Nghiên cứu đặc điểm hình thái giải phẫu và chỉ thị sinh học phân tử một số loài thuộc chi Sâm Panax L mọc tự nhiên ở Việt Nam

Nghiên cứu đặc điểm hình thái giải phẫu và chỉ thị sinh học phân tử một số loài thuộc chi Sâm Panax L mọc tự nhiên ở Việt Nam Nghiên cứu đặc điểm hình thái giải phẫu và chỉ thị sinh học phân tử một số loài thuộc chi Sâm Panax L mọc tự nhiên ở Việt Nam luận văn tốt nghiệp thạc sĩ

ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI TRƯỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN - Phạm Thị Ngọc NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM HÌNH THÁI, GIẢI PHẪU VÀ CHỈ THỊ SINH HỌC PHÂN TỬ MỘT SỐ LOÀI THUỘC CHI SÂM (PANAX L.) MỌC TỰ NHIÊN Ở VIỆT NAM LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC Hà Nội – 2017 ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI TRƯỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN Phạm Thị Ngọc NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM HÌNH THÁI, GIẢI PHẪU VÀ CHỈ THỊ SINH HỌC PHÂN TỬ MỘT SỐ LOÀI THUỘC CHI SÂM (PANAX L.) MỌC TỰ NHIÊN Ở VIỆT NAM Chuyên ngành: Thực vật học Mã số: 60.42.01.11 LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC: TS PHẠM THANH HUYỀN PGS TS NGUYỄN TRUNG THÀNH Hà Nội – 2017 LỜI CẢM Đ ho n th nh lu n v n n y, t i thầy, , Tr nh kho họ l nh v hết t i xin tr n trọng N nh n nhi u s gi p sinh họ , th ủ v t họ y t l ng iết n s u s Th nh Huy n – Tr ng Kho T i nguyên D liệu, Viện D h ng n t n t nh gi p v nh ng kiến, g p v th v ho n th nh t t lu n v n ủ m nh t i TS Phạm liệu, l ng i thầy ng qu u t i T i xin tr n trọng ảm n nh ng kiến ng g p quý báu ủ PGS TS Nguyễn Trung Th nh – Ph tr ng Kho Sinh họ , hủ nhiệm ộ m n Th v t họ , thầy, ph ng Đ o tạo S u ại họ – Tr ng Đại họ Kho họ T nhiên qu tr nh họ t p v ho n thiện lu n v n T i ũng xin gửi l i ảm n h n th nh t i PGS TS Đinh Đo n Long, NCS Phạm Thị Hồng Nhung ng n ộ Bộ m n Y Đại họ Qu gi H Nội tạo i u kiện thu n l i ủ m nh họ C s , Kho Y D , t i th hiên nghiên ứu T i ũng xin tr n trọng ảm n Ban l nh ạo Viện D liệu, ồng nghiệp, n ộ Kho T i nguyên D liệu tạo i u kiện thu n l i công tác nghiên ứu ũng nh ho nh ng l i khuyên qu u t i ho n thiện lu n v n T i xin y t l ng iết n ủ m nh t i ng i th n gi nh, nh ng ng i lu n ộng viên t i su t qu tr nh họ t p v th lu n v n Đ t i nghiên ứu s h tr phần kinh ph i Bộ Kho họ v C ng nghệ v i t i ―Kh i th v ph t tri n nguồn gen S m ngọ linh (Panax vietnamensis H & Grushv.‖, Ch ng tr nh T y B v i t i ―Ứng ụng giải ph p kho họ ng nghệ ph t tri n nguồn nguyên liệu v tạo sản phẩm từ h i lo i y thu S m vũ iệp (Panax bipinnatifidus Seem.) v T m thất ho ng (Panax stipuleanatus H.Ts i K.M Feng) v ng T y B ‖ Qu họ N g o Việt N m T i xin tr n trọng v t l ng ảm n n 31 t n 01 năm 2018 T c giả uận v n Phạm Thị Ngọc LỜI CAM ĐOAN T i xin h tr h m o n ng s liệu v kết lu n v n n y l trung th ất k n lu n v n ng tr nh n o kh Tất ả v nguồn th ng tin liệt kê t i liệu th m khảo Nếu g s is t t i xin hịu ho n to n tr h nhiệm n 31 t n 01 năm 2018 T c giả uận v n Phạm Thị Ngọc MỤC LỤC MỞ ĐẦU .1 Ch ng TỔNG QUAN 1.1 Tổng qu n nghiên ứu v 1.1.1 Lịc sử n 1.1.2 C c n ên cứu c 1.2.1 C c lo t u cc 1.2.2 Lịc sử n sn Panax L ên cứu p ân loạ c 1.2 Tổng qu n nghiên ứu v 1.2.2 hi Panax L gi i Panax L sử dụn s n ọc p ân tử hi S m (Panax L.) Việt N m 11 Sâm (Panax L.) n ận V ệt am 11 ên cứu c Sâm (Panax L.) V ệt am .13 ên cứu p ân loạ c c lo t u cc Panax L V ệt am sử dụn ọc p ân tử 16 1.3 Tổng qu n v ph ng ph p nghiên ứu 18 1.3.1 C c loạ c ỉ t ị v dấu c uẩn tron n ên cứu t ực vật .18 1.3.2 Cơ sở k oa ọc v ệc sử dụn c c trìn tự AD bảo t ủ tron p ân tíc quan ệ p t s n t ực vật 19 1.3.3 C c p ươn p Ch p xâ dựn câ quan ệ p t s n 22 ng MỤC TIÊU, ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU .26 2.1 Mụ tiêu nghiên ứu .26 2.2 Đ i t ng, ị i m v v t liệu nghiên ứu 26 2.2.1 Đố tượn n ên cứu .26 2.2.2 Địa đ ểm n ên cứu .26 2.2.3 Vật l ệu n ên cứu 27 2.3 Nội ung nghiên ứu 30 2.4 Ph ng ph p nghiên ứu 31 2.4.1 P ươn p p k ảo cứu kế t ừa t l ệu 31 2.4.2 P ươn p p đ ều tra t u t ập mẫu vật 32 2.4.3 P ươn p p n ên cứu t ực vật 2.4.4 P ươn p p n ên cứu s n ả p ẫu 32 ọc p ân tử 33 2.4.4.1 T c c ết AD tổn số .33 Ch ng KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU .37 3.1 X ịnh th nh phần 3.2 Đặc đ ểm ìn t lo i thứ thuộ hi Panax L Việt N m .37 .41 3.2.1 Tam t ất oan v Tam t ất l xẻ 41 3.2.2 Sâm n ọc l n v c c t ứ (var et ) 49 3.2.3 Tam t ất bắc – Panax notoginseng (Burkill) F.H.Chen 61 3.2.4 Đặc đ ểm ìn t 3.3 Đặ c un c Panax L V ệt am 66 i m giải ph u .67 3.3.1 Tam t ất oan – Panax stipuleannatus H.T.Tsai et K.M.Feng 67 3.3.2 Sâm n ọc l n v c c t ứ 70 3.3.3 Tam t ất bắc – Panax notoginseng (Burkill) F.H Chen 74 3.3.4 So s n đặc đ ểm ả p ẫu ữa c c lo v t ứ lo c Panax L V ệt am 79 3.4 Nghiên ứu hỉ thị ph n tử v m i qu n hệ i truy n ủ v i t xon ng hi Panax L .79 3.4.1 Tác c ết AD tổn số v k uếc đạ vùn 3.4.2 P ân tíc v m u thu th p ả trìn tự vùn 3.4.3 Xâ dựn câ p en ITS-rDNA matK 79 en ITS-rDNA matK .80 t s n c ủn loạ c o c c lo t u cc Panax V ệt Nam 90 3.5 So s nh h nh th i v x y Panax L ng kh ph n loại ho lo i thứ thuộ hi Việt N m 94 KẾT LUẬN .98 TÀI LIỆU THAM KHẢO - PHỤ LỤC - Phụ lụ C tr nh t ITS v gen m tK lấy từ Gen nk sử ụng nghiên ứu ph n t h qu n hệ ph t sinh - Phụ lụ C m u tiêu ản Type ủ lo i thuộ hi Panax L sử ụng nghiên ứu - 14 Phụ lụ D nh s h tiêu ản nghiên ứu ph ng tiêu ản v Phụ lụ Kết x ịnh tên kho họ m u thu th p ảo t ng - 15 - 23 - DANH MỤC HÌNH ẢNH H nh 3.1 Ảnh hụp s tiêu ản tiêu ản lo i Panax bipinnatifidus 39 H nh 3.2 A Ảnh hụp tiêu ản NIMM.911; B Ảnh hụp tiêu ản NIMM.348 .40 H nh 3.3 Ảnh hụp tiêu ản Typus KUN.0560452 loài Panax stipuleanatus H.T.Tsai et K.M.Feng .40 H nh 3.4 H nh th i ủ T m thất ho ng – Panax stipuleanatus H.T.Tsai et K.M.Feng 43 H nh 3.5 Ảnh hụp y T m thất ho ng ngo i t nhiên 43 Hình 3.6 Hình th i ạng th n rễ ủ T m thất ho ng – Panax stipuleanatus H.T.Tsai et K.M.Feng .44 H nh 3.7 L t t ng ng th n rễ ủ T m thất ho ng – Panax stipuleanatus H.T.Tsai et K.M.Feng 44 H nh 3.8 Dạng l hét nguyên ủ T m thất ho ng – Panax stipuleanatus H.T.Tsai et K.M.Feng A L mặt trên; B L mặt i .44 Hình 3.9 Hình thái chét nguyên ủ T m thất ho ng – Panax stipuleanatus H.T.Tsai et K.M.Feng .45 H nh 3.10 L ng l T m thất ho ng - Panax stipuleanatus H.T.Tsai et K.M.Feng 45 H nh 3.11 H nh th i l kèm ủ T m thất ho ng - Panax stipuleanatus H.T.Tsai et K.M.Feng 45 H nh 3.12 Cụm ho T m thất ho ng - Panax stipuleanatus H.T.Tsai et K.M.Feng46 H nh 3.13 L ụm ho T m thất ho ng - Panax stipuleanatus H.T.Tsai et K.M.Feng 46 H nh 3.14 A H nh th i ho ủ T m thất ho ng ; B Cu ng ho kh ng g i thịt 46 H nh 3.15 L t t ọ ầu ủ T m thất ho ng – Panax stipuleannatus H.T.Tsai et K.M.Feng 47 H nh 3.16 Cụm h n ủ T m thất ho ng – Panax stipuleannatus H.T.Tsai et K.M.Feng 47 Hình 3.17 C ạng v hạt ủ T m thất ho ng - Panax stipuleanatus H.T.Tsai et K.M.Feng 47 H nh 3.18 H nh th i ủ T m thất hoang – Panax stipuleanatus H.T.Tsai et K.M.Feng 48 H nh 3.19 H nh ạng l ủ T m thất l xẻ - Panax sp.1 48 H nh 3.20 H nh th i l hét xẻ th y ng l 49 H nh 3.21 H nh th i ủ S m ngọ linh – Panax vietnamensis Ha & Grushv .51 H nh 3.22 C ạng h nh th i th n rễ ủ S m ngọ linh – Panax vietnamensis Ha & Grushv 51 H nh 3.23 L t t ng ng ạng th n rễ S m ngọ linh – Panax vietnamensis Ha & Grushv 52 H nh 3.24 H nh th i l S m ngọ linh – Panax vietnamensis Ha & Grushv 52 H nh 3.25 H nh th i l hét ủ S m ngọ linh – Panax vietnamensis Ha & Grushv 53 H nh 3.26 L ng l S m ngọ linh – Panax vietnamensis Ha & Grushv .53 H nh 3.27 Cụm ho ủ S m ngọ linh – Panax vietnamensis Ha & Grushv 53 H nh 3.28 H nh th i ho ủ S m ngọ linh – Panax vietnamensis Ha & Grushv .54 H nh 3.29 G i thịt u ng ho nh ủ S m ngọ linh – Panax vietnamensis Ha & Grushv 54 H nh 3.30 H nh th i v m u s ho ủ S m ngọ linh – Panax vietnamensis Ha & Grushv 54 H nh 3.31 L t t ọ ầu ho ủ S m ngọ linh – Panax vietnamensis Ha & Grushv 55 H nh 3.32 H nh th i nh ho S m ngọ linh – Panax vietnamensis Ha & Grushv 55 H nh 3.33 Cụm ủ S m ngọ linh – Panax vietnamensis Ha & Grushv 55 H nh 3.34 H nh th i ạng ủ S m ngọ linh – Panax vietnamensis Ha & Grushv 56 H nh 3.35 Dạng h i hạt h n ủ S m ngọ linh – Panax vietnamensis Ha & Grushv 56 H nh 3.36 H nh th i hạt S m ngọ linh - Panax vietnamensis Ha & Grushv .56 Hình 3.37 Hình thái Sâm lai châu - Panax vietnamensis var fuscidiscus K Komatsu, S Zhu & S.Q Cai 57 Hình 3.38 Hình thái Sâm lai châu 58 H nh 3.39 C ạng th n rễ ủ S m l i h u - Panax vietnamensis var fuscidiscus K Komatsu, S Zhu & S.Q Cai 58 H nh 3.40 H nh th i ho ủ S m l i h u - Panax vietnamensis var fuscidiscus K Komatsu, S Zhu & S.Q Cai .58 H nh 3.41 Ph n t h th nh phần ho ủ S m l i h u - Panax vietnamensis var fuscidiscus K Komatsu, S Zhu & S.Q Cai 59 H nh 3.42 Mặt t ọ ầu ủ S m l i h u - Panax vietnamensis var fuscidiscus K Komatsu, S Zhu & S.Q Cai 59 H nh 3.43 Quả non ủ S m l i h u - Panax vietnamensis var fuscidiscus K Komatsu, S Zhu & S.Q Cai .59 ...ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI TRƯỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN Phạm Thị Ngọc NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM HÌNH THÁI, GIẢI PHẪU VÀ CHỈ THỊ SINH HỌC PHÂN TỬ MỘT SỐ LOÀI THUỘC CHI SÂM (PANAX L. ) MỌC TỰ... ph t tri n ũng nh lo i S m ản ị ủ Việt N m, h ng t i l t i ? ?Nghiên cứu đặc điểm hình th i, giải phẫu thị sinh học phân tử số oài thuộc chi Sâm (Panax L. ) mọc tự nhiên Việt Nam? ?? Chương TỔNG QUAN... Chương TỔNG QUAN 1.1 Tổng quan c c nghiên cứu chi Panax L giới 1.1.1 L? ??ch sử nghiên cứu chi Panax L Chi Panax L l hi nh họ Nhân sâm (Ar li e e) gi i ghi nh n 12 lo i v thứ Ph n Đ ng B h u Á, o gồm