acid lactic Bacteria

acid lactic Bacteria

1 PHẦN MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề Ngày nay, nƣớc ta có nhiều nhà máy đƣờng tạo sản lƣợng lớn đƣờng kết tinh Bên cạnh lƣợng khơng nhỏ mật rỉ đƣờng mà nhà máy thải làm ô nhiễm môi trƣờng Với ứng dụng Công nghệ Sinh học sử dụng phế liệu mật rỉ để lên men tạo nhiều sản phẩm có giá trị nhƣ L-lysine, acid citric, acid glutamic.v.v đặc biệt acid lactic đƣợc quan tâm nhiều năm gần Nhu cầu cung cấp acid lactic ngày nhiều, chúng đƣợc ứng dụng rộng rãi nhiều lĩnh vực nhƣ bảo quản chế biến thực phẩm, y học, môi trƣờng (acid polylactic thay loại sản phẩm nhựa PE, PP, đĩa CD, bịch nilon), mỹ phẩm.v.v Tổng thị trƣờng giới acid lactic 86.000 vào năm 2001, 500.000 vào năm 2010 Ở Việt Nam: vào năm 2006, đại diện công ti dƣợc IIdong (Hàn Quốc) xuất số lƣợng lớn chế phẩm acid lactic sang hãng MERAP phân phối dƣợc Việt Nam với giá trị hợp đồng 3,7 triệu USD [38], [39], [40] Xuất phát từ tình hình thực tế trên, đƣợc đồng ý Bộ môn Công nghệ Sinh học trƣờng Đại học Nông Lâm TP.HCM Dƣới hƣớng dẫn Thầy Nguyễn Đức Lƣợng trƣờng Đại học Bách Khoa Thầy Phan Vĩnh Hƣng Trƣờng Cao đẳng Công nghiệp Thực Phẩm TP.HCM Chúng thực đề tài “Nghiên cứu trình lên men lactic từ mật rỉ đường” 1.2 Mục đích đề tài Chọn vi khuẩn có khả sinh acid lactic nhiều để sản xuất acid lactic 1.3 Yêu cầu - Phân lập vi khuẩn lactic - Tuyển chọn khuẩn lạc có khả lên men lactic - Khảo sát điều kiện tối ƣu cho trình lên men - So sánh tạo acid tổng khuẩn lạc - Sản xuất acid lactic từ mật rỉ PHẦN TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 Giới thiệu acid lactic Acid lactic, 2-hydroxypropionic acid (CH3CHOHCOOH) acid tồn rộng rãi tự nhiên, đƣợc tìm thấy ngƣời, động vật, thực vật vi sinh vật Đƣợc phát vào năm 1780 nhà hóa học Thụy Điển Sheele sữa chua Acid lactic đƣợc chấp nhận sản phẩm trình lên men vào năm 1847 [2], [25], [32] Trong cấu tạo phân tử acid lactic có carbon bất đối xứng nên chúng có hai đồng phân quang học: D - acid lactic L - acid lactic Hai đồng phân quang học có tính chất hóa lý giống nhau, khác khả làm quay mặt phẳng phân cực ánh sáng, sang phải sang trái Do tính chất sinh học chúng hoàn toàn khác Loại L - acid lactic dạng tinh thể Chúng có khả tan nƣớc, tan cồn, tan eter, khơng tan CHCl3, nhiệt độ nóng chảy 28o C [9] L - acid lactic đƣợc ứng dụng công nghiệp thực phẩm dƣợc phẩm Hầu hết sinh vật lên men lactic đồng hình tạo đƣợc dạng đồng phân quang học [32] Loại D - acid lactic dạng tinh thể, tan nƣớc tan cồn Nhiệt độ nóng chảy 28o C Nếu D - acid lactic L - acid lactic có hỗn hợp theo tỉ lệ 50/50 ngƣời ta gọi hỗn hợp Raxemic Trong q trình lên men khơng có hỗn hợp có tỉ lệ lý tƣởng mà có đƣợc hỗn hợp tiến hành tổng hợp hữu DL acid lactic có khả tan nƣớc, cồn, không tan CHCl3 [9] 2.2 Vi sinh vật lên men lactic Vi khuẩn lactic đƣợc phân lập từ trồng giới bao gồm hạt trái rau [24] Các lồi Lactobacillus cịn tìm thấy dày, ruột non, ruột già âm đạo [21] Vi khuẩn lactic vi khuẩn gram dƣơng, không sinh bào tử, tỉ lệ G+C thấp, cầu khuẩn hay hình que Chúng sản xuất acid lactic nhƣ sản phẩm lên men Chúng khơng có enzyme catalase catalase giả đƣợc tìm thấy trƣờng hợp khơng phân giải oxi già Các thành viên nhóm thiếu cytochrome Tất vi khuẩn lactic phát triển điều kiện kị khí Tuy nhiên, khơng giống nhƣ vi khuẩn kị khí, hầu hết vi khuẩn acid lactic khơng nhạy cảm với oxi phát triển tốt điều kiện có mặt oxi nhƣ khơng có mặt oxi Vì chúng vi khuẩn kị khí tùy ý (Madigan et al 2000) [30] Sự phân chia vi khuẩn lactic dựa vào sản phẩm trình trao đổi chất carbohydrate, lồi Lactobacillus phân chia thành nhóm [23], [19] - Nhóm I: Lên men đồng hình bắt buộc có fructose-1,6-diphosphate aldolase (FDP aldolase) nhƣng khơng có phosphoketolase Chúng lên men đƣợc hexose để tạo acid lactic nhƣng không lên men đƣợc pentose.) - Nhóm II: Lên men dị hình tùy ý (có FDP aldolase cảm ứng phosphoketolase Tuy nhiên, hexose lên men đồng hình pentose đƣợc chuyển thành acid lactic ethanol acid acetic) - Nhóm III: Lên men dị hình bắt buộc (Có phosphoketolase nhƣng khơng có FDP aldolase, q trình trao đổi chất hexose pentose lên men dị hình) Bảng 2.1 Phân loại Lactobacillus (Sharpe, 1981; Kandler Weiss, 1986) Đặc đểm Nhóm I Nhóm II Nhóm III Lên men pentose - + + Tạo CO2 từ glucose - - + Tạo CO2 từ gluconate - +a +a Sự diện FDP aldolase + + - Sự diện phosphoketolase - +b + Một vài đại diện L acidophilus L casei L brevis L delbrueckii L curvatus L buchneri L helveticus L plantarum L fermentum L salivarius L sake L reuteri a: Khi lên men b: Cảm ứng có pentose Một đặc điểm quan trọng dùng để phân biệt giống vi khuẩn acid lactic lên men glucose dƣới điều kiện chuẩn nhƣ: nồng độ glucose yếu tố tăng trƣởng (các tiền chất acid amin, vitamin acid nucleic) khơng giới hạn giới hạn sử dụng oxi Dƣới điều kiện này, vi khuẩn acid lactic phân thành hai nhóm: lên men lactic đồng hình chuyển hầu hết lƣợng glucose để tạo thành acid lactic lên men lactic dị hình glucose lên men tạo thành acid lactic, ethanol, acid acetic CO2 Thật việc kiểm tra sản phẩm khí từ glucose phân biệt đƣợc hai nhóm (Sharpe, 1979) 2.2.1 Vi khuẩn lactic dị hình Khi tiến hành lên men dung dịch đƣờng, vi khuẩn lactic dị hình thƣờng tạo lƣợng acid lactic khơng lớn Ngồi acid lactic chúng tạo hàng loạt sản phẩm khác nhƣ acid acetic, ethanol, CO2 [3], [9] Một số loài vi khuẩn lactic dị hình đƣợc nghiên cứu nhƣ sau: - Lactobacillus pasteurianus Trực khuẩn, gram dƣơng, kích thƣớc rộng 0,5 – μm; dài 7,0 – 35 μm Trong thiên nhiên chúng tồn riêng lẽ, không di động Có khả lên men đƣợc, glucose, fructose, galactose, maltose, saccharose, mannitol, dextrin Trong trình lên men tạo số sản phẩm nhƣ CO2, alcohol, acid lactic, acid acetic Nhiệt độ thích hợp 29 33o C, pH thích hợp [9] - Lactobacillus brevis Thuộc trực khuẩn, gram dƣơng, khơng có khả di động, kích thƣớc rộng 0,7 - 1,0 μm, dài 2,0 - 4,0 μm Trong thiên nhiên chúng liên kết với thành chuỗi Trong q trình phát triển, chúng sử dụng lactat canxi nhƣ nguồn cung cấp cacbon Chúng có khả lên men loại đƣờng nhƣ glucose, fructose, galactose, maltose Chúng lên men mannitol, glycerol, dextrin, tinh bột Chúng khơng hóa lỏng gelatin [18] - Lactobacillus lycopessici Trực khuẩn, gram dƣơng, thiên nhiên chúng tồn đơi một, có khả tạo bào tử Trong trình lên men đƣờng, chúng tạo cồn, acid lactic, acid acetic CO2 - Streptococcus cumoris Thuộc loài cầu khuẩn, thiên nhiên chúng tồn thành chuỗi dài Thuộc gram dƣơng, nhiệt độ thích hợp phát triển 30o C, không phát triển nồng độ NaCl % Khi lên men đƣờng tạo acid acetic, diacetyl, CO2 Chúng có khả tạo chất kháng khuẩn - Streptolacticus lactic Thuộc chồi cầu khuẩn, gram dƣơng, nhiệt độ phát triển từ 10 – 45o C, có khả chịu đƣợc nồng độ NaCl % Khi lên men đƣờng glucose, maltose, lactose, xylose, saccharose, mannitol, tạo acid lactic, acid acetic, diacetyl, CO2 Chúng khơng có khả lên men đƣợc glycerol, sorbitol - Streptococcus faecalis Chúng tạo thành chuỗi tế bào hình cầu, gram dƣơng Nhiệt độ tối ƣu 37o C, nhiệt độ sinh trƣởng 10 - 45o C, phát triển duới 5o C, phát triển 50o C Có khả sống sót 62,8o C 30 phút Phát triển pH 9,6 Chịu đƣợc nồng độ NaCl %, % 6,5 % Có khả lên men đƣờng glucose, maltose, lactose ln ln lên men mannitol; có lên men sucrose, glycerol, sorbitol [18] 2.2.2 Vi khuẩn lactic đồng hình Khi tiến hành lên men dung dịch đƣờng vi khuẩn lactic đồng hình thƣờng tạo acid lactic chủ yếu [3], [9] Một số lồi vi khuẩn lactic điển hình đƣợc nghiên cứu kỹ nhƣ sau: - Lactobacillus acidophilus Lần đƣợc phân lập Moro (1900) đƣợc phân lập từ phân trẻ sơ sinh qua phẩu thuật bê đẻ Có dạng hình que, chịu nhiệt, trình lên men tạo 2,2 % acid lactic [4], [17] Chúng có kích thƣớc rộng 0,6 - 0,9 μm, dài 1,5 - 6,0 μm Trong thiên nhiên chúng tồn riêng lẽ Đôi chúng tạo thành chuỗi ngắn Trên môi trƣờng gelatin: chúng không phát triển 20o C, khơng có khả hóa lỏng Trên mơi trƣờng khoai tây khơng phát triển Chúng thuộc nhóm vi khuẩn gram dƣơng khơng di động Chúng có khả lên men đƣờng nhƣ glucose, fructose, galactose, maltose, lactose, để tạo acid lactic Chúng khơng có khả lên men glycerol, mannitol, sorbitol Không thể phát triển đƣợc mơi trƣờng khơng có carbohydrate Nhiệt độ tối ƣu 37o C Nó phát triển từ 20 - 22o C Nhiệt độ phát triển tối đa 43 - 48o C [18] - Lactobacillus bulgaricus Chúng đƣợc tìm Mesnhicov sữa chua Bungari [14] Thuộc loại trực khuẩn có kích thƣớc dài, liên kết với tạo thành chuỗi, gram dƣơng Chúng khơng có khả di động, có khả lên men loại đƣờng nhƣ glucose, lactose, galactose Có thể khơng thể lên men fructose, maltose sucrose không lên men đƣợc xylose, mannitol, dextrin Chúng khơng có khả tạo nitrit từ nitrate [9] Quá trình lên men tạo 3,7 % acid lactic [14] Trên mơi trƣờng khoai tây, có khuẩn lạc trắng vàng [18] pH thích hợp cho phát triển pH = 5,2 - 5,6 [7] Nhiệt độ tối ƣu 45 - 50o C Tối thiểu 22o C [20] Trong sản xuất qui mô lớn, chúng thƣờng đƣợc chọn để lên men Whey để tạo acid lactic, sau dùng Ca(OH)2 để trung hịa lƣợng acid lactic tạo thành Nhiệt độ lên men 43o C, với nhiệt độ đủ để ức chế vi sinh vật gây nhiễm mà không ức chế L bulgaricus [22] - Lactobacillus bifidus Trực khuẩn nhỏ, kích thƣớc trung bình khoảng μm, khơng có khả di động, thuộc gram dƣơng Chúng đứng riêng lẽ, cặp chuỗi ngắn Có khả lên men đƣợc loại đƣờng nhƣ glucose, fructose, galactose, saccharose, dextrin, tinh bột maltose [18] - Lactobacillus casei Vi khuẩn đƣợc phân lập từ sữa, sản phẩm sữa, ủ xylo- thức ăn xanh dùng chăn ni, vi khuẩn dạng hình que, kích thƣớc 0,7 - 1,1 μm; 2,0 - 4,0 μm, trực khuẩn nhỏ thƣờng gặp dạng chuỗi dài hay chuỗi ngắn [4] Chúng thuộc gram dƣơng, khơng có khả lên men đƣợc loại đƣờng nhƣ glucose, fructose, galactose, maltose, lactose mannitol; có khơng thể lên men sucrose Nhiệt độ phát triển tối ƣu 30o C, thấp 10o C Tối đa 37 - 40o C vài chủng 45o C Q trình lên men tạo khoảng 1,5 % acid lactic [18] - Lactobacillus causaciccus Trực khuẩn ngắn, khơng có khả di động, gram dƣơng Chúng có khả lên men loại đƣờng nhƣ glucose, fructose, galactose, maltose, lactose, mannitol Nhiệt độ phát triển tối ƣu 48 - 55o C [9] - Lactobacillus delbrueckii Thƣờng gặp chúng hạt đại mạch [14] Vi khuẩn chịu nhiệt, đƣợc tìm thấy loài hạt ngũ cốc tinh bột, giống vi khuẩn có khả đồng hóa đƣợc tinh bột Trực khuẩn dài, kích thƣớc 0,5 - 0,8 μm; 2,0 - 9,0 μm, không di động, gram dƣơng Quá trình lên men tạo 2,5 % acid lactic Chúng có khả lên men đƣợc glucose, fructose, maltose, sucrose, galactose dextrin Chúng khơng có khả lên men xylose, lactose, tinh bột, mannitol Nhiệt độ tối ƣu 45o C [9], [18] -Lactobacillus leichmannii Trực khuẩn gram dƣơng Kích thƣớc tế bào 0,6 – μm Vi khuẩn có khả tạo thành chuỗi ngắn, khơng di động, gram dƣơng Nhiệt độ tối ƣu 36o C Tối đa 40 - 46o C Chúng khơng có khả tạo nitrit từ nitrate Có khả lên men glucose, fructose, maltose, saccharose Trong môi trƣờng khoai tây chúng tạo 1,3 % acid lactic [18] - Lactobacillus helveticcus Thuộc trực khuẩn có kích thƣớc 0,7 - 0,9 μm; 2,0 - 6,0 μm Trong thiên nhiên chúng tồn riêng tế bào, tồn thành chuỗi tế bào Nhiệt độ phát triển 40 - 42o C Chúng có khả lên men đƣợc glucose, fructose, galactose, maltose lactose [9] - Lactobacillus thermophillus Trực khuẩn, gram dƣơng, kích thƣớc tế bào 0,5 - 3,0 μm, khơng có khả di động Lên men đƣợc glucose, lactose, sucrose, tinh bột dạng glycerol Không tạo acid từ mannitol Lên men đƣợc fructose, galactose, maltose dextrin Không tạo nitrit từ nitrate Nhiệt độ tối ƣu 50 - 62,8o C Nhiệt độ tối thiểu 30o C, nhiệt độ tối đa 65o C Điểm nhiệt độ chết khoảng 71o C 30 phút [18] - Lactobacillus plantanrum Trực khuẩn, gram dƣơng, kích thƣớc tế bào 0,7 - 1,0 μm; 3,0 - 8,0 μm Nhiệt độ tối ƣu 30o C Tối thiểu 10o C, tối đa 40o C Điểm nhiệt độ chết từ 65 - 75o C 15 phút Có khả chịu nồng độ NaCl 5,5 % Chúng có khả lên men glucose, fructose, galactose, sucrose, maltose lactose Tinh bột khơng lên men Không tạo đƣợc nitrit từ nitrate [18] - Lactobacillus sporogenes Thuộc giống Lactobacillus dựa đặc tính Nakayama Yanoshi (1967) Chúng thuộc Gram dƣơng, có khả sinh bào tử, có dạng hình que, kích thƣớc – μm, thuộc vi khuẩn hiếu khí, vi khuẩn lactic đồng hình sản xuất axít lactic L(+) - (dextrorotraytory), phát triển nhiệt độ dao động từ 35 - 50o C, pH tối ƣu dao động từ 5,5 - 6,5, phản ứng với catalase dƣơng tính Tạo acid từ glucose, galactose, fructose, maltose sucrose Không có thủy phân tinh bột casein, khơng hóa lỏng gelatin phản ứng indol âm tính khơng tạo khí [31] 2.3 Cơ chế tạo acid lactic [20] Kluyver chia vi khuẩn lactic thành nhóm dựa vào sản phẩm cuối q trình chuyển hóa glucose Q trình tạo acid lactic sản phẩm từ lên men glucose đƣợc gọi lên men đồng hình Số lƣợng acid lactic đồng hình thu đƣợc nhiều lactic dị hình khoảng lần Vi khuẩn lactic dị hình lên men từ hexose tạo số lƣợng mole lactat, CO2 ethanol Bảng 2.2 Vi khuẩn lên men lactic đồng hình dị hình [20] Lên men đồng hình Sinh vật Dạng Lên men dị hình % G+C Sinh vật lactat Dạng % G+C lactat Lactobacillus Lactobacillus L acidophilus DL 36,7 L brevis DL 42,7 - 46,4 L bulgaricus D(-) 50,3 L buchneri DL 44,8 L casei L(+) 46,4 L cellobiosus DL 53 L coryniformis DL 45 L coprophilus DL 41,0 L curvatus DL 43,9 L fermentum DL 53,4 L delbrueckii D(-) 50 L hilgardii DL 40,3 L helveticus DL 39,3 L sanfrancisco DL 38,1 - 39,7 L jugurti DL 36,5-39,0 L trichoides DL 42,7 L jensenii D(-) 36,1 L fructivorans DL 38 - 41 L lactis D(-) 50,3 L pontis DL 53 - 56 L leichmannii D(-) 50,8 Leuconostoc L plantarum DL 45 L.cremoris D(-) 39 - 42 L salivarius L(+) 34,7 L.dextranicum D(-) 38 - 39 L.lactis D(-) 43 - 44 L.mesenteroides D(-) 39 - 42 L.gelidum D(-) 37 L.carnosum D(-) 39 Pediococcus P.acidilactici DL P.cerevisiae DL P.pentosaceus DL 44,0 38 Streptococcus Carnobaterium S.bovis D(-) 38 – 42 C.divergens 33,0 - 36,4 S.thermophilus D(-) 40 C.mobile 35,5 - 37,2 C.gallinarum 34,3 - 36,4 33,7 - 36,4 Lactococcus L.lactis subsp lactis D(-) 38,4 - 38,6 C.piscicola L.lactissubsp.cremoris D(-) 38,0 - 40,0 Weissella L.lactissubsp.hordniae 35,2 W.confusa DL 44,5 - 45,0 L.garvieae 38,3 - 38,7 W.hellenica D(-) 37 - 47 L.plantarum 36,9 - 38,1 W.halotolerans DL 45 L.raffinolactis 40,0 - 43 W.kandler DL 39 W.minor DL 44 Vagococcus V.fluvialis 33,6 W.paramesenteroides D(-) 38 - 39 V.salmoninarum 36,0 - 36,5 W.viridescens DL 43 DL 38 - 42 Oenococcus O.oeni 10 2.3.1 Vi khuẩn lactic dị hình [9] Tất vi khuẩn lactic dị hình thƣờng thiếu hai loại enzym quan trọng aldolase hexose isomerase Do giai đoạn đầu q trình lên men, chúng thƣờng đƣợc tiến hành theo đƣờng hexose monophosphate hay gọi đƣờng pentose phosphate (PP ) Q trình chuyển hóa đƣờng đƣợc trình bày nhƣ sau: 2.3.2.Vi khuẩn lactic đồng hình Quá trình lên men lactic đồng hình nhờ có enzyme aldolase hexose isomerase nhƣng thiếu phosphoketolase Chúng sử dụng đƣờng Embden-Meyerhof-Parnas (EMP) để tạo phân tử lactat từ phân tử glucose [9], [19], [20] Q trình chuyển hóa đƣợc trình bày nhƣ sau: 46 - Tiến hành lên men Hình 4.15: Quá trình lên men lactic + Kết trình lên men lactic từ mât rỉ đƣờng Lƣợng đƣờng khử cho vào lên men: 244 g/l, lƣợng đƣờng khử sau lên men: 198 g/l Vậy hiệu suất chuyển hóa đƣờng khử: 18,85 % Lƣợng giống cho vào lên men: 2877,5 x 106 tế bào/ml, lƣợng giống sau lên men: 40,25 x 106 tế bào/ml Hiệu suất chuyển hóa đƣờng khử thấp số lƣợng giống giảm thiết bị lên men khơng có cánh khuấy làm cho trình trao đổi chất L acidophilus đƣờng diễn chậm bị ức chế nên L acidophilus dễ tiến đến phase suy tàn lƣợng đƣờng lại nhiều Sau lên men thu đƣợc lƣợng acid lactic: 9,7 g Lƣợng acid lactic thu đƣợc thấp khơng có cánh khuấy làm giảm tiếp xúc chất dinh dƣỡng tế bào vi sinh vật Cho nên khả trao đổi chất xảy chậm nên lƣợng acid lactic tạo thấp Theo sơ đồ chuyển hóa acid lactic từ phân tử glucose fructose chuyển hóa theo đƣờng EMP cho phân tử acid lactic, 180 g đƣờng glucose fructose tạo 180 g acid lactic 46 g đƣờng glucose fructose chuyển hóa thành 46 g acid lactic Hiệu suất chuyển hóa thành acid lactic: 21,1 % Theo (Hui H Y ctv, 1994) cho vi khuẩn lactic đồng hình chuyển hóa đƣờng tạo thành 90 % acid lactic Lƣợng acid lactic thu đƣợc hiệu suất cao thiết bị lên men tốt (thiết bị có cánh khuấy) hay giống có chất lƣợng cao thiết bị tách acid lactic phƣơng pháp đại Nên trình trao đổi chất vi sinh vật chất diễn mạnh hơn, bên cạnh chất lƣợng giống tốt làm cho q trình lên men diễn nhanh cho suất cao Trong trình tách acid lactic, tách acid lactic thiết bị đại giảm hao hụt acid lactic 47 Đối với hiệu suất acid lactic thu đƣợc thấp tác giả thiết bị lên men khơng có cánh khuấy làm hạn chế khả tiếp xúc L acidophilus chất nên lƣợng acid lactic thu đƣợc thấp q trình tách lọc acid lactic không đƣợc tốt nên lƣợng acid lactic thu đƣợc bị hao hụt 48 PHẦN KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 5.1 Kết luận Từ kết thu đƣợc rút số kết luận nhƣ sau: - Phân lập định danh đƣợc dạng khuẩn lạc: L acidophilus, L bulgaricus Diplococcus từ Antibio, Biolactyl Đại mạch - Đã khảo sát điều kiện tối ƣu cho: + L acidophilus: nhiệt độ tối ƣu 37o C, pH tối ƣu = 6, tỉ lệ mật rỉ = 10 %, tỉ lệ giống = 10 % thời gian 24 + L bulgaricus: nhiệt độ tối ƣu 45o C, pH tối ƣu = 6, tỉ lệ mật rỉ = 10 %, tỉ lệ giống = 10 % thời gian 24 + Diplococcus: nhiệt độ tối ƣu 37o C, pH tối ƣu = 5, tỉ lệ mật rỉ = 10 %, tỉ lệ giống = 10 % thời gian 24 - Diplococcus tạo acid tổng nhiều nhất, L acidophilus cuối L bulgaricus môi trƣờng cấp 1, cấp sản xuất - Chọn L acidophilus sản xuất acid lactic 5.2 Đề nghị - Phân lập thêm nhiều khuẩn lạc tự nhiên để tuyển chọn chủng vi khuẩn tạo acid lactic nhiều để phục vụ cho qui mô công nghiệp - Thiết kế bồn lên men mang tính qui mơ cơng nghiệp - Hƣớng ứng dụng sản phẩm acid lactic thu đƣợc: + Bảo quản chế biến thực phẩm (dùng sản xuất dƣa chua, ủ chua rau quả, sản xuất sản phẩm lên men từ sữa.v.v.) + Y học (trong phẩu thuật chỉnh hình, nha khoa.v.v.) + Mỹ phẩm + Môi trƣờng 49 PHẦN TÀI LIỆU THAM KHẢO TIẾNG VIỆT Bùi Ái, 2003 Công nghệ lên men ứng dụng công nghệ thực phẩm Nhà xuất Đại học Quốc Gia TP.Hồ Chí Minh, trang 9-11 Kiều Hữu Anh, 1999 Giáo trình vi sinh vật cơng nghiệp Nhà xuất Khoa học Kỹ thuật, trang 113-118 Nguyễn Lân Dũng, Nguyễn Đình Quyến Phạm Văn Ty, 2000 Vi sinh vật học Nhà xuất Giáo Dục, trang 141-160, 221-229 Nguyễn Thị Nam Định, 2000 Phân lập-nhân giống vi khuẩn lactic từ dưa chua dùng cho sản phẩm lên men Khóa luận tốt nghiệp Kỹ sƣ Thực phẩm, Đại học Nơng Lâm TP Hồ Chí Minh, trang 5-8 Vƣơng Thị Việt Hoa, 2002-2003 Thực tập vi sinh đại cương Tủ sách Trƣờng Đại học Nơng Lâm TP.Hồ Chí Minh, trang 7-14, 39-49 Dƣ Lý Thùy Hƣơng, 2000 Chọn khảo sát vài đặc tính vi khuẩn lactic để muối chua nấm rơm, măng, đậu Luận văn thạc sĩ khoa học chuyên ngành vi sinh, Đại học Khoa Học Tự Nhiên TP.Hồ Chí Minh, trang 13-17 Lý Thành Kiệt Huỳnh Văn Thuận, 2002 Bước đầu nghiên cứu phân lập nhân giống hai khuẩn lạc vi khuẩn lactic streptococcus thermophilus Lactobacillus bulgaricus để cung cấp giống cho chế biến yogurt quy mơ nhỏ Khóa luận tốt nghiệp Kỹ sƣ Thực phẩm, Đại học Nơng Lâm TP.Hồ Chí Minh, trang 7-8 Nguyễn Đức Lƣợng, 2001 Công nghệ sinh học Nhà xuất Đại học Quốc Gia TP.Hồ Chí Minh, trang 278-280 Nguyễn Đức Lƣợng, 2002 Công nghệ vi sinh, tập 2, Vi sinh vật học công nghiệp Nhà xuất Đại học Quốc Gia TP.Hồ Chí Minh, trang 322-336 10 Nguyễn Đức Lƣợng Cao Cƣờng, 2003 Thí nghiệm cơng nghệ sinh học, tập 1, thí nghiệm Hóa sinh Nhà xuất Đại học Quốc Gia TP.Hồ Chí Minh, trang 33-34 11 Nguyễn Đức Lƣợng, Phan Thị Huyền Nguyễn Ánh Tuyết, 2003 Thí nghiệm cơng nghệ sinh học, tập 2, thí nghiệm Vi sinh vật học Nhà xuất Đại học Quốc Gia TP.Hồ Chí Minh, trang 72-73, 414-434, 450-461 12 Nguyễn Đức Lƣợng Nguyễn Thị Thùy Dƣơng, 2003 Công nghệ sinh học môi trường, tập 2, Xử lý chất thải hữu Nhà xuất Đại học Quốc Gia TP Hồ Chí Minh, trang 195-209 50 13 Bùi Thị Ngọc Phƣơng Lê Thị Thủy, 2003 Thử nghiệm sản xuất bột giống vi khuẩn lactic streptococcus thermophilus Lactobacillus bulgaricus dùng chế biến yaourt Khóa luận tốt nghiệp Kỹ sƣ Thực phẩm, Đại học Nơng Lâm TP.Hồ Chí Minh, trang 6-10 14 Lê Xuân Phƣơng, 2001 Vi sinh vật công nghiệp Nhà xuất Xây dựng, trang 157-161 15 Trần Minh Tâm, 2000 Công nghệ vi sinh ứng dụng Nhà xuất Nông nghiệp, trang 111-115 16 Trần Linh Thƣớc, Nguyễn Đức Hoàng, Phan Thị Phƣợng Trang Phạm Thị Hồng Tƣơi, 2001 Thực tập vi sinh vật học Nhà xuất Đại học Quốc Gia TP.Hồ Chí Minh, trang 52-56 17.Lê Thị Hồng Tuyết, 2004 Nghiên cứu Bacteriocin sản xuất Lactobacillus acidophilus NRRL B-2092 Luận văn thạc sĩ chuyên ngành vi sinh, Đại học Khoa Học Tự Nhiên TP.Hồ Chí Minh, trang 4-9 TIẾNG ANH 18 Breed S Robert, Murray D G E, and Hitchens Parker A, 1948 Bergey’s manual determinative bacteriology Sixth edition, The Williams &Wilkins Company p 305331, 349-361 19 Hui H Y, and Khachatourians G George, 1994 Food Biotechnology Microorganisms p 249-254 20 Jay M James, 1996 Modern Food Microbiology Fifth edition, ITP International Thomson Publishing p.131-145 21 Klein Harley Prescott, 1996 Microbiology Third Edition, volumne two p.124126 22 Pelczar J Michael, Chan E C S Jr, and Krieg R Noel, 1993 Microbiology concepts and applications p 873-874 23 Salminen Seppo, 1961 Lactic Acid Bacteria, microbiology and functional Aspects p 4-15, 22-29 24 Somogyi P L, Ramaswamy S H, and Hui H Y, 1958 Biology, Principles and Applications 25 Stanier Y Roger, Doudoroff Michael, and Adelberg A Edward, 1957 The Microbial World p 225-229 51 Tài liệu mạng internet 26 (http://www.baocantho.com.vn/vietnam/suckhoe/5345/ >) 27 http://www.hanoimoi.com.vn 28 VACS Tạp chí Thế giới Phụ nữ http://www.vnn.vn/chuyenmuc/camnang/mypham/lamdepvoisua.htm 29 http://www.nld.com.vn/tintuc/kinh-te/tin-the-gioi/97615.asp > Báo Ngƣời Lao Động - Tin giới Ralph P Tittsler, Carl S Pederson, Esmond E Snell, David Hendlin, and Charles F Niven, Jr, 1952 symposium on the lactic acid bacteria1 36 http://www.dsmz.de/media/med011.htm 52 37 http://141.150.157.117:8080/prokPUB/chaphtm/256/COMPLETE.htm 38 http://www.nld.com.vn/tintuc/kinh-te/tin-the-gioi/97615.asp > 39 http://www.chemsystems.com/newsletters/perp/jun02_01-s3abs.cfm > 40 http://www.the-infoshop.com/study/bc27352_fermentation_ingredients.html > [Report] Global Fermentation Ingredients Market Research, Trends, Analysis