Tài liệu hạn chế xem trước, để xem đầy đủ mời bạn chọn Tải xuống
1
/ 129 trang
THÔNG TIN TÀI LIỆU
Cấu trúc
Slide 1
Slide 2
Slide 3
Slide 4
Slide 5
Slide 6
ĐẶC ĐIỂM VI KHUẨN LAO
PHÂN LOẠI VI KHUẨN LAO
PHÂN LOẠI VI KHUẨN LAO
PHÂN LOẠI VI KHUẨN LAO
CÁC PHƯƠNG PHÁP PHÁT HIỆN VI KHUẨN LAO:
Slide 12
Slide 13
A. PHƯƠNG PHÁP TRỰC TIẾP:
Slide 15
Chỉ định xét nghiệm:
Hướng dẫn lấy đàm
Cách bảo quản và vận chuyển mẫu bệnh phẩm
Slide 19
Slide 20
Slide 21
Slide 22
Kỹ thuật nhuộm Ziehl- Neelsen:
Slide 24
Slide 25
Slide 26
Slide 27
Slide 28
Slide 29
Slide 30
Slide 31
Mục đích
Môi trường Lowenstein-Jensen
Slide 34
Slide 35
Các bước tiến hành
TEST NIACIN
Kết quả:
Lưu ý:
Slide 40
Slide 41
Slide 42
Phương pháp đo phóng xạ BACTEC
Phương pháp đo phóng xạ BACTEC
Slide 45
Kết quả của kháng sinh đồ
KỸ THUẬT MGIT ( Mycobacteria growth indicator tube)
KỸ THUẬT MGIT ( Mycobacteria growth indicator tube)
Môi trường nuôi cấy:
Kết quả :
KỸ THUẬT MGIT ( Mycobacteria growth indicator tube)
Kỹ thuật TLA:
Slide 53
III. CÁC KỸ THUẬT PHÂN TỬ:
Slide 55
Tổng quan về PCR
Slide 57
Nguyên lý của PCR
Slide 59
1. Giai đoạn biến tính:
2.Giai đoạn bắt cặp:
3. Giai đoạn kéo dài:
Slide 63
Slide 64
Slide 65
Slide 66
Slide 67
Các bước tiến hành:
Pha hỗn dịch Mix (thực hiện tại phòng chuẩn bị Mix)
Xử lý bệnh phẩm
Cho mẫu vào ống phản ứng PCR
Chụp ảnh và đọc kết quả:
Kết quả điện di sản phẩm PCR trên gel agarose 2%
Slide 74
Kỹ thuật Hain test:
Bệnh phẩm
Slide 77
Slide 78
Slide 79
Kết quả:
Slide 81
Slide 82
Slide 83
KỸ THUẬT GENE XPERT MTB/RIF
Slide 85
Slide 86
Slide 87
Slide 88
Slide 89
Slide 90
Slide 91
Slide 92
Slide 93
Marketing Diagram
Test nội bì (Mantoux test)
CƠ SỞ SINH BỆNH HỌC:
Slide 97
Vị trí tiêm:
Slide 99
Slide 100
Slide 101
Slide 102
Slide 103
Slide 104
Đọc kết quả:
Đọc kết quả:
Slide 107
Slide 108
Đánh giá kết quả:
Slide 110
Slide 111
Slide 112
Quy trình thực hiện:
Slide 114
Kỹ thuật ELISA “SANDWICH”
Xác định kháng nguyên:
PHÂN TÍCH KẾT QUẢ:
Slide 118
Slide 119
Slide 120
Slide 121
Interferon Gamma Release
Whole Blood IFN- Assay QuantiFERON-TB Test
Chỉ định sử dụng QFT:
Slide 125
Slide 126
Các phương pháp khác:
Các phương pháp khác:
Slide 129
Nội dung
LOGO Nhóm lớp Y5C CÁC PHƯƠNG PHÁP PHÁT HIỆN LAO www.themegallery.com Sự đời làm đời trở nên rõ ràng Cùng với Atoni Leeuwenhook trở thành ơng tổ ngành vi sinh học - Những kính hiển vi ban đầu phát minh vào năm 1590 Middelburg, Hà Lan Ba người thợ tạo kính Hans Lippershey (người phát triển kính viễn vọng trước đó), Zacharias Janssen, với cha họ Hans Janssen người xây dựng nên kính hiển vi sơ khai -Đóng góp lớn thuộc nhà phát minh người Hà Lan Antoni Philips van Leeuwenhoek, người phát triển kính hiển vi, người quan sát thấy vi khuẩn động vật nguyên sinh trở thành ông tổ ngành vi sinh học Bạn nhìn thấy ghế đá, bãi cỏ, gốc cây, thùng rác chí đơi dép Là kết vận chuyển từ hốc mũi xuống phế nang miệng Đờm chất tiết từ hốc mũi tới phế nang thải miệng Đờm gồm dịch tiết khí phế quản, phế nang, họng, xoang hàm trán, hốc mũi. 24/03/1882, buổi họp Viện sinh lý học Berlin, Robert Koch -39 tuổi tuyên bố dõng dạc “ Bệnh lao loại trực khuẩn gây ra” ĐẶC ĐIỂM VI KHUẨN LAO VK lao thuộc họ Mycobacteriaccae Dài từ 3-5µm, rộng 0.30.5µm, khơng có lơng, đầu trịn, thân có hạt, đứng đám hay riêng rẽ tiêu nhuộm ZiehlNelsen Không bị cồn acid làm màu Ngồi có nhóm vi khuẩn kháng cồn, kháng toan khơng điển hình PHÂN LOẠI VI KHUẨN LAO Phân loại dựa vào khả gây bệnh cho người động vật: Vi khuẩn lao người(M Tuberculosis Hominis) Vi khuẩn lao bò(M.bovis) Vi khuẩn lao chim(M Avium) Vi khuẩn lao chuột (M Microti) PHÂN LOẠI VI KHUẨN LAO Vi khuẩn kháng cồn kháng toan không điển hình (M.Atipique) Đây nhóm vi khuẩn có hình thể giống vi khuẩn lao Khi nhuộm Ziehl – Neelsen bắt màu đỏ fuchsin, có nghĩa khơng thể phân biệt chúng với vi khuẩn lao phương pháp nhuộm soi kính Trước thập kỷ 80 kỷ XX, chúng gây bệnh người, thường gây bệnh lao bệnh nhân bị bệnh bụi phổi, ghép quan, điều trị corticoid kéo dài… Nhưng nay, ngày gặp nhiều gây bệnh lao người có HIV/AIDS PHÂN LOẠI VI KHUẨN LAO Phân loại dựa cấu trúc ADN:Đoạn IS 6110 (với 1361 cặp base) có loại Mycobacteria M tuberculosis, M bovis, M avium , M microti (gọi chung M tuberculosis complex), mà khơng có Mycobacteria khác Kỹ thuật ELISA “SANDWICH” Xác định kháng nguyên: PHÂN TÍCH KẾT QUẢ: Kết xác định kháng thể đặc hiệu M.Tuberculosis phân tích thơng qua giá trị mật độ quang học (OD) trung bình giếng mẫu, so sánh với giá trị ngưỡng Giá trị khác tùy sinh phẩm cộng đồng Dương tính: > giá trị ngưỡng Âm tính: < giá trị ngưỡng Nhanh thuận tiện Có thể phát kháng nguyên dù nồng độ thấp Ưu điểm Nói chung an tồn:khơng u cầu chất phóng xạ,có chứa acid sulfuric loãng… Sử dụng nhiều loại xét nghiệm Kháng thể đơn dịng sử dụng với cặp phù hợp Kháng thể đơn dịng tốn chi phí nhiều với kháng thể đa dòng Kháng thể đơn dịng khó tìm kiếm Nhược điểm PHƯƠNG PHÁP MIỄN DỊCH HUỲNH QUANG VÀ MIỄN DỊCH PHÓNG XẠ (Radioimmunoassay-RIA) Cũng với kỹ thuật tương tự phương pháp ELISA, nhiên thay cho enzyme chất tạo màu phương pháp miễn dịch huỳnh quang sử dụng chất đánh dấu huỳnh quang kết đọc kính hiển vi huỳnh quang Chất thường dùng FITC (Flourescein Isothiocyanat) Phương pháp miễn dịch phóng xạ chất đánh dấu đồng vị phóng xạ Interferon gamma (Quanti FERON TB Gold test:QFT) Interferon Gamma Release Whole Blood IFN- Assay QuantiFERON-TB Test Stage Whole Blood Culture Mitogen Nil ESAT-6 CFP 10 Control Control Draw blood + heparin Aliquot blood & add antigen Incubate → INF- from sensitized Tcells Stage IFN-gamma ELISA COLOR TMB Harvest plasma Measure [ IFN-] in from above settled ‘Sandwich’ ELISA cells Computerized interpretation Cellestis 123 Chỉ định sử dụng QFT: Bệnh nhân nghi lao hoạt động Bệnh nhân có nguy tiến triển thành lao hoạt động Bệnh nhân có nguy cao nhiễm lao tiềm ẩn Để chẩn đoán loại trừ nguyên nhân khác Chỉ cần lấy mẫu lần, bn ko cần quay trở lại để đọc kết Ưu điểm QFT Khơng kích hoạt đáp ứng miễn dịch ghi nhớ Có thể đánh giá đáp ứng với nhiều kháng nguyên cách tự động Phải lấy máu xét nghiệm 12h sau lấy máu Hạn chế Khả dự đoán bệnh lao tiến triển chưa xác nhận Đòi hỏi trang thiết bị, kỹ thuật viên có trình độ cao Các phương pháp khác: Định lượng Adenosin Deaminase Chụp sắc tố lỏng kỹ thuật cao (HPLC) Chụp sắc tố khí mao quản Chụp sắc tố khí lỏng (GLC) Kỹ thuật Firefly luciferase Các phương pháp khác: LOGO Thank You ! www.themegallery.com ... VI KHUẨN LAO Phân loại dựa vào khả gây bệnh cho người động vật: Vi khuẩn lao người(M Tuberculosis Hominis) Vi khuẩn lao bò(M.bovis) Vi khuẩn lao chim(M Avium) Vi khuẩn lao chuột (M... + Khi có triệu chứng lâm sàng gợi ý lao phổi + Các triệu chứng lao phổi tương ứng với quan + Người tiếp xúc gần gũi với người chẩn đốn lao người có nguy mắc lao suy giảm miễn dich, HIV,… có triệu... khớp, dịch màng bụng, dịch màng phổi, dịch não tủy thể lao phổi tương ứng Theo khuyến cáo Hiệp hội chống lao quốc tế Chương trình chống lao quốc gia quy định cần lấy mẫu đờm xét nghiệm: Mẫu Mẫu