Đồ án tốt nghiệp phân lập các chủng nấm trichoderma spp từ đất hồ tiêu ở đồng nai và đánh giá khả năng đối kháng

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC CÔNG NGHỆ TP HỒ CHÍ MINH ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP PHÂN LẬP CÁC CHỦNG NẤM TRICHODERMA SPP TỪ ĐẤT HỒ TIÊU Ở ĐỒNG NAI VÀ ĐÁNH GIÁ KHẢ NĂNG ĐỐI KHÁNG CỦA CHÚNG VỚI CÁC NẤM GÂY BỆNH TRONG ĐẤT Ngành: CÔNG NGHỆ SINH HỌC Chuyên ngành: CÔNG NGHỆ SINH HỌC Giảng viên hướng dẫn : TS Nguyễn Thị Hai Sinh viên thực : Nguyễn Hoàng Vũ MSSV: 1151110426 Lớp: 11DSH04 TP Hồ Chí Minh, 2015 LỜI CAM ĐOAN - - - - - - - - -- - - - - - - - - Tôi tên: Nguyễn Hoàng Vũ Sinh ngày 29 tháng 07 năm 1993 Sinh viên lớp 11DSH04 - Công Nghệ Sinh Học - Trường ĐH Kỹ Cơng Nghệ TP Hồ Chí Minh Tơi xin cam đoan : Đề tài "Phân lập tuyển chọn chủng nấm Trichoderma sp đất hồ tiêu Đồng Nai" Tiến sĩ Nguyễn Thị Hai hướng dẫn đề tài riêng Các số liệu, kết luận văn tốt nghiệp trung thực chưa cơng bố cơng trình luận văn trước Những thông tin tham khảo khóa luận trích dẫn cụ thể nguồn sử dụng Tất nội dung đồ án nội dung đề tài yêu cầu giáo viên hướng dẫn Nếu có sai sót tơi xin chịu trách nhiệm trước hội đồng Sinh viên thực Nguyễn Hoàng Vũ LỜI CẢM ƠN - - - - - - - - -- - - - - - - - Để hoàn thành đề tài ngoại nổ lực, cố gắng thân, em nhận hỗ trợ nhiều từ nhiều người, chân thành gửi lời "CẢM ƠN" tới : Con xin kính dâng lời cảm ơn chân thành sâu sắc đến Ba Mẹ tất người thân gia đình ni khơn lớn nên người tận tâm lo lắng, tạo điều kiện cho học tập ngày hôm Ngôi trường Đại học Kỹ Thuật Cơng Nghệ Tp Hồ Chí Minh, nơi em gắn bó suốt bốn năm học qua, giúp em tiếp cận điều bổ ích, kinh nghiệm sống Ban chủ nhiệm khoa Môi Trường Công Nghệ Sinh Học, thầy cô môn Công Nghệ Sinh Học, Trường Đại Học Kỹ Thuật Công Nghệ TP HCM trang bị cho kiến thức bản, làm móng để tơi thực đề tài làm tốt công việc sau Cô T.S Nguyễn Thị Hai tận tình giúp đỡ, hướng dẫn tạo điều kiện thuận lợi cho em thực tốt đề tài Các bạn lớp cỗ vũ, khích lệ tinh thần cho em suốt thời gian thực đồ án MỤC LỤC MỤC LỤC i DANH MỤC BẢNG v DANH MỤC HÌNH vi MỞ ĐẦU Chương TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1 Giới thiệu chung nấm Trichoderma 1.1 Vị trí phân loại Trichoderma 1.2 Đặc điểm hình thái cấu trúc Trichoderma 1.3 Đặc điểm số chủng Trichoderma Việt Nam 1.4 Vai trị tiêu diệt lồi nấm gây bệnh thực vật 1.1.4.1 Nguyên tắc chung 1.1.4.2 Cơ chế đối kháng Hiệu phòng trừ nấm gây hại nấm Trichoderma 18 Giới thiệu hồ tiêu 19 1.3.1 Nguồn gốc tiêu 19 1.3.2 Công dụng tiêu 19 1.3.3 Đặc điểm hình thái tiêu (Phạm Văn Biên cộng sự, 1990 20 Bệnh hại hồ tiêu biện pháp phòng trừ 22 1.4.1 Bệnh hại hồ tiêu 22 1.4.1.1 Bệnh chết nhanh 23 i 1.4.1.2 Bệnh chết chậm 24 1.4.1.3 Bệnh virus hại hồ tiêu 25 1.4.2 Biện pháp phòng trừ 25 1.4.2.1 Biện pháp canh tác 25 1.4.2.2 Biện pháp hóa học 26 1.4.2.3 Biện Pháp sinh học 26 1.4.2.4 Biện pháp quản lý trồng tổng hợp (ICM) 26 Một số nấm bệnh hại đất 27 1.5.1 Phytophthora 27 1.5.1.1 Vị trí phân loại 27 1.5.1.2 Đặc điểm hình thái cấu trúc 28 1.5.1.3 Nấm Phytophthora gây bệnh trồng 30 1.5.2 Fusarium sp 32 1.5.2.1 Vị trí phân loại 32 1.5.2.2 Đặc điểm hình thái , cấu trúc Fusarium 33 1.5.2.3 Nấm Fusarium gây bệnh cho trồng việt nam 34 1.5.3 Rhizoctonia solani 35 1.5.3.1 Vị trí phân loại 35 1.5.3.2 Đặc điểm hình thái cấu trúc 36 1.5.3.3 Nấm Rhizoctonia gây hại cho trồng 36 Chương VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 39 ii 2.1 Thời gian địa điểm 39 2.2 Thiết bị dụng cụ vật liệu 39 2.3 Vật liệu 40 2.3.1 Vi sinh vật nghiên cứu 40 2.3.2 Môi trường 41 2.4 Phương pháp nghiên cứu 42 2.4.1 Phân lập nấm Trichoderma đất hồ tiêu 43 2.4.1.1 Phương pháp lấy mẫu (Nguyễn Lân Dũng cộng sự, 2000) 43 2.4.1.2 Phương pháp pha loãng mẫu 43 2.4.2 Phương pháp quan sát hình thái nấm 43 2.4.2.1 Quan sát đại thể nấm 43 2.4.2.2 Quan sát vi thể nấm 44 2.4.3 Phương pháp khảo sát khả sinh enzyme ngoại bào (cellulase, chitinase) (Tô Duy Khương, 2007) 45 2.4.4 Đánh giá tính đối kháng chủng nấm Trichoderma với chủng nấm bệnh (Fokkema, 1976) 46 2.4.5 Phương pháp xử lý số liệu thống kê 47 Chương KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 48 3.1 Kết phân lập nấm Trichoderma từ đất hồ tiêu 48 3.2 Đặc điểm chủng nấm Trichoderma phân lập đất hồ tiêu 48 3.3 Khảo sát khả sinh enzyme ngoại bào (cellulase chitinase) iii chủng nấm Trichoderma phân lập đất hồ tiêu bị bệnh 53 3.4 Đánh giá khả đối kháng với chủng nấm bệnh đất đất hồ tiêu chủng Trichoderma phân lập 56 3.4.1 Khả đối kháng với nấm Phytophthora sp1 57 3.4.2 Khả đối kháng với nấm Phytophthora sp2 61 3.4.3 Khả đối kháng với nấm Rhizoctonia solani 65 3.4.4 Khả đối kháng với nấm Fusarium sp 69 Chương KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 74 4.1 Kết luận 74 4.2 Kiến Nghị: 74 TÀI LIỆU THAM KHẢO 75 PHỤ LỤC iv DANH MỤC BẢNG Bảng 3.1 Đường kính vịng phân giải Chitin chủng nấm Trichoderma sau hai ngày nuôi cấy (đơn vị: cm) 53 Bảng 3.2 Đường kính vịng phân giải Cellulose chủa chủng nấm Trichoderma sau hai ngày nuôi cấy (đơn vị: cm) 55 Bảng 3.3 Khả đối kháng với nấm Phytophthora sp1 chủng Trichoderma spp sau 3, ngày nuôi cấy 57 Bảng 3.4 Khả đối kháng với nấm Phytophthora sp2 chủng Trichoderma spp sau 3, ngày nuôi cấy 61 Bảng 3.5 Khả đối kháng với nấm Rhizoctonia solani chủng Trichoderma spp sau 3, ngày nuôi cấy 65 Bảng 3.6 Khả đối kháng với nấm Fusarium sp chủng Trichoderma spp sau 3, ngày nuôi cấy 69 v DANH MỤC HÌNH Hình 1.1: Cuống bào tử trần nấm T.hazrianum (trái) T.aggresivum (phải) Hình 1.2: Trichoderma atroviride Hình 1.3: Trichoderma hazianum Hình 1.4: Trichoderma koningii Hình 1.5: Trichoderma hamatum Hình 1.6: Trichoderma viride Hình 1.7: Nấm Trichoderma atroviride đối kháng với nấm gỗ Polyporus 11 Hình 1.8: Trichoderma tiết enzyme chitinase phá hủy vách tế bào 12 Hình 1.9: Nấm Trichoderma sinh trưởng nấm bệnh 13 Hình 1.10: Ức chế phát triển nấm Pythium ultimum chất kháng sinh tiết từ Trichoderma hazianum 15 Hình 1.11: Nấm Trichoderma cạnh tranh dinh dưỡng không gian sống với nấm bệnh khác 17 Hình 1.12: Cây hồ tiêu với trái chưa chín (https://vi.wikipedia.org/wiki/Hồ_tiêu) 19 Hình 1.13: Hình ảnh chu kỳ sống Phytophthora 29 Hình 1.14: Bệnh Héo Fusarium chuối Fusarium oxysporum f.cubensesp 34 Hình 1.15: Biểu bệnh Rhizoctonia gây 38 Hình 3.1: Hình thái mặt trước mặt sau theo thứ tự nấm TT1, TT2, TT5, TT6, TT7, TT8 sau ngày 49 vi Hình 3.2: Hình ảnh sợi nấm cành sinh bào tử theo thứ tự nấm TT1, TT2, TT5, TT6, TT7, T2 51 Hình 3.3: Hình thái mặt trước mặt sau theo thứ tự nấm TT3, TT4 sau ngày 52 Hình 3.4: Sợi nấm cành sinh bào tử theo thứ tự nấm TT3 52 Hình 3.5: Sợi nấm cành sinh bào tử theo thứ tự nấm TT4 53 Hình 3.6: Hình ảnh vòng phân giải Chitin chủng nấm Trichoderma sp phân lập 55 Hình 3.7: Hình ảnh vịng phân giải CMC chủng nấm Trichoderma sp phân lập 56 Hình 3.8: Hình ảnh đối kháng với Phytophthora sp chủng nấm Trichoderma spp theo thứ tự TT1, TT2, TT3, TT4, TT5, TT6, TT7, TT8 đối chứng 61 Hình 3.9: Hình ảnh đối kháng với Phytophthora sp2 chủng nấm Trichoderma spp theo thứ tự TT1, TT2, TT3, TT4, TT5, TT6, TT7, TT8 đối chứng 65 Hình 3.10: Hình ảnh đối kháng với Rhizoctonia solani chủng nấm Trichoderma spp theo thứ tự TT1, TT2, TT3, TT4, TT5, TT6, TT7, TT8 đối chứng 69 Hình 3.11: Hình ảnh đối kháng với Rhizoctonia sp chủng nấm Trichoderma sp theo thứ tự TT1, TT2, TT3, TT4, TT5, TT6, TT7, TT8 đối chứng 73 vii ĐỐ ÁN TỐT NGHIỆP Hình 3.11 Hình ảnh đối kháng với Rhizoctonia sp chủng nấm Trichoderma sp theo thứ tự TT1, TT2, TT3, TT4, TT5, TT6, TT7, TT8 đối chứng Khảo sát đối kháng tốt với nấm Rhizoctonia solani Các chủng TT1, TT2, TT6, TT8 đối kháng Fusarium sp Điều mở triển vọng cho việc nghiên cứu nhân nuôi chủng nấm này, bổ sung vào đất để quản lý chủng na6m1ga6y bệnh côn trùng Các chủng Trichoderma spp khảo sát có khả ức chế tốt với loài nấm bệnh đất Phytophthora sp1 gây hại hồ tiêu, Phytopthora sp2 gây thối ca cao, Rhizoctonia solani, Rhizoctonia sp gây bệnh héo bắp Với nhóm nấm Phytophthora sp1 Phytophthora sp2, chủng TT2, TT4, TT5, TT7 có khả đối kháng tốt 73 ĐỐ ÁN TỐT NGHIỆP Chương KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 4.1 Kết luận – Đã phân lập chủng nấm Trichoderma spp từ đất hồ tiêu Đồng Nai có khả sinh trưởng mạnh – Các chủng Trichoerma spp phân lập từ đất hồ tiêu có khả sinh enzyme Chitinase Cellulase tốt – Các chủng nấm Trichoderma spp phân lập có khả đối kháng với bệnh có đất Phytophthora spp, Rhizoctonia solani, Fusarium sp – Các chủng TT2, TT4, TT5, TT7 đối đối kháng tốt nấm Phytophthora spp – Tất chủng đối kháng tốt nấm Rhizoctonia solani – Các chủng TT1, TT2, TT6, TT8 đối kháng tốt với nấm Fusarium sp 4.2 Kiến Nghị: – Tiếp tục khảo sát khả đối kháng chủng có triển vọng với loài nấm bệnh điều kiện invivo – Định danh loài nấm Trichoderma spp phân lập – Nghiên cứu khả nhân nuôi tạo chế phẩm từ chùng nấm để trừ bệnh hại đất 74 ĐỐ ÁN TỐT NGHIỆP TÀI LIỆU THAM KHẢO TÀI LIỆU TRONG NƯỚC Đoàn Nhân Ái (2007) Một số nguyên tắc phòng trừ bệnh chết nhanh tiêu, Diễn Đàn khuyến nông @ công nghệ lần thứ 5, chuyên đề giải pháp kỹ thuật nâng cao suất, chất lượng giá trị hồ tiêu Phạm Văn Biên (1989) Phòng trừ sâu bệnh hại tiêu, Nhà xuất nông nghiệp, 72 trang Phạm Văn Biên, Nguyễn Văn Tá, Mai Thị Vinh, Trần Minh Tú, Nghiêm Bảo Tuấn (1990) Kết nghiên cứu sâu bệnh hại tiêu (Piper nigrum), Tạp chí nơng nghiệp cơng nghiệp thực phẩm, số 339, tr 544-548 Nguyễn Lân Dũng, Nguyễn Đình Quyến, Phạm Văn Ty (2000) Vi sinh vật học (tập 1,2), NXB Đại học Trung học Chuyên nghiệp, Hà Nội Nguyễn Lân Dũng, Phạm Thị Trân Châu, Nguyễn Thanh Hiền, Lê Đình Lương, Đồn Xn Mượu, Phạm Văn Ty (1978) Một số phương pháp nghiên cứu vi sinh vật học (tập3), NXB Khoa học Kỹ thuật, Hà Nội Nguyễn Lân Dũng, Nguyễn Đăng Đức, Đặng Hồng Miên, Nguyễn Vĩnh Phước, Nguyễn Đình Quyến, Nguyễn Phùng Tiến, Phạm Văn Ty (1976) Một số phương pháp nghiên cứu vi sinh vật học ( tập & 3), NXB Khoa học Kỹ thuật Hà Nội Đỗ Tấn Dũng (1996) Kết nghiên cứu phạm vi ký chủ nấm Fusarium sp hại số giống trồng, cảnh cỏ dại vùng Hà Nội năm 1996, Kết nghiên cứu khoa học Khoa Trồng trọt, đại học nông nghiệp I Nhà xuất nông nghiệp Hà Nội Nguyễn Văn Đĩnh, Đỗ Tấn Dũng Hà Quang Hùng (2004) Giáo trình biện pháp sinh học bảo vệ thực vật, Đại học Nông Nghiệp Hà Nội 75 ĐỐ ÁN TỐT NGHIỆP Nguyễn Thành Đạt, Mai Thị Hằng (2000) Sinh học vi sinh vật, NXB Giáo dục 10 Lại Văn Ê (2003) Nghiên cứu sử dụng vi sinh vật đối kháng phòng trừ sinh học nấm Fusarium oxysporum Rhizoctonia solani Kühn gây bệnh chết vải (Gossypium hirsutum L.), Luận văn thạc sĩ, khoa Nông Nghiệp, Đại Học Cần Thơ 11 Huỳnh Văn Hiếu (2009) Nghiên cứu sử dụng nấm sợi Aspergillus sp Trichoderma sp xử lý bã khoai mì để sản xuất phân bón hữu vi sinh, Đại Học Bách Khoa TpHCM: TpHCM 12 Trần Nguyên Ha (2010) Using Trichoderma species for biologycal control of plans pathogens in Viet Nam, Issaas 13 Phạm Văn Kim (2000) Các nguyên lý bệnh hại trồng, Tài liệu học tập ngành Nông Học Trồng Trọt 14 Trương Duy Lâm (2006) Như đóa hồng Tạp chí hoa cảnh số 10/ 2006 15 Hứa Võ Thành Long (2010) Sản xuất bào tử nấm Trichoderma sp làm thuốc trừ nấm bệnh trồng, Đại Học Công Nghệ Tp.HCM 16 Tôn Nữ Tuấn Nam (2007) Một số giải pháp kỹ thuật để phát triển sản xuất hồ tiêu bền vững vùng Tây Nguyên, Diễn Đàn khuyến nông @ công nghệ lần thứ 5, chyên đề giải pháp kỹ thuật nâng cao suất, chất lượng giá trị hồ tiêu 17 Huỳnh Văn Phục (2006) Khảo sát tính đối kháng nấm Trichoderma sp Rhizoctonia solani, Fusarium oxysporum gây bệnh lúc bắp, Đại học Nông Lâm Tp.HCM: Tp.HCM 18 Tôn Nữ Tuấn Nam (2007) Một số giải pháp kỹ thuật để phát triển sản xuất hồ tiêu bền vững vùng Tây Nguyên, Diễn Đàn khuyến nông @ công nghệ lần thứ 5, chyên đề giải pháp kỹ thuật nâng cao suất, chất lượng giá trị hồ tiêu 76 ĐỐ ÁN TỐT NGHIỆP 19 Huỳnh Văn Phục (2006) Khảo sát tính đối kháng nấm Trichoderma sp Rhizoctonia solani, Fusarium oxysporum gây bệnh lúc bắp, Đại học Nông Lâm Tp.HCM: Tp.HCM 20 Nguyễn Phạm Phương Thảo (2009) Vi nấm Trichoderma-giải pháp bảo vệ thực vật đấu tranh sinh học, Đại Học Sư Phạm Huế: Tp Huế 21 Nguyễn Văn Tuất (2004) Nghiên cứu sản xuất xử dụng thuốc trừ sâu sinh học đa chức cho số loại trồng kỹ thuật công nghệ sinh học, Bộ khoa học công nghệ Hà Nội 22 Trần Thị Thanh Thuần (2009) Nghiên cứu xử lý vỏ cà phê Trichoderma viride Aspergillus niger để sản xuất phân bón hữu bán tổng hợp, Bách khoa TPHCM 23 Vũ Nguyên Thành (2009) Nghiên cứu khả đối kháng tiềm ứng dụng số chủng Trichoderma phân lập từ RNM số nấm bệnh thực vật, Đại Học Sư Phạm Hà Nội 24 Nguyễn Thân (2004) Tuyển chọn số dòng nấm Trichoderma sp đối kháng với nấm Phytophthora sp gây bệnh chết nhanh hồ tiêu bệnh xì mủ sầu riêng, Luận án thạc sĩ khoa học nông nghiệp, Đại học Nơng lâm, TP Hồ Chí Minh 25 Ngơ Vĩnh Viễn, Bùi Văn Tuấn, Mai Thị Liên, Đặng Lưu Hoa, F Benyon, A Denth (2003) Kết điều tra bệnh thối nõn dứa nấm Phytophthora gây ra, Hội thảo quốc gia bệnh sinh học phân tử, Đại học Nông nghiệp I Hà Nội 26.Cục Bảo vệ Thực vật (2007) Báo cáo tình hình sản xuất hồ tiêu ảnh hưởng loại dịch hại quan trọng tới sản xuất Việt Nam, Hội thảo sâu bệnh hại tiêu biện pháp phịng trừ Đắc Nơng 27.Ngơ Thị Xuyên (2002) Kiểm soát tuyến trùng Meloidogyne phương pháp sinh học Hội thảo bệnh sinh học phân tử, lần thứ nhất, Đại học Nông lâm TP Hồ 77 ĐỐ ÁN TỐT NGHIỆP Chí Minh, Nhà xuất Nơng nghiệp TÀI LIỆU NƯỚC NGỒI 28 Chacón Mariola R (2007) Microscopic and transcriptome analyses of early colonization of tomato roots by Trichoderma harzianum, international microbiology 29 Francesco Vinale (2008) Trichoderma–plant–pathogen interactions, Soil Biology & Biochemistry 30 Fokkema N J (1993) Oppurtunities and problems of control of foliar pathogens with microorganisms, Pestic Sci, 37, 411-416 31 Harman G E., et al (2004) Trichoderma species opportunistic, avirulent plant symbionts, Nat Rev Microbiol 32 Kularatne (2002) Pests and diseases of black pepper (Piper nigrum L.), in Sri Lanka, Paper presented at the Symposium on Pests and Diseases on Pepper, Sarawak, Malaysia 33 Mark Schubert and Siegfried Fink (2008) In vitro screening of an antagonistic Trichoderma strain against wood decay fungi Arboricultural 34 Sophien kamoun, et al (1998) Resistance of Nicotiana benthamiana to Phytophthora infestans is Mediated by the Recognition of the Elicitor Protein INF1, American Soclety of Plant Physlologlsts TÀI LIỆU INTERNET 35 http://explow.com/Trichoderma 36 https://vi.wikipedia.org/wiki/Hồ_tiêu 78 PHỤ LỤC PHỤ LỤC XỬ LÝ SỐ LIỆU Kết xử lý vòng phân giải Chitin Summary Statistics for chitin C1 C2 3 3.06667 3.33333 Standard deviation 0.11547 0.416333 C3 C4 C5 3 3.26667 3.2 3.33333 0.11547 0.2 0.23094 CHUNG Count Average Coeff of variation 3.76533% 12.49% 3.5348% 6.25% 6.9282% Minimu Maximu Rang m m e 3.0 3.2 0.2 3.0 3.8 0.8 C6 3.6 0.2 5.55556% C7 3.33333 0.416333 12.49% TR2 3.53333 0.11547 3.26802% Total 24 3.33333 0.268112 8.04336% ANOVA Table for chitin by CHUNG Source Sum of Squares Df Mean Square Between groups 0.613333 0.087619 Within groups 1.04 16 0.065 Total (Corr.) 1.65333 23 Multiple Range Tests for chitin by CHUNG Method: 95.0 percent LSD CHUNG Count Mean C1 3.06667 C4 3.2 C3 3.26667 C7 3.33333 C5 3.33333 C2 3.33333 TR2 3.53333 C6 3.6 Stnd skewness 1.22474 0.914531 3.2 3.0 3.2 3.4 3.4 3.6 0.2 0.4 0.4 1.22474 0.0 1.22474 3.4 3.0 3.4 3.0 3.8 3.8 3.6 3.8 0.4 0.8 0.2 0.8 0.0 0.914531 -1.22474 0.875023 F-Ratio 1.35 P-Value 0.2918 Homogeneous Groups X XX XX XX XX XX X X Kết xử lý vòng phân giải CMC Summary Statistics for CMC CHUNG Count Average C1 C2 C3 C4 C5 C6 C7 TR2 Total 3 3 3 3 24 4.53333 4.53333 3.93333 5.13333 4.93333 4.53333 4.46667 3.53333 4.45 Standard deviation Coeff of variation Minimum Maximum Range Stnd skewness 0.23094 5.09427% 4.4 4.8 0.4 1.22474 0.11547 2.54713% 4.4 4.6 0.2 -1.22474 0.11547 2.93568% 3.8 4.0 0.2 -1.22474 0.23094 4.49883% 5.0 5.4 0.4 1.22474 0.305505 6.19267% 4.6 5.2 0.6 -0.6613 0.305505 6.73908% 4.2 4.8 0.6 -0.6613 0.503322 11.2684% 4.0 5.0 1.0 0.41407 0.305505 8.64637% 3.2 3.8 0.6 -0.6613 0.544538 12.2368% 3.2 5.4 2.2 -0.800171 ANOVA Table for CMC by CHUNG Source Sum of Squares Df Mean Square Between groups 5.48667 0.78381 Within groups 1.33333 16 0.0833333 Total (Corr.) 6.82 23 Multiple Range Tests for CMC by CHUNG Method: 95.0 percent LSD CHUNG Count Mean TR2 3.53333 C3 3.93333 C7 4.46667 C6 4.53333 C2 4.53333 C1 4.53333 C5 4.93333 C4 5.13333 F-Ratio 9.41 P-Value 0.0001 Homogeneous Groups X X X X X X XX X Đối kháng với Phytophthora sp1 • Ba ngày Summary Statistics for DKPHYTOPH3 CHUNG Count Average Standard deviation C1 35.0 0.0 C2 31.19 7.83571 C3 29.5233 5.0677 C4 31.11 5.35689 C5 29.4433 4.19281 C6 32.8567 3.71236 C7 31.0333 6.61085 TR2 37.7 2.52389 Total 24 32.2321 4.95615 Coeff of variation 0.0% 25.1225% 17.1651% 17.2192% 14.2403% 11.2987% 21.3024% 6.69466% 15.3765% ANOVA Table for DKPHYTOPH3 by CHUNG Source Sum of Squares Df Mean Square Between groups 170.538 24.3626 Within groups 394.422 16 24.6514 Total (Corr.) 564.96 23 Multiple Range Tests for DKPHYTOPH3 by CHUNG Method: 95.0 percent LSD CHUNG Count Mean C5 29.4433 C3 29.5233 C7 31.0333 C4 31.11 C2 31.19 C6 32.8567 C1 35.0 TR2 37.7 F-Ratio 0.99 Homogeneous Groups X X X X X X X X Minimum 35.0 25.0 25.0 25.0 25.0 28.57 25.0 35.0 25.0 Maximum 35.0 40.0 35.0 35.0 33.33 35.0 38.1 40.0 40.0 P-Value 0.4734 Range 0.0 15.0 10.0 10.0 8.33 6.43 13.1 5.0 15.0 Stnd skewness 0.944998 0.577409 -1.0922 -0.415015 -1.22474 0.485219 -0.491632 -0.426266 • Năm ngày Summary Statistics for DKPHYTOPH5 CHUNG Count Average Standard deviation Coeff of variation C1 85.0867 25.8307 30.358% C2 68.2 16.5436 24.2575% C3 64.7367 7.74969 11.9711% C4 76.01 21.0662 27.7151% C5 83.0867 24.4925 29.4783% C6 85.0867 25.8307 30.358% C7 89.7533 13.0951 14.5901% TR2 63.7733 2.83645 4.4477% Total 24 76.9667 18.6331 24.2094% ANOVA Table for DKPHYTOPH5 by CHUNG Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio Between groups 2202.69 314.669 0.87 Within groups 5782.78 16 361.424 Total (Corr.) 7985.47 23 Multiple Range Tests for DKPHYTOPH5 by CHUNG Method: 95.0 percent LSD CHUNG Count Mean TR2 63.7733 C3 64.7367 C2 68.2 C4 76.01 C5 83.0867 C6 85.0867 C1 85.0867 C7 89.7533 • Minimum 55.26 55.26 60.0 60.53 55.0 55.26 75.0 60.53 55.0 Maximum 100.0 86.84 73.68 100.0 100.0 100.0 100.0 65.79 100.0 Range 44.74 31.58 13.68 39.47 45.0 44.74 25.0 5.26 45.0 Stnd skewness -1.22474 0.966185 1.2183 1.07564 -1.1495 -1.22474 -0.965375 -1.11873 0.444709 P-Value 0.5496 Homogeneous Groups X X X X X X X X Bảy ngày Summary Statistics for DKPHYTOPH7 CHUNG Count Average Standard deviation Coeff of variation Minimum C1 89.5833 18.0422 20.1401% 68.75 C2 100.0 0.0 0.0% 100.0 C3 78.9167 18.2626 23.1416% 68.0 C4 100.0 0.0 0.0% 100.0 C5 100.0 0.0 0.0% 100.0 C6 88.1933 20.4497 23.1874% 64.58 C7 93.3333 11.547 12.3718% 80.0 TR2 69.8333 1.87639 2.68695% 68.75 Total 24 89.9825 14.6857 16.3206% 64.58 ANOVA Table for DKPHYTOPH7 by CHUNG Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio Between groups 2532.24 361.749 2.38 Within groups 2428.18 16 151.761 Total (Corr.) 4960.42 23 Multiple Range Tests for DKPHYTOPH7 by CHUNG Method: 95.0 percent LSD CHUNG Count Mean Homogeneous Groups Maximum 100.0 100.0 100.0 100.0 100.0 100.0 100.0 72.0 100.0 P-Value 0.0712 Range 31.25 0.0 32.0 0.0 0.0 35.42 20.0 3.25 35.42 Stnd skewness -1.22474 1.22242 -1.22474 -1.22474 1.22474 -1.67808 TR2 C3 C6 C1 C7 C5 C4 C2 3 3 3 3 69.8333 78.9167 88.1933 89.5833 93.3333 100.0 100.0 100.0 X XX XX XX X X X X Đối kháng với Phytophthora sp2 • Ba ngày Summary Statistics for DKPHYTOPH3 CHUNG Count Average Standard deviation C1 33.3333 5.7735 C2 35.0 0.0 C3 29.4433 4.19281 C4 30.11 5.00363 C5 30.0 5.0 C6 35.4767 2.42046 C7 31.6667 7.63763 TR2 37.0667 1.78979 Total 24 32.7621 4.71362 Coeff of variation 17.3205% 0.0% 14.2403% 16.6178% 16.6667% 6.82269% 24.1188% 4.82856% 14.3874% ANOVA Table for DKPHYTOPH3 by CHUNG Source Sum of Squares Df Mean Square Between groups 174.329 24.9042 Within groups 336.689 16 21.0431 Total (Corr.) 511.018 23 Multiple Range Tests for DKPHYTOPH3 by CHUNG Method: 95.0 percent LSD CHUNG Count Mean C3 29.4433 C5 30.0 C4 30.11 C7 31.6667 C1 33.3333 C2 35.0 C6 35.4767 TR2 37.0667 • F-Ratio 1.18 Minimum 30.0 35.0 25.0 25.0 25.0 33.33 25.0 35.0 25.0 Maximum 40.0 35.0 33.33 35.0 35.0 38.1 40.0 38.1 40.0 Range 10.0 0.0 8.33 10.0 10.0 4.77 15.0 3.1 15.0 Stnd skewness 1.22474 -0.415015 -0.139635 0.0 0.602332 0.6613 -1.22474 -0.631288 P-Value 0.3654 Homogeneous Groups X X X X X X X X Năm ngày Summary Statistics for DKPHYTOPH5 CHUNG Count Average Standard deviation C1 85.3667 9.71416 C2 73.71 13.1551 Coeff of variation Minimum Maximum 11.3793% 75.0 94.26 17.8471% 60.53 86.84 Range 19.26 26.31 Stnd skewness -0.471505 -0.0120939 C3 64.3433 3.5311 5.4879% 60.53 C4 79.1667 19.0941 24.1188% 62.5 C5 87.2533 17.346 19.88% 67.5 C6 84.7533 21.6283 25.5191% 60.0 C7 85.3667 9.71416 11.3793% 75.0 TR2 64.43 1.71747 2.66564% 62.5 Total 24 78.0487 14.613 18.7229% 60.0 ANOVA Table for DKPHYTOPH5 by CHUNG Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio Between groups 1890.49 270.07 1.43 Within groups 3020.91 16 188.807 Total (Corr.) 4911.39 23 Multiple Range Tests for DKPHYTOPH5 by CHUNG Method: 95.0 percent LSD CHUNG Count Mean C3 64.3433 TR2 64.43 C2 73.71 C4 79.1667 C6 84.7533 C7 85.3667 C1 85.3667 C5 87.2533 • 67.5 100.0 100.0 100.0 94.26 65.79 100.0 6.97 37.5 32.5 40.0 19.26 3.29 40.0 -0.571278 0.6613 -1.0756 -1.12841 -0.471505 -0.939727 0.543057 P-Value 0.2605 Homogeneous Groups X X X X X X X X Bảy ngày Summary Statistics for DKPHYTOPH7 CHUNG Count Average Standard deviation C1 93.3333 11.547 C2 100.0 0.0 C3 78.28 9.53704 C4 100.0 0.0 C5 100.0 0.0 C6 86.8433 22.788 C7 94.2867 9.89578 TR2 72.5 6.49519 Total 24 90.6554 13.3616 Coeff of variation 12.3718% 0.0% 12.1832% 0.0% 0.0% 26.2404% 10.4954% 8.95888% 14.7389% ANOVA Table for DKPHYTOPH7 by CHUNG Source Sum of Squares Df Mean Square Between groups 2338.87 334.124 Within groups 1767.39 16 110.462 Total (Corr.) 4106.26 23 Multiple Range Tests for DKPHYTOPH7 by CHUNG Method: 95.0 percent LSD CHUNG Count Mean TR2 72.5 C3 78.28 C6 86.8433 C1 93.3333 Minimum 80.0 100.0 68.0 100.0 100.0 60.53 82.86 68.75 60.53 F-Ratio 3.02 Homogeneous Groups X XX XXX XX Maximum 100.0 100.0 86.84 100.0 100.0 100.0 100.0 80.0 100.0 P-Value 0.0316 Range 20.0 0.0 18.84 0.0 0.0 39.47 17.14 11.25 39.47 Stnd skewness -1.22474 -0.555203 -1.22474 -1.22474 1.22474 -2.06425 C7 C5 C4 C2 3 3 94.2867 100.0 100.0 100.0 XX X X X Đối kháng với Rhizoctonia solani • Ba ngày Summary Statistics for DKRhi CHUNG Count Average Standard deviation C1 91.11 15.3979 C2 86.6667 23.094 C3 100.0 0.0 C4 41.11 8.39025 C5 100.0 0.0 C6 78.4733 18.6716 C7 100.0 0.0 TR2 78.4733 18.6716 Total 24 84.4792 22.1159 Coeff of variation 16.9004% 26.6469% 0.0% 20.4093% 0.0% 23.7936% 0.0% 23.7936% 26.1791% ANOVA Table for DKRhi by CHUNG Source Sum of Squares Df Mean Square Between groups 8173.4 1167.63 Within groups 3076.17 16 192.261 Total (Corr.) 11249.6 23 Multiple Range Tests for DKRhi by CHUNG Method: 95.0 percent LSD CHUNG Count Mean C4 41.11 C6 78.4733 TR2 78.4733 C2 86.6667 C1 91.11 C7 100.0 C3 100.0 C5 100.0 • Minimum 73.33 60.0 100.0 33.33 100.0 66.67 100.0 66.67 33.33 F-Ratio 6.07 Maximum 100.0 100.0 100.0 50.0 100.0 100.0 100.0 100.0 100.0 Range 26.67 40.0 0.0 16.67 0.0 33.33 0.0 33.33 66.67 Stnd skewness -1.22474 -1.22474 Range 24.14 25.0 0.0 8.33 23.33 17.24 Stnd skewness -1.22474 -1.22474 0.413597 1.20767 1.20767 -2.12097 P-Value 0.0014 Homogeneous Groups X X X X X X X X Năm ngày Summary Statistics for DKRhi5 CHUNG Count Average Standard deviation C1 91.9533 13.9372 C2 91.6667 14.4338 C3 100.0 0.0 C4 79.2133 4.16584 C5 92.2233 13.4696 C6 89.81 9.03876 Coeff of variation 15.1569% 15.7459% 0.0% 5.25902% 14.6054% 10.0643% Minimum 75.86 75.0 100.0 75.0 76.67 82.76 Maximum 100.0 100.0 100.0 83.33 100.0 100.0 -0.0737968 -1.22474 0.971996 C7 TR2 Total 3 24 94.2533 9.95352 88.49 9.98569 90.9513 10.3983 ANOVA Table for DKRhi5 by CHUNG Source Sum of Squares Df Between groups 723.17 Within groups 1763.7 16 Total (Corr.) 2486.87 23 Method: 95.0 percent LSD CHUNG Count Mean C4 79.2133 TR2 88.49 C6 89.81 C2 91.6667 C1 91.9533 C5 92.2233 C7 94.2533 C3 100.0 • 10.5604% 11.2845% 11.4328% 82.76 82.14 75.0 Mean Square 103.31 110.231 F-Ratio 0.94 100.0 100.0 100.0 17.24 17.86 25.0 -1.22474 1.20521 -0.772849 P-Value 0.5055 Homogeneous Groups X XX XX XX XX XX XX X Bảy ngày Summary Statistics for DKRhi7 CHUNG Count Average Standard deviation Coeff of variation C1 93.3333 11.547 12.3718% C2 93.3333 11.547 12.3718% C3 100.0 0.0 0.0% C4 82.8567 2.855 3.44571% C5 93.3333 11.547 12.3718% C6 100.0 0.0 0.0% C7 95.2367 8.25034 8.66298% TR2 90.4733 8.25034 9.11908% Total 24 93.5708 8.64411 9.23804% ANOVA Table for DKRhi7 by CHUNG Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio Between groups 630.001 90.0002 1.32 Within groups 1088.57 16 68.0359 Total (Corr.) 1718.58 23 Multiple Range Tests for DKRhi7 by CHUNG Method: 95.0 percent LSD CHUNG Count Mean C4 82.8567 TR2 90.4733 C1 93.3333 C5 93.3333 C2 93.3333 C7 95.2367 C6 100.0 C3 100.0 Homogeneous Groups X XX XX XX XX XX X X Minimum 80.0 80.0 100.0 80.0 80.0 100.0 85.71 85.71 80.0 Maximum 100.0 100.0 100.0 85.71 100.0 100.0 100.0 100.0 100.0 P-Value 0.3021 Range 20.0 20.0 0.0 5.71 20.0 0.0 14.29 14.29 20.0 Stnd skewness -1.22474 -1.22474 -0.00371509 -1.22474 -1.22474 1.22474 -1.34867 Đối kháng với Fusarium sp • Ba ngày Summary Statistics for KHANANGDOIKHANG% CHUNG Count Average Standard deviation Coeff of variation C1 35.9067 4.99364 13.9073% C2 21.6933 17.8126 82.1108% C3 32.1067 4.67076 14.5476% C4 25.98 3.06005 11.7785% C5 37.7467 11.4237 30.2642% C6 31.86 5.94093 18.647% C7 37.99 2.97542 7.8321% TR2 39.7067 12.7363 32.0761% Total 24 32.8737 9.91351 30.1563% Minimum 31.25 6.25 29.41 23.53 25.0 25.0 35.29 25.0 6.25 ANOVA Table for KHANANGDOIKHANG% by CHUNG Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio Between groups 839.851 119.979 1.35 Within groups 1420.54 16 88.7835 Total (Corr.) 2260.39 23 Maximum 41.18 41.18 37.5 29.41 47.06 35.29 41.18 47.06 47.06 Range 9.93 34.93 8.09 5.88 22.06 10.29 5.89 22.06 40.81 Stnd skewness 0.386952 0.685072 1.22474 0.914531 -0.869943 -1.22474 0.509806 -1.22474 -1.38118 P-Value 0.2905 Multiple Range Tests for KHANANGDOIKHANG% by CHUNG Method: 95.0 percent LSD CHUNG Count Mean C2 21.6933 C4 25.98 C6 31.86 C3 32.1067 C1 35.9067 C5 37.7467 C7 37.99 TR2 39.7067 • Homogeneous Groups X XX XX XX XX XX XX X Năm ngày Summary Statistics for DOIKHANG CHUNG Count Average Standard deviation Coeff of variation Minimum C1 81.92 16.0312 19.5693% 69.44 C2 66.7233 6.22017 9.32233% 60.53 C3 67.5533 0.875119 1.29545% 66.67 C4 63.02 2.45567 3.89665% 61.11 C5 85.5267 12.9589 15.1518% 75.0 C6 81.9733 7.80565 9.52219% 72.97 C7 68.55 4.76862 6.95641% 63.16 TR2 82.2667 16.1448 19.6249% 68.42 Total 24 74.6917 12.0413 16.1213% 60.53 ANOVA Table for DOIKHANG by CHUNG Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio Between groups 1705.34 243.62 2.39 Maximum 100.0 72.97 68.42 65.79 100.0 86.84 72.22 100.0 100.0 P-Value 0.0704 Range 30.56 12.44 1.75 4.68 25.0 13.87 9.06 31.58 39.47 Stnd skewness 0.975895 0.0272811 -0.0605789 0.977689 0.879198 -1.2127 -0.998398 0.72163 2.20586 Within groups Total (Corr.) 1629.48 3334.82 16 23 101.842 Multiple Range Tests for DOIKHANG by CHUNG Method: 95.0 percent LSD CHUNG Count Mean C4 63.02 C2 66.7233 C3 67.5533 C7 68.55 C1 81.92 C6 81.9733 TR2 82.2667 C5 85.5267 • Homogeneous Groups X XX XX XXX XX XX XX X • Bảy ngày Summary Statistics for DOIKHANG7 CHUNG Count Average Standard deviation C1 100.0 0.0 C2 92.9067 12.286 C3 71.4367 6.31445 C4 62.03 5.43745 C5 87.9533 11.8265 C6 100.0 0.0 C7 84.5733 13.4887 TR2 90.0 17.3205 Total 24 86.1125 15.3633 Coeff of variation 0.0% 13.224% 8.83922% 8.76584% 13.4464% 0.0% 15.9492% 19.245% 17.8409% ANOVA Table for DOIKHANG7 by CHUNG Source Sum of Squares Df Mean Square Between groups 3744.31 534.901 Within groups 1684.39 16 105.275 Total (Corr.) 5428.7 23 Multiple Range Tests for DOIKHANG7 by CHUNG Method: 95.0 percent LSD CHUNG Count Mean C4 62.03 C3 71.4367 C7 84.5733 C5 87.9533 TR2 90.0 C2 92.9067 C6 100.0 C1 100.0 F-Ratio 5.08 Homogeneous Groups X XX XX XX X X X X Minimum 100.0 78.72 67.5 57.5 76.36 100.0 75.0 70.0 57.5 Maximum 100.0 100.0 78.72 68.06 100.0 100.0 100.0 100.0 100.0 P-Value 0.0034 Range 0.0 21.28 11.22 10.56 23.64 0.0 25.0 30.0 42.5 Stnd skewness -1.22474 1.21273 0.810994 0.121792 1.12078 -1.22474 -0.886921 ... iii chủng nấm Trichoderma phân lập đất hồ tiêu bị bệnh 53 3.4 Đánh giá khả đối kháng với chủng nấm bệnh đất đất hồ tiêu chủng Trichoderma phân lập 56 3.4.1 Khả đối kháng với nấm Phytophthora... vien tiến hành đề tài PHÂN LẬP CÁC CHỦNG NẤM TRICHODERMA SPP TỪ ĐẤT HỒ TIÊU Ở ĐỒNG NAI VÀ ĐÁNH GIÁ KHẢ NĂNG ĐỐI KHÁNG CỦA CHÚNG VỚI CÁC NẤM GÂY BỆNH TRONG ĐẤT, nhằm tìm chủng có triển vọng để... thái vào sưu tập phịng thí nghiệm trường Hutech Nội dung nghiên cứu ➢ Phân lập chủng nấm Trichoderma từ đất hồ tiêu Đồng Nai ➢ Đánh giá đặc điểm sinh học chủng nấm Trichoderma phân lập ➢ Đánh giá