Cố định glucoamylase ứng dụng trong quy trình sản xuất đường glucose

tên đề tài.txt CỐ ĐỊNH GLUCOAMYLASE ỨNG DỤNG TRONG QUY TRÌNH SẢN XUẤT ĐƯỜNG GLUCOSE (Giảng viên hướng dẫn:PGS.TS.Nguyễn Tiến Thắng) SV: Thân Thị Tâm Lớp: 07DSH3 MSSV: 107111143 Page Đồ án tốt nghiệp GVHD: PGS.TS Nguyễn Tiến Thắng CN Đỗ Thị Tuyến Chương 1: LỜI MỞ ĐẦU SVTH: THÂN THỊ TÂM MSSV: 107111143 Đồ án tốt nghiệp GVHD: PGS.TS Nguyễn Tiến Thắng CN Đỗ Thị Tuyến Đặt vấn đề Enzyme chất xúc tác sinh học khơng có ý nghĩa cho sinh trưởng, phát triển sinh vật mà cịn đóng vai trị quan trọng ngành cơng nghiệp chế biến thực phẩm, y học, chăn nuôi, bảo vệ môi trường… Hiện nay, giới lượng enzyme sản xuất theo quy mô công nghiệp lớn Giá trị enzyme công nghiệp tăng hàng năm từ 10 - 15% Năm 2005, tổng doanh thu từ sản phẩm enzyme đạt 3,5 tỷ USD, riêng glucoamylase hàng năm thu 40 triệu USD [12] Việc sử dụng enzyme hòa tan trình thủy phân thường phải tốn chi phí lớn cho trình tinh sản phẩm, tái sử dụng enzyme vấn đề dễ dàng Với việc sử dụng enzyme cố định thay enzyme hòa tan khắc phục điểm yếu Tuy nhiên việc nghiên cứu khả ứng dụng thủy phân enzyme cố định cịn hạn chế hoạt tính enzyme thấp thời gian thủy phân thường kéo dài Kết vài nghiên cứu cho thấy glucoamylase tạo từ chủng nấm mốc Asp.kawasaki, nuôi môi trường bán rắn tạo suất hoạt tính cao Tuy vậy, việc cố định enzyme glucoamylase từ chủng mốc ứng dụng chúng chưa nghiên cứu Mặt khác, khoai mì có hàm lượng tinh bột cao sử dụng làm thức ăn gia súc, phần sử dụng công nghiệp tinh bột thực phẩm cho người Điều làm cho giá trị kinh tế loại thấp Cho nên, việc tạo sản phẩm có giá trị kinh tế cao từ khoai mì cần thiết Vì vậy, việc cố định enzyme glucoamylase, khảo sát điều kiện thủy phân ứng dụng enzyme cố định thủy phân tinh bột khoai mì vấn đề nên quan tâm nghiên cứu Tình hình nghiên cứu Ngày nay, có vài quy trình cơng nghiệp quy mơ lớn hoạt động mà có sử dụng enzyme cố định Hai ví dụ điển hình trình sản xuất siro fructose từ tinh bột bắp trình sản xuất L - amino acid từ hỗn hợp L D amino acid SVTH: THÂN THỊ TÂM MSSV: 107111143 Đồ án tốt nghiệp GVHD: PGS.TS Nguyễn Tiến Thắng CN Đỗ Thị Tuyến Enzyme cố định penicillin acylase sử dụng rộng rãi trình sản xuất penicillin bán tổng hợp Tuy nhiên việc sử dụng trực tiếp enzyme glucoamylase ứng dụng cơng nghệ thực phẩm ứng dụng lâu Nhưng việc dùng glucoamylase dạng cố định ứng dụng vào q trình sản xuất cịn dạng nghiên cứu chưa úng dụng rộng rãi Mục đích - Sản xuất đường glucose cách sử dụng enzyme glucoamylase dạng cố định Mục tiêu - Thu nhận enzyme glucoamylase từ việc nuôi cấy nấm mốc Asp.kawasaki môi trường bán rắn - Cố định enzyme glucoamylase gel natrialginate - Dùng enzyme cố định thử nghiệm thủy phân tinh bột khoai mì tạo sản phẩm đường glucose Yêu cầu - Nuôi nấm mốc Asp.kawasaki mơi trường bán rắn có tỷ lệ cám gạo bã khoai mì 3:2 - Trích ly enzyme nước cất tỷ lệ sinh khối nước cất 1:4 - Tủa dịch enzyme trích ly cồn 960 với tỷ lệ dịch enzyme cồn 1:3, thu nhận enzyme hòa tan - Khảo sát ảnh hưởng điều kiện ngoại cảnh lên enzyme glucoamylase - Tinh sạch, phân tách xác định hoạt tính enzyme glucoamylase - Cố định enzyme hòa tan gel natrialginate 3% - Khảo sát ảnh hưởng điều kiện ngoại cảnh lên enzyme glucoamylase cố định - Khảo sát điều kiện thủy phân tối ưu thủy phân tinh bột khoai mì Termamyl giai đoạn dịch hóa glucoamylase cố định giai đoạn đường hóa - Từ điều kiện thủy phân tối ưu thử nghiệm tạo sản phẩm đường glucose SVTH: THÂN THỊ TÂM MSSV: 107111143 Đồ án tốt nghiệp GVHD: PGS.TS Nguyễn Tiến Thắng CN Đỗ Thị Tuyến Phương pháp nghiên cứu - Sinh tổng hợp enzyme glucoamylase - Xác định hàm lượng hoạt tính enzyme theo phương pháp Bradford phương pháp Miller - Tinh enzyme phương pháp sắc ký lọc gel - Phân tách protein điện di polyacrylamide - Cố định enzyme natrialginate 3% - Khảo sát yếu tố ảnh hưởng đến enzyme (nhiệt độ, pH, độ bền nhiệt) - Xác định hoạt tính enzyme amylase Termamyl theo Rose - Smith - Khảo sát trình thủy phân tinh bột khoai mì với kết hợp enzyme Termamyl glucoamylase cố định theo phương pháp tối ưu hóa thực nghiệm - Tạo sản phẩm đường glucose Các kết đạt - Thu enzyme glucoamylase - Tinh enzyme xác định trọng lượng phân tử protein - Đã cố định thành công 5g enzyme natrialginate 3% Xác định hoạt tính, số lần tái sử dụng hiệu suất cố định - Khảo sát ảnh hưởng điều kiện ngoại cảnh đến glucoamylase điều kiện thủy phân tối ưu tinh bột khoai mì - Tạo sản phẩm đường glucose Kết cấu đồ án tốt nghiệp Đồ án tốt nghiệp gồm chương: Chương 1: Lời mở đầu Chương 2: Tổng quan tài liệu Chương 3: Vật liệu phương pháp Chương 4: Kết biện luận Chương 5:Kết luận kiến nghị SVTH: THÂN THỊ TÂM MSSV: 107111143 Đồ án tốt nghiệp GVHD: PGS.TS Nguyễn Tiến Thắng CN Đỗ Thị Tuyến Chương 2:TỔNG QUAN VỀ TÀI LIỆU SVTH: THÂN THỊ TÂM MSSV: 107111143 Đồ án tốt nghiệp GVHD: PGS.TS Nguyễn Tiến Thắng CN Đỗ Thị Tuyến 2.1.Sơ lược enzyme 2.1.1 Khái quát chung enzyme [5, tr 32] Enzyme theo tiếng Hi Lạp chất nấm men, chất xúc tác sinh học tạo thành tế bào sinh vật Enzyme đóng vai trị quan trọng việc tham gia xúc tác cho phản ứng sinh hóa tế bào thể điều kiện đẳng nhiệt, đẳng áp “Sự sống định nghĩa điều phối phản ứng enzyme” [6] Enzyme tham gia xúc tác cho phản ứng tế bào, với đặc điểm người ứng dụng enzyme vào sống Mỗi enzyme có tính đặc hiệu riêng biệt với phản ứng định Dưới tác dụng enzyme phản ứng sinh hóa xảy đạt hiệu cao, nhiều phản ứng xảy đồng thời theo dây chuyền, tiêu tốn lượng Enzyme protein có tính đặc hiệu cao có hiệu gấp nhiều lần so với chất xúc tác vô HCl, H2SO4 Enzyme chất khó tổng hợp phương pháp hóa học mà thu từ nguồn vi sinh vật, thực vật, động vật việc sử dụng chúng an tồn Enzyme thu từ nhiều nguồn khác có nguồn enzyme từ vi sinh vật đáp ứng nhu cầu sản xuất quy mô công nghiệp Các enzyme từ vi sinh vật có hoạt tính cao, đa dạng, dễ thu nhận Đặc biệt nguyên liệu sản xuất enzyme từ nguồn vi sinh vật đa dạng, phong phú, dễ kiếm rẻ tiền SVTH: THÂN THỊ TÂM MSSV: 107111143 Đồ án tốt nghiệp GVHD: PGS.TS Nguyễn Tiến Thắng CN Đỗ Thị Tuyến 2.1.2 Lịch sử phát triển enzyme [5, tr.7] Bảng 2.1: Tóm tắt lịch sử phát triển công nghệ enzyme Stt Năm Nội dung nghiên cứu, phát triển 1833 Payen Peoz tách diatase từ malt 1874 Hansen người tách gen từ bào tử cừu 1876 Kiihne gọi chất xúc tác sinh học enzyme 1897 Hai anh em Buchner chứng minh dịch chiết từ nấm men chuyển hóa đường glucose thành cồn CO2 1900 Rohm sử dụng protease vào công nghiệp thuộc da tẩy rửa 1926 Samner kết tinh uerase Northrop kết tinh protease 1928 Fleming phát penicilline 1930 – 1945 Bắt đầu sản xuất kháng sinh theo quy mô công nghiệp Sử dụng glucoamylase thủy phân tinh bột 1972 Boyeretal đưa kỹ thuật di truyền ứng dụng vào công nghệ enzyme sau 10 1984 Nito xác lập quy trình tạo acrylamide loạt trình sản xuất có tham gia enzyme 11 1984 - Là giai đoạn việc tạo hàng trăm loại enzyme khác Enzyme ứng dụng rộng rãi đời sống người Kỹ thuật enzyme cố định đời đưa công nghệ enzyme lên tầm cao mới, 1998 Yang sử dụng chất mang pefluorpolymer phủ poly-vinil-alcohol để cố định -amylase từ B.licheniformis (Võ Viết Phi, luận văn thạc sĩ, 2001) SVTH: THÂN THỊ TÂM MSSV: 107111143 Đồ án tốt nghiệp GVHD: PGS.TS Nguyễn Tiến Thắng CN Đỗ Thị Tuyến 2.1.3.Tính chất enzyme [6, tr 12] 2.1.3.1 Bản chất sinh học: Enzyme tạo bên tế bào chịu điều khiển gen Phản ứng enzyme hao tốn lượng có khả tham gia phản ứng tế bào Một gen  enzyme  phản ứng Enzyme thu nhận dễ dàng từ nguồn nguyên liệu khác từ sinh vật, enzyme thu nhận từ nguồn thực vật rau thơng dụng khơng có tính chất gây độc Đa số enzyme hoạt động xúc tác phản ứng sinh học điều kiện nhiệt độ 20 – 450C, 1atm, pH acid yếu, kiềm yếu hay trung tính Mỗi enzyme tham gia xúc tác đặc hiệu với chất định, vận tốc phản ứng tăng gấp nhiều lần so với chất xúc tác sinh học enzyme cần dùng với lượng nhỏ Có thể điều chỉnh hay ngừng phản ứng nhiệt độ, pH… 2.1.3.2 Bản chất hóa học Gồm hai nhóm:  Nhóm enzyme đơn cấu tử: Enzyme cấu tạo thành phần protein  Nhóm enzyme đa cấu tử: Là loại enzyme mà cấu tạo hai thành phần gồm: Một thành phần protein thành phần cịn lại khơng phải protein Thành phần chất hữu đặc hiệu có vai trị thúc đẩy q trình xúc tác 2.1.4 Nguồn thu nhận enzyme[10] 2.1.4.1 Nguồn enzyme từ động vật Enzyme lấy từ tuyến dịch phận khác quan tiêu hóa như: Tuyến tụy, dày, màng nhầy, tim…chủ yếu cho enzyme protease  Ưu điểm: Enzyme từ nguồn động vật có hoạt tính cao ổn định  Nhược điểm: Thu nhận khó, hiệu thu nhận hiệu kinh tế khơng cao Có nhiều rủi ro khơng ổn định nguồn nguyên liệu Chưa có nghiên cứu nhằm tạo giống động vật với mục đích thu nhận enzyme SVTH: THÂN THỊ TÂM MSSV: 107111143 Đồ án tốt nghiệp GVHD: PGS.TS Nguyễn Tiến Thắng CN Đỗ Thị Tuyến 2.1.4.2 Nguồn enzyme từ thực vật  Ưu điểm: Trong phận thực vật có chứa nhiều enzyme có hoạt tính cao Phần lớn gồm loại sau:  Enzyme amylase: Từ đại mạch nảy mầm (malt)  Enzyme papain: Từ đu đủ  Enzyme bromelin: Từ dứa  Enzyme ficin: Từ sung  Nhược điểm: Tuy loài thực vật cho enzyme có hoạt tính cao gặp nhiều khó khăn lệ thuộc vào điều kiện thiên nhiên thời gian thu hoạch dài, khó đáp ứng nhu cầu sử dụng 2.1.4.3 Nguồn enzyme từ vi sinh vật Đây nguồn enzyme sử dụng để sản xuất enzyme quy mô công nghiệp, quan tâm nhiều để phát triển khối lượng số lượng enzyme Khác với nguồn động – thực vật loài vi sinh vật động vật đơn bào nên có ưu điểm hẳn như: Thời gian thu nhận enzyme tương đối ngắn, số lượng enzyme lớn… Hoạt tính enzyme từ nguồn vi sinh vật cao nguồn động vật, thực vật Tốc độ sinh sản vi sinh vật cao thời gian ngắn nên thu lượng sinh khối lớn Từ ta chiết xuất lượng lớn enzyme Ưu điểm lớn vi sinh vật chúng nhỏ nên dễ dàng đưa vào thiết bị lên men, từ dễ dàng điều khiển kiểm soát điều kiện nhiệt độ, pH, nồng độ chất, ánh sáng, lưu thông khí… Nên ta điều khiển tốc độ sinh tổng hợp enzyme Nguyên liệu dùng để nuôi vi sinh vật sản xuất enzyme nguồn nguyên liệu rẻ tiền dễ kiếm, thường phế liệu ngành cơng nghiệp Có nhiều phương pháp để ni cấy thu nhận enzyme từ vi sinh vật tùy vào điều kiện khác việc nuôi cấy vi sinh vật môi trường bán rắn tập trung nghiên cứu đánh giá mang lại hiệu cao việc thu nhận enzyme SVTH: THÂN THỊ TÂM MSSV: 107111143 Đồ án tốt nghiệp GVHD: PGS.TS Nguyễn Tiến Thắng CN Đỗ Thị Tuyến Kết thu sau cho than hoạt tính vào dung dịch đường glucose nhằm loại bớt chất gây màu protein cho dung dịch qua cột trao đổi Cation Anion, mang dung dịch đông khô sản phẩm glucose dạng tinh thể Hình 4.13: Mẫu đường glucose sau đông khô Nghiền nhỏ khối glucose đơng khơ cho vào hộp kín bảo quản Hình 4.14: Mẫu đường glucose sau nghiền nhỏ Kết định lượng glucose mẫu đường sau thủy phân Lấy 1g sản phẩm xác định hàm lượng glucose có mẫu Thấy mẫu sản phẩm chứa 89,2% glucose  Nhận xét Sản phẩm tạo thành chứa hàm lượng glucose cao, với loại đường sử dụng làm thực phẩm như: Bánh, kẹo, nước giải khát… SVTH: THÂN THỊ TÂM 84 MSSV: 107111143 Đồ án tốt nghiệp GVHD: PGS.TS Nguyễn Tiến Thắng CN Đỗ Thị Tuyến Chương 5: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ SVTH: THÂN THỊ TÂM 85 MSSV: 107111143 Đồ án tốt nghiệp GVHD: PGS.TS Nguyễn Tiến Thắng CN Đỗ Thị Tuyến 5.1 Kết luận  Đã thu nhận enzyme glucoamylase từ việc nuôi cấy nấm mốc Asp.kawasaki môi trường bán rắn với tỷ lệ thành phần chất môi trường gồm cám gạo bã khoai mì tỷ lệ 3:2 , có bổ sung khống tối ưu, bổ sung 8% mốc giống, độ ẩm môi trường 45 %  Xác định hoạt tính hàm lượng enzyme thơ enzyme hòa tan  Đã tinh enzyme glucoamylase phương pháp sắc ký lọc gel Xác định hoạt tính hàm lượng enzyme sau tinh từ tính hiệu suất tinh enzyme  Đã xác định trọng lượng phân tử chạy điện di polyacrylamide  Đã cố định thành công 5g enzyme glucoamylse hịa tan gel natrialginate 3% Xác định hoạt tính, số lần tái sử dụng, hiệu suất cố định  Xác định ảnh hưởng điều kiện ngoại cảnh nhiệt độ, pH, độ bền nhiệt tới enzyme glucoamylse hòa tan enzyme glucoamylase cố định  Đã lấy dung dịch tinh bột khoai mì thực dịch hóa enzyme Termamyl thu độ Brix = 33 tối ưu, sau đường hóa glucoamylase cố định xác định điều kiện thủy phân tối ưu  Từ điều kiện tối ưu hóa q trình thủy phân tinh bột khoai mì ứng dụng tạo đường glucose với hàm lượng đạt 89,2% 5.2 Kiến nghị Nếu có đủ thời gian, thiết bị hóa chất đầy đủ em xin có vài kiến nghi sau:  Cố định enzyme glucoamylase số chất mang khác chitosan kết hợp natrialginate với số chất mang cố định enzyme glucoamylase  Dùng glucoamylase cố định thử nghiệm thủy phân số tinh bột khác như: Tinh bột bắp (ngơ), tinh bột mì…  Tìm biện pháp nâng cao hiệu suất tinh tinh sản phẩm sau thủy phân tinh bột khoai mì SVTH: THÂN THỊ TÂM 86 MSSV: 107111143 Đồ án tốt nghiệp GVHD: PGS.TS Nguyễn Tiến Thắng CN Đỗ Thị Tuyến TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài Liệu Tiếng Việt [1] Ts Hồng Kim Anh, Nguyễn Xích Liên (2000), PGS.Ts Ngơ Kế Sương, Tinh bột sắn sản phẩm từ tinh bột sắn, NXB Khoa Hoc Và Kỹ Thuật [2] Ts Hoàng Kim Anh, Ks Phan Văn Dân, Ts Lê Chiến Phương, Ts.Hoàng Nghĩa Sơn (2006), Nghiên cứu tạo chế phẩm glucoamylase từ nấm mốc Asp.kawasaki kiểm tra tính ổn định chế phẩm, Viện Sinh Học Nhiệt Đới [3] Nguyễn Cảnh (2004), Quy hoạch thực nghiệm, NXB ÑHQG Tp.Hồ Chí Minh [4] Nguyễn Thị Ánh Hồng (2003), Hóa phân tích, ĐHQG Tp.Hồ Chí Minh, trang 104 [5] Cao Cường, Tạ Thu Hằng, Phan Thị Hiền, Nguyễn Thúy Hương, Nguyễn Đức Lượng (chủ biên), Huỳnh Ngọc Oanh, Lê Thị Thủy Tiên, Nguyễn Ánh Tuyết (2004), Công nghệ enzyme, NXB ĐHQG Tp.Hồ Chí Minh [6] Nguyễn Văn Mùi (2001), Thực hành hóa sinh, NXB Khoa Học Và Kỹ Thuật Hà Nội, trang 42-43, 117-119 [7] TS Nguyễn Tiến Thắng, Thực tập sinh học phân tử, Viện sinh học nhiệt đới, Tp.Hồ Chí Minh, trang [8] GS.Ts Nguyễn Văn Diệp, GS.Ts Bùi Minh Đức, PGS.Ts Nguyễn Phùng Tiến (2003), Vi sinh vật thực phẩm, NXB Y Hoïc, trang 31-35, 360, 361 [9] Võ Viết Phi (2006), Luận văn tốt nghiệp thạc sĩ, ĐHBK Tp.Hồ Chí Minh Tài Liệu Tiếng Anh [11] Ashok Pandey (1994) Solid State Fermentation Wiley Eastern Limited New Age International Publishers [12] Dr Ashok Pandey, Industrial Biotechnology and inductrial enzyme, p524 [13 Dr Ashok Pandey, P Selvakumar, Carlos R Soccol and Poonam Nigam, Solid state fermentation for the production of industrial enzymes SVTH: THÂN THỊ TÂM 87 MSSV: 107111143 Đồ án tốt nghiệp GVHD: PGS.TS Nguyễn Tiến Thắng CN Đỗ Thị Tuyến Phần Tài Liệu Trên Internet [14] http://nte-serveur.univ [15] http://www.mpl.orstom.fr [16] http://www.food-data.com/ [17] http://www.vocm.eduvn/ [18] http://vi.wikipedia.org SVTH: THÂN THỊ TÂM 88 MSSV: 107111143 Đồ án tốt nghiệp GVHD: PGS.TS Nguyễn Tiến Thắng CN Đỗ Thị Tuyến PHỤ LỤC Phụ lục A: Phương pháp làm đệm acetat Lấy 11,55ml CH3COOH đậm đặc dẫn mức lên 1000ml với nước cất, dung dịch x Lấy 27,2g CH3COONa.3H2O hịa tan 60ml nước cất sau dẫn lên 1000 ml, dung dịch y Giá trị pH dung dịch đệm tính phụ thuộc vào x ml y ml cho vào dẫn lên 100ml theo bãng sau: x y pH x y pH 46,3 3,7 3,6 25,5 24,5 4,6 44,0 6,0 3,8 20,0 30,0 4,8 41,0 9,0 4,0 14,8 35,2 5,0 36,8 13,2 4,2 10,5 39,5 5,2 30,5 19,5 4,4 8,8 41,2 5,4 4,8 45,2 5,6 SVTH: THÂN THỊ TÂM 89 MSSV: 107111143 Đồ án tốt nghiệp GVHD: PGS.TS Nguyễn Tiến Thắng CN Đỗ Thị Tuyến Phụ lục B: Phương pháp làm đệm phosphat Lấy 27,8g NaH2PO4 hòa tan vào nước cất dẫn lên 1000ml, dung dịch a Lấy 71,7g Na2HPO4.12H2O hòa tan vào nước dẫn lên 1000ml, dung dịch b Dung dịch đệm có pH tạo phụ thuộc vào lượng dung dịch a vàb dẫn lên nước cất cho đủ 200ml theo bảng sau: a b pH a b pH 93,5 6,5 5,6 45,0 55,0 6,9 92,0 8,0 5,8 39,0 61,0 7,0 90,0 10,0 5,9 33,0 67,0 7,1 87,7 12,3 6,0 28,0 72,0 7,2 85,0 15,0 6,1 23,0 77,0 7,3 81,5 18,5 6,2 19,0 81,0 7,4 77,5 22,5 6,3 16,0 84,0 7,5 73,5 26,5 6,4 13,0 87,0 7,6 68,5 31,5 6,5 10,5 89,5 7,7 62,5 37,5 6,6 8,5 91,5 7,8 56,5 43,5 6,7 7,0 93,0 7,9 51,0 49,0 6,8 5,3 94,7 8,0 SVTH: THÂN THỊ TÂM 90 MSSV: 107111143 Đồ án tốt nghiệp GVHD: PGS.TS Nguyễn Tiến Thắng CN Đỗ Thị Tuyến Phụ lục C: Xác định hoạt tính enzyme Đơn vị hoạt tính enzyme: Tính DVHD /1ml enzyme Đơn vị hoạt động /g ngun liệu thơ = DVHD*V m Hoạt tính amylase tính theo gam canh trường:  A  A1    V    100        n  A   10   W  HT (U/g canh trường) =  Hoạt lực amylase tính ml dịch enzyme: HT (U/ml) =  A  A1       100    A    10  Trong đó: A : Mật độ quang mẩu đối chứng sóng 590nm A1 : Mật độ quang mẫu enzyme sóng 590nm V : Thể tích dịch chiết enzyme thu sau li tâm W : Khối lượng canh trường ban đầu mang chiết ly n : Hệ số pha lỗng m : Trọng lượng canh trường dùng trích ly SVTH: THÂN THỊ TÂM 91 MSSV: 107111143 Đồ án tốt nghiệp GVHD: PGS.TS Nguyễn Tiến Thắng CN Đỗ Thị Tuyến Phụ lục D: Phương pháp xác định độ ẩm Sau sấy khô 1050C tới khối lượng không đổi Được khối lượng nước phần trăm độ ẩm loại chất Khối lượng cám gạo giảm 12g (khối lượng nước bay hơi) Vậy độ ẩm cám gạo 12% Khối lượng bã khoai mì giảm 16g (khối lượng nước bay hơi) Vậy độ ẩm bã khoai mì 16% Độ ẩm hổn hợp chất tính theo cơng thức sau: % ẩm hổn hợp = mA  % A  mB  %B mA  mB Trong đó: mA khối lượng cám gạo %A độ ẩm cám gạo mB khối lượng bã khoai mì %B độ ẩm bã khoai mì SVTH: THÂN THỊ TÂM 92 MSSV: 107111143 Đồ án tốt nghiệp Phụ lục E: GVHD: PGS.TS Nguyễn Tiến Thắng CN Đỗ Thị Tuyến Bảng thị trường enzyme công nghiệp thực phẩm Stt Lĩnh vực công nghiệp enzyme Giá trị enzyme (triệu USD) Chuyển hoá tinh bột 140 -Amylase 40 Glucose isomerase 20 Cellulase, hemicelluase -Amylase Công nghiệp sữa 110 Rennet động vật 75 Rennet VSV 20 Lyszyme Rượu bia nước giải khát 46 Pectinase 10 Papain - glucanase Cellulase, hemicelluase 3-4 -Amylase 2-3 Công nghiệp bánh kẹo 15 Amylase nấm sợi 10-12 -Amylase 1-2 Protease 1-2 Thực phẩm hỗn hợp 15 Lipase Bromelin 3-4 Glucose oxidase 1-2 (Nguồn: A Wiseman, 1998) SVTH: THÂN THỊ TÂM 93 MSSV: 107111143 Đồ án tốt nghiệp Phụ lục F: GVHD: PGS.TS Nguyễn Tiến Thắng CN Đỗ Thị Tuyến Tiêu chuẩn chất lượng tinh bột khoai mì Chất lượng Độ ẩm, khơng q (%) Mức chất lượng Hảo hạng Loại Loại Loại 12,5 13 14 14 97,5 96 96 0,15 0,3 0,5 0,3 0,3 0,3 0,2 0,5 1,0 4,5-7 3,5-7 3,5-7 3 Hàm lượng tinh bột tính 97,5 theo chất khơ, không lớn (%) Hàm lượng tro, không 0,10 (%) Hàm lượng protein tính theo 0,2 chất khơ khơng (%) Hàm lượng xơ (của 50g 0,1 bột), không (%) pH 4,5-7 Tổng chất rắn thu sau lọc qua màng kích thước 150µm, khơng q (%) Độ nhớt (BU) 700 500 400 350 Độ trắng(%) 96,5 94 90 88 (Nguồn: Ngô Kế Sương, sắn sản phẩm từ sắn) SVTH: THÂN THỊ TÂM 94 MSSV: 107111143 Đồ án tốt nghiệp Phụ Lục G: GVHD: PGS.TS Nguyễn Tiến Thắng CN Đỗ Thị Tuyến Một vài thành phần cám gạo Dinh dưỡng Trong 100 g Năng lượng 316.0 Chất béo tổng số 20.9 g Chất béo bão hịa 4.2 g Chất béo khơng no (cao phân tử) 7.5 g Chất béo không no đơn phân tử 7.5 g Cholesterol 0.0 mg Carbohydrate tổng số 49.7 g Đường tổng số 0.9 g Protein 13.4 g Năng lượng từ chất béo 174.5 kcal Năng lượng từ carbohydrates 116.8 kcal Năng lượng từ protein 24.3 kcal Nước 6.1 g Năng lượng 7.2 g Chất tro 10.0 g Calcium, Ca 57.0 mg Iron, Fe 18.5 mg Magnesium, Mg 781.0 mg Manganese, Mn 14.2 mg Vitamin B-6 4.1 mg Thiamin 2.8 mg Fatty acids, total saturated 4.2 g Tryptophan 0.1 g (Nguồn http://www.food-data.com) SVTH: THÂN THỊ TÂM 95 MSSV: 107111143 Đồ án tốt nghiệp GVHD: PGS.TS Nguyễn Tiến Thắng CN Đỗ Thị Tuyến Phụ lục H: Đường chuẩn protein Đường chuẩn glucose SVTH: THÂN THỊ TÂM 96 MSSV: 107111143 Đồ án tốt nghiệp GVHD: PGS.TS Nguyễn Tiến Thắng CN Đỗ Thị Tuyến Phụ lục I: Biểu đồ sắc ký enzyme glucoamylase chuẩn hãng AMONO SVTH: THÂN THỊ TÂM 97 MSSV: 107111143 Đồ án tốt nghiệp GVHD: PGS.TS Nguyễn Tiến Thắng CN Đỗ Thị Tuyến Phụ lục K: Các thiết bị Máy đo độ Brix Bể ổn nhiệt Memmeert GmbH Đức Máy đo quang phổ UV- Vis Cân điện tử Máy đông khô SVTH: THÂN THỊ TÂM 98 MSSV: 107111143 ... việc dùng glucoamylase dạng cố định ứng dụng vào q trình sản xuất cịn dạng nghiên cứu chưa úng dụng rộng rãi Mục đích - Sản xuất đường glucose cách sử dụng enzyme glucoamylase dạng cố định Mục... Tuyến Enzyme cố định penicillin acylase sử dụng rộng rãi trình sản xuất penicillin bán tổng hợp Tuy nhiên việc sử dụng trực tiếp enzyme glucoamylase ứng dụng cơng nghệ thực phẩm ứng dụng lâu Nhưng... nghiên cứu Ngày nay, có vài quy trình công nghiệp quy mô lớn hoạt động mà có sử dụng enzyme cố định Hai ví dụ điển hình trình sản xuất siro fructose từ tinh bột bắp trình sản xuất L - amino acid từ