MỤC LỤC
DANH MỤC BẢNG
DANH MỤC BIỂU ĐỒ
ĐẶT VẤN ĐỀ
CHƯƠNG 1. TỔNG QUAN
1.1. Đặc điểm của dây rốn, bánh rau và tế bào gốc máu dây rốn
1.2. Tạo nguồn tế bào gốc từ máu dây rốn
1.2.1. Quy trình thu thập, xử lý và bảo quản máu dây rốn
1.2.1.1. Thu thập máu dây rốn
1.2.1.2. Xử lý máu dây rốn
1.2.1.3. Bảo quản tế bào gốc máu dây rốn
1.2.2. Các loại hình ngân hàng máu dây rốn
1.2.2.1. Ngân hàng TBG máu dây rốn cộng đồng
1.2.2.2. Ngân hàng lưu trữ TBG MDR cá nhân
1.2.2.3. Ngân hàng kết hợp lưu trữ cộng đồng và cá nhân.
1.2.3. Tìm kiếm tế bào gốc máu dây rốn cho ghép
1.2.3.1. Chọn mẫu phù hợp HLA (Human Leucocyte Antigen)
1.2.3.2. Chọn liều ghép phù hợp
1.2.3.3. Vấn đề nhóm máu trong ghép
1.3. Ứng dụng nguồn tế bào gốc từ máu dây rốn
1.3.1. Ứng dụng ghép máu dây rốn trong các bệnh lý huyết học
1.3.2. Ứng dụng của TBG máu dây rốn trong y học tái tạo
1.3.3. Một số hình thức ghép tế bào gốc máu dây rốn trong điều trị bệnh lý
1.4. Tình hình nghiên cứu tế bào gốc máu dây rốn trong và ngoài nước
CHƯƠNG 2
ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
2.1. Đối tượng nghiên cứu
2.2. Phương pháp nghiên cứu
2.2.1. Thiết kế nghiên cứu
2.2.2. Quy trình nghiên cứu
Bước 1. Lựa chọn đối tượng hiến và thu thập máu dây rốn (do nhân viên y tế tại khoa Sản Bệnh viện Phụ sản Hà Nội thực hiện)
Bước 2. Xử lý và bảo quản đông lạnh TBG MDR
Bước 3. Rã đông khối tế bào gốc đông lạnh
Bước 4. Thu thập và quản lý thông tin kết quả nghiên cứu
2.2.3. Các xét nghiệm thực hiện
Sơ đồ 2.1. Quy trình xử lý và xét nghiệm máu dây rốn
2.3. Phương tiện, vật liệu và các kỹ thuật sử dụng trong nghiên cứu
2.3.1. Các trang thiết bị
2.3.2. Vật liệu nghiên cứu
2.3.3. Hóa chất, sinh phẩm
2.4. Các kỹ thuật thực hiện trong nghiên cứu
2.4.1. Quy trình thu thập máu dây rốn
2.4.2. Quy trình xử lý máu dây rốn bằng để lắng có HES ly tâm 1 lần
2.4.3. Quy trình bảo quản khối tế bào gốc sau xử lý bằng nitơ lỏng
2.4.4. Quy trình đếm CD34 bằng máy Beckman Coulter FC500
2.4.5. Quy trình xét nghiệm HLA bằng kỹ thuật PCR-SSO
2.4.6. Quy trình nuôi cấy tạo cụm tế bào
2.4.7. Quy trình rã đông đơn vị tế bào gốc
2.5. Địa điểm nghiên cứu
2.6. Xử lý số liệu
2.7. Đạo đức nghiên cứu
Sơ đồ 2.2. Sơ đồ nghiên cứu
CHƯƠNG 3
KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU
3.1. Một số đặc điểm sản phụ và thai nhi của các đơn vị MDR được bảo quản
Bảng 3.1. Một số đặc điểm sản phụ của TBG MDR được lưu trữ (n=1668)
Bảng 3.2. Phân bố dân tộc của sản phụ (n=1668)
Bảng 3.3. Hình thức sinh của sản phụ (n=1668)
Biểu đồ 3.1. Số lần sinh của sản phụ (n = 1668)
Bảng 3.4. Một số đặc điểm thai nhi của TBG MDR lưu trữ (n=1668)
Bảng 3.5. Tỷ lệ theo giới tính trẻ sơ sinh (n=1668)
Bảng 3.6. Một số đặc điểm dây rốn, bánh rau (n=1668)
3.2. Kết quả thu thập, xử lý, bảo quản máu dây rốn cộng đồng
3.2.1. Kết quả thu thập máu dây rốn
Bảng 3.7. Kết quả chung thu thập, xử lý MDR cộng đồng
Bảng 3.8. Nguyên nhân loại túi máu dây rốn sau thu thập (trước xử lý)
Bảng 3.9. Nguyên nhân loại đơn vị tế bào gốc sau xử lý
Bảng 3.10. Một số đặc điểm của mẫu máu dây rốn trước xử lý (n=1668)
Bảng 3.11. Tỷ lệ thể tích máu dây rốn trước xử lý (n=1668)
Bảng 3.12. Đặc điểm tế bào bạch cầu trong túi máu dây rốn trước xử lý (n=1668)
Bảng 3.13. Đặc điểm hồng cầu và tiểu cầu trong túi máu dây rốn trước xử lý (n=1668)
2906
Đơn vị MDR thu thập
1770
Đơn vị MDR xử lý
1668
STT
HLA-A
HLA-B
HLA-DRB1
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
Đơn vị TBG MDR lưu trữ
3.2.2. Kết quả xử lý và bảo quản
Bảng 3.14. Một số thông số đơn vị TBG lưu trữ (n=1668)
Bảng 3.15. Tỷ lệ trung bình các thành phần loại bỏ sau ly tâm (n=1668)
Bảng 3.16. Thành phần tế bào máu trong túi TBG lưu trữ (n=1668)
Bảng 3.17. Tỷ lệ nhóm máu đơn vị tế bào gốc lưu trữ (n=1668)
Bảng 3.18. Đặc điểm thành phần huyết sắc tố đơn vị TBG MDR lưu trữ (n=1668)
Bảng 3.19. Đặc điểm tế bào máu của đơn vị TBG MDR trước và sau rã đông (n = 94)
Bảng 3.20. Thành phần tế bào trong đơn vị TBG MDR trước và sau rã đông (n = 94)
Bảng 3.21. Kết quả cấy cụm sau bảo quản đông lạnh (n = 94)
3.3. Một số yếu tố liên quan đến chất lượng và khả năng sử dụng đơn vị TBG MDR cộng đồng
3.3.1. Một số yếu tố liên quan đến chất lượng đơn vị TBG MDR cộng đồng
3.3.1.1. Một số yếu tố liên quan trong quá trình thu thập MDR cộng đồng
Biểu đồ 3.2. Liên quan giữa thể tích máu dây rốn và tuổi sản phụ (n = 1668)
Bảng 3.22. Liên quan giữa một số yếu tố của mẹ với thể tích mẫu máu dây rốn (n=1668)
Biểu đồ 3.3. Liên quan thể tích máu dây rốn và trọng lượng thai (n = 1668)
Bảng 3.23. Liên quan giữa một số yếu tố thai nhi với thể tích MDR (n=1668)
Bảng 3.24. Liên quan giữa một số yếu tố mẹ với tổng số TBCN (n = 1668)
Bảng 3.25. Liên quan giữa một số yếu tố của thai nhi với tổng số TBCN (n=1668)
Bảng 3.26. Liên quan giữa một số yếu tố mẹ với TB CD34 (n = 1668)
Bảng 3.27. Liên quan giữa một số yếu tố của trẻ với TB CD34 (n=1668)
3.3.1.2. Một số yếu tố liên quan trong quá trình xử lý MDR cộng đồng
Biểu đồ 3.4. Liên quan giữa số lượng TBCN và thể tích MDR trước xử lý (n=1668)
Biểu đồ 3.5. Liên quan giữa số lượng TB CD34 và thể tích MDR (n = 1668)
Biểu đồ 3.6. Liên quan giữa hiệu suất xử lý và thể tích MDR thu được (n = 1668)
Biểu đồ 3.7. Liên quan giữa hiệu suất xử lý và số lượng TBCN (n = 1668)
Biểu đồ 3.8. Liên quan giữa hiệu suất xử lý và hematocrit (n = 1668)
Biểu đồ 3.9. Liên quan giữa hiệu suất xử lý và thời gian lưu trước xử lý (n = 1668)
Biểu đồ 3.10. Liên quan giữa hiệu suất xử lý và thời gian xử lý (n = 1668)
Biểu đồ 3.11. Liên quan giữa TB CD34 sống và thời gian chờ xử lý (n = 1668)
Biểu đồ 3.12. Liên quan giữa TB CD34 sống và thời gian xử lý (n = 1668)
Biểu đồ 3.13. Liên quan giữa tỷ lệ TB CD34 sống và số lượng TBCN (n = 1668)
3.3.1.3. Một số yếu tố liên quan trong quá trình bảo quản TBG MDR cộng đồng
Biểu đồ 3.14. Liên quan giữa TB CD34 và cụm sau rã đông (n = 94)
Biểu đồ 3.15. Liên quan giữa số lượng TBCN và cụm sau rã đông (n = 94)
Biểu đồ 3.16. Mối liên quan giữa thời gian bảo quản và CFU-E (n = 94)
Biểu đồ 3.17. Mối liên quan giữa thời gian bảo quản và BFU-E (n = 94)
Biểu đồ 3.18. Mối liên quan giữa thời gian bảo quản và CFU-GM (n = 94)
Biểu đồ 3.19. Mối liên quan giữa thời gian bảo quản và CFU-GEMM (n = 94)
Biểu đồ 3.20. Mối liên quan giữa thời gian bảo quản và tổng số cụm (n = 94)
Biểu đồ 3.21. Mối liên quan giữa thời gian bảo quản và tỷ lệ sống
của tế bào sau rã đông (n = 94)
3.3.2. Khả năng sử dụng đơn vị TBG MDR cộng đồng
3.3.2.1. Kết quả xét nghiệm HLA
Bảng 3.28. Tỷ lệ các alen HLA ở mức độ phân giải thấp của từng locus (n=1668)
Bảng 3.29. Tỷ lệ các alen HLA-A của mẫu nghiên cứu (n=1668)
Bảng 3.30. Tỷ lệ các alen HLA-B của mẫu nghiên cứu (n=1668)
Bảng 3.31. Tỷ lệ các alen HLA-DR của mẫu nghiên cứu (n=1668)
3.3.2.2. Xác xuất tìm kiếm đơn vị tế bào gốc máu dây rốn
Biểu đồ 3.22. Xác xuất tìm kiếm ít nhất 1 đơn vị TBG MDR hòa hợp HLA theo các cỡ mẫu lưu trữ
Biểu đồ 3.23. Khả năng tìm kiếm đơn vị TBG MDR theo liều TBCN tối thiểu 2 x 107/kg (n=1668)
Biểu đồ 3.24. Khả năng tìm kiếm TBG MDR theo liều CD34 tối thiểu 1 x 105/kg (n=1668)
3.3.2.3. Kết quả chọn đơn vị tế bào gốc máu dây rốn cho bệnh nhân
Bảng 3.32. Đặc điểm của bệnh nhân tìm kiếm (n=217)
Bảng 3.33. Tỷ lệ bệnh nhân tìm kiếm theo bệnh (n=217)
Bảng 3.34. Tỷ lệ bệnh nhân tìm thấy đơn vị TBG MDR hòa hợp HLA
(n = 217)
Bảng 3.35. Liều tế bào tìm kiếm được tương ứng với các mức hòa hợp (n=217)
Bảng 3.36. Số đơn vị TBG MDR đã ghép
CHƯƠNG 4
BÀN LUẬN
4.1. Một số đặc điểm sản phụ và thai nhi của các đơn vị MDR được lựa chọn
4.2. Kết quả thu thập, xử lý, bảo quản máu dây rốn cộng đồng
4.2.1. Kết quả thu thập máu dây rốn
Bảng 4.1. So sánh thể tích máu dây rốn trong nghiên cứu với một số tác giả trong và ngoài nước
Bảng 4.2. So sánh tổng số tế bào có nhân với một số nghiên cứu trong và ngoài nước
Bảng 4.3. So sánh chỉ số hồng cầu trong nghiên cứu với nghiên cứu của Nelida I Noguera
4.2.2. Kết quả xử lý và bảo quản
4.3. Một số yếu tố liên quan đến chất lượng và khả năng sử dụng đơn vị TBG MDR cộng đồng
4.3.1. Một số yếu tố liên quan đến chất lượng đơn vị TBG MDR cộng đồng
4.3.1.1. Một số yếu tố liên quan trong quá trình thu thập MDR cộng đồng
4.3.2.2. Một số yếu tố liên quan trong quá trình xử lý MDR cộng đồng
4.3.2.3. Một số yếu tố liên quan trong quá trình bảo quản TBG MDR cộng đồng
4.3.2. Khả năng sử dụng đơn vị TBG MDR cộng đồng
4.3.2.1. Kết quả xét nghiệm HLA
Biểu đồ 4.1. Tần suất gặp các alen HLA-A, B, DR trong nghiên cứu và tác giả trong nước
4.3.2.2. Xác xuất tìm kiếm đơn vị tế bào gốc máu dây rốn
4.3.2.3. Kết quả chọn đơn vị tế bào gốc máu dây rốn cho bệnh nhân
KẾT LUẬN
KIẾN NGHỊ
Danh dách các bài báo và công trình liên quan
đến nội dung luận án
TÀI LIỆU THAM KHẢO
PHỤ LỤC 1
PHỤ LỤC 2