Phân lập nấm trichoderma spp từ nấm linh chi và khảo sát khả năng đối kháng với nấm gây bệnh thán thư trên cây ớt

LỜI CAM ĐOAN Tơi cam đoan cơng trình nghiên cứu Các số liệu kết Đồ án trung thực Mọi thơng tin trích dẫn Đồ án ghi rõ nguồn gốc Tơi xin hồn tồn chịu trách nhiệm lời cam đoan Tp Hồ Chí Minh, ngày 20 tháng năm 2015 Sinh viên thực Huỳnh Nhi LỜI CÁM ƠN Lời đầu tiên, em xin chân thành cám ơn thầy cô khoa Công nghệ sinh học, Thực phẩm Môi trường tạo điều kiện cho em hoàn thành tốt đồ án tốt nghiệp Em xin chân thành cám ơn TS Nguyễn Thị Hai tạo điều kiện thuận lợi từ việc định hướng đề tài đến theo sát tiến trình thí nghiệm Em học nhiều điều hay lịng nhiệt huyết, tinh thần trách nhiệm cơng việc, tình yêu thương người Em xin gởi lời cám ơn đến thầy Th.S Huỳnh Văn Thành tận tình giúp đỡ hỗ trợ em suốt thời gian thí nghiệm trường Em xin cám ơn anh KS Nguyễn Tấn Đức (Trung tâm Công nghệ sinh học Tp Hồ Chí Minh) giúp đỡ em nhiều chuyên môn, giúp em định hướng tốt công việc, cung cấp công cụ làm việc để em hồn thành tốt luận văn Và em gửi lời cảm ơn đến bạn khóa đặc biệt em Phan Ánh Ngân anh Nguyễn Thái Minh Hiếu tận tình hỗ trợ, giúp đỡ, động viên khích lệ tinh thần, em trải qua khó khăn suốt q trình thực Đồ án tốt nghiệp Con xin gởi lời tri ân chân thành sâu sắc đến ba mẹ hỗ trợ nhiều tinh thần vật chất, giúp an tâm thực tốt thí nghiệm thời gian vừa qua Tp Hồ Chí Minh, Ngày 20 tháng năm 2015 Sinh viên thực Huỳnh Nhi ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP MỤC LỤC MỤC LỤC I DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT IV DANH MỤC BẢNG V DANH MỤC HÌNH VI MỞ ĐẦU 1 Lý chọn đề tài Mục đích nghiên cứu Mục tiêu nghiên cứu CHƢƠNG TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Giới thiệu nấm Trichoderma spp 1.1.1 Phân loại 1.1.2 Đặc diểm hình thái 1.1.3 Đặc điểm sinh lý, sinh hóa 1.1.4 Cơ chế kiểm soát sinh học nấm Trichoderma phòng trừ nấm gây bệnh trồng .6 1.1.5 Mối liên hệ khả đối kháng nấm gây bệnh thực vật hoạt động enzyme chitinase Trichoderma spp 11 1.1.6 Một số nghiên cứu ứng dụng nấm Trichoderma spp giới Việt Nam 12 1.1.7 Ứng dụng Trichoderma spp nông nghiệp .15 1.2 Giới thiệu nấm Colletotrichum spp gây bệnh thán thƣ ớt 18 1.2.1 Tình hình sản xuất tiêu thụ ớt giới Việt Nam 18 1.2.2 Nghiên cứu loài nấm Colletotrichum spp gây bệnh thán thư ớt 20 1.2.3 Tình hình gây bệnh thán ớt nấm Colletotrichum spp gây Việt Nam 26 1.2.4 Các biện pháp kết đạt phòng trừ bệnh thán thư ớt 27 CHƢƠNG VẬT LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU .31 i ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP 2.1 Thời gian địa điểm nghiên cứu 31 2.2 Vật liệu 31 2.2.1 Nguyên liệu 31 2.2.2 Giống vi sinh vật 32 2.2.3 Dụng cụ thiết bị 32 2.2.4 Hóa chất 32 2.2.5 Các loại môi trường 33 2.3 Phƣơng pháp nghiên cứu 35 2.3.1 Phân lập nấm Trichoderma spp từ tai nấm linh chi trồng Tp Hồ Chí Minh 35 2.3.2 Phương pháp quan sát hình thái sợi nấm 36 2.3.3 Phương pháp phân lập nấm gây bệnh thán thư tái nhiễm theo quy tắc Koch 37 2.3.4 Xác định hoạt tính cellulase phương pháp khuếch tán thạch 39 2.3.5 Phương pháp nghiên cứu khả sinh tổng hợp chitinase Trichoderma môi trường thạch 39 2.3.6 Phương pháp nuôi cấy Trichoderma spp để thu nhận enzyme chitinase .41 2.3.7 Phương pháp thu nhận dịch môi trường chứa enzyme chitinase 41 2.3.8 Phương pháp xác định hoạt độ enzyme chitinase .42 2.3.9 Khảo sát khả đối kháng chủng nấm Trichoderma với chủng nấm bệnh Colletotrichum acutatum đĩa petri điều kiện invitro .44 2.3.10 Khảo sát khả đối kháng chủng nấm Trichoderma với chủng nấm bệnh Colletotrichum acutatum trái ớt điều kiện invivo 46 2.3.11 Khảo sát tính đối kháng chủng nấm Trichoderma với chủng nấm bệnh Colletotrichum acutatum ớt trồng chậu .48 2.3.12 Đánh giá ảnh hưởng số hoá chất trừ nấm lên sinh trưởng chủng Trichoderma spp 49 2.3.13 Phương pháp xử lý số liệu .50 CHƢƠNG KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 51 ii ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP 3.1 Phân lập nấm Trichoderma spp từ tai nấm linh chi xác định tác nhân gây bệnh ớt sừng trâu đƣợc trồng Tp Hồ Chí Minh 51 3.1.1 Phân lập nấm Trichoderma spp từ tai nấm linh chi gây bệnh huyện Hóc Mơn, Tp Hồ Chí Minh .51 3.1.2 Xác định tác nhân gây bệnh thán thư ớt sừng trâu trồng huyện Củ Chi, Tp Hồ Chí Minh 54 3.2 Khảo sát khả sinh trƣởng, sinh enzyme ngoại bào đối kháng với nấm Colletotrichum acutatum chủng Trichoderma spp .58 3.2.1 Khảo sát khả sinh trưởng chủng nấm Trichoderma T1, T2, T3, T4, T5 58 3.2.2 Khảo sát khả sinh enzyme cellulase chủng nấm Trichoderma T1, T2, T3, T4, T5……….………………………………………………………60 3.2.3 Khảo sát khả sinh enzyme chitinase chủng nấm Trichoderma T1, T2, T3, T4, T5 61 3.2.4 Khảo sát hoạt độ enzyme chitinase chủng nấm Trichoderma T1, T2, T3, T4, T5 63 3.2.5 Khảo sát khả đối kháng chủng nấm Trichoderma T2 T4 với Colletotrichum acutatum điều kiện invitro .64 3.2.6 Khảo sát khả đối kháng chủng nấm Trichoderma T2, T4 với Colletotrichum acutatum trái ớt điều kiện invivo 67 3.2.7 Khảo sát tính đối kháng chủng nấm Trichoderma T2, T4 với chủng nấm bệnh Colletotrichum acutatum ớt trồng chậu 70 3.3 Đánh giá ảnh hƣởng số hoá chất trừ nấm lên sinh trƣởng chủng Trichoderma spp điều kiện invitro 73 CHƢƠNG KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 76 4.1 Kết luận 76 4.2 Kiến nghị .76 TÀI LIỆU THAM KHẢO 76 iii ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT CMC: Carboxymethyl cellulose CT: Công thức ĐC: Đối chứng PDA: Potato D-glucose Agar VSV: Vi sinh vật iv ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP DANH MỤC BẢNG Bảng 1.1 Một số loài Colletotrichum spp ghi nhận tác nhân gây bệnh thán thư ớt nhiều nước giới .25 Bảng 3.1 Đặc điểm hình thái chủng (nghi ngờ Trichoderma spp.) phân lập được………………………………………………………………………… 51 Bảng 3.2 Đặc điểm hình thái chủng Trichoderma spp Nguyễn Thái Minh Hiếu [10] 53 Bảng 3.3 So sánh đặc điểm hình thái chủng nấm phân lập nấm Colletotrichum acutatum theo mô tả Verma (2006) Mordue (1979) [6] 55 Bảng 3.4 Đặc điểm hình thái Colletotrichum acutatum phân lập ban đầu sau lây bệnh nhân tạo 57 Bảng 3.5 Đường kính tản nấm Trichodema spp (cm) sau ngày nuôi cấy 58 Bảng 3.6 Tỉ lệ đối kháng (%) chủng Trichoderma spp với Colletotrichum acutatum .64 Bảng 3.7 Tỉ lệ bệnh (%) trái ớt thí nghiệm .67 Bảng 3.8 Chỉ số bệnh (%) trái ớt thí nghiệm 68 Bảng 3.9 Tỉ lệ bệnh (%) ớt sau ngày theo dõi .70 Bảng 3.10 Chỉ số bệnh (%) ớt sau ngày theo dõi 71 Bảng 3.11 Đường kính tản nấm Trichodema spp công thức sau ngày nuôi cấy 73 Bảng 3.12 Tỉ lệ ức chế (%) Trichoderma spp thuốc hóa học sau ngày nuôi cấy 73 Bảng 3.13 Các chủng nấm Trichoderma spp nuôi cấy sau ngày mơi trường PDA có bổ sung thuốc hóa học 75 v ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP DANH MỤC HÌNH Hình 1.1 Hình thái vi thể Trichoderma harzianum Hình 1.2 Hình thái đại thể số chủng Trichoderma spp Hình 1.3 Hệ sợi nấm Trichoderma kí sinh sợi nấm gây bệnh Rhizoctonia solani Hình 1.4 Ức chế phát triển nấm Pythium ultimum chất kháng sinh tiết từ Trichoderma harzianum 10 Hình 1.5 Các trung tâm xuất nhập ớt lớn giới 18 Hình 1.6 Đặc điểm hình thái nấm Colletotrichum gloeosporioides 20 Hình 1.7 Đặc điểm hình thái nấm Colletotrichum nigrum 21 Hình 1.8 Đặc điểm hình thái nấm Colletotrichum capsici 21 Hình 1.9 Đặc điểm hình thái nấm Colletotrichum acutatum 22 Hình 1.10 Đặc điểm hình thái nấm Colletotrichum coccodes 22 Hình 1.11 Bào tử loài Colettotrichum spp 23 Hình 1.12 Một số khu vực mùa mà bệnh thán thư xuất giới 24 Hình 1.13 Vết bệnh thán thư trái ớt 26 Hình 2.1 Trái ớt sừng trâu bị bệnh thán thư 31 Hình 2.2 Trái ớt sừng trâu bệnh mua vườn ớt ………………… 32 Hình 3.1 Hình thái đại thể chủng nấm gây bệnh thán thư ớt sau 10 ngày nuôi cấy môi trường PDA 54 Hình 3.2 Hình thái vi thể chủng nấm bệnh: (a) Sợi nấm, (b) Bào tử 54 Hình 3.3 Trái ớt sừng trâu trước sau lây nhiễm theo quy tắc Koch 56 Hình 3.4 Hình thái đại thể chủng nấm Trichoderma spp sau ngày nuôi cấy môi trường PDA 59 Hình 3.5 Biểu đồ thể đường kính vịng phân giải cellulase chủng Trichoderma (cm) 60 Hình 3.6 Đường kính vịng phân giải cellulase năm chủng Trichoderma 61 Hình 3.7 Biểu đồ thể đường kính vịng phân giải chitin chủng Trichoderma (cm) 61 vi ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP Hình 3.8 Đường kính vịng phân giải chitin năm chủng Trichoderma 62 Hình 3.9 Biểu đồ thể hoạt độ enzyme chitinase chủng Trichoderma T1, T2, T3, T4, T5 63 Hình 3.10 Kết đối kháng chủng nấm Trichoderma T1, T2, T3, T4, T5 với nấm Colletotrichum acutatum đĩa petri 7NSC 65 Hình 3.11 Sợi nấm Trichoderma spp cơng Colletotrichum acutatum kính hiển vi quang học với độ phóng đại X100 66 Hình 3.12 Trái ớt thời điểm phun trước 7NSC 69 Hình 3.13 Trái ớt thời điểm phun đồng thời 7NSC 69 Hình 3.14 Trái ớt thời điểm phun sau 7NSC 70 Hình 3.15 Các cơng thức thí nghiệm ớt 11NSC 72 vii ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP MỞ ĐẦU Lý chọn đề tài Ớt loại rau ăn loại gia vị thiếu bữa ăn người Việt Nam nhiều nước giới Ngồi ra, ớt cịn ngun liệu cho số ngành công nghiệp chế biến thực phẩm vị thuốc quý y học cổ truyền chữa hữu hiệu số bệnh Ớt loại nơng sản xuất có giá trị kinh tế cao Việt Nam Vì vậy, ớt trồng rộng rãi nhiều tỉnh thành nước Tuy nhiên, suất ớt cịn bấp bênh gây hại dịch bệnh Một bệnh hại quan trọng ảnh hưởng tới diện tích trồng ớt Việt Nam bệnh thán thư nấm Colletotrichum spp gây Trong điều kiện nhiệt đới ẩm Việt Nam, bệnh thán thư gây hại rộng khắp vùng trồng ớt Đặc biệt, vào mùa mưa bệnh phát triển lây lan nhanh Những ruộng bị nhiễm nặng tỉ lệ bệnh lên đến 70% (Nguyễn Cảnh Trí, 2010) Hiện việc phòng trị bệnh thán thư ớt chủ yếu biện pháp canh tác biện pháp hóa học Theo quan điểm phịng trị bệnh thực tế sản xuất ngày biện pháp quản lý dịch hại tổng hợp, có phối hợp nhiều biện pháp gồm canh tác, biện pháp sinh học biện pháp hóa học Đối với biện pháp hóa học có ưu điểm giúp ngăn chặn bệnh hiệu thời gian ngắn Tuy nhiên biện pháp tồn nhiều khuyết điểm gây ô nhiễm môi trường, phá vỡ cân sinh thái, dễ tạo điều kiện cho mầm bệnh hình thành nịi kháng thuốc tồn lưu thuốc hóa học nơng sản Hiện biện pháp sinh học (sử dụng vi sinh vật đối kháng vi khuẩn vùng rễ, nấm) nghiên cứu phát triển mạnh, đặc biệt chủng nấm Trichoderma spp sử dụng tác nhân phòng trừ bệnh hại trồng hiệu phổ biến Tuy nhiên, Trichoderma spp chủ yếu phân lập từ đất để phòng trừ nấm gây hại trồng có đất (Trần Thị Miên, 2008) Vì vậy, cần phải tìm kiếm lồi nấm Trichoderma có ổ sinh thái khác với đất để sử dụng trừ nấm Colletotrichum spp gây hại ớt cần thiết Xuất phát từ yêu cầu trên, sinh viên thực đề tài “Phân lập nấm 11 A 5.927 T2-3 A 5.187 T4-3 A 5.187 T4-2 A 3.703 T2-2 A 2.963 HH-3 A 0.000 HH-2 A 0.000 T2-1 A 0.000 T4-1 A.19 Chỉ số bệnh (%) 7NSC thí nghiệm đối kháng invivo phịng thí nghiệm The GLM Procedure Duncan's Multiple Range Test for Y NOTE: This test controls the Type I comparisonwise error rate, not the experimentwise error rate Alpha 0.01 Error Degrees of Freedom Error Mean Square Number of Means Critical Range 26.69 23.41 24.42 20 101.5821 25.09 25.57 25.95 26.24 26.87 Means with the same letter are not significantly different Duncan Grouping Mean N A 40.000 B 11.853 HH-1 B 11.853 T2-3 B 6.667 T4-3 B 6.667 T4-2 B 5.927 HH-3 B 5.187 T2-2 DC-2 AB 10 26.49 12 B 3.703 HH-2 B 0.000 T2-1 B 0.000 T4-1 A.20 Số ớt bệnh thí nghiệm đối kháng invivo đồng Thời gian khảo sát Lần lặp ĐC T2 T4 HH 3 3 5 3 X 10 6 7 5 X 5NSC 7NSC 11NSC A.21 Tỉ lệ bệnh (%) 5NSC thí nghiệm đối kháng invivo ngồi đồng The ANOVA Procedure Duncan's Multiple Range Test for N NOTE: This test controls the Type I comparisonwise error rate, not the experimentwise error rate Alpha 0.05 Error Degrees of Freedom Error Mean Square Number of Means Critical Range 141.6667 22.41 23.35 23.88 Means with the same letter are not significantly different Duncan Grouping Mean A 40.000 N DC T 13 A 40.000 T4 A 33.333 T2 A 33.333 HH A.22 Tỉ lệ bệnh (%) 7NSC thí nghiệm đối kháng invivo ngồi đồng The ANOVA Procedure Duncan's Multiple Range Test for N NOTE: This test controls the Type I comparisonwise error rate, not the experimentwise error rate Alpha 0.05 Error Degrees of Freedom Error Mean Square 57.14286 Harmonic Mean of Cell Sizes 2.666667 NOTE: Cell sizes are not equal Number of Means Critical Range 15.48 16.10 16.43 Means with the same letter are not significantly different Duncan Grouping Mean N A 73.333 DC B 50.000 T4 C B 43.333 T2 C 33.333 HH T A.23 Tỉ lệ bệnh (%) 11NSC thí nghiệm đối kháng invivo đồng The ANOVA Procedure Duncan's Multiple Range Test for N NOTE: This test controls the Type I comparisonwise error rate, not the experimentwise error rate Alpha 0.05 Error Degrees of Freedom 14 Error Mean Square 150 Harmonic Mean of Cell Sizes 2.666667 NOTE: Cell sizes are not equal Number of Means Critical Range 25.08 26.08 26.61 Means with the same letter are not significantly different Duncan Grouping Mean N A 83.33 DC B 56.67 HH B 55.00 T4 B 53.33 T2 T A.24 Cấp độ bệnh ớt bệnh thí nghiệm đối kháng in vivo ngồi đồng Thời gian Lần khảo sát lặp 5NS 7NS 9NS ĐC T2 T4 HH 1,3,3 1,1 1,1,1,3 3,5,5 3,5,7 1,1,1,1 1,1,1 3,5,7 1,1,1,3,3,3 1,1,3,3 1,1,1,1,1 3,3,5,7 3,3,5,5,5,7,7,7 9,5,7,7,5 7,5,3,7,5,3 3,5,7 9,7,7,5,7,5 3,5,7,3 1,3,5,5 1,3,5 9,3,7,7,9,7,3,7 1,1,3,3 X 1,3,7,7 3,5,5,7,7,7,7,7,9,9 5,5,7,7,7 1,3,3,5,9,9,9 3,3,3,3,7,7,9 3,3,7,7,7 1,1,5,7,7 5,7,7,7,7,7,9,9 1,3,3,5 x 3,5,5,5,7,7 1,3,5,5,7,7 1,3,5,5,5,7 15 A.25 Chỉ số bệnh (%) 5NSC thí nghiệm đối kháng invivo đồng The ANOVA Procedure Duncan's Multiple Range Test for N NOTE: This test controls the Type I comparisonwise error rate, not the experimentwise error rate Alpha 0.05 Error Degrees of Freedom Error Mean Square 10.81051 Number of Means Critical Range 6.191 6.451 6.597 Means with the same letter are not significantly different Duncan Grouping Mean N A 16.667 HH A 12.593 DC B 5.187 T4 B 5.183 T2 T A.26 Chỉ số bệnh (%) 7NSC thí nghiệm đối kháng invivo đồng The ANOVA Procedure Duncan's Multiple Range Test for N NOTE: This test controls the Type I comparisonwise error rate, not the experimentwise error rate Alpha 0.05 Error Degrees of Freedom Error Mean Square 100.4118 Harmonic Mean of Cell Sizes 2.666667 NOTE: Cell sizes are not equal Number of Means Critical Range 20.52 21.34 21.77 16 Means with the same letter are not significantly different Duncan Grouping Mean N A 49.630 DC B 24.445 T4 B 21.853 T2 B 15.557 HH T A.27 Chỉ số bệnh (%) 11NSC thí nghiệm đối kháng invivo ngồi đồng The ANOVA Procedure Duncan's Multiple Range Test for N NOTE: This test controls the Type I comparisonwise error rate, not the experimentwise error rate Alpha 0.05 Error Degrees of Freedom Error Mean Square 131.916 Harmonic Mean of Cell Sizes 2.666667 NOTE: Cell sizes are not equal Number of Means Critical Range 23.52 24.46 24.96 Means with the same letter are not significantly different Duncan Grouping Mean N A 60.367 B 30.555 T4 B 29.260 B 28.887 T2 DC HH T 17 A.28 Đường kính (cm) tản nấm Trichoderma spp mơi trường bổ sung thuốc hóa học sau ngày theo dõi 5NSC 4NSC 3NSC 2NSC N G À Y Trichoder ma Lần lặp ĐC Carbenzim Saizole CUP Antracol ĐC Carbenzim Saizole CUP Antracol ĐC Carbenzim Saizole CUP Antracol ĐC Carbenzim Saizole CUP Antracol T1 T2 T3 T4 T5 3 3 4.7 4.4 4.1 8 7.6 8 7.2 7.6 8 0 0 0 0 0 0 0 0 0 4.4 4.6 4.2 1.6 1.7 1.6 2.9 3 2.1 1.9 5.3 5.4 8 7.4 7.9 7.4 7.2 7.2 8 0.9 0.6 0 0 0 0.6 0.8 0.7 2.8 2.1 0.8 8 8 8 8 8 8 8 0 0 0 0 0 0 0 0 0 7.1 7.5 7.1 3.2 2.8 2.7 5.5 5.4 5.2 4.2 4.9 4.7 8 8 8 8 8 8 8 1.9 2 1.9 1.1 2.1 2.2 1.5 2.4 3.5 3.3 6.2 5.9 3.7 8 8 8 8 8 8 8 0 0 0 0 1.1 1.1 1.2 0 0 0 8 5.1 4.5 4.1 7.3 7.6 7.4 7.1 8 8 8 8 8 8 8 3.1 3.7 3.8 5.3 3.9 4.3 5.8 5.9 4.3 6.2 6.7 7.3 8 8 8 8 8 8 8 8 8 0 8 0 1.1 1.1 1.2 0 0 0 8 5.1 4.5 4.2 7.4 7.8 7.2 7.7 7.2 8 8 8 8 8 8 8 4.3 5.1 5.3 7.8 6.7 8 8 8 8 A.29 Đường kính tản nấm (cm) Trichodema virens (T1) nghiệm thức qua thời điểm Nghiệm thức Đƣờng kính tản nấm (cm) qua ngày sau nuôi cấy Ngày sau Ngày sau Ngày sau Ngày sau Đối Chứng 4.40b 8.00a 8.00a 8.00a Carbenzim 0.00c 0.00c 0.00c 0.00c Saizole 0.00c 0.00c 0.00c 0.00c CUP 5.23a 8.00a 8.00a 8.00a Antracol 0.67c 1.97b 3.53b 4.90b 18 A.30 Đường kính tản nấm Trichodema harzianum (T2) nghiệm thức qua thời điểm Nghiệm thức Đƣờng kính tản nấm (cm) qua ngày sau ni cấy Ngày sau Ngày sau Ngày sau Ngày sau Đối Chứng 8.00a 8.00a 8.00a 8.00a Carbenzim 0.00c 0.00d 0.00c 8.00a Saizole 4.40b 7.23b 8.00a 8.00a CUP 8.00a 8.00a 8.00a 8.00a Antracol 0.00c 1.33c 4.50b 6.83b A.31 Đường kính tản nấm Trichodema T3 nghiệm thức qua thời điểm Nghiệm thức Đƣờng kính tản nấm (cm) qua ngày sau nuôi cấy Ngày sau Ngày sau Ngày sau Ngày sau Đối Chứng 7.87a 8.00a 8.00a 8.00a Carbenzim 0.00c 0.00d 0.00c 0.00c Saizole 1.63b 2.90b 4.57b 4.60b CUP 7.77a 8.00a 8.00a 8.00a Antracol 7.87a 8.00a 8.00a 8.00a A.32 Đường kính tản nấm Trichodema T4 nghiệm thức qua thời điểm Nghiệm thức Đƣờng kính tản nấm (cm) qua ngày sau nuôi cấy Ngày sau Ngày sau Ngày sau Ngày sau Đối Chứng 7.60a 8.00a 8.00a 8.00a Carbenzim 0.00c 0.00d 1.13c 1.13c Saizole 2.95b 5.45b 7.45a 7.60b CUP 7.27a 8.00a 8.00a 8.00a Antracol 0.70c 3.07c 6.73b 8.00a 19 A.33 Đường kính tản nấm Trichodema T5 nghiệm thức qua thời điểm Nghiệm thức Đƣờng kính tản nấm (cm) qua ngày sau ni cấy Ngày sau Ngày sau Ngày sau Ngày sau Đối Chứng 8.00a 8.00a 8.00a 8.00a Carbenzim 0.00c 0.00c 0.00c 0.00c Saizole 2.00b 4.60b 7.17b 7.37b CUP 8.00a 8.00a 8.00a 8.00a Antracol 1.90b 5.27b 8.00a 8.00a A.34 Tỉ lệ ức chế (%) nấm Trichoderma T1 thuốc hóa học ngày sau cấy The ANOVA Procedure t Tests (LSD) for N NOTE: This test controls the Type I comparisonwise error rate, not the experimentwise error rate Alpha 0.01 Error Degrees of Freedom Error Mean Square 0.130208 Critical Value of t 3.35539 Least Significant Difference 0.9886 Means with the same letter are not significantly different t Grouping Mean N T A 100.0000 Carbenzi A 100.0000 Saizole B 75.4167 Antracol C 0.0000 CUP A.35 Tỉ lệ ức chế (%) nấm Trichoderma T2 thuốc hóa học ngày sau cấy The ANOVA Procedure t Tests (LSD) for N 20 NOTE: This test controls the Type I comparisonwise error rate, not the experimentwise error rate Alpha 0.01 Error Degrees of Freedom Error Mean Square 11.58854 Critical Value of t 3.35539 Least Significant Difference 9.3263 Means with the same letter are not significantly different t Grouping Mean N T A 100.000 Carbenzi B 83.333 Antracol C 9.583 Saizole D 0.000 CUP A.36 Tỉ lệ ức chế (%) nấm Trichoderma T3 thuốc hóa học ngày sau cấy The ANOVA Procedure t Tests (LSD) for N NOTE: This test controls the Type I comparisonwise error rate, not the experimentwise error rate Alpha 0.01 Error Degrees of Freedom Error Mean Square 8.333333 Critical Value of t 3.35539 Least Significant Difference 7.9087 Means with the same letter are not significantly different t Grouping Mean N T A 100.000 Carbenzi B 75.833 Antracol C 63.750 Saizole D 0.000 CUP 21 A.37 Tỉ lệ ức chế (%) nấm Trichoderma T4 thuốc hóa học ngày sau cấy The ANOVA Procedure t Tests (LSD) for N NOTE: This test controls the Type I comparisonwise error rate, not the experimentwise error rate Alpha 0.01 Error Degrees of Freedom Error Mean Square 400.2604 Critical Value of t 3.35539 Least Significant Difference 54.811 Means with the same letter are not significantly different t Grouping Mean N T A 100.00 Carbenzi A 61.67 Antracol B A 54.58 B 0.00 3 Saizole CUP A.38 Tỉ lệ ức chế (%) nấm Trichoderma T5 thuốc hóa học ngày sau cấy The ANOVA Procedure t Tests (LSD) for N NOTE: This test controls the Type I comparisonwise error rate, not the experimentwise error rate Alpha 0.01 Error Degrees of Freedom Error Mean Square 77.86458 Critical Value of t 3.35539 Least Significant Difference 24.175 Means with the same letter are not significantly different t Grouping A Mean 100.000 N T Carbenzi 22 B 42.500 Saizole B 34.167 Antracol C 0.000 CUP 23 Phụ lục B Hình ảnh B.1 Lá ớt bị bệnh thán thư cât ớt thí nghiệm 24 B.2 Cây ớt ban đầu chưa chủng nấm bệnh 25 ... NGHIỆP 3.1 Phân lập nấm Trichoderma spp từ tai nấm linh chi xác định tác nhân gây bệnh ớt sừng trâu đƣợc trồng Tp Hồ Chí Minh 51 3.1.1 Phân lập nấm Trichoderma spp từ tai nấm linh chi gây bệnh huyện... 2.3.10 Khảo sát khả đối kháng chủng nấm Trichoderma với chủng nấm bệnh Colletotrichum acutatum trái ớt điều kiện invivo 46 2.3.11 Khảo sát tính đối kháng chủng nấm Trichoderma với chủng nấm bệnh. .. khác với đất để sử dụng trừ nấm Colletotrichum spp gây hại ớt cần thiết Xuất phát từ yêu cầu trên, sinh viên thực đề tài ? ?Phân lập nấm ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP Trichoderma spp từ nấm linh chi khảo sát khả