Nghiên cứu đa dạng thành phần loài nấm rễ nội cộng sinh arbuscular mycorrhiza trong đất trồng ngô

ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI TRƢỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN - LƢU THỊ DUNG NGHIÊN CỨU ĐA DẠNG THÀNH PHẦN LOÀI CỦA NẤM RỄ NỘI CỘNG SINH (ARBUSCULAR MYCORRHIZA) TRONG ĐẤT TRỒNG NGÔ LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC Hà Nội – 2018 ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI TRƢỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN - LƢU THỊ DUNG NGHIÊN CỨU ĐA DẠNG THÀNH PHẦN LOÀI CỦA NẤM RỄ NỘI CỘNG SINH (ARBUSCULAR MYCORRHIZA) TRONG ĐẤT TRỒNG NGÔ Chuyên ngành: Vi sinh vật học Mã số: 60420107 LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC NGƢỜI HƢỚNG DẪN KHOA HỌC: TS LÊ THỊ HOÀNG YẾN TS MAI THỊ ĐÀM LINH Hà Nội - 2018 LỜI CẢM ƠN Tôi xin phép gửi lời cảm ơn sâu sắc tới Ban giám hiệu, Phòng Đào tạo Sau đại học, Bộ môn Vi sinh học, Khoa Sinh học, Trường Đại học Khoa học Tự nhiên, Đại học Quốc gia Hà Nội tạo điều kiện giúp đỡ tơi hồn thành Luận án Tơi xin phép gửi lời cảm ơn sâu sắc tới Đại học Quốc gia Hà Nội, đơn vị hỗ trợ kinh phí cho nghiên cứu từ đề tài QG 16.35 để thực nghiên cứu Luận văn Tôi xin phép gửi lời cảm ơn sâu sắc tới Viện Vi sinh vật Công nghệ sinh học - Đại học Quốc gia Hà Nội, đơn thị thực nghiên cứu cung cấp sở vật chất để tơi hồn thành kết nghiên cứu trình bày Luận văn Tơi xin trân trọng cảm ơn TS Lê Thị Hoàng Yến, Viện Vi sinh vật Công nghệ Sinh học - Đại học Quốc gia Hà Nội, giáo viên hướng dẫn tận tình hướng dẫn, bảo tạo điều kiện cho tơi hồn thành Luận văn Tơi xin trân trọng cảm ơn TS Mai Thị Đàm Linh, Bộ môn Vi sinh vật, Trường Đại học Khoa học Tự nhiên, Đại học Quốc gia Hà Nội, giáo viên hướng dẫn tận tình hướng dẫn, bảo tạo điều kiện cho tơi hồn thành Luận văn Tơi xin trân trọng cảm ơn tồn cán Viện Vi Sinh vật Công nghệ Sinh học - Đại học Quốc gia Hà Nội tạo điều kiện giúp đỡ tơi suốt q trình thực nghiên cứu Tôi xin trân trọng cảm ơn thầy, cô giáo Bộ môn Vi sinh vật, Khoa Sinh học, Trường Trường Đại học Khoa học Tự nhiên, Đại học Quốc gia Hà Nội tận tình dạy dỗ giúp đỡ tạo điều kiện cho tơi suốt q trình học tập, nghiên cứu Tơi xin phép gửi lời cảm ơn tới Khoa Kiểm định Vắc xin Vi rút, Viện Kiểm định Quốc gia Vắc xin Sinh phẩm y tế, Bộ y tế, nơi công tác tạo điều kiện cho tơi để tơi hồn thành Luận văn Tơi xin chân thành cảm ơn bạn bè đồng nghiệp động viên, hỗ trợ, dõi theo bước tiến chia sẻ với mặt sống công việc Sau cùng, xin bày tỏ lịng biết ơn vơ hạn tới bố mẹ gia đình ln bên cạnh, ủng hộ đồng hành cho ngày hôm Hà Nội, ngày 02 tháng năm 2018 Học viên Lưu Thị Dung MỤC LỤC MỞ ĐẦU .1 CHƢƠNG - TỔNG QUAN .3 1.1 Nấm rễ nội cộng sinh 1.2 Lịch sử nghiên cứu 1.3 Phƣơng pháp phân loại nấm rễ nội cộng sinh .4 1.3.1 Phân lập bào tử nấm rễ nội cộng sinh 1.3.2 Phân loại 1.4 Vai trò nấm rễ nội cộng sinh thực vật 10 1.4.1 Khả huy động nước chất dinh dưỡng 10 1.4.2 Thu nhận hợp chất cacbon cộng sinh Mycorrhiza 10 1.4.3 Tăng sức chống chịu trồng điều kiện bất lợi môi trường 11 1.4.4 Giúp chống chịu với bệnh hại 11 1.4.5 Hấp thu lân 12 1.5 Tình hình nghiên cứu AMF giới 12 1.6 Tình hình nghiên cứu Việt Nam 16 1.7 Đặc điểm tự nhiên địa điểm nghiên cứu .18 1.7.1 Đặc điểm tự nhiên Duy Tiên – Hà Nam 18 1.7.2 Đặc điểm tự nhiên Thường Tín - Hà Nội 19 CHƢƠNG - NGUYÊN VẬT LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP 21 2.1 Đối tƣợng nghiên cứu 21 2.2 Địa điểm thời gian nghiên cứu .21 2.3 Vật liệu trang thiết bị 21 2.3.1 Nguyên vật liệu 21 2.3.2 Dụng cụ 22 2.4 Phƣơng pháp 22 2.4.1 Lấy mẫu đất 22 2.4.2 Phân lập AMF 22 2.4.3 Tiệt trùng bào tử AMF 23 2.4.4 Phân loại nấm rễ nội cộng sinh 24 CHƢƠNG - KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN .28 3.1 Phân lập AMF từ mẫu đất thu thập 28 3.2 Phân loại AMF phƣơng pháp hình thái học .29 3.3 Đánh giá đa dạng thành phần loài AMF vùng sinh thái nghiên cứu mối tƣơng quan điều kiện môi trƣờng sống tới đa dạng thành phần loài chủng nấm rễ nội cộng sinh đất trồng ngô 45 3.3.1 Dựa vào thành phần loài 45 3.3.2 Dựa vào tần suất xuất 46 3.3.3 Dựa vào mật độ loài 51 3.4 Lựa chọn số AMF có độ đa dạng cao để phân loại chúng kỹ thuật sinh học phân tử 52 KẾT LUẬN .55 TÀI LIỆU THAM KHẢO 56 DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT - ADN (Acid deoxiribonucleic): Axit deoxiribonucleotit - ARN (Acid ribonucleic): Axit ribonucleotit - AMF(Arbuscular Mycorrhizal Fungi): Nấm rễ nội cộng sinh - BP (Base pair): Cặp bazơ - dNTP ( Deoxynucleotide Triphosphates): Nucleotide - PCR (Polymerase Chain Reaction): Phản ứng khuếch đại DANH MỤC BẢNG Bảng 1.1 Phân loại AMF hình thái học Bảng 2.1 Danh sánh mẫu đất nghiên cứu .21 Bảng 2.2.Thành phần phản ứng PCR 25 Bảng 2.3 Chu kỳ nhiệt phản ứng PCR .26 Bảng 3.1 Số lƣợng bào tử AMF phân lập 28 Bảng 3.2 Tần suất xuất chi AMF 47 Bảng 3.3 Tần suất xuất loài AMF .49 Bảng 3.4 Sự phân bố AMF đất theo mật độ lồi (SR) 51 DANH MỤC HÌNH Hình 1.1 Vị trí địa lý Duy Tiên - Hà Nam đồ .19 Hình 1.2 Vị trí địa lý Thƣờng Tín-Hà Nội đồ .20 Hình 3.1 Biểu đồ mật độ bào tử AMF phân lập mẫu Hà Nội Hà Nam .29 Hình 3.2 Hình ảnh bào tử lồi Acaulospora gerdemanii (kích thƣớc bar 100µm) 30 Hình 3.3 Hình ảnh bào tử lồi Acaulospora longula, kích thƣớc bar 30 µm 31 Hình 3.4 Hình ảnh bào tử lồi Acaulospora mellea, kích thƣớc bar 20 µm 31 Hình 3.5 Hình ảnh bào tử lồi Acaulospora morrowiae, kích thƣớc bar 50 µm .32 Hình 3.6 Hình ảnh bào tử lồi Acaulospora rehmii phân lập, kích thƣớc bar 50 µm 32 Hình 3.7 Hình ảnh bào tử lồi Acaulospora sp 1, kích thƣớc bar 30 µm .33 Hình 3.8 Hình ảnh bào tử lồi Acaulospora sp.2, kích thƣớc bar 20 µm 33 Hình 3.9 Hình ảnh bào tử lồi Acaulospora sp.3, kích thƣớc bar 50 µm 34 Hình 3.10 Hình ảnh bào tử lồi Centraspora pellucida, kích thƣớc bar 50µm .34 Hình 3.11 Hình ảnh bào tử lồi Dentiscutata nigra, kích thƣớc bar 50µm 35 Hình 3.12 Hình ảnh bào tử lồi Dentiscutata reticulata, kích thƣớc bar 50µm 35 Hình 3.13 Hình ảnh bào tử lồi Dentiscutata sp., kích thƣớc 50 µm 36 Hình 3.14 Hình ảnh bào tử lồi Glomus ambisporum, kích thƣớc bar 50 µm 37 Hình 3.15 Hình ảnh bào tử lồi Glomus multicaule, kích thƣớc bar 50 µm .37 Hình 3.16 Hình ảnh bào tử lồi Glomus intraradice, kích thƣớc bar 50µm 38 Hình 3.17 Hình ảnh bào tử lồi Gigasspora albida, kích thƣớc 50µm 38 Hình 3.18 Hình ảnh bào tử lồi Gigasspora decipiens, kích thƣớc bar 50µm 39 Hình 3.19 Hình ảnh bào tử lồi Gigasspora gigantean, kích thƣớc 100 µm 39 Hình 3.20 Hình ảnh bào tử lồi Gigasspora margarita, kích thƣớc bar 50 µm 40 Hình 3.21 Hình ảnh bào tử lồi Racocetra gregari, kích thƣớc bar 50µm 41 Hình 3.22 Hình ảnh bào tử lồi Rhizophagus clarus, kích thƣớc bar 50µm 41 Hình 3.23 Hình ảnh bào tử lồi Rhizophagus sp., kích thƣớc bar 50µm 42 Hình 3.24 Hình ảnh bào tử lồi Septoglomus constrictum, kích thƣớc bar 50 µm .42 Hình 3.25 Hình ảnh bào tử lồi New Genus sp., kích thƣớc bar 50µm 43 Hình 3.26 Hình ảnh bào tử lồi New Genus sp., kích thƣớc bar 50µm 44 Hình 3.27 Hình ảnh bào tử lồi New Genus sp., kích thƣớc bar 50µm 44 Hình 3.28 Tần số xuất chi AMF 47 Hình 3.29 Tần suất xuất loài AMF 50 Hình 3.30 Mật độ lồi AMF .52 Hình 3.31 Cây chủng loại phát sinh chủng AMF nghiên cứu lồi có mối quan hệ họ hàng gần dựa vào phân tích trình tự 18S 53 Hình 3.29 Biểu đồ tần suất xuất loài AMF Nhận xét: Qua bảng 3.3 hình 3.29 cho thấy mẫu đất trồng ngơ Hà Nội có 16 lồi đƣợc phát hiện, số có lồi Gigaspora decipiens, Gigaspora gigantean, Glomus multicaule Acaulospora mellea loài chiếm ƣu thế, tần suất xuất lần lƣợt là: 14,3 %; 12,4 %; 10,5 % 10,5 % Cịn đất trồng ngơ Hà Nam, phát đƣợc 18 lồi, lồi Gigaspora decipiens Gigaspora gigantean loài chiếm ƣu thế, tần suất xuất lần lƣợt là: 18,8 % 12,8% (Bảng 3.3 Hình 3.29) Nhƣ vậy, thấy lồi thuộc chi Acaulospora, Gigaspora Glomus loài AMF chiếm ƣu Kết qủa phân tích đa dạng AMF tƣơng đồng so với nghiên cứu trƣớc Trần Thị Nhƣ Hằng cs (2012) Nguyễn Thị Kim Liên cs (2012) cho chi thƣờng gặp đất trồng cà chua, mía cam Việt Nam [5,7] 50 3.3.3 Dựa vào mật độ loài Để đánh giá đƣợc mức độ đa dạng AMF đất trồng ngô, nghiên cứu chúng tơi cịn đề cập đến đa dạng mật độ loài AMF đất trồng ngơ Hà Nội Hà Nam Kết đƣợc trình bày Bảng 3.4 Hình 3.30 Bảng 3.4 Sự phân bố AMF đất theo mật độ loài (SR) Loài AMF xuất STT Mẫu Hà Nội Hà Nam Giá trị SR Hà Hà Nội Nam N01 10 10 12 13 20 21 22 25 26 10 N02 18 13 20 21 22 26 N03 16 13 15 N04 11 12 10 N05 11 10 12 13 15 17 19 20 21 22 24 25 26 10 12 13 14 19 20 21 22 26 12 13 14 20 21 22 24 N06 17 13 14 21 10 12 13 14 17 10 N07 11 20 13 10 12 13 14 17 24 10 N08 10 11 17 18 19 23 10 13 26 14 17 7 N09 11 17 18 21 12 13 19 26 10 N10 10 20 13 14 26 11 N11 16 14 12 13 14 12 N12 10 17 23 12 13 17 26 13 N13 21 23 10 12 13 24 26 14 N14 14 23 12 13 14 26 15 N15 17 23 12 13 14 17 19 26 51 Hình 3.30 Biểu đồ mật độ lồi AMF Nhận xét: Sự phân bố mật độ bào tử (SD) mật độ loài (RS) 15 loài AMF 15 mẫu đất trồng ngô Hà Nội thể bảng cho thấy mật độ bào tử AMF mẫu từ 9,5-102 bào tử/100g đất (trung bình 45.63 bào tử/100g) Mật độ lồi thay đổi từ 1-7 lồi/mẫu (trung bình 3,6 lồi) Trong phân bố mật độ bào tử (SD) mật độ loài (RS) 18 loài AMF 15 mẫu đất trồng ngô Hà Nam thể bảng cho thấy mật độ bào tử AMF mẫu từ 110-304 bào tử/100g đất (trung bình 165.72 bào tử/100g) Mật độ loài thay đổi từ 6-15 lồi/mẫu (trung bình 8,73 lồi) Kết cho thấy có tƣơng quan mật độ bào tử số lƣợng loài xuất mẫu Các mẫu có số lƣợng bào tử nhiều đồng thời số lƣợng lồi nấm mẫu đất lớn Kết tƣơng đồng với nghiên cứu Zhao cộng (2003) nghiên cứu đa dạng AMF rừng mƣa nhiệt đới Xishuangbanna [80] 3.4 Lựa chọn số AMF có độ đa dạng cao để phân loại chúng kỹ thuật sinh học phân tử Trong số 11 chi AMF đƣợc phát từ hai địa điểm nghiên cứu, Acaulospora Gingaspora, hai chi có TSXH cao hai địa điểm nghiên 52 cứu, lần lƣợt 12,4% 32,4% Hà Nội 37,6% 29,9% Hà Nam Các chủng 03 chủng SP2, SP18, SP19 chủng thuộc chi Acaulospora Gingaspora dựa vào phân tích hình thái học Chúng đƣợc lựa chọn tiến hành phân tích phƣơng pháp sinh học phân tử vào phân tích trình tự gen ARN 18S đoạn AML1/AML2 Kết đƣợc trình bày dƣới đây: 0.01 Glomus_intraradices_FJ009604 94 Funneliformis_mosseae_FR750227 91 81 74 72 Glomus_macrocarpum_FR772325.1 Acaulospora_spinos Z14004 Acaulospora laevis Y17633 Acaulospora_cavernata AJ306442 Acaulospora mellea FJ009670.1 94 Acaulospora_lacunosa FR719957 63 64 SP2 57 74 52 Acaulospora V3 KC182581 Acaulospora_longula AJ306439 Acaulospora_brasilien FN825899 Gigaspora margarita AJ852604 SP18 52 100 SP19 Diversispora_epigaea X86687 Paraglomus_occultum_KP144314.1 Hình 3.31 Cây chủng loại phát sinh chủng AMF nghiên cứu lồi có mối quan hệ họ hàng gần dựa vào phân tích trình tự 18S Giá trị Bootstrap value > 50% đƣợc thể Bar 0.01 Phân tích trình tự gen dựa vào phân tích trình tự đoạn 18S SP2 nằm nhánh với Acaulospora V3 Acaulospora longula với giá trị bootstrap 57-74% Nhƣ thấy có phù hợp phân loại dựa vào phân tích hình thái phân tích trình tự 18S chủng SP2 thuộc loài Acaulospora longula Kết phù hợp với kết phân tích hình thái học 53 Phân tích chủng loại phát sinh cịn cho thấy SP18, SP19 có họ hàng gần gũi với với Gingaspora marganita SP18 SP19 nằm nhánh nhỏ với giá trị Bootstrap 100%; nhánh nhỏ nằm cụm với G marganita, giá trị bootstrap 52% Có thể kết luận SP18, SP19 thuộc Gingaspora marganita loài gần gũi với chúng Dựa vào kết phân tích hình thái phân tích sinh học phân tử kết luận SP19 thuộc lồi G gigantea cịn SP18 thuộc lồi G margarita 54 KẾT LUẬN Đã phân lập đƣợc 3179 bào tử AMF từ 15 mẫu đất trồng ngô Hà Nội 15 mẫu đất trồng ngô Hà Nam Trên 100g đất đƣợc phân lập Hà Nội có từ 9,33-102 bào tử AMF, cịn mẫu Hà Nam 110,66-304 bào tử Có tƣơng đồng đa dạng sinh học hai địa điểm nghiên cứu số lƣợng chi, loài, đa dạng sinh học tần số xuất AMF: Đã phát đƣợc 11 chi, 26 loài AMF từ hai địa điểm nghiên cứu: Hà Nội (8 chi, 14 loài); Hà Nam (8 chi, 18 lồi, chi có hình thái khác với mơ tả trƣớc, nghi ngờ loài mới) Acaulospora Gigaspora hai chi có tần suất xuất cao (12,4% 37,6%) (35 35%) mẫu đất cát Hà Nội Hà Nam Đã thành công việc phân loại AMF dựa vào phân tích trình tự 18S (đoạn AML1/MML2) chủng đại diện cho chi có chi có tần số xuất cao: SP2 thuộc loài Acaulospora longula, SP18 thuộc loài Gingaspora margarita SP19 thuộc loài Gingaspora gingatae 55 TÀI LIỆU THAM KHẢO Tiếng Việt Nguyễn Sỹ Giao (1976), “Ảnh hƣởng rễ nấm sinh trƣởng phát triển non thơng nhựa”, Tạp chí Lâm nghiệp, 25(12), tr 21-36 Nguyễn Sỹ Giao, Nguyễn Thị Nhâm (1977), “Bƣớc đầu nghiên cứu ứng dụng số loại nấm cộng sinh chủng để tạo rễ nấm thông nhựa (Pinus Merkussi), Kỉ yếu khoa học 1976-1977 Viện Khoa học Lâm nghiệp Việt Nam, tr 98-103 Nguyễn Sỹ Giao, Nguyễn Thị Nhâm (1980), “Nghiên cứu bệnh vàng cịi Thơng nhựa, dựa vào qui luật cộng sinh với nấm”, Kỉ yếu Khoa học 19701980 Viện Khoa học Lâm nghiệp Việt Nam, tr 216-224 Nguyễn Hồng Hà, Trịnh Thị Thu Hà, Nguyến Thị Hồng Hải, Nguyễn Ngọc Cƣờng, Trần Ngọc Ninh (2003), “Thu thập bào tử nấm cộng sinh vùng rễ dƣợc liệu”, Hội nghị Cơng nghệ Sinh học tồn quốc, Hà Nội, tr 238-240 Trần Thị Nhƣ Hằng, Trần Thị Hồng Hà, Nguyễn Đình Luyện, Postakatalin, Lê Mai Hƣơng (2012), “Phân lập, nhân nuôi lƣu giữ định tên số nấm rễ nội cộng sinh lúa cà chua Bắc Việt Nam”, Tạp chí Khoa học Công nghệ, 50(4) 521-527 Nguyễn Viết Hiệp (2008), “Phân bố nấm rễ cộng sinh Arbuscular mycorhiza fungi đất trồng chè Thái Nguyên”, Khoa học đất, 29, tr 17-23 Nguyễn Thị Kim Liên, Lê Thị Thủy, Nguyễn Viết Hiệp, Nguyễn Huy Hoàng (2012), “Nghiên cứu đa dạng hệ nấm cộng sinh arbuscular mycorrhiza đất rễ cam Quỳ Hợp, Nghệ An” Tạp chí sinh học, 34(4): 441-445 Trần Văn Mão (2004), Sử dụng trùng vi sinh vật có ích tập 2, Nhà xuất Nông Nghiệp, Hà Nội, tr 247-251 Nguyễn Thị Minh (2005), “Phân lập tuyển chọn nấm rễ Arbuscular mycorhizae để xử lý cho trồng”, Khoa học đất, 23, tr 46-52 56 10 Nguyễn Thị Minh (2007), “Ảnh hƣởng số loại phân hữu đến thiết lập mối quan hệ cộng sinh nấm rễ Arbuscular mycorhizae, Gigaspora margirita sinh trƣởng chủ”, Tạp chí Khoa học đất, 28, tr 27-31 11 Nguyễn Đình Quyến (2004), “Vai trị Mycorrhiza Nông – Lâm nghiệp đại”, Hội thảo nấm rễ Mycorrhiza, Viện Thổ Nhƣỡng Nơng Hóa, Hà Nội 12 Nguyễn Văn Sức, Bùi Quang Xuân, Nguyễn Viết Hiệp (2004), “Nghiên cứu, áp dụng kỹ thuật phát triển cộng sinh Mycorrhiza cho số trồng số vùng sinh thái phục vụ cho sản xuất nông nghiệp bền vững”, Báo cáo kết nghiên cứu 2004, Viện Thổ Nhƣỡng Nơng Hóa, Hà Nội 13 Nguyễn Văn Sức, Bùi Quang Xuân, Nguyễn Viết Hiệp, Nguyễn Thị Nga (2005), “Nấm rễ nội cộng sinh (VAM) quần thể vi sinh vật đất trồng bƣởi đặc sản Đoan Hùng-Phú Thọ”, Khoa học đất, 23, tr 42-46 14 Nguyễn Văn Sức, Bùi Quang Xuân, Nguyễn Viết Hiệp (2006), “Khả nhân bào tử nhờ ký chủ chủng nấm rễ nội cộng sinh (Vesicular Arbuscular mycorhiza) SHM 4-DH16, SHM 04-DH47 SHM 04-TC 139 phân lập từ đất Việt Nam”, Khoa học đất, 24, tr 33-37 15 Phạm Quang Thu Nguyễn Đức Thắng (1998), “Bƣớc đầu nghiên cứu thành phần loài nấm ngoại cộng sinh với số lồi Thơng Việt Nam”, Thơng tin khoa học Lâm nghiệp 16 Phạm Quang Thu (1999), “Ứng dụng vi sinh vật cộng sinh việc sản xuất vƣờn”, Khoa học Công nghệ Quản lí Kinh tế, Nơng nghiệp Cơng nghiệp Thực phẩm 17 Phạm Quang Thu (2002), “Sử dụng nấm cộng sinh vi sinh vật phân giải phốt phát để sản xuất Thông nhựa chất lƣợng cao vƣờn ƣơm”, Bản tin trồng triệu rừng 57 18 Nguyễn Hoàng Yến (2007), “Phân bố nấm nội cộng sinh với loài Sao đen (Hoperata Odorata Roxb) tỉnh Đồng Nai”, Luận văn Thạc sỹ Khoa học Lâm nghiệp, Trƣờng Đại học Lâm nghiệp Tiếng Anh 19 Bahadalung N N., Suwanarit A., Dell B., Nopamornbodi O., Thamchaipenet A., Rungchuang J (2005), “Effect of long-term NP-fertilization on abundance and diversity of arbucular mycorrhizal fungi under maize cropping system”, Plant and soil, 270, pp 371-382 20 Bali V., Mammta J., Mukerji T (2002), “Effect of VAM fungi on Fusarium wilt of cotton and jute”, ACOM 1, University of Madras, pp 22 Barea J (1982), “Production of plant growth regulating substances by VAM fungus Glomus mosseae”, Applied and Environmental Microbiology, 43(3), pp 810-813 23 Bever J.D., Morton J.B., Antonovics J., Schultz P A (1996), “Host dependent sporulation and species diversity of arbuscular mycorrhiza fungi in a mown grassland”, J Ecol, 84, pp 71 24 Bolandnazar S., Neyshabouri M R., Aliasgharzad N., Chaparzadeh N., (2007), “Effects of mycorrhizal colonization on growth parameters of onion under irrigation and soil conditions”, Pakistan J Biol Sci., 9, pp 14911495 25 Brundrett M (1996), “Working with Mycorrhiza in Forestry and Agriculture”, Canberra, Australia, pp 141-252 26 Brundrett M (2004), “Diversity and classification of mycorrizal associations”, Biol, 79, pp 473-495 27 Daniels B A., Skipper H D (1982), “Methods for recovery and quantitative estimation of propagules from soil”, In: Schenck NC (ed) Methods and principles of mycological research, The American Phytological Society, St Paul, MN, pp 29-35 58 28 Dehne J (1982), “Interaction between vesicular-Arbuscular Mycorrhiza Fungi and plant pathogens”, Phytopathology, 72, pp 1115-1118 29 Deressa, T G., Schenk M K., (2008), “Contribution of roots and hyphae to phosphorus uptake of mycorrhizal onion (Allium cepa L.) A mechanistic modeling approach”, Journal of Plant Nutrition and Soil Science, 171, pp 810-820 30 Fa Y W., Zhao Y S (2008), “Biodiversity of Arbuscular Mycorrhiza Fungi in China: a Review”, Advances in Environmental Biology, 2(1), pp 31-39 31 Feldmann F., Boyle C (1998), “Weed-mediated stability of Arbuscular Mycorrisal effectiveness in Maize monocultures”, Journal of Applied Botanu, 73, pp 1-5 32 Friese C F., Koske R E (1991), “The spatial dispersion of spores of vesicular-Arbuscular Mycorrhiza Fungi in a sand dune: Microscale patterns associated with the root architecture of American beachgrass”, Mycological Research, 95(8), pp 952-957 33 Gamper H., Leuchtmann A (2007), “Taxon-specific PCR primers to detect two inconspicuous arbuscular mycorrhizal fungi from temperate agricultural grassland”, Mycorrhiza, 17, pp 145-152 34 Galvan G A., Paradi I., Burger K., Baar J., Kuyper T.W., Scholten O E., Kik C (2009), “Molecular diversity of arbuscular mycorrhizal fungi in onion roots from organic and conventional farming systems in the Netherlands”, Mycorrhiza, 19(5), pp 317-328 35 Gerdemann J W (1968), “Vesicular-arbuscular mycorrhizae and plant growth”, Annual Review of Phytopathology, 6, pp 397- 418 36 Gerdemann J W (1975), “Vesicular-arbuscular mycorrhizae In: The development and function of roots, (Eds JG Torrey and DT Clarkson)” Academic Press, New York, USA, pp 575-591 59 37 Gerdemann J W., Nicolson T H (1963), “Spores of mycorrhizal Endogone species extracted from soil by wet sieving and decanting”, Transaction of the British Mycological Society, 46, pp 235-244 38 Goussous S J., Mohammad M J (2009), “Comparative Effect of Two Arbuscular Mycorrhizae and N and P Fertilizers on Growth and Nutrient Uptake of Onions”, Int J Agric Biol, 11, pp 463-467 39 Guadarrama P., Alvarez Sanchez F J (1999), “Abundance of arbuscular mycorrhizal fungi spores in different environments in a tropical rain forest, Veracruz, Mexico”, Mycorrhiza, 8, pp 267 40 Hajilou M., Abbasdokht M., Amerian M., Gholami A (2010), “Function of biologic fertilizers on growth characteristics, yield and yield components of maize in agriculture ecosystem”, The first national congress of sustainability agriculture and healthy crop production, Iran 41 Hayman D S (1983), “The physiology of vesicular arbuscular endomycorrhizal symbiosis”, Canadian Journal of Botany, 61, pp 944-963 42 Helgason T., Merryweather J W., Denison J., Wilson P., Young J P W., Fitter A H (2002), “Selectivity and functional diversity in arbuscular mycorrhizas of co-occurring fungi and plants from a temperate deciduous woodland”, J Ecol, 90, pp 371-384 43 Jaikoo Lee, Sangsun Lee, Peter J., Young W., (2008), “Improved PCR primers for the detection and identification of arbuscular mycorrhizal fungi”, FEMS Microbiol Ecol, 65, pp 339-349 44 Jaime M D L A., Hsiang T., Mcdonald M R., (2008), “Effects of Glomus intraradices and onion cultivar on Allium white rot development in organic soils in Ontario”, Canadian Journal of Plant Pathology, 30, pp 543-553 45 Jansa J, Mozafar A, Frossard E (2003), “Long-distance transport of P and Zn through the hyphae of an arbuscular mycorrhizal fungus in symbiosis with maize”, Agronomie, 23, pp 481-488 60 46 Kohler J., Hernández J A., Caravaca F., Roldán A., (2008), “Plant - growth promoting rhizobacteria and arbuscular mycorrhizal fungi modify alleviation biochemical mechanisms in water-stressed plants”, Funct Plant Biol, 35, pp 141-151 47 LloydbMacgilp S A., Chambers S M., Dodd J C., Fitter A H., Walker C., Young J P W (1996), “Diversity of the ribosomal internal transcribed spacers within and among isolates of Glomus mosseae and related mycorrhizal fungi”, New Phytol, 133, pp 103-111 48 Mengel K., Kirby E A (2001), Principles of Plant Nutrition, 5th Ed, Kluwer Academic Publishers, London 49 MacMahon, Warner (1984), Dispersal of mycorrhizal fungi: Processes and agents, In: S.E Williams and M.F, Allen, Editors 50 Mobasser H., Tavassoli A (2013), “Study on vesicular arbuscular mycorrhizal (VAM) fungi symbiosis with maize root and it effect on yield component, yield and protein content of maize in water deficit condition”, Journal of Novel Applied Science, 2(10), pp 456-460 51 Morton J B (1988) “Taxonomy of mycorrhizal fungi: Classification nonmenclature and identification”, Mycotaxon, 32, pp 276-324 52 Morton J B., Benny G L (1990), “Revised classification of Arbuscular Mycorrhiza Fungi (Zygomycetes): A new order Glomales, two new suborders, Glominae and Gigasporinae, and two new families, Acaulosporaceae and Gigasporaceae, with an emendation of Glomacease”, Mycotaxon, 37, pp 471491 53 Moss E B (1959), “Observation on the extramatrical mycelium of vesiculararbuscular endophyte”, Transactions of the British Mycological Society, 42, pp 439- 418 54 Mosse B., Hepper C M (1975), “Vesicular-arbuscular infections in root organ cultures”, Physiological Plant Pathology, 5, pp 215-223 61 55 Newsham K., Fitter A H., Watkinsont A R (1995), “Arbuscular mycorrhiza protect an annual grass from root pathogenic fungi in the field”, Journal of Ecology, 83, pp 991-1000 56 Redecker D (2000), “Specific PCR primers to identify arbuscular mycorrhizal fungi within colonized roots”, Mycorrhiza, 10, pp 73-80 57 Robert M A (2001), “Water relations, drought and vesicular arbuscular mycorrhizal symbiosis , Mycorrhiza, 11, pp 3-42 58 Sajedi N., Madani H (2006), “Interaction effect of drought stress, Zinc and mycorrhiza on yield, yield components and harvest index of maize”, Journal of Agriculture Science, 2(7), pp 271-283 59 Salem S F., Dobolyi C., Helyes L., Pék Z., Dimény J (2003), “Side-effect of benomyl and captan on arbuscular mycorrhiza formation in tomato plant”, In 8th IS on Processing Tomato, 613, pp 243-246 60 Sasvárí Z., Hornok L., Posta K (2011), “The community structure of arbuscular mycorrhizal fungi in roots of maize grown in 50 year monoculture”, Biol fertile soil, 47, pp 167-176 61 Schonbeck F., Dehne H (1989), “VA-Mycorrhiza and plant health in “Interrelationships between microorganisms and plants in soil”, Czechoslovak Academy of Sciences, Praha, pp 83-93 62 Schenck N C., Perez Y (1990), Manual for the identification of VA mycorrhizal fungi, 3rd edn, Synergistic Publications, Gainesville, FL 63 Schußler A., Schwarzott D., Walker C (2001), “A new fungal phylum, the Glomeromycota: phylogeny and evolution”, Mycol Res, 105, pp 1413-1421 64 Schuybert A., Hayman D S (1978), “Plant growth responses to vesicular – asbuscular mycorrhizae: XVI Effectiveness of different endophytes at different levels of soil phosphate”, New Phytologist, 103, pp 79-80 62 65 Schwarzott D., Walker C., Schußler A (2001), “Glomusthelargest genus of the arbuscular mycorrhizal fungi (Glomales), is nonmonophyletic”, Mol Phylogenet Evol, 21, pp 190-197 66 Shipra Singh., Anita Pandey., Bhaskar Chaurasia., Lok Man S., Palni (2008), “Diversity of Arbuscular Mycorrhiza Fungi associated with the rhizosphere of tea growing in natural and cultivated ecosites”, Canadian Journal of Microbiology, 39(6), pp 567-575 67 Smith S E., Read D J (2008), Mycorrhizal Symbiosis, 3rd Edition, Academic Press, London 68 Song, Y Y., Zeng, R S., Xu, J F., Li, J., Shen, X., Yihdego, W G (2010), “Interplant communication of tomato plants through underground common mycorrhizal networks”, PLoS ONE, 5(10 ), pp 13324 69 Ted S J (2000), The instant expert guide to Mycorrhiza: The conection for functional enocosystems 70 Tommerup I C (1992), “Method for study of the population biology of vescular Arbuscular Mycorrhiza Fungi”, In Method in MicrobiologyTechniques for the study of mycorrhiza”, Acedemic press, London, 24, pp 23-51 71 Trappe J M., Schenck N C (1982), „„Taxonomy of the fungi forming endomycorrhizae In: Methods and Principles of Micorrhizal Research (N C Schenck, ed.)”, The American Phytopathological Society, St Paul, pp 1-9 72 Vamerali T., Saccomani M., Mosca S., Guarise N., Ganis A (2003), “A comparison of root characteristics in relation to nutrient and water stress in two maize hybrids plant and soil”, 25, pp 57- 167 73 Vancura V., Kunc F (1989), “Interrelationships between microorganisms and plants in soil”, Publishing House of the Czechoslovak academy of sciences, Praha 63 74 Walker C (1987), “Current concepts in the taxonomy of the Endogonaceae In Sylvia, D.M., Hung, L.L & Graham, J.H (eds.), Mycorrhizae in the next decade”, IFAS, Gainesville, Florida, pp 300-302 75 Walker C., Vestberg M (1998), “Synonymy amongst the arbuscular mycorrhizal fungi: Glomus claroideum, G maculosum, G multisubstenum and G fistulosum”, Ann Bot, 82, pp 601-624 76 Walker C., Blaszkowski J., Schwarzott D., Schußler A (2004), “Gerdemannia gen nov., a genus separated from Glomus, and Gerdemanniaceae fam nov., a new family in the Glomeromycota”, Mycol Res, 108, pp 707-718 77 Wang Y.Y., Vestberg M., Walker C., Hurme T., Zhang X., Lindstrom K (2008), “Diversity and infectivity of arbuscular mycorrhizal fungi in agricultural soils of the Sichuan Province of mainland China”, Mycorrhiza, 18, pp 59-68 78 White T J, (1990), “Amplification and direct sequencing of fungal ribosomal RNA gens for phylogentics In: Innis MA, Gelfand DH, Sninsky JJ, White TJ(eds) PCR Protocols:a Guide to Methods and Applications”, Academic Press, New York, pp.315-322 79 Zajicek, J M., Hetrick, B A D., Owensby, C E (1986), “The influence of soil depth on mycorrhizal colonisation of forbes in the tallgrass prarie”, Mycologi, 78, 316-320 80 Zhao Z W., Wang, G H., Yang L (2003), “Biodiversity of arbuscular mycorrhizal fungi in tropical rain forests of Xishuangbanna, southwest China”, Fungal Diversity, 13, pp 233 81 Zhang Y., Yao Q., Li J., Hu Y L Chen J Z (2014), “Growth response and nutrient uptake of Eriobotrya japonica plants inoculated with three isolates of arbuscular mycorrhizal fungi under water stress condition”, J Plant Nutr, 37, pp 690-703 82 (https://invam.wvu.edu/) 64 ... ? ?Nghiên cứu đa dạng thành phần loài nấm rễ nội cộng sinh (Arbuscular Mycorrhiza) đất trồng ngô? ?? đƣợc tiến hành với mục tiêu nghiên cứu sau: Phân lập, phân loại chủng nấm rễ nội cộng sinh từ đất. .. đất trồng ngô Hà Nội Hà Nam Đánh giá đa dạng thành phần loài AMF vùng sinh thái nghiên cứu mối tƣơng quan điều kiện môi trƣờng sống tới đa dạng thành phần loài chủng nấm rễ nội cộng sinh đất trồng. .. nhiên, đa dạng nấm AMF đất trồng ngô Việt Nam nhƣ mối tƣơng quan điều kiện môi trƣờng sống tới đa dạng thành phần loài chủng nấm rễ nội cộng sinh đất trồng ngơ cịn chƣa đƣợc nghiên cứu nhiều Việc nghiên