chất cộng hợp miễn dịch lectin - Sepharose dùn g chắn đoán sớm kliánu nguyên kháng thể số bệnh ung thư người” Nội dung đề tài bao gồm hai phán Pììảu thứ Iihàt, lựa chọn phương pháp đê tinh c h ế sô leclin co hc;ii tính ứng dụ nụ quan trọng y học miễn dịch Pliần thứ hai, nghiên cứu thử nghiệm điều c h ế chất cộ n g hợp miễn dịch lcctin dể nghiên cứu biếu bất thường kháng thể kháng nguyên (V số bệnh ung thư, góp phần chắn đốn sớm đặc biệt ung thu' gan ung thu vịm họng Các cơng việc nghiên cứu chi bước dầu thu nhứnu kcì hứa hẹn tiêp tục kéo dài nhiều năm đế hoàn Ihiện mọt sinh phẩm chẩn đốn sơ bệnh ung thư hiểm nghèo C h ú n g loi rai m o n u giúp đỡ cấp lãnh đạo nhà trường, Khoa quan hữu quan BẢO C Ả O r ỏ M TÁT Tên đẽ tài: ÍMiHIÊN CỨU ĐIỂU CHÍ: ('HAT CỘNíí HỢP MIẾN DỊCH LECTIN-SKPHAUOSI[)1 N(; TRONíỉ chấn đoản KHẢN(Ỉ n g u y ê n vả k h n í ; t h ể c ù a m o i so BỆNH UN(; T H Ư Õ N(ỈƯÒI Nhữn g ngi thực hiện, 2.1 Cliù trì (lé tài: 1HỈS.TS Đỗ N g ọ c Liên - Bộ mơn Hóa Sinh, khoa Sinh học Trư ờn g Đại học Khoa học T ự nhiên, Đại học Quốc gia Hà Nội 2.2 Các cún tham gia: NCS T h c sĩ Nguyễn Văn Lợi i liạc Nguyỏn Thị Thanh Loan Tiến sì; Nguyền Hạnh Phúc l i ê n sĩ/'Trương Văn Châu Cl,cÀ(r Học viên T h c su Trần Thị Phương Liên Nội (lung nghiên cứu đãng ký: ỉ ỉ lo n thiện quy trình tinh chê m ột sỏ lectỉn có hoạt tính ứng (liuiiỊ q u a n t r ọ n ẹ tr o n g n g h i ê n c ứ u m iế n d ịc h V h ọ c ' 3.2 Nghiên cứu thử nghiêm điều c h ế chất cộng hợp miễn dịch chán đốn sớm sơ bệnh ung thư, xét nghiệm biểu bất thường cua kháng thè kháng nguyên điểm ung thư (Tumor marker antigen) Các két qua đạt được: 4.1 Đã tinh ch ê loại lecỉin có hoạt tính đạc hiệu miễn dịch Con A Con G loại lacalin, lựa chọn loại, có hoại lính mien dịch đậc hiệu cao đê thiết kế sinh phắm miễn dịch nghiên cứu chắn đoán sớm úng thư 4.2 Đã thiết kê sinh phẩm dạng cột lực miễn dịch: Con A Sepharosc 4B, Con G-Sephnrose 4B, J 1-Sepharose 4B J4- Sepharose 4B Có hoại tinh đặc hiệu cao để tóm hắt kháng thể kháng nguyên chì điếm so bệnh ung thư: ung íhư gan, ung thư vịm họng Q uy trình Ihiẽt kê cột lực miễn dịch đạt liêu chuẩn cao: - Có lực miễn dịch đặc hiệu - Kha lìãng dùn g báo quán lâu dài hàng năm 4"C - Giá thành bang phẩn ba so với sản phẩm phai mun nước - Sử dụng tài ngu yên nước, có giá trị kinh tê cao 4.ĩ Bước đáu hồn thiện quy trình lạo sinh phàm ilưới dang xót nghiệm nhanh miễn dịch đại (ELiSA: enzyme Linked ỉm nu m oso rben t Assav) 4.4 c ác kết nghiên cứu đăng báo Tạp chí Dược học v;ì I báo cáo O' hội nghị Sinh học bán tồn quốc tháng 8/2000 T ó m tát kết nghiên c ứ u '3 5.1 Đã thăm dò nghiên cứu tinh c h ế số lectin từ sơ lồi cà\ họ đậu họ dâu tằm cuối hoàn thiện quy trình sác ký lực dạc cao đẽ tinh c h ế loài lectin ứng dụng đặc hiệu bắt giữ miễn dịch kháng thò’ IgA kháng nguyên AFP Đó lectin Co nA ConG lừ hai loài đậu dại trồng Việt Nam (Yên Bái Lào Cai, Ba Vì - Sơn Tây) tluiộc chi Canavalia ensiformis, Canavalia gl;uli;il;i Đây hai loài đậu dại chưa dùng cho thực phẩm hạl chứa nhiên gluco/it axit Xianhy dric (HCN) có độc lính cao Sụ' phân loại khoa học xác nhận phân tích hình thái ■ Trung tâm Khoa học Tự nhiên Công nghệ Quốc gia thực Trên co' sớ khoa học đó, chúng tơi tiến hành phương pháp tinh chê ;ii lực có biến kỹ thuật Golstein & cộng thành cổng điều chê ilnnu tinh khiết cao hai loại lectin Một sơ lính chất lectin Co nA CoitG + Tinh khiết chí chứa băng Protein SPS-PAGE + Hàm lượng Protein chê phẩm địng khơ 90-95% + Hoại đ ộ n g liêng ngưng kịt hổng cầu nhóm máu A: 7,2 X 10 đon vị/mu (liên Im! piotein chế phẩm) 6.6 X lOVtưn vị/mg tương ứng (nêu m u chc phẩm nàv cùa hãn g hóa chất SIGMA tiêng Ig phải trả I80USD, dang ctóim khó) Đ ộ tăng từ 10 đôn I 1,5lần so với dịch chiết PBS + Có tính đặc hiệu đường glucoza, manno/.a dẫn xuàl cua dninii co iln' linh dặc hiệu cao với kháng nguyên AFP ung thu + So sánh với tiêu chuẩn quốc tế, chê phẩm lectin lực miễn (lịch lì.IV đại liêu chuẩn cao chứng minh xét nghiệm miỏn tlịcli bệnh viêm gan ung thư gan + Ráo quán dạng dun g dịch dạng đông khô hàn g năm có hoại lính miễn dịch cao (Ứ4°c, có chất chống khn azide 0,04%) 5.2 Hồn thiện quy trình điều chế cột lực M ucine- Sepharose 4B lại Việt Nam đế linh ch ế lực lectin sơ lồi mít chọn lựa có hoạt lính Itk miẻn dịch đặc hiệu cao Đ ó lectin mít dai, mít tơ nữ, mít dại Táy Nuiivẽn có tịn phân loại khoa học tưig ứng Arlocarpus helerophyllus l.iimk Aitocarpus Champetlen Cìagn Arlocarpus - masticata Gagn Một sơ đặc tính c h ế phẩm lectin là: + Tính khiết đồng chứa tiểu đơn vị 14 !7 kD a điện ili SDSPAGE + Hoạt dộn g liêng tương ứng 650,5 x10 '; 52 ,2 x (ý x ' don vị lui/ma, protcin Và độ sau tinh c h ế cột sắc ký lực tăng từ đèn so với dịch chiết thô lừ hạt + So sánh với tiêu chuẩn lectin quốc tế, c h ế ph ẩm có độ tinh cao hàm lượng P ro te in tiên 90% (phấn cịn lại muối đệm) + Có hoại tính dặc hiệu cao với IgAI chứng h kỹ IỈHI.H XÓI nghiêm miễn dịch uch terlo n y 5.3 Thiôt k ế cột lực điều kiện tai Việt Nam chứa chât cộnu họ'Ị> miền dịch lectin- Sepharose: 11- Sepharose 4B; J2- Sepharose 4B; J4 Sephaiosc 4B dù n g đế bắt giữ miễn cỉịch IgAI bệnh nhân ung thư gan ung thu' vòm h o n uc Kết quà phân tích nồng độ IgAl từ huyết bệnh nhân ung thu' gan la 7.85 ± 0,80 (với = 30) tăng gấp 2,76 lán so với người bình thường (2.84 11 ±0.28)m g/ml, khác biệt có ý nghĩa (hống kê 5.4 Thiêt kế CỘI lực cliãl cộng hợp miền dịch C on A - Sepharosc 4B \ ConG Sephnrose 4B đè bắt giữ kháng nguyên ung thư gan A F P (ung thư bicu mo tè bào gan HCC) để tinh chê có hiệu AFP ỏ' ma LI huyêl ung lim Các chê phấni kháng nguvên nàv sử dụng nghiên cứu lạo khánu thỏ (la đòng đơn dòng liong chươiti; (rình nghiên cứu sau đế phái stVm unu thu' b;mg phương pháp xét Iiụhiộm miễn (lích hồn thiện cao 5.5 Đang hồn thiện Cịiiy limlì xét nghiệm ELiSA liên kê( lectin míí dê bál giữ lực kháng thổ IgA từ huyết bệnh nhân ung thu' gan Kêì cho thấy: Sử clune si nh phẩm (lạng ELISA xét nghiệm lìồng độ lgAI luiyét Ihanli cho kè! xét nụhiệm nhanh, xác cao xác định nồng độ IgAI huyèl bệnh nhàn ung thu' gan (7.5 ± 0,5)mg/ml (ăng gấp 2,5 lán so với người không mác bệnh (2,84 ± 0,8)/mg/ml Và đôi với viêm gan siêu trùng (10,98 ±0,83)mg/ml (dã nghiên cứu tù' 1998-1999) gấp 3,86 lân so với bình thường 5.6 Đang nghiên cứu quy trình tao sinh phắm dạng ELISA cho XÓI nghiệm khánu nguyên ung thu' AFP sinh phàm xét nghiệm phân biệt khánc nctiyèn AF:P bệnh nhàn viêm gan siêu trùng bệnh nhân ung thư gan T i n h hình kinh phi (lề lùi.' 6.1 Kinh phí câp ngày 15/8/2000: 7.000.000đ (Bảy triệu: gổm ca lièn quản lý đề lài 300.000(1) 6.2 Các khoán chi: - Mục 10: Vật lu' văn phòng 300.000c1 - Mục 12: In ấn, mun tài liệu làm c h ế ban, ảnh tiêu bán 700.000c1 - Mục ỉ 13: Công tác phí thu mua mẫu lại Ihực địa I OOO.OOOđ - Mục I 14: Ticn thuê hợp đồng làm phân (ích thuê xác định tên khoa học 1.800.000đ - ỈVIục 19: Chi phí hoạt động chuyên mồn,mua hoá chát đụng cụ (huỷ linh 2.900.000c1 Tọn g cộ n g clĩí chi hết 7.000.000(1 XAC: NH ẠN (UA BAN CH ú NIIIÊM KIK)A ( H Ú TRÌ f)í; TẢI PGS TS Đ ỗ N gọc Liên t SUMMARY StUtỉy OI1 piepniation C)f Lectin - Sepharose Conjugates for tliagnosiic oỉ anlihociy and anlcgen's T m nor markers The icsulls ohtaincd oí lliis projccl are: Fivc Lectins vvere purified íYom species of Vietnamẹse (Arícx ti/>/>ii\ hclcroỊìììxlliis, A champedc'II, A masticata Canavaỉio i‘Ịisifontiis CaihiYdlhi ìịIiulidtd ) for preparation ()f immunological conjugates to dingnose Tunioi markers Sludy on IgAl Concentration from healthy and Tumoui (íICC lepaiocellukư Carcinoma) sera using iinmunological Conjugates basccl ('II lacalin - Sepharose 4B affinity column The results obtained showed thai IgAI Cdiicentralion íiom liuman Hepalocelltilarcarcinoma (HCC) s e m m (7,85 ± 0,8 mg/ml), is 2,76 times higher llian thai of healthy human (2,84 ± 0,28 mg/ml) Using modiíied ELISA technique períeeteđ in om laboratorv (E n / v m L.cclin linketl I mm un o Assay) we liave shovved IgAI Concentialion íYom Scra uí n c c paticnts is same in Comparison vvith Affinity chr om atog iaph y techniqtic Usiim highly puriíied leclins Con A and Con G from seeds ol l u o species Canavalid cnsiỊormis and Canavalia ạlưdiata to m ak e ConA and Con G - Sepharosc 4B a n i 11 ity Columns for tMcctirtịỊỊ serum T u m o r markci API’ in palienls of livei and brcast cancer, we showeci a high speciíic interactiorì bclxveen lectins Con A or Con G and AFP as well as soine pathologicnl glvcopioteins Thai was Ihe nia in base for om later research on leclin alTinity AF1J markers in carly diagnostic ()f HCC, especially in palients al high risk snch as cỉironic hcpaíilis and Cirrhosis This results was published in papers of national joumals IVoịect Co - ordinator Assoc P ro f Do Ngoe IJeii I T Ổ N G Q U A N T Ả I L I Ệ U Khái niệm võ ung thư co c h ế l>iếu ung thư / / C ieii íỊ y ỈỈIIÍỊ t h u v g e n k i m h ã m u n g t h , Ung thư (Tiimoui Canccr) biếu tăng sinh vó han ciii) mot clónu tê bào lạo nên khối u có bàn chất đơn dịng Các dò n g tê bào 11,1 V co bicu h i ệ n hát I h n g vé di tr u y ề n s ự hoạt đ ộ n g q u m ứ c c ủ a m ộ t so u cn Mí' roi loan tốn ihuơng nhiễm sắc thê dẫn đến vi phạm vào trình phân chi;i k' bào Sụ' bâl thường cúa máy di Iruyổn tê bào, dẫn đến vi ph ạm vào t|í (lình hiệt hóa tê bào và, kìm hãm tiêp xúc, vi phạm vào q trình tu chói theo chươn g trình (apoptosis) vốn sán có cùa tê bào sơng Từ lẽ hào ung thư tăne di (metastasis) đến khu trú m ô lê bào dặc hiệt khác gan, não, tim, xương N g \ nay, người ta chứng minh ung thư bệnh hiểm nghèo co ban chài gen bàn chất tiếp thu di truyền Thê m vào đó, người la dà c h n u m i n h c c y ê u tô tác đ ộ n g p h ứ c lạ p b ê n tr o n g c th ê m ô i I r ờn u Mills: quanh dã tao nguyên nhân gây bệnh ung (hư Tron" tô bào luôn tồn gen ung thư gọi O n co ucn CIIII k' bào nhữnu gcn lạo sán phẩm kiếm sối tín hiệu hoạt hóa V.I I.mu sinh lơ bào Đó thụ thê (Receptor) yếu tơ tăng trưởng, piotein truyền dẫn tín hiệu nhu' Photpholyrozin Kinaza (PTK), k ina/a cua SCI Iii/trenonin, protein G, protein lliam gia vào báo vệ c h ố n g oxy hóa (Bcl-2) hoậc yếu lơ phiên mã (C-myc) Các oncogen hoạt hón bãim đột hiên Đột hiến làm rỏi loạn hay đối kh án g lại chê đicu hịn sinh lí cùa biếu oncogen Những đột biến gen họ ras mội ví dụ dược thây rõ phần lớn khối 11 người, gáy phong bê (bao váv) m ộ t loại p r o t e i n p l r a s , l m t h a y đ ổ i c ấ u h ì n h h o t đ ộ n g , c h ố n g lại SƯ bãl ho ại trình thuy phân CìTP thành GDP Chính q trình thủy phAn CÌTÍ’ dã curn: cáp tín hiệu cho hoạt hóa phân chia tê bào Tác động cua on co gen co IỈK' thực băng chuyên đoạn nhiễm sắc thể, liên quan đèn tlicu hòa cua aen khác Ví dụ chuyên đoạn nhiễm sác thể 14 18 liên quan đón o n cogen Bcl-2 nằm nhiễm sắc thê 14, vùng DJ gel IgH (chuỗi nạnLi 1^) Sự biếu mức gcl Bcl-2 di c h ế chết theo chưưim li inli cua lê bào (apoptosis) lympho B dần đến ung thu' dòng tế bào B Ironu Inniịi lâm tó hào niáin (tuý xirơng) Sự chuyến đoạn nhiễm sác Ihè (hnlcli.'|)iuloin (All') • NGUYỀN HỮU UỬC- NGUYẺN 1 | MỘNG HltN: 12 HGUYI:N LA Minh • NCIIYFN THỊ TIIANII I.OAN: Stiidy on Iho nllmily < if liió t s ố b ệ n h n h ậ n u m j th VOI le c lin C o n koiii rau m ã - nghê • in Phu ího Piovince •■p nhiou ] háng XII - 199G quà chiu, r.huiKi tni llm (lươc I k(j quá, số quà xứ ly v.'i thu (lược 55,6 g hạt khô chi tiêu cluiẩn làm ( ) n ỉ:'"' ( 1*’ ( * V t| f i í : I 111 VMM f11f\ IOM c1.il) tiõn đưói (lạng trồng đai trà III K Ế T LUÂN Kõt (|un llmr nghiệm tiổng bn kích Phu ĩ ho ' ’ Sou In,lự) nàm, ,‘tl Cíi c;ic cày (la bam v;jn > sơ V õ't dố lái - Bân đánh máy M Ỉ I I I É N CƯU Áỉ L ự c CU A G L Y C U r n O ĩ E I N ƯÀ A L P I I A r E T O P H i ) Ĩ E I N ( A F P ) HUYẾT TỊỊIANII IVÌÙr s GỆ N H N H Ã N ƯN G THU v ỏ ì L t C T I M C O N A OIỂU CH É TÙ HẠT DẬU R Ụ A ( C A N A V A U A E N S i F O R M I S J VIỆT NAÍVI N ( ; iJ Y H N V Á N L Ụ I 1, D À O K I M C I I l ) ỏ N c ụ c LIÍCN2, N(’.ƯYỀN THỊ THANH LOAN2 I / Trirơ'iìf' ilni hục Dưựv l ì Nội •jTnrờnff (/ạ/ học Khoa hục tự lìlìiơiỉDại học Qc gm Hà nội I I ĐẬT VẤN ĐỂ Viẻc khám phá tương lác nhân lièì c ác loại tê bào cúng phán ứng ôn kếl đ ăc hiệu cùa lectin với (|lycop(olein lã mớ (liến vọng to lởn viêc ứny dunt) 'A I' c i l i liu o c n ụ c - sỏ 1/2001 loctin vào nghlôn cứu mỉễn dịch học, y dược hoc chân (ĩoán unq thư, chấn đo án phòrựi rigưa bệnh suy giảm miền dịch AIDS Lectin, mõt (lang protoin có Ịioal tính sinh h ọc pítổ biơn IrniiỊỊ thô (lỏng vât, Ihưc vât vá vi sinh vnl, • N g h iê n cú u - K ỹ th u ậ t đõ tinh khiết đẽ điều chn cột lực Con, A sepliarose 4[3 dung cho nghiỏri cứu biểu hlộn A Ỉ T (Ịlycoproỉoin huyết t nh binh thường bệnh lý Điểu c h ê c ộ t Con A - s e p h a r o s 4B vá n g h i ê n c ú u h u yế t b ệ n h ly Hồ tan m g Con A đơng khơ có mức độ linh khiỏl c ao trốn dung dịch dâm trộn vảo 10g gel s ophar os e 4B hoạt hoá b ằ n g BrCN, ' S d ụ n g cột, s ắ c kí ál l ự c ' n y nghiồn cứu biểu cùa glycoprotoin vồ AFP huyết bệnh nhân ung thư gan ung thư vu thu Kất quà s a u ; ' ■ Xác đinh hàm lương protein tổng s ố c ác mẫu huyết binh thường bệnh ly theo p hư ơn g ' ph áp lovvry v ' p hư ng pháp đo quang phổ bước s ó ng 200nm, cho kết bàng ( k ế r q u trung binh 10 mẫu lặp lại) f '■ n ò n q 1: Kât qu.n srìc (lịnh hảm liíợnq prn/niiì hoi ĩg lìuyỏl tlw nh (mq/ml) ' ' ninh Ihườngị Ung thư vu Ung thơ gan Hnm luợng piotein tlioo plnrang phnp Lowiy 73,29 100,06 18,90 H.irn lượng proloin thno phưong phép đo 200nm 62,05 90.72 t o , 19 WAu huyiM Phương pháp Kết quà cho thấy bệnh nhân ung Ihư gan ung thư vú, hảrn lưỌỊÌg protein ln ln cao người bình thường vẰ tăny lương ứng 137,6% v '162,3% Điểu náy chưng tỏ"trong huyốt bệnh lý (ung thư) dã xuất c c glycoprotein c c globulin miễn dịch, s ỏ liệu c ho tháy cà phương pháp.xác, định dều cho hàm lượng proieln lâng so VỚI ì mẫu huyốt bình thường va gần tương đương Như với mẫu huyết, thanh, kết q xác dịnh bẳng phương pháp klv-ín nhmi có khnn rihnu, dióu (io ú buớc íiỏny 0 nm chí có acld nmln vòng hấp thu c a o nhát đỏ phương pháp Lowty hầu hết c c acid amin déu kết h p v ì thuốc thử Folinciocaltôur đ ể tạo phức chất màu Proleln r h u í n ; Huyốl thnnh BT H T B ĩ qua cột : Huyết K vú 5, H T K vú qua cột ; Huyết K gan HT K gan qua cột Minh 2: Đ lặ n dl đ cố c m ấ u h u y ê t th a n h trước sa u khl qua cột Kết quà điện di cho tháy c ác mẫu huyết binh thường Khư bênh lý cho rầt nhiều băng protein Mau huyết qua CỘI lưc cùa bệnh nhân ung thư vú ung thư gan xunít h i ộ r i m ộ t B ố b f i n g p r o t o l n n h u n q r õ v r ộ m nhât băng c ó Irọny lưựrty phản tứ khoRitg 69kDa - 70kDa tương đương VỚI trọng lượng p h â n tứ c u a A F P c ú n g n n g đ ộ trô n đ i ệ n di dồ, mẫu huyết K gan đậm nhiều s o với mẫu huyết K vú chứng tò lực khác cun AFP với lectin c ác bệnh lí khác Bă n g protein gần VỚI vị trí cùn băng albumin huyếl người (66kDa) trôn điộn tll dổ không lltấy xuốt ciál băng nảy albumin huyết khơng c ó lực với Con A [8] vá t hế khơng háp phụ qua cột Con A - s e p h a r o s 4B nht/ đối vói AFP hut t nh người vổl khầ n n g h ấ p p hụ 90% cột ál lực Con A Hơn nửa, nồng độ AFP huyết người bình thưởng thấp có khoảng 20 nanogram/ml khơng dủ dể phát điện dl đồ.1Kết c h ú n g phú h ợp VỚI nghiên cứu c ủ a T a k e t a K v c c n ghiên c ứ u c ủ a Ruoslathi [6,8] c h o thây Con A liên kèt đặc hiệu với AFP ung thư g a n ' ‘ ‘ IV KFT IA )Ậ N • s ứ dụng Con A tinh c c ó độ tinh khiết cao tử đậu rựa (Canavaliâ ensiíorm is) Việt Nam để thiết kê cột'ái lực Con A * sepharos 4B dùng nghiên cứu biểu AFP s ô qlycoprotein huyết bệnh nhân ung Cho protein huyết hấp phụ côt thư gan ung thư vú cho thấy lectin Con A tương tác đặc hiệu c a o với AFP s ỏ Con A - s e ph a r os 4B, sau phơn tích 'dịch glycoproỉein huyết bênh lý Đỏ giải hấp phụ khỏi cỏt SDS- PAGE Kết điộn di Ihể Hình ? > c s đổ chúng tôl liếp lục tighiỗn cứu điổu chị’ T Ạ P C H Í DƯỢC H Ọ C - s ố 1/2001 J h P lD t íiỵỉ ỵ ^ / l o o ± Ngliien cứu hiểu nổng dọ kháng tliè IgAI từ huyết N^ưịi bình th ườn g b ệ n h n h â n ung th biểu II1Ỏ t ế bà o g a n b a n g sác kí lực Sepliarose 4Fi-Iectin mít Việt Nam Ngun Ván ỉ (rì, Đào Kim Chi (I) t)ó N ịịọc ỉ.ien (2) t rương Văn ('háu (3) Nguyễn ỉlanh r h ú c (4) (1) (2) (3) (4) Trường Đại học I )ược I Nội Trường đại học K11TN - f ) l l ( X i 1là nội Trường đại học sư phạm ỉ nội Viện Vệ sinh dịch lỗ Trung ương Đãt v:m (le: Chi Ariocarpus họ Dâu tằm (Moraceao) Việi Nam có khống trẽn 20 lồi [2], leciin cua mội sổ loài ihuộc chi dã dược lách linh chê nghiên cứu li mi vé đặc tính cấu Irúc phan lử [3,4,8] Các tác già khẳng định lectin thuộc chi c ó phan ứng đặc hiệu với ỉgAI I ì , , 8j Cìlohulin niiỗn dịch kluing huì có hàm lưựnụ ổn định người khóc mạnh, tà mội chí sỏ giúp đánh giá nang đề kháng thổ, số' liiay đỏi mội sỏ' Irường hợp bệnh li, Nố n g đi) l g A huyêì ihanh người Việi Nam bình Ihường Ì63 ± 30 ( m g %) lãng lôn bệnh nhân bị viêm gan virus, ung thư [ 1,3] Trong phạm vi báo này, chúng lỏi nghiên cứu biểu cùa IgAl huyết bệnh nhăn ung thư biểu mỏ tẽ bào gan ( UTBMTBCÌ) nhờ lực lương tác dặc hiổu với iectin míi irơn CỘI sác kí lực JI -Scpharose R bà ng kỹ Ihuât m iỗ n dị ch leclin en/.ym ( kỹ thuật IÍ1.1SA cài tiến) ( C ộ t s c Ả/ i lự( íịcÍ iì vớ t l c c i i n m í t A r i o c a r p u s l i c i e r o p h y l l t i s [ x in ik ịỉỌÍ l 11- S e p h u r o s e -lli) N ụ u y e n lien p h u o i m nliiíp imliién cứu: C hê' phẩm lcciin mít (Artocarpus heterophyilus I anik) (gọi J I ) dà tinh c h ế kì ihuâl sãc kí lực Sepharose 4B - Mucin Đ ộ tinh c h ế phàm leclin I gAl sau linh chê xác định bàng phương pháp diện (li ưên gcl polyacrylamid iheo kĩ thuật I acmmli [ J ii uyêì người hình thường huyốl bệnh nhân UTBMTBCÌ dã (.lược chán đoán kỹ ihuat m õ học đo Viện Quân Y 108 cung cấp Các mẫu huyết llianh thu nhan kết lúa dung d Ịch A m o n Su Hat 41% bão hòa Thu hồ tan kêt lúa irờ lại lượng lơi thióu liệm 1’BSO,I.SM pl 1—7,4 Phân lích hàm lượng IgAl nhở cột sác kí lực J1 - Scpharose 4H Cội sắc kí lực 11 - Sepharose 4B (lược điổu c h ế từ lcclin mít linh khiêì Scpharose 4B Iheo phương pháp March cl al [7] dã dược hoàn thiện Việl Nam Xác định Proicin theo kì ihuẠi q u a n g bước s ó n g n m kỹ ihuật Brađlorđ với ihuôV thử Brilliant Bluc (ì 2.SO Các sỏ liệu dược xứ lý theo chương Irinh phần mổm thống kô SPSS ■V Kol (Mià t h o luân: Chúng lỏi tiến hành phân tích hàm lượng I g A l lừ 30 mẫu huyết ihanh người khoe mạnh hình ihường 30 mẫu huyếl Ihanh hệnh nhân UT BMT BG két quà trình bày báng Kèl qua cho thấy hàm lượng IgAI huyêì người khoé mạnh 2,84 ± 0,28, phù hợp với kốl Cịuả nghièn cứu cùa tác già Vãn Đình lloa, Trấn Thị Chính dối với huyét ihaah người \ iội nam trướng ihành không mắc bộnh [1] hàm lương IgA! huyêi Ilutnh bệnh nhãn U T B M T B í ì 7,85 i , cao so với người bình thường la 76 lần Sư khác có ý nghĩa thống kè với [>0,()0I ) T ịịỊ [ umị [ h a m k h ao : \ an Dinh loa, Tnin Thị Chinh ( 96 ) I lùm lương lg(ì, IgA, IgM irong huyếi nturời hình Ihường Nghiên cứu moi sò' chi liẻu sinh học cúa người Việl Nam - (Ký yếu cơng irình I lội nghị lồn lịiiỏv Y học Viội Nam) trang ỉ 75 - 176 N X B Yhọc I nội Phạm I l oàng lộ ( 0 ) ( \\y ccS Việt N a m Nhà xuấl bán irẽ - Thành phố 1lổ Chí Minh V )ỏ N g ọ c 1.iên, Trương Văn Châu, Nguy ền 1lanh Phúc, Cung Thị Tý (] 99 9) Sự hiên đổi hà m lượng I g A l huyèl người bình thường người bệnh v i êm gan siêu vi trùng nhờ Iươn lì lác đặc hiệu IgAl -lectin ni (Ar locar pi ts hei cropl iyl lus I.cimk) Tap chí sinh học tập 21, sơ’ I B, trang 102 -109 I )o N g o e I ien, Brillard M., 1locbckc J., (1 99 3) ilic a and (i-suhuniis ol the jacalin are cl cavage prođucls í rom a 17kl)a precusor Jìiochomi Biophys Acla, 156, p: 19- 22 .Ỹ IX) N g o e I ,ien, Brillarđ M., Ị loebeke J., Aucouiurier R , ( 95 ) Noưvclle chainc a đe lacalin c h o / đeux espèces sauvages đe jaquier Compl cs Rcnilus, Ac ađé mi e ties Sciences, 1’aris, 318, I’: 167-172 1.aemmli U.K k e a gc n l s and gcl íur SDS-PACÌI: Niilurc (227) , 1970 p X() Maivh S.C., Parikh !., Cuatrecasas Ỉ’.A ( 74 ) Simplilied meihođ lor Cyanogen bromitle aclivalion o í a g a r o s e Ibr A l ĩ m i i y chromaiography Anal lỉiochcm 60, P: 149-152 X h n e a u N., Aucoiiuirier R , 1’reucl l l o m m e I L, Uagiwara K and Kobayashi K ( I C)I ) Slmctural and íunclional vanability /\] concenlration /rom licahliy mui ỊlepaỉocelluliiìCurciiKima SCI'U IISÌIIIỊ \ ' i c l N a m J c a H n - S e p h a r o s e l i aỊỊ it i il y c o h i n i n N g u y a i ì a n L o i el al W c have usctl ihc jacalin , a lcciin puriíial Irom \ ielnamese lacklruii (Ariocarpus hcl ci ophyl lus aink) lo đesign 11 Sepharose B alíinily col umn ÍOI' siuđying IgAl coiKvntraiion Ironi hcalihy and I lepaioCellularCarcinoma scra The ivsults obtaineđ showeđ ihai l g A l concenlralion Irom human I IcpatoCellularCarcinoma s erum (7,85 í , i ng /ml ) , is , l i me s highcT ihan thai o! heallliy human (2,K4 ± (),2X mg/ml) Ttk' usc ol iTKKliíietl I J ISA technique (Kn/ ym-l acl i n linked l mmunosorbcni a s s a y ) ÍOI' đ d e r m in a lio n Ig A I c o n c c n t t ÌD ii \l l inii> i h m m a l o g i a p h y technique íro m SLTa i n đ i c a l a l Ih c s a m c iv s u lls in c o m p a r i s o n w it h Bộ KHOA HỌC, CÔNG NGHÊ VÀ MƠI TRƯỜNG CHƯƠNG TRÌNH NGHIÊN c ứ u c BÁN TRONG KHOA HỌC Tự NHIẺN Những vốn đê EMGHIÊN CỨU Cơ BẢN TRONG SINH HỌC ■ BAO CAO KHOA HỌC HỘI NGHỊ SINH HỌC ọ u ố c GIA (HẢ NỘI, N G À Y 8-9 THÁNG NĂM 2000) ' e D ĩ] ÚD t ì »1.1 Nỏ! NHÀ XUẤT BẢN ĐẠI HỌC Q U Ỏ C GIA H À NỘI, 2000 NHỮNG VÁN ĐẾ NGI HÊN c u c BẢN TRONG SINH HỌC Đ Ặ C TÍNH LE C T IN V À PRO TEIN DIINỈH DƯỠNG IẺr\l QUAN Đ ẾN TÍIYH Đ A DẠN G C Ủ A C Á C LO À I Đ Ậ U HỌ F A B A C F A E TR' ‘N G V Ả N C IIÂ U Trường ỈJ học S p h m I I H N ộ i TRA IT U Ấ N QU Ỳ N H Viên C ô n g /1 hệ Sau thu hoenh IU ) N ộ i N (i J Y Ễ N V ã n l ợ i TrườiHỊ i )ạ i h ọ c D ợ c / N ộ i Đ ỏ N G Ọ C LI ÊN T iư n g D i liọc K hoa liọ c T ự Iihiẽn, D H Q G H N Đ Ặ T VẤN ĐỂ éc nghiên CỨII mối quan hẹ prolcin dinh dưỡng prolcr.) có hoại lính sinh học quan trọng, lồn Iiguổn gcn, khai thác nhíln giỏng giống cAy dạu C') ích (rong ( lổ ng trọi bào quàn sau thu )ưa v o d ặ c đ i ể m c ấ u trú c b ậc n h íu c ù a p r o l e i n le c t in , c c c i u i m m ộ t s ố d a n g p r o l e i n c iin li d ỡ n g , c ó thổ tìm lìiổu dược q trình tiến hóa tính đa dụng cùa lì ỎI lồi tliực vạ;, dộ ng vạt dó Vì Ịg tơi clã l iê n h n h n g h i ê n u ve m ỏ i q u a n hệ g iữ a d c l í n h ' :i'lin vù p i o k n d i n h d ỡ n g l iê n q u a n clén ung cíly họ đíiu ’ N G U Y Ê N L IÊ U VÀ P H Ư Ơ N G P H Á P íc inAu clủu dược lliu ihập, pliân loại dịnli (ÔI), phơi khổ, liién Iiliủ l>;ìo quàn lạnh dể tiến hành (1 c c c h ì l iố u liế p theo txu dụng ngưng kết hổng cáu, viết lát II AA (Ilaemagglutina ing Acl ivii y) , dược xác tiịnh tlico plnrơng A le cx;m đ ci A K u ill (31) tlẽn bàn nliựa đáy nhọn (M icio tile i ) ậm lượng proicin c ỏ liong dịch cliiél (lược xác ilịnh llieo p!ì' I>ng pháp Lovvry | | dùng iilbumm hu yết t ( BSA) làm cliAl cliuán tim lượng prulcin tổng sỏ dược xác định phương phi':-) Micro Kjelclalil, xác định ihànli phán axit trình lư xếp cùa chúng Irong plìíln tử lcclin dã dược mó tài liệu ( 1, ) lội sỏ lính cliílì cùa lcclin Iiliư: ị)ll lúi thích ciio hoại dộng, (1< ■hen nhiệt, línlì dịic iiiỌu dường dược xác o phương pháp cliuàn quốc lè dược hoàn ihiện i lỏn lioá sinh tiường Dai học Khoa học Tự lại học Quố c gia 11ỈI Nội I K Ế T Q UẢ VÀ T H Ả O LUẬN Khiì tiiìng ngưu ỉ; két tẽ bào liổriR cầu cùa người l ú n g l ỏ i dã liế n l ù m li cliổLi t ia l io l d ộ n g n g n g kết liổ n g CÀU lìg irờ c ụ a c c lo i d ị c l i c h i ế l từ h ạt c ù a c c lu (culiivar) cùa lồi tlíHi (spccics) chi (genus) (huộc ho i'íìu I:;ib;iceac dược trổng Viộl Nam điều lia dưưc (rìuli bày bàng I íc kêt q Iiình bày bàng ] cho lh;ìy lioal lính ngưng kCl hỏng cíiu L la (ỉịcli clnét lừ liat (!Au cliicm l iong loài nghiên cứu (79% : 11011 g 25 lồi diều tra, có 19 lồi cỏ lu ạt tính ngưng kẽt hóng cíùi) hững kơl tị 11 liên cịn cho lliííy, chi clẠu u ổ n g phổ biên Viộí N a m P h a s e o l u s , c u n g cílị) IU ăn l I úU đinh đương Ịiiolein (|uan liọ n g cho người 1lo.It lính I t g u r g kci hổnt; CÀU lính liC n g c ũ n g c l i i c m IV IC' c ; m Ià 7 % ặc iliổm chung cùa ngưng kêl liổag cíiu cùa icctin họ đíni dãc lìiổu, tiú đậu ngư dậu ván li.nií; íig c ó l ín h d ặ c h iệ u n g n g kct h ổ n g cóu I i l i ó m m u A ịứNG VẤN ĐẾ NGHIÊN c u c BẢN TRON ụ 4H HỌC Hàng Hoạt tính ngưng két li ) c;'iu nlióm máu AHO cua Ii^ưịi Các giơng dậu |Ạu lương 111 (Glycine max) >ậu lương Bt) (Glycine max) 'ỏ ve dỏ (Phuseolus vulgaris) ) Í I U lụicli ĐB5 (Phaseolus vulgaris) )ộu vầu nâu SG (Phaseolus vulgaris) )Au irớiig cuốc SG (Pluiscolus vulgaris) )Ạu tliẠn dò (Pliaseolus vulgaris) )ậu dỏ hai nhỏ (Phaseoius vulgaris) )ặu nho nhe c u (Pliaseolus vulgaris) Đậu ngự 1luế (PIkìscoIus lunulus) Cơ ve vàng lyf (Pluiscolus vulgaris) Dậu dcn Kí (Vigna caljang) Đậu cicn TB (Vignu cuijung) ĐẠii liũa (Vigna unguiculata) Đậ u iráng SG (Vigna chinensis) Dậu rựa YB (Canavalia ensiíormis) Đậu kiếm YB (Canavalia gladiala) Bạch biển dậu (Lubiab vulgaris) ĐẠu ván đen (Lablub purpureus) Đậu vá 11 nau (Lablab vulgaris) Đậu ván trắng HP (Lublab dasycarpncs ?) Móng bị (Bauhinia albu) Lạc (Arachis hypogaea) Đậu Hà Lan (Pisum saiivum) Dâu rổiift (Pseudocarpus tetraponolohus) 203 1loai tlộ luuriiỊ; két hổiiR CÀU, dơn vị 1IA Nhóm A Nhóm o Nhỏm 13 256 256 256 204 K 2048 2048 20-18 1024 1024 256 512 512 1024 1024 1024 256 256 256 1024 1024 512 0 0 0 256 256 256 256 0 0 0 1024 1024 128 256 128 1024 512 128 128 128 0 J J 1024 1024 256 256 256 256 256 256 128 256 / Ị Ị / / 256 128 128 256 256 256 128 256 Ilò 111 lượng protcin giống đ(u Chúng ỉổi dã liến hành nghiên cứu hàn lượng ] ilein lổng sỗ piolein hoìi lan l iong dung (lịch đốm liút m u ố i (P H S ) C c k ế l tịuà dược l i ì n l i I ,y bà ng H àm lượng p ro lí > lổng số protcin tan (ý 11)01 số ịịiõíiịị dậu n^liién Tên loài, giống Hàm lượng prolcin tống số (% chai khô) Dâu lương ( Gl yc me max) Đ ;) u xanh (Vigna í iu r e u s ) ĐA II den (Vignu catjang) Đ;1u rồng (Pscuclocarpus letragon ilobus) Đáu c ỏ v c dò (P vulgaris) DAu Hà Lan (Pisum salivum) Đáu v ằ n ( | J v u l g a r i s ) Đáu ngư (p lunaius) Đáu dũa (Vigna unguiculalii) Dâu dò 11a ( nhó (l \ vtiluai ) hàu í 1iich ( p vunlgaiis) t)Ạu n úng cuốc (P vulguns) Dậu quycii ( l ‘ vulg;uis) Dậu ưãng Sài Gòn (Vigim UDịịí: ulala) Đáu ván đen (l.abhib pui cus L Swcel) ĐẠu vãn iiAii (PIkiscoIu.s aris L.) ĐiUi kiếm (Canaval! glucliala) Đáu lưa (Caiiaviilia ciisiíonnis) l)Au cỏ ve lliíui ( 1’hascolui vul|',;uis) 35.25 27.8 29.72 16 24 28 28.64 24 67 23.58 23.78 25 67 17 H4 1U.64 28 73 23.75 86 CIÍ1I 1làm lượng piotein lan (% cliíú khỏ) 28.72 22.68 22 76 21.4 18.48 21.32 19.64 19.37 17.02 14.25 Tỷ lệ protcin tan so 9.34 14.09 52.35 71.74 21 78 SI 82 69 19.6-1 20.48 24.29 25.6 24.79 21.22 23 2^ 15.12 I5.3.Ì 1 36 với p r o l e i n tổ n g s ố (% ) 81 48 81.58 76 58 66.54 76 1 74 44 79 61 82,15 71.57 55.5 76.25 X7.36 59 96 45 S2 65 03 205 JHỬNG VÁN DẾ NGHIÊN c u c BẢN TRONG SINH H Ọ C A n h IMiổ (liẽn d i cùa le c liii (!;m rira v;i (lau kiế m va (lau rưa Lt-t tin iláii kiớ/ii Im h t hí' Lee lui (lán n ú iím li I /lữ Du lì chiết Ịiiưin lliõ lừ Iml (líìn kiẽin Dich chiết I>I o i ì n ih õ lừ l u II dâu I ưa ảnh băng protein leclin cùa dâu rựa dậu kiếm dược linh chê’ Irôn cốt Scphadcx G có linh Iác cao iiíiu chứa mội băng nít dâm c ó khối lương p h n từ khoảng 30 - 31 kDa Irong điện di biến c ó chai khử Trong dó phổ diện di cùa dịch chiét đ ệ m phosphal niuối hai loài đậu chứa ihiền hãng prolcín dinh dưỡng có khối lượng phân lử khác Nếu so sánh số lượng băng protcin dinh Ig hai loài dậu rựa (Canavalia ensi f omi s) dâu kiếm (C glitdiiila) c hún g la lỉiáy s ỏ lượng băng prolcin loài dậu rựa (C c nsị fo mi s) nliiển so với dậu kiếm (C glatlialii) Dặc điếm c ũng ihể biến hành pliđn piolem dạu kiếm IrìIIh tiến hố Trình lự axii amin đíùi N cùa lectin đậu kiếm, đílu rựa đậu c o v e llìận (lã dược phan lích Kết CỊIIÙ : lnnh bày bàng Iỉà n g T r ìn h tự 15 a x it am in dầu c ù n g N củ a m ột số g iố n g d ậu Lecún >Au gươm Ịáu rua >áu Covc Iluln A A A D D T T T E I T Trình lư iixil am in 1.m CÙI u clÀu N V ìl T A D V T A E L D s F 1 D A F V V Y Y N p p K N N T I N I C c kết Cịtià 1rình bày bàng cho hióì liình lự iixil auiiii limi t ùng N cùa lcclm (iirơc linh c h ế lừ hai loài cln (.InLI kiủm, dãu Iira (C cn.siloimis, c glađmi.i) mõi loài iliỊu kliiic chi ((.làu c o vu llìiín-Pluiseolus Ịins) có dặc iliểm khác Kếl íị cho thấy (lình lư axil itmin (lau N cùa loai lcclin khác chi hoan khác Trong Iiinli lự axit amin đáu N cùa lcclin c ùn g chi nliưng khác loài hốn lm g iố ng ị, I( n li i 15 a x i l a m i n l ậ n c ù n g dÀu N Đ i ể u đ ó c h ứ n g lò c ú c l c c i m c ù a c ù n g m ộ t c h i c ó CÁU tr ú c h o h ọ c llni cao, lectin khác chi có cấu Irúc hiến dổi q (lình liên hố Đặc íliem cho ihííy, có (he SỪ >dác lính cáu núc lcctin lồi họ (lãLI đáu hiệu (maikers) dáng Ún nom; phím loại theo học phủn lừ Cúc Iighiỏn cứu cùa Strosbcrg cộ ng | | trẽn mội sỏ d a ng leciin lừ loài chiu c ũng chu biết lcciin lừ lọ dậu có lính bào thù cao cấu trúc Các lectin giống vé cấu trúc mõi quan hệ ho hàng Irong Ịiố cùa loài gẩn nliau Những Hghiên cứu dặc tính phàn ứng kháng nguyên cùa leclin s ố loài đậu iliơm (l.uihyius ođoiuius) , cho biél 13 , cày họ tlẠu chứa iccim mội chuỗi polypcplil h.u clmỏi polypeplit déu cỏ IMỘI sỏ (Ịiiyél kháng ng uy ên gi ống Tuy nliiỏn nglìién cứu Irén c ũn g dã phát hiên dươc sơ biến (.lối sAu sac cùa Ịuycl (linh kháng nguyên (trình lư axii amin) lừng lo.ii lcclin c o ngnổn g ốc khác loin, ihám chí khác g i óng ; (culiiv.ir) Iiong c ùng niộl lồi mà |ìhái) loại co (.liên ihco hình ili.il k hô ng thé phái liiẹn ilưoc MỎI su tin li cliã t cua Ic c lin truiif> hạt cua m oi su iI>nị (1,111 n ^ liié n cứu K h n ũ n g lio at d ỏ n g c ù a l c c l i n n o n g c c m ô i litrỜMg |)l ỉ k h c n h a u n h ì n c h u n ; ; lì / li i t y đ o i m ữ a c c l o i Noi chung hoai (.lóng cua lecnn lồi đàu hoai đong ihícli li(ác với loại Iig monuxíicaril cùa leclin khác Khả bị kìm hãm hời loai dường c ùa da sô lcclin từ loại c o VL' lliuộc chi Pluiseolus a - D - glucoza, a - D - manno /a vìi (lán xuãt cùa chúng Các lcclin lliuộc > khủng có lính dặc hiệu tương lác với nhóm máu ABC) cùa người Chi riỏng leclin cùa dận ngự (Phaseolus lunatus) đậu ván trắng Hài Phịng (Lablub sp) bị kìm hãm bời lg a ■ 1) - galacloza dẫn xuấl cùa liiể lính dặc hiệu tương lác với nhóm máu A cùa người- Đặc n y c ù a le ctin d ậ u n gự d ậ u ván trắ ng c ó thể dư ợ c p d u n g l i i a y t l i ế h u y ế l l l m n h i i i A u t r o n g p h â n l o i n h ó m ABC) cùa người IV KÉT LUẬN Hàm lượng piolein tổng số cùa giống (lậu nghiên cứu có phẩm chất sổ lưiíng cao Protein lổng sỏ ,84% liến 35,25% so với cliẩl khỏ Thành phQn axit am ị 11 dinh đường cùa pioiein loài đâu cftn Các lcclin cùa loài đậu dã linh chế dậu tliận dỏ, (lậu trứng cuốc, đâu kiếm dậu lựa có độ linh cao I lình lự axit ami 11 dầu tẠu N lectin dẠu kiếm, dủu rụa, díiu c vc llìíìn đưực xác Trình lơ asil amiii lAn N cùa loại lcctin dậu kiếm dâu rựa chi khác lồi liồn tồn g i ố ng nli ú 15 axit amin lãn đíìu N, liong dó trình lự cùa lcclin dâu c ỏ ve thận có rát Iihiổu iliơm lác so vái đílu kiếm clQu lựa Điổu tló liu hiên sư biến dổi sAti sắc vổ cấu í rúc pliíln lừ lectin cùa lồi ■ODg (|U.Ì liìnli liốn hon TÀI 1,1 Klỉ 'I HAM K HẢO lỵuyển Lệ Plii, N ỵuyc n Vãn Lọi, Ph ạm QiKinỵ Tùng, Đ ỗ Nỵọc Liên, 1993 Nghión cứu so sánh khà nâng oạt động ngưng kcì hổng cáu ngưừi cùa số loài thực vậl làm dược liệu Viọt Nam Tap ch í Di truyén ọc ứng (lung, số 2/1993 hang 14 17 •ư N ịị o c L í c h , B n l l í i u l M., a n d l l u c h c k c J , 1993 The u arui p - subtmỉts o í ilic jacalins aic cleavagc:; rociucts íroin a 17 k!J>;i piccursor Bioclieni Biophys Acta 1156 : 219 - 222 ienư/ l E 1976 Phytoheimigglulinins (Phytolcclins) AnII Rcv Plant Pltysiol 27 ; 291 - 319 ti.sba IỊ Á l >., Biiffaicl D U n n v e ir y s M , and F u iie i V/\., 1986 Leguine lcclins: A laiuc family o f ho mo gc no us 'Olcius In: ihc lcciins: IVopcilies, function and applicutions in bioiogy and mctlicinc Acíid Press London : 25 I 33 IỮNG VÁN D Ế N G H IỄN c ứ u c BẢN TRO N G SIN H n ọ c 207 SUM MAU Y C H A R A C T E R IZ A T IO N OF L E C T IN S A N D IMUTRSTIOUS P R O T EỈN S IN RELA TIO N TO T H E D ÍV E R S ỈT Y OF LEG U M IN O U S S P E C ÍE S (P A B A C E A E ) TRU O N G VAN CH AU 11(1)101 I I U m v is iỉy o f P e tla ỵ o ỵ y T R A N T U A N Q U Y N li l l a n o ì hisiiiitií- o f Po \t-H {H vrst N C ìU Y IiN V A N L O I l l u n o i P lu in iiíH euiù a l C o ll e ỵ e IÌO N G O C L H N l l a n o i u n iv e rs it y />fS( ĩcnt cs, Victiiain N íi iio iìd l L J m v rr s ity T lie re lario nsh ip hetween lectinx antl reserve p io t e in s / r o iìi U' i; i ể u iìi io i i \ sịìe cies was 'ihtdieil Thơ u h s ta in e d ts have p o in te d out llial ihe c o iìlciìl o f lotal reserve p ro te in s [roiiì 19 líí;u iiiin o u s s p e cie s is Ytu ic d f i o/n 't% lo ,2 % T h e am uioui id co m po silio n o f proteins is w cll - I>Iopoilio/iCil Th a It i lin s xpeũes p n rifìe iì a n d N -IC I Diúuil a m in o a cid sequences o f lectìns f r o m C a n a v a lia c u x iịo ìm is C a n a v a l i a gUidiata P h a s c o lu s v u lỵ a r is D B S (K ith ie y hean) were lìetermined Tlie.sc i c s u l l s i i i i l i i a i I' ilidl ỉia lu l Iiio le ctila r IV l ì t ũ i l i p c a l i o n m a v h e th e c v o l u t i o i u i r y i n a i k e r ... quan trọng y học miễn dịch Pliần thứ hai, nghiên cứu thử nghiệm điều c h ế chất cộ n g hợp miễn dịch lcctin dể nghiên cứu biếu bất thư? ??ng kháng thể kháng nguyên (V số bệnh ung thư, góp phần chắn... nguồn thực vật Việt Nam , “ nghiên cứu điều c h ế chất cộng hợp miễn dịch lectin - Sepharose dùn g chắn đoán sớm kliánu nguyên kháng thể số bệnh ung thư người” Nội dung đề tài bao gồm hai phán... ọ c ' 3.2 Nghiên cứu thử nghiêm điều c h ế chất cộng hợp miễn dịch chán đoán sớm sô bệnh ung thư, xét nghiệm biểu bất thư? ??ng cua kháng thè kháng nguyên điểm ung thư (Tumor marker antigen) Các
Ngày đăng: 18/03/2021, 15:56
Xem thêm:
