Tuyển chọn, định tên và khảo sát một số yếu tố ảnh hưởng đến chủng vi khuẩn Lactic sinh tổng hợp Cellulase, có hoạt tính probiotic

Bài viết tiến hành tuyển chọn, định tên và khảo sát một số yếu tố ảnh hưởng đến chủng vi khuẩn Lactic sinh tổng hợp Cellulase, có hoạt tính Probiotic để ứng dụng trong sản xuất thức ăn chăn nuôi.

Công ngh sinh h c & Gi ng tr ng TUY N CH N, NH TÊN VÀ KH O SÁT M T S Y U T NH H NG N CH NG VI KHU N LACTIC SINH T NG H P CELLULASE CAO,CĨ HO T TÍNH PROBIOTIC Nguy n Th Thu1, Tr n Liên Hà2, Nguy n Chí D ng3 Tr ng i h c Bách Khoa, Hà N i Trung tâm Công ngh sinh h c Công ngh th c ph m 1,2 TÓM T T N c ta n c nông nghi p, l ng ph ph ph m t o t ngành ch bi n nông s n vô l n, phong phú đa d ng S d ng ph , ph ph m đ làm th c n ch n nuôi cách ti t ki m ngu n n ng l ng, gi i quy t v n đ ô nhi m môi tr ng xu h ng hi n Vì v y, chúng tơi ti n hành nghiên c u: n ch n, đ nh tên kh o sát m t s y u t nh h ng đ n ch ng vi khu n lactic có kh n ng sinh t ng h p cellulase, đ ng d ng s n xu t th c n ch n nuôi T ba ngu n v i m i m u phân l p đ c ch ng vi khu n lactic t o enzym cellulase ch n đ c ch ng G5 sinh axit t ng cao nh t 14,4 g/l; sinh t ng h p cellulase: t l vòng th y phân so v i đ ng kính l th ch D3 - d3 = 22, kháng v i Samonella typhimrium ATCC 14028 9, Staphylococus epidermidis ATCC 12228 8, Bacillus cereus ATCC 13061 10, Listeria innocua ATCC33090là 13 B ng ph ng pháp sinh lý, sinh hóa 16S Rrna, k t qu đ nh tên ch ng G5 có đ t ng đ ng 100% v i ch ng Lactobacillus casei ATCC334 i u ki n nuôi thu sinh kh i đ i v i ch ng L.casei G5: nhi t đ = 37°C; pH 6,5; n ng đ đ ng 20g/l; t l c p gi ng 5%, t c đ l c 75 vịng/phút sau 36 gi ni c y giá tr OD (600 nm) thu đ c 11,76 T khóa: Bã dong ri ng, cellulose, lactic acid, lactobacillus casei, probiotic I TV N Vi c s d ng công ngh vi sinh ch bi n th c n ch n nuôi b ng ph ng pháp chua ph , ph ph m nông nghi p v i vi khu n lactic u ki n y m khí lên men t o axit lactic làm pH gi m, kéo dài th i gian b o qu n đ c nhà nghiên c u quan tâm Vi khu n lactic sinh t ng h p cellululase phân gi i cellulose thành phân t nh h n giúp gia súc d h p th Ngồi ra, chúng cịn sinh bacteriocin c ch s phát tri n c a n m m c vi khu n gây b nh, vi sinh v t gây th i r a Ph ng pháp giúp t n d ng đ c l ng ph , ph ph m d th a, gi m chi phí th c n ch n ni Th c n chua khơng b t n th t dinh d ng l i b sung vi sinh v t có l i cho đ ng tiêu hóa, giúp gia súc b b nh h n ã có m t s nghiên c u ngồi n c v vi c ch bi n s d ng ph ph ph m nông nghi p nh r m, s n, bã s n làm th c n ch n nuôi b ng ph ng pháp chua (Nguyen Thi Lo c ng s , 2000; Preston T.R and Leng.R A, 1987; Nguy n Xuân Tr ch, 2004) S d ng vi sinh v t v i ph ph ph m nông nghi p, ch y u vi khu n lactic nh L plantarum, Enterococcus lactis ( Th L ng, 2010), L casei, L bulgaricus, L termofil, Streptococcus pyogenes, Streptococcus lactics thành axit lactic axit h u c u ki n y m khí (Lê V n Li n Nguy n H u Tào, 2004) Hàm l ng axit lactic t ng trình sinh tr ng, phát tri n c a vi sinh v t làm cho môi tr ng pH gi m gây c ch vi khu n gây th i Ngoài ra, vi khu n lactic sinh bacteriocin c ch toàn b s phát tri n c a n m m c vi khu n gây b nh ( Th L ng, 2010; Lê Ng c Thùy Trang Ph m Minh Nh t, 2014) S d ng vi khu n Lactobacillus plantarum lên men bã s n làm th c n cho gia súc (Nguy n Minh Trí c ng s , 2014) S d ng thân đ u ph ng (l c) chua v i ch ph m vi sinh làm th c n cho bị ( ồn c V , 2008) Tuy nhiên, đ nâng cao hi u su t giá tr dinh d ng c a trình ch bi n ph , ph ph m thành th c n gia súc y u t nh h ng t i q trình sinh T P CHÍ KHOA H C VÀ CÔNG NGH LÂM NGHI P S 1-2018 11 Công ngh sinh h c & Gi ng tr ng tr ng, phát tri n c a ch ng vi khu n r t quan tr ng Vì v y, chúng tơi ti n hành nghiên c u: “Tuy n ch n, đ nh tên kh o sát m t s y u t nh h ng đ n s sinh tr ng phát tri n c a vi khu n lactic có kh n ng sinh t ng h p cellulase, có ho t tính probiotic” II PH NG PHÁP NGHIÊN C U 2.1 V t li u nghiên c u Ngu n vi sinh v t: t m u lên men: d a mu i, cà mu i, bã dong ri ng Các ch ng vi sinh v t ki m đ nh l y vi n công ngh sinh h c Thành ph n môi tr ng: Môi tr ng môi tr ng MRS (Man Rogosa Sharpe): Pepton (10g/l), cao n m men (5g/l), cao th t (5g/l), glucose (20g/l), amonicitrat (2g/l), CH3COONa (5g/l), K2HPO4 (2g/l), MgSO4.7H2O (0,1g/l), MnSO4.4H2O (0,05g/l), Agar (15g/l), pH 6.5 Môi tr ng CMC: (NH4)2SO4 (1 g/l), K2HPO4(1g/l), MgSO4.7H2O (0,5g/l) NaCl (0,003 g/l), CMC (1 g/l), Agar (2 g/l) i u ch nh pH Môi tr ng nuôi vi sinh v t ki m đ nh: môi tr ng NA: 3g/l cao th t, 10g/l pepton, 5g/l NaCl Mơi tr ng th ho t tính: Mơi tr ng th ho t tính lactic: MRS + (g/l) CaCO3 Mơi tr ng th ho t tính cellulase: CMC (1g/l), agar (2 g/l) Các môi tr ng trùng 110°C 30 phút 2.2 Ph ng pháp nghiên c u Ph ng pháp phân l p n ch n vi sinh v t: Phân l p theoph ng pháp pha lỗng (Phí Th Thanh Mai c ng s , 2015) S d ng môi tr ng MRS có b sung CaCO3 ( Th L ng, 2010) Ph ng pháp n ch n s d ng ph ng pháp sau: đ nh tính axit lactic b ng 12 thu c th Uffelmann (Nguy n c L ng c ng s , 2003); d a vào kh n ng phân gi i CaCO3 (c y ch m m đ c l th ch); đ nh l ng axit theo Therner (Emanuel, V c ng s , 2005); d a vào kh n ng phân gi i cellulose (c y ch m m đ c l th ch) (Võ V n Ph c Qu , Cao Ng c i p, 2011), kh n ng kháng khu n sinh bacteriocin (Mai àm Linh c ng s , 2007; Lê Ng c Thùy Trang Ph m Minh Nh t, 2014) Ph ng pháp đ nh tên Xác đ nh đ c tính sinh lý, sinh hóa (Nguy n c L ng c ng s , 2003; Mai àm Linh c ng s , 2007) Ph ng pháp đ nh tên b ng sinh h c phân t : gi i trình t 16S rRNA Phân lo i d a gi i trình t 16S rRNA c a ch ng vi khu n v i c p m i 518F: 5’CCAGCAGCCGCGGTAATACG3’; 800R: 5’TACCAGGGTATCTAATCC3’(Sakiyama, Y c ng s , 2009) Chu trình nhi t: B c 1: 95°C phút; b c 2: 95°C 45 giây; b c 3: 52°C phút; b c 4: 72°C phút 30 giây; l p l i t b c đ n 4: 35 chu k ; b c 5: 72°C phút (Khu t H u Thanh, 2006) S n ph m PCR đ c tinh s ch xác đ nh trình t máy ABI PRISM® 3100 Genetic Analyzer K t qu đ c trình t đ c x lý ph n m m Clustal X so sánh v i trình t 16S rRNA c a lồi đ c cơng b t d li u c a DDBJ, EMBL GenBank Ph ng pháp kh o sát y u t nh h ng Ch ng n ch n đ c nuôi môi tr ng MRS l ng 37oC, 48 gi canh tr ng đ c s d ng làm gi ng cho t t c thí nghi m nh h ng c a nhi t đ : S d ng v i môi tr ng MRS pH ban đ u 6,5; t l c p gi ng 10% nuôi t nh nhi t đ : 30oC, 35oC, 37oC, 40oC, 45oC nh h ng c a pH: Nuôi nhi t đ l a ch n trên, t l c p gi ng 10% pH ban T P CHÍ KHOA H C VÀ CƠNG NGH LÂM NGHI P S 1-2018 Công ngh sinh h c & Gi ng tr ng đ u giá tr : 5; 5,5; 6; 6,5; 7; 7,5; nh h ng c a n ng đ đ ng: Nhi t đ , pH đ c ch n trên, t l c p gi ng 10% vào môi tr ng MRS Thay đ i hàm l ng đ ng m c: 5, 10, 15, 20, 25 g/l nh h ng c a t l c p gi ng: Nhi t đ , pH, n ng đ đ ng đ c l a ch n t k t qu Thay đ i t l gi ng: 5, 10, 15, 20, 25% B ng nh h ng c a t c đ l c: V i u ki n nhi t đ , pH, n ng đ đ ng, t l c p gi ng đ c l a ch n Ta ti n hành kh o sát t c đ l c t c đ : 0, 25, 50, 75, 100, 125 vòng/phút III K T QU VÀ TH O LU N 3.1 Phân l p n ch n ch ng vi khu n sinh axit c m c a ch ng vi khu n đ c n ch n Sinh t ng h p cellulase Hàm l ng axit t ng sinh (g/l) c l th ch c l th ch (D1 - d1) (mm) (D3 - d3) (mm) 12 11,5 12 11,7 20 13,5 21 12,6 24 10 14,4 22 10,8 ng kính khu n l c; d2, d4: đ ng kính l th ch Lên men sinh axit Tên ch ng C y ch m m (D/d) (mm) DC1 DC2 5,5 C1 G1 G3 G4 5,5 G5 G6 4,5 D: đ ng kính vịng phân gi i; d1, d3: đ B ng Kh n ng sinh bacteriocin c a ch ng đ c ch n Ch ng D1 - d (mm) D2 - d (mm) Ch ng ki m đ nh lactic Không b sung pepsin B sung pepsin G1 G3 Samonella G4 typhimrium G5 ATCC 14028 Staphylococus epidermidisATCC 12228 Bacillus cereus ATCC 13061 Listeria innocua ATCC33090 G1 G3 G4 G5 G1 G3 G4 G5 G1 G3 G4 G5 8 4 10 14 13 10 13 13 13 11 D1 - D2 (mm) 1 D1: đ ng kính vịng kháng khu n không b sung pepsin (mm); D2: đ ng kính vịng kháng khu n b sung pepsin (mm); d: đ ng kính l th ch (mm) T P CHÍ KHOA H C VÀ CƠNG NGH LÂM NGHI P S 1-2018 13 Công ngh sinh h c & Gi ng tr ng T ba ngu n v i m i m u n ch n đ c ch ng vi khu n lactic môi tr ng MRS, sinh t ng h p cellulase: DC1, DC2, C1, G1, G3, G4, G5, G6 Các ch ng vi khu n đ c nuôi môi tr ng MRS, đem th b ng Uffelmann K t qu cho th y canh tr ng ch ng vi khu n làm cho thu c th t màu tím đen chuy n sang màu vàng r m, ch ng t ch ng vi khu n có kh n ng sinh axit lactic Dùng ph ng pháp n ch n: d a vào kh n ng phân gi i CaCO3 (c y ch m m đ c l th ch); đ nh l ng axit; d a vào kh n ng phân gi i cellulose (đ c l th ch) (b ng 1), ta ch n đ c ch ng: G1, G3, G4, G5 có t l vịng phân gi i cao nh t Ch n ch ng sinh bacteriocin cao nh t (b ng 2) Ta ch n đ c B ng Ch ng Hình thái khu n l c Hình thái t bào G5 Tr ng s a, khu n l c to, tròn, m t nh n Tr c khu n ch ng G5 sinh axit t ng cao nh t 14,4 g/l; D/d = 7, D1 - d1 = 10; sinh t ng h p cellulase t t D3 - d3 = 22; sinh bacteriocin t t nh t, kích th c vịng kháng (D4 - d4) đ i v i Samonella typhimrium ATCC 14028 9, Staphylococus epidermidis ATCC 12228 8, Bacillus cereus ATCC 13061 10, Listeria innocua ATCC 33090 13 T ph ng pháp n ch n trên, l a ch n ch ng G5 đ ti n hành đ nh danh b ng ph ng pháp sinh h c phân t 3.2 nh tên b ng ph ng pháp sinh h c phân t Ti n hành quan sát đ c m sinh lý, sinh hóa c a ch ng G5 K t qu th hi n b ng c m sinh lý, sinh hóa ch ng G5 Kh n ng T o axit hóa Catalase Gram bào mơi t tr ng + – + – Hemicellulase + Sinh khí – Hình K t qu n di s n ph m sau PCR T hình ta th y xu t hi n v ch b n n di xu t hi n v ch, u th hi n m u 14 s n ph m sau PCR đ ng nh t có kích th c 1400bp T P CHÍ KHOA H C VÀ CƠNG NGH LÂM NGHI P S 1-2018 Cơng ngh sinh h c & Gi ng tr ng Ti n hành ch y ch ng trình Blast® đ xem m c đ t ng đ ng v i ch ng Hình Các ch ng có đ t DNA h gen c a ch ng G5 đ c tách chi t đo n gen mã hóa cho 16S rRNA đ c khu ch đ i nh ph n ng PCR s d ng c p m i 518F/800R K t qu gi i trình t đo n gen 16S rRNA c a G5 cho th y đo n gen g m 1400 bp trình t đ c so sánh v i gen16S rRNA vi khu n Genbank v i ph n m m Blastn K t qu cho th y đo n gen 16S rRNA c a ch ng G5 có đ t ng đ ng đ n 100% v i ch ng Lactobacillus casei ATCC334 Ch ng G5 có tên Lactobacillus casei G5 Theo m t nghiên c u khác, vi khu n lactic sinh t ng h p cellulase, ho t tính enzyme cellulase đ c th hi n qua t l vòng th y phân đ ng kính l th ch cao nh t Hình nh h ngân hàng gen ta thu đ hình c k t qu ng đ ng cao v i ch ng G5 12 Kháng v i M luteus t - mm, E coli t - 12 mm, Samonella typhi t - mm, Shigella flexneri 10 - 12 mm ch ng vi khu n lactic c ng sinh t ng h p cellulase Lactobacillus plantarum Enterococcus lactics ( Th L ng c ng s , 2010) 3.3 Kh o sát m t s y u t nh h ng đ n kh n ng sinh tr ng phát tri n ch ng G5 nh h ng c a nhi t đ : K t qu hình o cho th y r ng nhi t đ 37 C, pH ban đ u 6,5 sau 36 gi nuôi c y, ch ng đ t sinh kh i cao nh t có giá tr OD600nm 9,12 nhi t đ 40°C, giá tr OD600nm 7,14 th p h n so v i nhi t đ 37oC Ch n nhi t đ 37oC cho nghiên c u ti p theo ng c a nhi t đ đ n s sinh tr ng phát tri n c a ch ng T P CHÍ KHOA H C VÀ CÔNG NGH LÂM NGHI P S 1-2018 15 Công ngh sinh h c & Gi ng tr ng nh h ng c a pH: K t qu cho th y pH ban đ u 6,5 ch ng sinh tr ng phát tri n t t nh t, giá tr OD600nm 9,52 sau 36 gi nuôi c y (hình 4) Khi pH xu ng giá tr OD t i Hình nh h ng c a pH đ n s sinh tr nh c a n ng đ đ ng: K t qu cho th y n ng đ đ ng nh h ng đ n s sinh tr ng phát tri n c a ch ng n ng đ đ ng 20 g/l cho giá tr OD 600 nm 9,59 t i 36 gi Tuy nhiên, t ng n ng đ đ ng lên 25g/l Hình nh h 16 ng phát tri n c a ch ng giá tr OD 600 nm đ t 10,10 t i 36 gi , t c t ng 1,05 l n, t ng không đáng k so v i n ng đ đ ng 20g/l Vì v y ch n n ng đ đ ng 20g/l cho nghiên c u ti p theo ng c a n ng đ đ nh h ng c a t l c p gi ng: hình cho ta th y t l c p gi ng 10% cho giá tr OD 600 nm cao nh t 9,43 sau 36 gi nuôi c y Tuy nhiên, giá tr OD t l c p gi ng 10% Hình nh h 600 nm ch đ t 2,79 Khi môi tr ng ki m t i pH giá tr OD t i 600 nm đ t 4,95 Vì v y, ch n pH 6,5 cho nghiên c u ti p theo ng cao không đáng k so v i t l c p gi ng 5% 8,56 u khơng kinh t Vì v y, ch n t l c p gi ng 5% cho nghiên c u ti p theo ng c a t l c p gi ng đ n s sinh tr ng phát tri n c a ch ng T P CHÍ KHOA H C VÀ CÔNG NGH LÂM NGHI P S 1-2018 Công ngh sinh h c & Gi ng tr ng nh h ng c a t c đ l c: Hình cho ta th y, giá tr OD th p nh t t c đ l c 25 125 vòng/phút Giá tr OD cao nh t t c đ Hình nh h l c 75 vòng/phút 36 gi đ t 11,76 Ta ti n hành ch n t c đ l c 75 vòng/phút cho nghiên c u ti p theo ng c a t c đ l c đ n s sinh tr IV K T LU N T ngu n v i 10 m u n ch n đ c ch ng vi khu n có kh n ng lên men axit lactic, sinh t ng h p cellulase Qua b c n ch n ch ng G5 sinh axit cao nh t, sinh t ng h p cellulase t t, sinh bacteriocin t t nh t G5 tr c khu n gram (+), khơng t o bào t , catalase âm tính, hemicellulase d ng tính, khơng sinh khí nh tên theo ph ng pháp sinh h c phân t 16S rRNA ch ng G5 có đ t ng đ ng 100% v i ch ng Lactobacillus casei ATCC334 Ch ng G5 ch ng Lactobacillus casei G5 i u ki n đ nuôi ch ng G5 t t nh t t i 37°C; pH 6,5; n ng đ đ ng 20g/l; t l c p gi ng 5%, t c đ l c 75 vịng/phút sau 36 gi ni c y giá tr OD thu đ c 11,76 TÀI LI U THAM KH O Th L ng, Nguy n Th Anh ào, Nguy n Th Kim Quy, Tr n Th L Quyên, D ng V n H p, Tr n Qu c Vi t, Ninh Th Len, Bùi Th Thu Huy n (2010) Phân l p n ch n vi khu n lactic dùng ch bi n b o qu n th c n thô xanh ph ph m nông nghi p cho gia súc nhai Di truy n h c ng d ng - Chuyên san Công ngh sinh h c, s 6/2010 oàn cV , ng Ph c Chung, Nguy n Th Hi p (2008) Nghiên c u k thu t chua than đ u ph ng (l c) làm th c n cho bò s a, bò th t T p chí ng phát tri n c a ch ng Ch n nuôi, s 6, tr.21-25 Emanuel, V., Adrian, V., Ovidiu, P., Gheorghe, C (2005) Isolation of a Lactobacillus plantarum strain used for obtaining a product for the presvervation of fodders African Journal of Biotechnology 4(5): 403-408 Khu t H u Thanh (2006) K thu t gen: Nguyên lý ng d ng NXB Khoa h c K thu t Kozaki M., Uchimura T & Okada S (1992) Experimental manual of lactic acid bacteria Asakurasyoten, Tokyo, Japan Lê Ng c Thùy Trang, Ph m Minh Nh t (2014) Phân l p kh o sát y u t nh h ng đ n kh n ng s n sinh ch t kháng khu n c a Lactobacillus plantarum T p chí sinh h c, 36, tr.97-106 Lê V n Li n, Nguy n H u Tào (2004) K th t ch bi n b o qu n ph ph m nông nghi p th y s n làm th c n ch n nuôi NXB Lao đ ng xã h i Mai àm Linh, MP, Ph m Th Tuy t, Ki u H u nh, Nguy n Th Giang (2007) c m sinh h c c a ch ng vi khu n lactic phân l p đ a bàn Hà N i T p chí Khoa h c i h c Qu c gia HN, Chuyên san Khoa h c t nhiên công ngh , 24: tr 221-226 Nguy n c L ng, Phan Th Huy n Nguy n Ánh Tuy t (2003) Thí nghi m cơng ngh sinh h c, t p 2, thí nghi m vi sinh v t h c NXB i h c Qu c gia TP H Chí Minh, trang 72-73, 414-434, 450-461 10 Nguy n Minh Trí, Mai Th Tuy t Nga, H Thúy Di m (2014) Tuy n ch n ch ng vi khu n lactic kh cyanua t ng thích h p mơi tr ng bã s n, s 2, tr.67-72 11 Nguyen Thi Lo, Nguyen Thi Hoa Ly, Vo Thi Kim Thanh and Hoang Nghia Duyet (2000) Ensiling T P CHÍ KHOA H C VÀ CÔNG NGH LÂM NGHI P S 1-2018 17 Công ngh sinh h c & Gi ng tr ng Techniques and evaluation of cassava leaf silage for Mong Cai Sow in central Viet Nam, Sustaimable Livestock production on local feed resources, Ho Chi Minh City, Viet Nam Famury, 18-20 th c hi n, P 25 12 Nguy n Xuân Tr ch (2004) nh h ng c a x lý ki m hóa b ng vơi ho c ure đ n l ng n vào t l tiêu hóa r m T p chí Ch n ni, s 11, tr 16-18 13 Phí Th Thanh Mai, Tr n Liên Hà, Nguy n Thanh H ng, Nguy n Th Thùy (2015) Phân l p n ch n ch ng vi khu n có kh n ng lên men s n xu t axit lactic t xyloza T p chí Khoa h c Nơng nghi p, s 10, tr 91-94 14 Preston T.R and Leng.R A (1987) Matching ruminant production systems with available resources in the tropics and sub-tropics Penambul Books Ltd, Mmidale NSW Australia, pp 25-37 15 Sakiyama, Y., Nguyen, K N T., Nguyen, M G., Miyadoh, S., Duong, V H & Ando, K (2009) Kineosporia babensis sp nov., isolated from plant litter in Vietnam Int J Syst Evol Microbiol, 59: 550-554 16 Thompson J.D., Gibson T.J., Plewniak F., Jeanmougin F & Higgins D.G (1997) The CLUSTAL_X windows interface: flexible strategies for multiple sequence alignment aided by quality analysis tool Nucleic Acids Res 25: 4876-4882 17 Võ V n Ph c Qu , Cao Ng c i p (2011) Phân l p nh n di n vi khu n phân gi i cellulose T p chí Khoa h c, H C n Th , 18ª, tr.177-184 SELECTION, IDENTIFICATION AND CHARACTERIZATION OF LACTIC ACID BACTERIA, WHICH PRODUCE CELLULASE TO APPLICATION FOR ANIMAL FEED PRODUCTION Nguyen Thi Thu1, Tran Lien Ha2, Nguyen Chi Dung3 1,2 Hanoi University of Science and Technology Center of Biotechnology and Food Technology SUMMARY At present, the area of cultivating edible canna is 30,000 hectares in the whole country, with an annual output of about 300,000 tons of fresh tubers The starch producting process from edible canna tubers creates a large amount of canna dregs of about 70 to 75% Using the brewed edible canna paste as animal feed is a way to save energy and solve the problem of environmental pollution, which is the current trend Therefore, we had done research: “selection, identification and characterization of lactic acid bateria, which produce cellulase and application for animal feed production” Among them, G5 was selected because it has produced the highest total acid of 14.4 g/l; cellulase (D - d4 = 22), and bacteriocin inhibition growth of Samonella typhimrium ATCC 14028 is 9, Staphylococus epidermidis ATCC 12228 is 8, Bacillus cereus ATCC 13061 is 10, Listeria innocua ATCC 33090 is 13 G5 was identified Lactobacillus casei by physiological and 16S rRNA The condition for biomass production: temperature of 37°C; pH 6.5; sugar concentration of 20 g/l; inoculum of 5%, shaking rate of 75 rpm/minute after 36 hours of culturing OD value (600 nm) was 11.76 Keywords: Edible canna dregs, cellulose, Lactic acid, Lactobacillus casei, probiotic 18 Ngày nh n : 18/4/2017 Ngày ph n bi n Ngày quy t đ nh đ ng : 10/5/2017 : 17/5/2017 T P CHÍ KHOA H C VÀ CÔNG NGH LÂM NGHI P S 1-2018 ... sinh tr ng phát tri n c a vi khu n lactic có kh n ng sinh t ng h p cellulase, có ho t tính probiotic? ?? II PH NG PHÁP NGHIÊN C U 2.1 V t li u nghiên c u Ngu n vi sinh v t: t m u lên men: d a mu i,... danh b ng ph ng pháp sinh h c phân t 3.2 nh tên b ng ph ng pháp sinh h c phân t Ti n hành quan sát đ c m sinh lý, sinh hóa c a ch ng G5 K t qu th hi n b ng c m sinh lý, sinh hóa ch ng G5 Kh... c đ l c đ n s sinh tr IV K T LU N T ngu n v i 10 m u n ch n đ c ch ng vi khu n có kh n ng lên men axit lactic, sinh t ng h p cellulase Qua b c n ch n ch ng G5 sinh axit cao nh t, sinh t ng h p