Cô lập một số hợp chất diterpene từ phân đoạn cao ethyl acetate cây euphorbia antiquorum l

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH _ Lâm Vũ Hồng Thơng CƠ LẬP MỘT SỐ HỢP CHẤT DITERPENE TỪ PHÂN ĐOẠN CAO ETHYL ACETATE CÂY EUPHORBIA ANTIQUORUM L KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP Thành phố Hồ Chí Minh-2020 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH _ Lâm Vũ Hồng Thơng CƠ LẬP MỘT SỐ HỢP CHẤT DITERPENE TỪ PHÂN ĐOẠN CAO ETHYL ACETATE CÂY EUPHORBIA ANTIQUORUM L Chun ngành: Hóa học hữu KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC: TS DƯƠNG THÚC HUY Thành phố Hồ Chí Minh-2020 LỜI CẢM ƠN Em xin trân trọng gửi lời cảm ơn sâu sắc đến TS Dương Thúc Huy, giảng viên hướng dẫn đề tài khóa luận tốt nghiệp Bằng nhiệt huyết tận tụy nhà giáo dục, thầy giúp đỡ em ngày vững bước đường chinh phục kiến thức lý thuyết nghiên cứu khoa học hóa học hữu Những quan tâm thầy nguồn động lực lớn để em tự nhắc nhở thân phải ln cố gắng phấn đấu để hồn thành khóa luận tốt nghiệp Em xin gửi lời cảm ơn chân thành đến thầy, khoa Hóa học Trường Đại học Sư phạm Thành phố Hồ Chí Minh truyền đạt mảng kiến thức lý thuyết, kỹ thực nghiệm suốt năm qua tạo điều kiện thuận lợi để giúp em hồn thành tốt khóa luận tốt nghiệp Em xin gửi lời tri ân đến anh, chị bạn phịng thí nghiệm Hóa Hữu giúp đỡ, hướng dẫn, chia sẻ kinh nghiệm học tập, nghiên cứu tạo động lực để em hồn thành khóa luận tốt nghiệp cách thành công Cuối cùng, em xin cảm ơn gia đình, bạn bè quan tâm giúp đỡ động viên em thời gian học tập nghiên cứu TP Hồ Chí Minh, tháng năm 2020 Lâm Vũ Hồng Thơng MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN DANH MỤC BẢNG DANH MỤC HÌNH ẢNH DANH MỤC SƠ ĐỒ DANH MỤC PHỤ LỤC LỜI MỞ ĐẦU CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN 1.1 Mô tả chi Euphorbia 1.2 Mô tả E antiquorum L 1.2.1 Các thông tin chung 1.2.2 Các nghiên cứu dược tính 1.2.3 Các nghiên cứu thành phần hóa học CHƯƠNG 2: THỰC NGHIỆM 12 2.1 Hóa chất, thiết bị, phương pháp tiến hành 12 2.1.1 Hóa chất 12 2.1.2 Thiết bị 12 2.1.3 Phương pháp tiến hành 12 2.2 Nguyên liệu 13 2.3 Điều chế cao ethyl acetate 13 2.4 Phân lập hợp chất TH1 TH2 cao EA 13 CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ 16 3.1 Khảo sát cấu trúc hợp chất TH1 16 3.2 Khảo sát cấu trúc hợp chất TH2 19 CHƯƠNG 4: KẾT LUẬN – KIẾN NGHỊ 22 4.1 Kết luận 22 4.2 Kiến nghị 22 TÀI LIỆU THAM KHẢO 23 PHỤ LỤC DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT VÀ KÍ HIỆU Hx n-hexane C Chloroform A Acetone EA Ethyl acetate Me Methanol H2O Nước cất NMR Nuclear Magnetic Resonance Spectroscopy Proton Nuclear Magnetic Resonance H-NMR 13 C-NMR Carbon-13 Nuclear Magnetic Resonance HMBC Heteronuclear Multiple Bond Coherence HSQC Heteronuclear Single Quantum Correlation HMQC Heteronuclear Multiple Quantum Correlation COSY H-H Correlation Spectroscopy NOESY Nuclear Overhauser Effect Spectroscopy HR-ESI-MS High Resolution-Electrospray Ionization-Mass Spectroscopy s singlet d doublet t triplet m multiplet J Hằng số ghép cặp DANH MỤC BẢNG Bảng 1.1 Một số hợp chất cô lập từ thân nhựa E antiquorum L Bảng 3.1 So sánh liệu phổ 1H-NMR 13C-NMR TH1 với ent-14[S],16α,17trihydroxyatisan-3-one 17 Bảng 3.2 So sánh liệu phổ 1H-NMR 13C-NMR hợp chất TH2 với 20-deoxy16-hydroxyingenol 21 DANH MỤC HÌNH ẢNH Hình 1.1 Một số lồi chi Euphorbia Hình 1.2 Một số hình ảnh E antiquorum L Hình 1.3 Cấu trúc số hợp chất hữu E antiquorum L Hình 2.1 Một số hình ảnh trình phân lập chất từ cao EA 14 Hình 3.1 Cấu trúc hóa học số tương quan HMBC, COSY, NOESY TH1 14 Hình 3.2 Cấu trúc hóa học số tương quan HMBC, COSY, NOESY TH2 20 Hình 4.1 Cấu trúc hóa học chất cô lập 22 DANH MỤC SƠ ĐỒ Sơ đồ Quy trình lập chất từ cao EA E antiquorum L 15 DANH MỤC PHỤ LỤC Phụ lục Phổ 1H-NMR hợp chất TH1 Phụ lục Phổ 13C-NMR hợp chất TH1 Phụ lục Phổ HSQC hợp chất TH1 Phụ lục Phổ HMBC hợp chất TH1 Phụ lục Phổ COSY hợp chất TH1 Phụ lục Phổ NOESY hợp chất TH1 Phụ lục Phổ HR-ESI-MS hợp chất TH2 Phụ lục Phổ 1H-NMR hợp chất TH2 Phụ lục Phổ 13C-NMR hợp chất TH2 Phụ lục 10 Phổ HSQC hợp chất TH2 Phụ lục 11 Phổ HMBC hợp chất TH2 Phụ lục 12 Phổ COSY hợp chất TH2 Phụ lục 13 Phổ NOESY hợp chất TH2 LỜI MỞ ĐẦU Việt Nam quốc gia nằm gần đường xích đạo, có khí hậu nhiệt đới gió mùa quanh năm nằm khối Indosinias vỏ Trái Đất bền vững từ lâu Do đặc tính độ ẩm cao, nhiệt độ phù hợp mà thời tiết vị trí địa lý nước ta tạo thành tổ hợp điều kiện sinh thái thuận lợi cho sinh sơi, phát triển của lồi thực vật Vì thế, Việt Nam trở thành vùng đất có thực vật vơ đa dạng phong phú, với 12.000 loài sinh sống (chưa kể rong, rêu, tảo, …) [1] Từ xa xưa, người dân biết tận dụng đặc điểm thuận lợi việc nghiên cứu dược tính loại thuốc tạo nên y học cổ truyền phát triển (thường gọi Nam Y) Với kiến thức y học cổ truyền hàng nghìn năm nguồn thảo dược vô phong phú đầy tiềm tạo động cho việc nghiên cứu thành phần hóa học hoạt tính sinh học hợp chất đó, nhằm mục đích phát chất có hoạt tính cao từ tiến hành tổng hợp nên hợp chất nhằm mục đích làm tăng tính đa dạng kho tàng y học giới Hiện nay, ngành hóa dược giới có tiến triển vượt bậc Cùng với kỹ thuật, công nghệ phân lập, tổng hợp mà nhiều loại dược phẩm có giá trị y học cao xuất Những loại dược phẩm góp vai trị quan trọng việc cải thiện sức khỏe an sinh cho nhân loại Gần đây, cơng trình nghiên cứu chi Euphorbia cho thấy dược tính chi đa dạng phong phú, hứa hẹn nguồn thảo dược đầy tiềm ngành y học Một số công dụng chi Euphorbia phần nhựa có nhiều tác dụng y học điển thuốc trị đau dày, tiểu đường, thuốc chống viêm, sát khuẩn [2] Trong đó, Euphorbia antiquorum L trở nên bật với nhiều chức chữa bệnh sử dụng đơn thuốc Đông Y nhiều quốc gia Đông Nam Á, Trung Quốc, Ấn Độ thành phần hóa học cho thấy diện số hợp chất diterpene có giá trị Tuy nhiên, cơng trình nghiên cứu cịn hạn chế Từ đó, xuất phát từ kết nghiên cứu giới bổ sung vào y dược học chất diterpene đối tượng E antiquorum L chọn đề tài khóa luận tốt nghiệp có khả hoạt động tiêu diệt mầm bệnh sinh vật ký sinh Thơng qua đánh giá độc tính tế bào ống nghiệm cho thấy khả chống lại tế bào ung thư cổ tử cung người [11] Năm 2018, Miao Dong cô lập số hợp chất thử nghiệm hoạt tính sinh học chất từ E antiquorum Kết đáng ngạc nhiên, chúng có tên Prostratin có khả kháng hoạt động virus HIV Điều tạo kỷ nguyên dược tính E antiquorum [12] 1.2.3 Các nghiên cứu thành phần hóa học Trên giới, có số cơng trình khoa học thành phần hóa học E antiquorum L Năm 1989, Min Zhi-Da cộng cô lập diterpene tên antiquorin (1) hai triterpene friedelan-3β-ol (2) β-taraxerol (3) [13] Cùng năm đó, Mohan B Gewali cộng lập bốn macrocylic diterpene 3,12-di-Οacetyl-8-O-benzoylingol (4); 3,12-di-O-acetyl-8-O-tigloylingol (5); 12-O-acetyl-8-O- tigloylingol (6) 8-O-tigloylingol (7) [14] Năm 1990, Mohan B Gewali cộng cô lập ba triterpene euphol 3-O-cinnamate (8), antiquol A (9) antiquol B (10), euphol (11), 24methylenecycloartanol (12), cycloeucalenol (13), (Z)-9-nonacosene (14), sitosterol (15), Sacetoxyphenol (16) [15] Năm 2002, Toshihiro Akihisa cộng cô lập triterpene từ nhựa antiquol C (17), antiquol B, euphorbol (18), lemmaphylla-7,21-dien-3β-ol (19), isohelianol (20), camelliol C (21) khảo sát hoạt tính sinh học hợp chất việc ức chế virus Epstein-Barr (EBV-EA) [16] Năm 2014, Wei-Yan Qi cộng cô lập 18 hợp chất diterpene (2239) với hợp chất biết từ trước (40-43) Một số hợp chất khảo sát hoạt động ức chế 1β-HSD1 (một loại enzim liên quan đến đái tháo đường loại 2) chuột [17] Năm 2016, Jiang hu cộng cô lập ba hợp chất neolignan 7S,8S4,9-dihydroxy-3,5,3’,9’-tetramethoxy-7-O-5’,8-O-4’-neolignan(44), 7S,8S-4,9-diacetyl- 3,3’,9’-trimethoxy-7-O-5’,8-O-4’-neolignan (45), 3’-hydroxycleomiscosin B (46) [18] Năm 2018, Miao Dong cộng cô lập chất 24,24-dimethoxy25,26,27-trinoreuphan-3β-ol (47), (24S)-24-hydroperoxyeupha-8,25-dien-3β-ol (48) khảo sát hoạt tính kháng HIV chúng trông môi trường ống nghiệm [12] Cùng thời điểm đó, Siritapetawee cộng lập galactose-lectin (49) khảo sát hoạt tính kháng khuẩn [19] Trong cơng trình nghiên cứu Wei-Yan Qi cộng phát chất quorumolides A-C (50-52) [20] Năm 2019, Yue Liang cộng cô lập thành công 18 diterpenoid (53-70) [21] Cùng năm đó, Lijun An cộng cô lập phân lập thêm 12 chất (71-82) từ thân E antiquorum Một số chất tiến hành khảo sát hoạt tính sinh học chống viêm người [22] Năm 2020, W J Yuan cộng cô lập thêm sáu diterpenoid euphonoid A-F (83-88).[23] Các hợp chất tự nhiên phân lập từ E antiquorum L thống kê bảng Bảng 1.1 Một số hợp chất cô lập từ thân nhựa E antiquorum L Tên hợp chất Antiquorin Friedelan-3-β-ol β-taraxerol 3,12-di-Ο-acetyl-8-O-benzoylingol 3,12-di-O-acetyl-8-O-tigloylingol 12-O-acetyl-8-O-tigloylingol 8-O-tigloylingol Euphol 3-O-cinnamate Antiquol A Antiquol B Euphol 24-methylenecycloartanol Cycloeucalenol (Z)-9-nonacosene Sitosterol S-acetoxyphenol Antiquol C Euphorbol lemmaphylla-7,21-dien-3β-ol Isohelianol Camelliol C Euphorantin A-R 3,12-diacetyl-7-angeloyl-8-methoxyingol 7S,8S-4,9-dihydroxy-3,5,3’,9’-tetramethoxy-7-O-5’,8-O-4’neolignan 7S,8S-4,9-diacetyl-3,3’,9’-trimethoxy-7-O-5’,8-O-4’neolignan 3’-hydroxycleomiscosin B 24,24-dimethoxy-25,26,27-trinoreuphan-3β-ol (24S)-24-hydroperoxyeupha-8,25-dien-3β-ol Galactose- lectin Quorumolides A Kí hiệu 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 2242 43 Tài liệu tham khảo [13] [14] [15] [16] [17] 44 45 46 47 48 49 50 [18] [12] [19] [20] Quorumolides B Quorumolides C 51 52 5361 Antiquorpene (A-I) (4R,5S,8S,9R,10S,13R,16S)-ent-16α,17-dihydroxy-19butyryloxykauran-3-one ent-3-oxokaurane-16α,17-diol Euphopilolide Eurifoloid G 17-hydroxyjolkinolide A Andaracopimaradienolal 3,12-di-O-acetyl-8-O-tigloylingol 12-O-acetylingol 3,8-ditiglate 12-O-acetyl-3-O-benzoylingol 8-tiglate Euphorin A-E 3,12-O-diacetyl-7-O-[(E)-2-methyl-2-butenoyl]-8,12-diepjing-ol 3,12-diacetyl-8-benzoylingol 12-O-acetyl-8-O-benzoylingol 3-tiglate ent-3,14-dioxo-16-atisane ent-(3α,5β,8α,9β,10α,12α)-3-hydroxyatis-16-en-14-one eurifoloid R (3β,11β)-3,11-dihydroxylanosta-8,24-dien-7-one Euphonoid A-F 62 63 64 65 66 67 68 69 70 7175 76 77 78 79 80 81 82 8388 [21] [22] [23] Hình 1.3 Cấu trúc số hợp chất hữu E antiquorum L Hình 1.3 Cấu trúc số hợp chất hữu E antiquorum L (tiếp) 10 Hình 1.3 Cấu trúc số hợp chất hữu E antiquorum L (tiếp) 11 CHƯƠNG 2: THỰC NGHIỆM 2.1 Hóa chất, thiết bị, phương pháp tiến hành 2.1.1 Hóa chất - Dung mơi hữu cơ: methanol, ethanol, n-hexane, ethyl acetate, chloroform, acetone - Silica gel 0.040–0.063 mm (Merck), 60 RP-18 F254S dùng cho sắc ký cột - Sắc ký mỏng loại DC–Alufolein 20×20, Kiesel gel 60 F254 (Merck) - Thuốc thử hình sắc ký mỏng: dung dịch H2SO4 15% + vanilin 2.1.2 Thiết bị - Cột sắc ký pha thường, pha đảo, sephadex LH-20 với kích thước khác - Máy quay chân không; - Cân điện tử số; - Đèn UV bước sóng 254 nm; - Máy cộng hưởng từ hạt nhân (Bruked Avance III) tần số 400 MHz phổ - H-NMR 100 MHz phổ 13C-NMR viện kiểm nghiệm thuốc Tp.HCM Máy đo phổ khối Bruker MicroTOF Q-II viện công nghệ Hóa học Tp.HCM 2.1.3 Phương pháp tiến hành - Cao EA thô điều chế phương pháp chiết lỏng – lỏng với dung mơi có độ phân cực tăng dần n-hexane, n-hexane:ethyl acetate (1:1), ethyl acetate - Để phân lập hợp chất cao EA, sử dụng kỹ thuật sắc ký cột (pha thường, pha đảo, sephadex LH-20) - Dự đoán cấu trúc hợp chất cô lập khối phổ, phổ cộng hưởng từ hạt nhân 1H-NMR, 13C-NMR, HSQC, HMBC, COSY, NOESY, MS hịa tan dung mơi CD3OD (Methanol-d4 với peak dung môi δH 4.87 δC 49.00) 12 2.2 Nguyên liệu Toàn E antiquorum L thu hái từ tỉnh Bình Thuận, Việt Nam vào tháng năm 2019 Sau đó, mẫu bảo quản vận chuyển phòng nghiên cứu hợp chất tự nhiên, Khoa Hoá học, trường Đại học Sư phạm Thành phố Hồ Chí Minh Mẫu định danh E antiquorum TS Phạm Văn Ngọt, Khoa Sinh học, trường Đại học Sư phạm Thành phố Hồ Chí Minh 2.3 Điều chế cao ethyl acetate Các phận Xương rồng có khối lượng kg thái nhỏ, phơi khơ sau ngâm ethanol nhiệt độ phòng thời gian thu cao tổng Lần lượt tiến hành chiết lỏng-lỏng Hx, Hx:EA (1:1), EA Phần dung dịch chiết từ EA đem lọc cô quay chân không, thu 180.7 gam cao EA 2.4 Phân lập hợp chất TH1 TH2 cao EA Thực sắc ký cột cao EA (180.7 g) thu với hệ dung môi giải ly Hx:EA (1:2) thu năm phân đoạn (A-E) Phân đoạn B C tiếp tục khảo sát để phân lập chất Thực sắc ký gel Sephadex LH-20 phân đoạn B (5.6 g) với dung môi giải ly C:Me (1:3) thu sáu phân đoạn (B1-B6) Tiến hành phân tách chất B3 (2.31 g) sắc ký cột sử dụng hệ dung môi giải ly Hx:C:EA:A:Me:H2O (170:10:70:20:1:0.1) thu năm phân đoạn (B6A-B6E) Tiến hành sắc ký pha đảo phân đoạn B3B (300 mg) với hệ dung môi giải ly Me:H2O (1:3) thu hợp chất TH1 (3.7 mg) Thực sắc ký gel Sephadex LH-20 với dung môi giải ly methanol phân đoạn C (20.3 g) thu năm phân đoạn (C1-C5) Tiến hành chạy sắc ký phân đoạn C1 (0.334 g) với dung môi giải ly Hx:EA (1:1.5), thu bốn phân đoạn (C1A-C1D) Thực sắc ký pha đảo phân đoạn C1D (50 mg) với dung môi giải ly Me:H2O (2:1) thu hợp chất TH2 (3.8 mg) 13 Hình 2.1 Một số hình ảnh trình phân lập chất từ cao EA E antiquorum L 14 Cao EA thô (180.7g) SKC Hx:EA (1:2) B (5.6 g) A (41.1 g) C (20.3 g) Sephadex LH-20 C:Me (1:3) B1 B2 (523 mg) (426 mg) B3 (2.31 g) B3B (300 mg) E (40.8 g) Sephadex LH-20 Me (100%) B6 B4 B5 (238 mg) (243 mg) (156 mg) SKC Hx:C:EA:A:Me:H2O (170:10:70:20:1:0.1) B3A (148 mg) D (12.3 g) B3C B3D B3E (201 mg) (605 mg) (333 mg) C1 (334 mg) C2 (1.45 g) C3 (4.18 g) SKC Hx:EA (1:1,5) C1A (47 mg) C1B (94 mg) C1C (33 mg) C1D (50 mg) SKC pha đảo Me: H2O (2:1) SKC pha đảo Me:H2O (1:3) TH2 (3.8 mg) TH1 (3.7 mg) Sơ đồ Quy trình lập chất từ cao EA E antiquorum L 15 C4 (6.20 g) C5 (1.97 g) CHƯƠNG 4: KẾT LUẬN – KIẾN NGHỊ 4.1 Kết luận Đề tài “Cô lập số hợp chất diterpene từ phân đoạn cao ethyl acetate Euphorbia antiquorum L.” thu kết sau: Sử dụng phương pháp chiết lỏng-lỏng kết hợp với kỹ thuật sắc ký cột cao EA lập hai chất có kí hiệu sau: TH1 (từ phân đoạn B3B) TH2 (từ phân đoạn C1D) Sử dụng phương pháp phổ nghiệm đối chiếu với tài liệu tham khảo có liên quan đưa cấu trúc đề nghị hợp chất sau: Hình 4.1 Cấu trúc hóa học chất lập Trong đó, hợp chất TH1 hợp chất tự nhiên lập thể hợp chất TH2 hợp chất tự nhiên 4.2 Kiến nghị Trong phạm vi khóa luận lập hai chất cao EA E antiquorum L Trong tương lai có đầy đủ điều kiện thuận lợi tiếp tục khảo sát phân đoạn khác cao EA tiến hành kiểm tra hoạt tính sinh học chúng với hy vọng tìm hợp chất có giá trị y học nhằm đóng góp phần vào kho tàng kiến thức nhân loại 22 TÀI LIỆU THAM KHẢO TÀI LIỆU TIẾNG VIỆT [1] Phạm Hoàng Hộ, Cây cỏ Việt Nam - T.1 Nhà xuất trẻ: Hà Nội, 1999 [2] Đỗ Tất Lợi, Những thuốc vị thuốc Việt Nam Nhà xuất Y học: Hà Nội, 2004 TÀI LIỆU TRANG WEB [3] (2019, Aug 20) Euphorbia PBI - Project Description [Online] Available: http://www.euphorbiaceae.org/pages/project.html TÀI LIỆU NƯỚC NGOÀI [4] G L Stebbins, and R D Hoogland, “Species diversity, ecology and evolution in a primitive Angiosperm genus: Hibbertia (Dilleniaceae), ” Plant Syst Evol, 1976, 125 (3): 139–154 [5] A Kumar, and D Saikia, “Euphorbia Antiquorum Linn: A Comprehensive Review of Ethnobotany, Phytochemistry and Pharmacology, ” J Anal Pharm Res, 2016, (4): 2–6 [6] P Deka, K K Nath, and S K Borthakur, “Ethoiatrical uses of Euphorbia antiquorum L and E ligularia Roxb in Assam, ” Indian J Tradit Knowl, 2008, (3): 466–468 [7] P Mag, T M Jyothi, K Prabhu, J E L S, and R S S, “PHCOG MAG: Research Article Hepatoprotective and antioxidant activity of Euphorbia antiquorum,” 2008; 4(13): 127–133 [8] W A P P de Silva, G K Manuweera, and S H P P Karunaratne, “Insecticidal activity of Euphorbia antiquorum L latex and its preliminary chemical analysis,” J Natl Sci Found Sri Lanka, 2008; 36(1): 15–23 [9] W T Hsieh, H Y Lin, J H Chen, Y H Kuo, M J Fan, R S C Wu, K C Wu , W G Wood, and J G Chung, “Latex of euphorbia antiquorum induces apoptosis in human cervical cancer cells via c-Jun N-terminal kinase activation and reactive oxygen species production,” Nutr Cancer, 2011; 63(8): 1339–1347 [10] V Madhavan, A Murali, D Lalitha, and S Yoganarasimhan, “Studies on 23 antihyperglycemic effect of Euphorbia antiquorum L root in diabetic rats,” J Intercult Ethnopharmacol, 2015; 4(4): 308–313 [11] C Rajkuberan, S Prabukumar, G Sathishkumar, A Wilson, K Ravindran, and S Sivaramakrishnan, “Facile synthesis of silver nanoparticles using Euphorbia antiquorum L latex extract and evaluation of their biomedical perspectives as anticancer agents,” J Saudi Chem Soc., 2017; 21(8): 911–919 [12] M Dong, X Q Chen, C H Chen, and R T Li, “Terpenes from Euphorbia antiquorum and Their in Vitro Anti-HIV Activity,” Chem Biodivers.,2018; 15(5): 1–7 [13] M Zhi-Da, M Mizuno, T Tanaka, M Iinuma, X Guang-Yi, and H Qing, “A diterpene from Euphorbia antiquorum,” Phytochemistry, 1989; 28(2): 553–555 [14] M B Gewali, M Hattori, Y Tezuka, T Kikuchi, and T Namba, “Four Ingol Type Diterpenes from Euphorbia antiquorum L,” Chem Pharm Bull., 1989; 37(6): 1547–1549 [15] M B Gewali, M Hattori, Y Tezuka, T Kikuchi, and T Namba, “Constituents of the latex of Euphorbia antiquorum,” Phytochemistry, 1990; 29(5): 1625–1628 [16] T Akihisa, E M K Wijeratne, H Tokuda, F Enjo, M Toriumi, Y Kimura, K Koike, T Nikaido, Y Tezuka, and H Nishino, “Eupha-7,9(11),24-trien-3β-ol (‘Antiquol C’) and other triterpenes from Euphorbia antiquorum latex and their inhibitory effects on Epstein-Barr virus activation,” J Nat Prod., 2002; 65(2): 158–162 [17] W Y Qi, W Y Zhang, Y Shen, Y Leng, K Gao, and J M Yue, “Ingol-type diterpenes from Euphorbia antiquorum with mouse 11β - Hydroxysteroid dehydrogenase type inhibition activity,” J Nat Prod., 2014; 77(6): 1452–1458 [18] J Hu, H Li, X Mao, and X Shi, “Neolignans from the ethanol extract of Euphorbia antiquorum,” Chem Nat Compd., 2016; 52(1): 48–51 [19] J Siritapetawee, W Limphirat, W Wongviriya, J Maneesan, and W Samosornsuk, “Isolation and characterization of a galactose-specific lectin (EantH) with antimicrobial activity from Euphorbia antiquorum L latex,” Int J 24 Biol Macromol., 2018; 120(0): 1846–1854 [20] W Y Qi, J X Zhao, W J Wei, K Gao, and J M Yue, “Quorumolides A-C, Three Cembranoids from Euphorbia antiquorum,” J Org Chem., 2018; 83(2): 1041–1045 [21] C Xie, D Lee, J Xu, L An, L Shuai, Z Shi, M Tuerhong, X Zhang; Y Ohizumi, and Y Guo, “Bioactive Diterpenoids from the Stems of Euphorbia antiquorum.” J Nat Prod 2019; 82(6): 1634–1644 [22] L An, Y Liang, X Yanga, H Wanga, J Zhangb, M Tuerhongc, D Lid, C Wange, D Leef, J Xua, L Shuaia, J Jina and Y Guo, “NO inhibitory diterpenoids as potential anti-inflammatory agents from Euphorbia antiquorum,” Bioorg Chem., 2019; 92(8): 103-237 [23] W J Yuan, W F Gao, J Y Zhao, Y Zhang, D Z Chen, S L Li, Y T Di, and X J Hao, “Diterpenes with potential treatment of vitiligo from the aerials parts of Euphorbia antiquorum L,” Fitoterapia, 2020; 144: 1-31 [24] A R Lal, R C Cambie, P S Rutledge, and P D Woodgate, “Ent-atisane diterpenes from Euphorbia fidjiana”,” 1990; 29(6): 1925–1935 [25] H Gotta, W Adolf, H J Opferkuch, and E Hecker, “On the Active Principles of the Euphorbiaceae, IXa Ingenane Type Diterpene Esters from Five Euphorbia species,” Zeitschrift fur Naturforsch - Sect B J Chem Sci., 1984; 39(5): 683– 694 [26] A Q Khan, and A Malik, “A new macrocyclic diterpene ester from the latex of Euphorbia tirucalli,” J Nat Prod., 1990; 53: 728–731 25 ... trình l? ??p chất từ cao EA E antiquorum L 15 C4 (6.20 g) C5 (1.97 g) CHƯƠNG 4: KẾT LUẬN – KIẾN NGHỊ 4.1 Kết luận Đề tài ? ?Cô l? ??p số hợp chất diterpene từ phân đoạn cao ethyl acetate Euphorbia antiquorum. .. 3,12-di-Ο-acetyl-8-O-benzoylingol 3,12-di-O-acetyl-8-O-tigloylingol 12-O-acetyl-8-O-tigloylingol 8-O-tigloylingol Euphol 3-O-cinnamate Antiquol A Antiquol B Euphol 24-methylenecycloartanol Cycloeucalenol (Z)-9-nonacosene... Các hợp chất tự nhiên phân l? ??p từ E antiquorum L thống kê bảng Bảng 1.1 Một số hợp chất cô l? ??p từ thân nhựa E antiquorum L Tên hợp chất Antiquorin Friedelan-3-β-ol β-taraxerol 3,12-di-Ο-acetyl-8-O-benzoylingol