Nghiên cứu này được thực hiện nhằm xác định diễn biến của bệnh hoại tử gan tụy trên tôm nuôi trong ao và phòng thí nghiệm và đề xuất một số giải pháp hạn chế bệnh hoại tử gan tụy cấp tính. 51 mẫu tôm thu theo định kỳ 10 ngày/lần và 35 mẫu thu lúc dịch bệnh được kiểm tra bằng phương pháp mô bệnh học.
VIỆN NGHIÊN CỨU NUÔI TRỒNG THỦY SẢN MỘT SỐ KẾT QUẢ VỀ NGHIÊN CỨU BỆNH HOẠI TỬ GAN TỤY CẤP TÍNH TRÊN TƠM NI Ở ĐỒNG BẰNG SƠNG CỬU LONG VÀ BIỆN PHÁP KIỂM SOÁT Nguyễn Văn Hảo1*, Lê Hồng Phước2 TÓM TẮT Nghiên cứu thực nhằm xác định diễn biến bệnh hoại tử gan tụy tơm ni ao phịng thí nghiệm đề xuất số giải pháp hạn chế bệnh hoại tử gan tụy cấp tính 51 mẫu tơm thu theo định kỳ 10 ngày/lần 35 mẫu thu lúc dịch bệnh kiểm tra phương pháp mô bệnh học Dấu hiệu hoại tử gan tụy xuất sớm ngày thứ 17 muộn vào ngày thứ 77 sau thả tôm vào ao nuôi Tần suất xuất hoại tử cao ghi nhận từ 2045 ngày Tôm chết tập trung giai đoạn 19-31 ngày tuổi Tất mẫu thu từ ao có tôm chết ghi nhận dấu hiệu hoại tử gan tụy cao phải thu hoạch sớm sau phát hoại tử 2-3 ngày Điều đáng ghi nhận tỷ lệ hoại tử biến động lớn ao (từ 9-90%) Điều cho thấy mức độ nguy hiểm hội chứng gan tụy phát tỷ lệ hoại tử thấp Tất ao ghi nhận có dấu hiệu hoại tử phải thu hoạch sớm Tôm từ ao nuôi bị nhiễm AHPND mức độ nhẹ chyển phịng thí nghiệm có tỷ lệ chết khơng đáng kể sau tháng ni Việc tầm sốt Vibrio sp V parahaemolyticus diện nước tôm nuôi ao xem quan trọng làm sở cho người nuôi có biện pháp giải Từ khóa: Hoại tử gan tụy, tôm, thu hoạch I ĐẶT VẤN ĐỀ Hiện nay, tôm nuôi xuất hội chứng chết sớm hay cịn gọi bệnh hoại tử gan tụy cấp tính (Acute Hepatopancreatic Necrosis Disease - AHPND) ghi nhận Trung Quốc, Malaysia Thái Lan Ở Trung Quốc xuất năm 2009 chưa người nuôi ý đến Đến năm 2011, bệnh trở nên trầm trọng trang trại nuôi năm gần biển (Panakorn, 2012) Các trang trại nuôi tôm Hainan, Guangdong, Fujian Guangxi bị thiệt hại tháng đầu năm 2011 với khoảng 80% Ở Malaysia, bệnh xuất lần đầu vào năm 2010 bang Pahang Joho sau lan rộng sang vùng khác Sự bùng phát EMS làm giảm sản lượng đáng kể tôm thẻ chân trắng (khoảng 60%) Gần đây, Thái Lan, bệnh xuất tỉnh phía Đơng vịnh Thái Lan Bệnh ghi nhận gây thiệt hại nặng tôm sú tôm thẻ chân trắng Bệnh thường xảy giai đoạn 15-40 ngày sau thả nuôi Tôm bệnh có dấu hiệu giảm ăn, khối gan tụy có nhiều biến dạng bất thường trương to nhũn teo nhỏ, màu sắc nhợt nhạt, dấu hiệu khác ghi nhận bao gồm mềm vỏ, sậm màu Tỷ lệ tơm chết lên đến 100% vài ngày kéo dài Theo Lightner (2012), quan sát tiêu mô học mẫu tôm bệnh thu tỉnh Sóc Trăng cho thấy AHPNS có số Viện Nghiên cứu Nuôi trồng Thủy sản Trung tâm Quốc gia Quan trắc Cảnh báo Mơi trường Phịng ngừa Dịch bệnh Thủy sản Khu vực Nam bộ, Viện Nghiên cứu Nuôi trồng Thủy sản * Email: haoria2@hcm.vnn.vn TẠP CHÍ NGHỀ CÁ SÔNG CỬU LONG - - THÁNG 10/2014 73 VIỆN NGHIÊN CỨU NI TRỒNG THỦY SẢN đặc điểm (1) diễn biến q trình thối hố gan tuỵ cấp tính từ ngoài, (2) thiếu hoạt động phân bào đẳng nhiễm tế bào có nguồn gốc từ mơ phơi (3) rối loạn chức tế bào tổ chức gan tuỵ (4) dễ nhận diện tế bào có nhân lớn bất thường bong tróc tế bào, (5) giai đoạn cuối bao gồm tập hợp tế bào máu khoảng gian ống gan nhiễm khuẩn thứ cấp Kết mô học tương tự tìm thấy Prachumwat ctv., (2012) nghiên cứu tôm thẻ chân trắng Thái Lan thu từ hai tỉnh Chantaburi Rayong vào cuối năm 2011 đầu năm 2012 Trang trại lớn có tổng diện tích 76 ha, có đầu tư sở hạ tầng tốt hệ thống giao thông trang trại, điện, quạt nước, thổi khí trang bị có hệ thống, có hệ thống cho ăn tự động, có nhà tập thể, bếp ăn cho cơng nhân, có biện pháp an tồn sinh học Trang trại trung bình có diện tích 20-35 ha, có hệ thống điện, quạt nước Tuy nhiên, mức độ đầu tư cho hạ tầng thấp so với trang trại lớn, khơng có khu tập thể hay bếp ăn cho cơng nhân, khơng có hệ thống cho ăn tự động Trang trại nhỏ có diện tích < 10ha, đầu tư cho sở hạ tầng trang trại trung bình, trang thiết bị nghèo nàn Theo NACA (2012), nghiên cứu tôm bệnh thu từ vùng khác phát vi khuẩn thuộc giống Delftia Ralstonia Ngồi ra, tác giả cịn phát diện bacteriophage mẫu tôm bị hội chứng gan tuỵ cấp tính Tuy nhiên chưa có kết luận cuối cần phải có kết từ các thí nghiệm kiểm chứng 2.1.2 Nghiên cứu khả hồi phục bệnh hoại tử gan tuỵ cấp tính Theo Loc ctv., (2013) bệnh hoại tử gan tụy cấp tính vi khuẩn Vibrio parahaemolyticus, vi khuẩn bị nhiễm loại thể thực khuẩn (bacteriophage, virus ký sinh vi khuẩn) làm tăng cường độc lực gây chết tôm Vi khuẩn lây truyền qua đường miệng, sau chúng xâm nhập vào đường tiêu hóa tơm, sinh độc tố gây phá hủy mô làm rối loạn chức gan tụy, quan tiêu hóa tơm II VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Vật liệu 2.1.1 Thời điểm tỷ lệ xuất hoại tử gan tụy tôm nuôi thâm canh Mẫu tôm thu phân loại theo định kỳ (10 ngày/lần), mẫu không theo định kỳ (dịch bệnh) Mẫu thu trang trại nuôi tôm thuộc hiệp hội tôm Mỹ Thanh (xã Liêu Tú, Huyện Trần Đề, tỉnh Sóc Trăng) Các trang trại phân loại theo quy mô lớn, trung bình nhỏ 74 Thu mẫu tơm từ hai ao tôm thẻ xã Liêu Tú, huyện Trần Đề, tỉnh Sóc Trăng có dấu hiệu bệnh nhẹ (Ao & với kết kiểm tra tình trạng hoại tử gan tụy phương pháp mô học cho tỷ lệ nhiễm ao 12%, ao 10%) hai ao tơm thẻ có dấu hiệu bệnh nặng (Ao 3&4, với tỷ lệ hoại tử gan tụy 89 32%) Ao ni với diện tích 5.000 m2, mật độ thả 100 con/m2 Đối với ao & 2, thu mẫu lúc tôm nuôi 27 ngày tuổi chuyển phịng thí nghiệm ni bể kính chứa 70 lít nước biển 20%o để theo dõi tiếp Tương tự cho ao & khác tuổi tôm, tôm từ ao chuyển phịng thí nghiệm sau ngày ni 2.1.3 Theo dõi bệnh hoại tử gan tụy cấp tính tơm ni phịng thí nghiệm ngồi ao Tơm ni 10 ngày sau vận chuyển sống từ ao tơm (Ao1&2 có diện tích 5.000 m2, mật độ thả 100 con/m2) huyện Trần Đề, tỉnh Sóc Trăng phịng thí nghiệm ni bể kính chứa 70 lít nước biển 20%o Tổng số 300 tơm chuyển từ ao phịng thí nghiệm ni theo dõi vịng 21 ngày Số tơm ao nuôi theo dõi song song với số tơm ni bể kính Thu mẫu tơm định kỳ hàng tuần để đánh giá tình trạng gan tụy phương pháp mơ bệnh học TẠP CHÍ NGHỀ CÁ SÔNG CỬU LONG - - THÁNG 10/2014 VIỆN NGHIÊN CỨU NUÔI TRỒNG THỦY SẢN 2.1.4 Thực nghiệm giải pháp kiểm sốt bệnh hoại tử gan tụy cấp tính điều kiện thực địa thơng qua việc tầm sốt Vibrio tổng số V parahaemolyticus Theo dõi 11 ao nuôi tơm thẻ chân trắng thâm canh xã Dương Hịa, huyện Kiên Lương, tỉnh Kiên Giang Ao ni có diện tích từ 1.0003.000 m2, mật độ thả 100 con/m2 Theo dõi thu mẫu nước tôm để xác định Vibrio tổng số V parahaemolyticus theo định kỳ ngày/lần suốt chu kỳ nuôi 2.2 Phương pháp mô bệnh học Mẫu mô học cố định dung dịch Davidson’s với tỷ lệ mẫu vật hoá chất cố định 1:10 Mẫu xử lý theo phương pháp mô học truyền thống cắt lát mỏng từ 4-5mm nhuộm tiêu Hematoxylin Eosin (H&E) theo Lightner (1996) 2.3 Phương pháp nghiên cứu khả hồi phục tôm bệnh Thu mẫu tôm từ hai ao tôm thẻ Sóc Trăng có dấu hiệu bệnh nhẹ (Ao1&2) hai ao tơm thẻ có dấu hiệu bệnh nặng (Ao 3&4) để kiểm tra tình trạng hoại tử gan tụy Sau chuyển tơm từ ao phịng thí nghiệm ni bể kính chứa 70 lít nước biển có độ mặn 15%o thay 30-40% nước ngày Theo dõi tơm ni vịng 25 ngày, ghi nhận thu mẫu tôm trường hợp chết khuẩn lạc mọc đĩa cho thích hợp nằm khoảng 30-300 khuẩn lạc/đĩa Tổng số Vibrio mẫu nước (CFU/ml nước) xác định số khuẩn lạc trung bình từ đĩa thạch TCBS nồng độ x 10 x độ pha loãng Định lượng Vibrio tôm tiến hành tương tự, thay lấy 1ml mẫu nước lấy 1g gan tụy tiến hành pha loãng, cấy trường hợp mẫu nước Xác định diện Vibrio parahaemolyticus cách cấy mẫu nước, tôm môi trường chọn lọc Chromagar Trên loại mơi trường tìm thấy khuẩn lạc tím hoa cà đặc trưng V parahaemolyticus III KẾT QUẢ 3.1 Thời điểm tỷ lệ xuất hoại tử gan tụy tôm nuôi thâm canh Kết nghiên cứu bước đầu thời điểm xuất hoại tử gan tụy trang trại với quy mô lớn nhỏ khác cho thấy số 51 ao theo dõi ghi nhận trường hợp thu hoạch sớm có can thiệp kháng sinh, hóa chất diệt khuẩn, chất bổ trợ gan, vitamine, khống Đối với trang trại có quy mô lớn, 16 ao khảo sát ghi nhận 11 ao có hoại tử gan tụy (đồ thị 1) 2.4 Phương pháp xác định Vibrio tổng số V parahaemolyticus trường Tổng số Vibrio mẫu nước ao nuôi xác định trường phương pháp trải đĩa thạch TCBS Để xác định Vibrio tổng số nước ao ni trước hết pha lỗng mẫu nước muối sinh lý vô trùng để dãy nồng độ 10o, 10-1, 10-2 Lấy 100 µl mẫu từ nồng độ cấy đĩa thạch TCBS (mỗi nồng độ cấy đĩa) Trong điều kiện ao tơm khơng có tủ ấm để ủ đĩa thạch 28oC bảo quản đĩa nhiệt độ phòng 24 đếm khuẩn lạc mọc TCBS Số Đồ thị Kết mô học xác định thời điểm xuất hoại tử gan tuỵ tơm TẠP CHÍ NGHỀ CÁ SÔNG CỬU LONG - - THÁNG 10/2014 75 VIỆN NGHIÊN CỨU NI TRỒNG THỦY SẢN Trong số ao nghiên cứu theo dõi suốt chu kỳ nuôi cho thấy tượng hoại tử gan tụy xuất sớm ngày thứ 17 sau thả nuôi muộn ngày thứ 63 Hầu hết trường hợp phát hoại tử thu hoạch sớm Một số trường hợp kéo dài thời gian nuôi biện pháp can thiệp (chất bổ trợ gan, kích thích miễn dịch, kháng sinh,…) nhiên khơng trì đến cuối vụ nuôi mà phải thu hoạch sớm Đối với nhóm ao có tơm chết lúc thu mẫu ghi nhận 100% mẫu thu có dấu hiệu hoại tử gan tụy (15/15 mẫu) Thời gian xuất hoại tử từ 16-38 ngày tuổi Tất ao phải thu hoạch sau 2-3 ngày phát có hoại tử gan tụy (đồ thị 2) Qua khảo sát cho thấy giai đoạn tập trung nhiều tôm chết AHPND Đồ thị Kết mô học khảo sát hoại tử gan tuỵ mẫu tôm bệnh Đối với nhóm tơm chết kéo dài có tỷ lệ hoại tử thấp tôm chết thời điểm thu mẫu (đồ thị 3) Đồ thị Kết mô học xác định tỷ lệ hoại tử gan tuỵ nhóm tơm chết kéo dài có dấu hiệu hồi phục 76 TẠP CHÍ NGHỀ CÁ SÔNG CỬU LONG - - THÁNG 10/2014 VIỆN NGHIÊN CỨU NI TRỒNG THỦY SẢN 3.2 Kết nghiên cứu khả hồi phục bệnh hoại tử gan tuỵ cấp tính Mục đích nghiên cứu nhằm xác định khả hồi phục tôm bệnh chuyển từ ao ni phịng thí nghiệm Kết thu mẫu phân tích mơ bệnh thời điểm chuyển mẫu PTN cho thấy nguồn tôm không nhiễm MBV (Monodon Baculovirus), HPV (Hepatopancreas Parvoirus), YHCV Ao (240 con) Ao (240 con) (Yellow Head Complex Virus) WSSV (White Spot Syndrome Virus) Ao1, 2, & có dấu hiệu hoại tử gan tụy đặc trưng với tỷ lệ 10, 12, 89 32% Kết theo dõi phịng thí nghiệm vịng 25 ngày cho thấy tôm chết chủ yếu tập trung ngày đầu sau chuyển phịng thí nghiệm với ngun nhân sốc q trình vận chuyển Ao (240 con) Ao (120 con) Đồ thị Số cá thể chết nghiệm thức theo thời gian nuôi Một số thông tin liên quan đến ao nuôi sau: Ao 1: Xét nghiệm mẫu ngày ni thứ 18 có hoại tử gan tụy, ao ngừng nuôi vào ngày nuôi thứ 22 Tôm chuyển từ ao phịng thí nghiệm vào ngày nuôi thứ 18 cho thấy tôm khỏe sau 25 ngày nuôi, tỷ lệ chết không đáng kể (< 5%) Ao 2: Đến ngày ni thứ tơm có dấu hiệu đặc trưng hoại tử gan nhẹ ao nuôi mô bệnh học cho thấy bị hoại tử gan tụy chết ngày sau Giống tơm ao 1, đàn tôm ngày nuôi thứ chuyển phịng thí nghiệm cho tỷ lệ chết khơng đáng kể q trình chăm sóc Ao 3: Kết theo dõi mô bệnh học liên tục tuần đầu cho thấy tôm không bị hoại tử gan tụy phát có dấu hiệu mơ bệnh học hoại tử gan tụy đặc trưng 89% vào ngày nuôi thứ 27 (ngày ngừng nuôi ao) Kết theo dõi tơm ni phịng thí nghiệm cho thấy chết nhiều ngày (70%) sau giảm chết (đồ thị 4) Ao 4: Kết theo dõi mô bệnh học liên tục tuần đầu cho thấy tôm không bị hoại tử gan tụy Ao bị phát có dấu hiệu mô bệnh học hoại tử gan tụy đặc trưng 32% vào ngày nuôi thứ 27 Giống ao 3, tơm chuyển phịng thí nghiệm chết nhiều ngày TẠP CHÍ NGHỀ CÁ SÔNG CỬU LONG - - THÁNG 10/2014 77 VIỆN NGHIÊN CỨU NI TRỒNG THỦY SẢN Tất ao nuôi tôm chết bị hoại tử gan tụy cấp tính 3.3 Kết theo dõi bệnh hoại tử gan tụy cấp tính tơm ni phịng thí nghiệm ngồi ao Mục đích thí nghiệm theo dõi bệnh hoại tử gan tụy cấp tính nguồn tôm nuôi song song ao bể kính Tơm ni vận chuyển sống từ ao tôm (Ao1&2) huyện Trần Đề, tỉnh Sóc Trăng phịng thí nghiệm ni bể kính Số tơm bắt từ ao 125 con, tơm từ ao có tổng số 175 Đối với tôm nuôi ao: Theo dõi thu mẫu tôm định kỳ ngày/lần để xem diễn biến bệnh hoại tử gan tụy phân tích mơ học Kết phân tích mơ bệnh học mẫu thu định kỳ (Bảng 1) cho thấy nguồn mẫu thu định kỳ không nhiễm MBV, HPV, YHCV WSSV, tất mẫu thu định kỳ khơng có dấu hiệu hoại tử gan tụy đến tuần thứ Tuy nhiên, mẫu thu định kỳ tuần ao Ao có hoại tử gan tụy phải thu hoạch Ao không phát hoại tử gan tụy tuần thứ tuần thứ tôm chết hoại tử gan tụy phải thu hoạch Điều cho thấy diễn tiến bệnh hoại tử gan tụy cấp tính nhanh Bảng Kết phân tích mơ bệnh học thu mẫu định kỳ ao nuôi Tuần thu mẫu Ao1 Tuần Tuần Tuần Tuần Tuần Ao2 Tuần Tuần Tuần Tuần Tuần Tuần Kết phân tích mơ học MBV HPV WSSV (-) (-) (-) (-) (-) (-) (-) (-) (+) (-) (-) (-) (-) (-) (-) YHCV (-) (-) (-) (-) (-) KST (-) (+) (+) (+) (+) HT1 (-) (-) (-) (-) (-) HT2 (-) (-) (-) (-) (-) (-) (-) (-) (-) (-) (+) (+) (-) (-) (-) (-) (-) (-) (+) (+) (+) (+) (+) (-) (-) (-) (-) (-) (+) (-) (-) (-) (-) (-) (+) (-) (-) (-) (-) (-) (-) (-) (-) (-) (-) (-) (-) KST: ký sinh trùng; HT1: Hoại tử 1: bong tróc tế bào gan tụy; HT2: Hoại tử 2: có xuất thể granuloma Đối với tôm nuôi bể kính: Theo dõi thu mẫu định kỳ tuần lần (3 cá thể/ nghiệm thức) thu mẫu cá thể tơm yếu chết (nếu có) để phân tích mơ học Tơm ni bể kính theo dõi hàng ngày suốt tuần Kết cho thấy tỷ lệ chết tôm chuyển từ ao nói khơng q 10% sau tuần ni PTN Kết phân tích mơ học định kỳ q trình theo dõi khơng có dấu hiệu hoại tử gan tụy, không nhiễm mầm bệnh MBV, HPV, YHCV, WSSV, KST 78 3.4 Thực nghiệm giải pháp kiểm sốt bệnh hoại tử gan tụy cấp tính điều kiện thực địa thơng qua việc tầm sốt Vibrio tổng số V parahaemolyticus Việc tầm soát diện Vibrio môi trường nước ao nuôi suốt vụ nuôi (nhất tháng nuôi đầu tiên) cần thiết việc kiểm soát bệnh hoại tử gan tụy cấp tính Trên sở có biện pháp can thiệp kịp thời chất diệt khuẩn cấy vi TẠP CHÍ NGHỀ CÁ SÔNG CỬU LONG - - THÁNG 10/2014 VIỆN NGHIÊN CỨU NI TRỒNG THỦY SẢN sinh thích hợp Kết đồ thị cho thấy hiệu phần chất diệt khuẩn chế phẩm vi sinh việc kiểm soát Vibrio V parahaemolyticus nước ao nuôi Ở hầu hết trường hợp cho thấy mật độ Vibrio tổng số V parahaemolyticus giảm đáng kể sau cấy chế phẩm vi sinh Đồ thị Mật độ Vibrio nước ao nuôi trước diệt khuẩn, sau diệt khuẩn-trước cấy vi sinh sau cấy vi sinh Đồ thị Mật độ Vibrio parahaemolyticus nước ao nuôi trước diệt khuẩn, sau diệt khuẩntrước cấy vi sinh sau cấy vi sinh Cũng giống việc tầm soát diện Vibrio môi trường nước, kiểm tra Vibrio thể tôm nuôi cần thiết Trên sở dùng chất kháng khuẩn hay kháng sinh thích hợp cần thiết Kết đồ thị cho thấy hiệu phần việc dùng kháng sinh việc kiểm soát Vibrio V parahaemolyticus gan tụy tôm nuôi, mật độ Vibrio giảm sau sử dụng kháng sinh TẠP CHÍ NGHỀ CÁ SÔNG CỬU LONG - - THÁNG 10/2014 79 VIỆN NGHIÊN CỨU NUÔI TRỒNG THỦY SẢN Đồ thị Mật độ V parahaemolyticus gan tụy tôm nuôi trước sau sử dụng kháng sinh IV THẢO LUẬN Các kết nghiên cứu bệnh hoại tử năm 2011 2012 chưa thấy chứng tác nhân hữu sinh gây bệnh Giả thuyết nguyên nhân gây chết nghi ngờ ảnh hưởng độc tố nhiễm thứ phát vi khuẩn gây bệnh Độc tố đến từ tảo, từ thức ăn vi sinh vật tiết Dấu hiệu hoại tử gan quan gan tuỵ tương tự ghi nhận tôm tiếp xúc với độc tố aflatoxin B1 có tượng ức chế phân bào Theo Flegel (2012), nghiên cứu tôm bệnh thu từ vùng khác phát vi khuẩn thuộc giống Delftia Ralstonia Ngồi ra, tác giả cịn phát diện bacteriophage mẫu tôm bị hội chứng gan tuỵ cấp tính Tuy nhiên, chưa có kết luận cuối cần phải có kết từ các thí nghiệm kiểm chứng Othman (2012) nghiên cứu bệnh Malaysia cho hội chứng hoại tử gan tuỵ tơm liên quan đến lột xác, thiếu hụt khoáng chất ao ni lạm dụng hố chất chế phẩm vi sinh q trình ni Theo Lightner ctv., (2013) hội chứng hoại tử gan tụy cấp tính vi khuẩn Vibrio parahaemolyticus, vi khuẩn bị nhiễm 80 loại thể thực khuẩn (bacteriophage, virus ký sinh vi khuẩn) làm tăng cường độc lực gây chết tôm Vi khuẩn lây truyền qua đường miệng, sau chúng xâm nhập vào đường tiêu hóa tơm, sinh độc tố gây phá hủy mơ làm rối loạn chức gan tụy, quan tiêu hóa tơm Đối với ao tơm ni bệnh hoại tử gan tụy cấp tính chết kéo dài nhiều ngày hệ việc người nuôi dùng giải pháp can thiệp chủ yếu dùng loại kháng sinh khác Thực tế cho thấy việc sử dụng kháng sinh làm giảm có tác động tạm dừng chết với số lượng lớn khơng có tác động phục hồi chức gan Tơm chậm lớn, chết dần q trình nuôi dẫn đến sản lượng thấp thu hoạch Qua nghiên cứu cho thấy nguồn tôm tơm ni ao chết bệnh hoại tử gan tụy số tơm chuyển phịng thí nghiệm khơng chết AHPND tỷ lệ chết tích lũy không đáng kể sau tuần nuôi (không 10%) Điều cho thấy việc kiểm sốt tốt phịng thí nghiệm khơng làm bùng phát AHPND vai trị mơi trường ao ni làm ảnh hưởng lớn đến phát sinh AHPND TẠP CHÍ NGHỀ CÁ SÔNG CỬU LONG - - THÁNG 10/2014 VIỆN NGHIÊN CỨU NUÔI TRỒNG THỦY SẢN Theo Shrimp New International tháng 10/2014 với thông tin điều tra từ sở Thủy sản Thái Lan đưa khuyến cáo tơm giống thả tổng số Vibrio tơm post khơng qua 1.000 CFU/g. Trong số nhiều 100 CFU/g với khuẩn lạc xanh cịn lại 900 CFU/g khuẩn lạc vàng. V harveyi khơng phép có mặt Theo Pitogo (2012) đa dạng vi sinh vật ao nuôi giảm nhanh sau 2-3 tuần Từ ngày 20 -30 sau thả tơm tổng vi sinh vật nước có xu giảm tổng vi khuẩn Vibrio tổng vi khuẩn phát sáng có xu tăng cao Số lượng vi khuẩn phát sáng diện với mức độ thấp trước có tượng tơm chết ao tăng cao tôm bắt đầu chết ổn định thời gian dài (10 ngày kể từ tơm bắt đầu chết) Có trường hợp Vibrio harveyi diện môi trường mức