Nghiên cứu sản xuất phân bón vi sinh dạng hạt có khả năng kích thích sinh trưởng từ vi khuẩn bacillus megaterium VACC 118 và chất mang được xử lý chiếu xạ

ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI TRƯỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN - NGUYỄN THỊ THU THỦY NGHIÊN CỨU SẢN XUẤT PHÂN BÓN VI SINH DẠNG HẠT CÓ KHẢ NĂNG KÍCH THÍCH SINH TRƯỞNG TỪ VI KHUẨN Bacillus megaterium VACC 118 VÀ CHẤT MANG ĐƯỢC XỬ LÝ CHIẾU XẠ LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC Hà Nội - 2019 ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI TRƯỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN - NGUYỄN THỊ THU THỦY NGHIÊN CỨU SẢN XUẤT PHÂN BÓN VI SINH DẠNG HẠT CÓ KHẢ NĂNG KÍCH THÍCH SINH TRƯỞNG TỪ VI KHUẨN Bacillus megaterium VACC 118 VÀ CHẤT MANG ĐƯỢC XỬ LÝ CHIẾU XẠ Chuyên ngành: Vi sinh vật học Mã số: 8420101.07 LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC: TS TRẦN MINH QUỲNH PGS TS BÙI THỊ VIỆT HÀ Hà Nội – 2019 LỜI CẢM ƠN Để hoàn thành luận văn này, xin trân trọng cảm ơn Trung tâm Chiếu xạ Hà Nội (Viện Năng lƣợng nguyên tử Việt Nam) tạo điều kiện để học tập thực đề tài nghiên cứu Tôi xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới TS Trần Minh Quỳnh tận tình bảo, hướng dẫn, giúp đỡ động viên tơi suốt q trình học tập, nghiên cứu thực luận văn Xin cảm ơn nghiên cứu viên phòng Nghiên cứu Công nghệ Bức xạ giúp đỡ thảo luận với tơi suốt q trình tiến hành thí nghiệm Tôi xin gửi lời cảm ơn sâu sắc tới PGS.TS Bùi Thị Việt Hà đồng hành trường Đại học Khoa học Tự nhiên Hà Nội, chia sẻ với kỹ năng, kinh nghiệm suốt q trình nghiên cứu góp ý cho tơi để hồn thành luận văn Tơi xin bày tỏ lịng biết ơn tới thầy, giáo thuộc Khoa Sinh học, Trường Đại học Khoa học Tự nhiên Hà Nội, đặc biệt thầy, cô giáo thuộc Bộ môn Vi sinh vật học truyền đạt cho kiến thức quý báu suốt thời gian học tập thực tập Cuối cùng, xin gửi lời cảm ơn đến gia đình, bạn bè, người tạo cho động lực điều kiện tốt để hoàn thành luận văn Luận văn thực với hỗ trợ kinh phí đề tài Khoa học Công nghệ cấp Nhà nước, mã số ĐTĐLCN 19/16 TS Trần Minh Quỳnh làm chủ nhiệm Hà Nội, ngày tháng năm 2019 Học viên Nguyễn Thị Thu Thủy DANH MỤC HÌNH Hình Cây phát sinh số loài thuộc chi Bacillus vào trình tự 16S rRNA [49] 10 Hình Bố trí hệ thống thiết bị tạo hạt phân bón 25 Hình Quy trình sản xuất phân bón vi sinh vật dạng hạt 26 Hình Hạt phân bón tạo từ thiết bị tạo hạt thành phẩm sau sấy khô 34 Hình Thí nghiệm đánh giá ảnh hưởng phân vi sinh đến cải bắp, cà chua cải củ (A) Khảo nghiệm đồng ruộng bắp cải, (B) Khảo nghiệm đồng ruộng cà chua, (C) Khảo nghiệm đồng ruộng cải củ 37 DANH MỤC BẢNG Bảng Một số nhóm VSV sử dụng sản xuất phân bón vi sinh .5 Bảng Thành phần hóa học rỉ đường mía [13] nước chiết đậu [12] 12 Bảng Nồng độ muối khoáng cần thiết vi khuẩn, nấm xạ khuẩn 13 Bảng Điều kiện nhân sinh khối B.megaterium VACC 118 20 Bảng Các môi trường nuôi cấy nhân sinh khối vi khuẩn 21 Bảng Hỗn hợp đệm pH pha môi trường nước chiết đậu 23 Bảng Ảnh hưởng môi trường thời gian lên men đến trình sinh trưởng phát triển B.megaterium VACC 118 28 Bảng Ảnh hưởng pH thời gian lên men đến trình sinh trưởng phát triển B.megaterium VACC 118 29 Bảng Ảnh hưởng nhiệt độ mơi trường lên q trình sinh trưởng phát triển chủng vi khuẩn sinh tổng hợp IAA 30 Bảng 10 Ảnh hưởng lượng khí cấp đến q trình sinh trưởng phát triển chủng vi khuẩn sinh tổng hợp IAA 31 Bảng 11 Ảnh hưởng tốc độ cánh khuấy đến trình sinh trưởng phát triển chủng vi khuẩn sinh tổng hợp IAA 32 Bảng 12 Ảnh hưởng tỷ lệ giống cấp đến trình sinh trưởng phát triển chủng vi khuẩn sinh tổng hợp IAA 33 Bảng 13 Chất lượng phân vi sinh vật dạng hạt 35 Bảng 14 Ảnh hưởng thời gian bảo quản đến mật độ tế bào hạt phân bón 35 Bảng 15 Tỉ lệ sống sót B.megaterium hạt phân bón sau thời gian bảo quản 36 Bảng 16 Ảnh hưởng phân vi sinh dạng hạt đến đặc điểm nông học cà chua 37 Bảng 17 Ảnh hưởng phân vi sinh dạng hạt đến đặc điểm nông học cải bắp 39 Bảng 18 Ảnh hưởng phân vi sinh dạng hạt đến đặc điểm cải củ .40 MỤC LỤC MỞ ĐẦU CHƢƠNG I: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Tổng quan phân bón vi sinh vật 1.1.1 Định nghĩa phân bón vi sinh vật 1.1.2 Phân loại phân bón vi sinh 1.1.3 Vai trị phân bón vi sinh với trồng 1.1.4 Hạn chế phân bón vi sinh 1.2 Vai trò vi khuẩn vùng rễ đất trồng sinh trưởng phát triển thực vật 1.3 Vi sinh vật sinh tổng hợp chất kích thích sinh trưởng thực vật Bacillus megaterium 1.4 Một số đặc điểm nuôi cấy vi sinh vật 10 1.4.1 Nguồn dinh dưỡng 10 1.4.2 Điều kiện nhiệt độ 14 1.4.3 Hàm lượng O2 14 1.4.4 pH môi trường 14 1.4.5 Ảnh hưởng tỷ lệ tiếp giống 15 1.5 Đặc điểm chất mang sử dụng sản xuất phân bón vi sinh 15 1.6 Bọc tế bào VSV chất mang nguồn gốc alginate 16 1.7 Xử lý chiếu xạ biến tính tinh bột sắn 16 1.8 Tính đề tài 17 1.9 Mục đích nghiên cứu 18 CHƢƠNG II: VẬT LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 20 2.1 Vật liệu 20 2.2 Thiết bị, dụng cụ sử dụng nghiên cứu 20 2.3 Môi trường nuôi cấy VSV sử dụng nghiên cứu .21 2.4 Phương pháp nghiên cứu 22 2.4.1 Hoạt hóa chủng B.megaterium VACC 118 22 2.4.2 Xác định điều kiện lên men B.megaterium VACC 118 phù hợp 22 2.4.2.1 Đánh giá ảnh hưởng môi trường thời gian lên men đến trình sinh trưởng phát triển B.megaterium VACC 118 22 2.4.2.2 Đánh giá ảnh hưởng pH mơi trường đến q trình sinh trưởng B.megaterium VACC 118 22 2.4.2.3 Đánh giá ảnh hưởng nhiệt độ lên men đến trình sinh trưởng B.megaterium VACC 118 23 2.4.2.4 Đánh giá ảnh hưởng lưu lượng cấp khí tốc độ khuấy đến q trình sinh trưởng B.megaterium VACC 118 23 2.4.2.5 Đánh giá ảnh hưởng tỉ lệ giống gốc đến trình sinh trưởng B.megaterium VACC 118 24 2.4.3 Tạo hạt phân bón vi sinh vật 24 2.4.4 Đánh giá chất lượng phân bón vi sinh dạng hạt 26 2.4.5 Đánh giá ảnh hưởng phân bón VSV rau 27 CHƢƠNG III: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 28 3.1 Xác định điều kiện lên men thích hợp cho chủng Bacillus megaterium VACC 118 đánh giá chất lượng sản phẩm phân bón vi sinh dạng hạt .28 3.1.1 3.1.1.1 Xác định điều kiện lên men B.megaterium VACC 118 thích hợp 28 Đánh giá ảnh hưởng mơi trường thời gian lên men đến q trình sinh trưởng B.megaterium VACC 118 28 3.1.1.2 Đánh giá ảnh hưởng pH mơi trường đến q trình sinh trưởng B.megaterium VACC 118 29 3.1.1.3 Đánh giá ảnh hưởng nhiệt độ mơi trường lên men đến q trình sinh trưởng B.megaterium VACC 118 30 3.1.1.4 Đánh giá ảnh hưởng lưu lượng cấp khí tốc độ khuấy lên men đến trình sinh trưởng B.megaterium VACC 118 31 3.1.1.5 Đánh giá ảnh hưởng tỉ lệ tiếp giống đến trình sinh trưởng B.megaterium VACC 118 33 3.1.2 Đánh giá chất lượng phân bón vi sinh dạng hạt 34 3.2 Đánh giá hiệu phân bón rau 37 CHƢƠNG IV: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 41 TÀI LIỆU THAM KHẢO TIẾNG VIỆT 42 TÀI LIỆU THAM KHẢO TIẾNG ANH 42 PGPR VOCs VSV SX BA ĐC TN1 TN2 LSD(0.05) CV 3.1.2 Đánh giá chất lƣợng phân bón vi sinh dạng hạt Phân vi sinh vật dạng hạt chứa bào tử B.megaterium tạo theo quy trình mơ tả Hình chất lượng sản phẩm phân bón đánh giá thơng qua tiêu kỹ thuật trình bày Bảng 13 Rõ ràng là, phân bón vi sinh vật dạng hạt tạo đáp ứng toàn yêu cầu hành pH, độ ẩm, mật độ tế bào độ tạp nhiễm Đặc biệt mật độ tế bào VSV hữu ích phân bón 10 VSV dạng hạt đạt 4,34×10 CFU/g, cao nhiều so với quy định hành (chỉ yêu cầu 10 CFU/g) Hình Hạt phân bón tạo từ thiết bị tạo hạt thành phẩm sau sấy khô Mật độ vi sinh vật cao giúp tăng thời gian bảo quản Hơn nữa, độ ẩm thấp của hạt phân bón giúp hạn chế tạp nhiễm kéo dài thời gian bảo quản So với nghiên cứu trước, mật độ B.megaterium phân bón 10 tương đối giống với mật độ A.brasillense (10 -10 11 CFU/g) phân bón dạng hạt bao alginate – tinh bột theo nghiên cứu Ivanova et al [29], nhiên kết lại cao nhiều so với nghiên cứu tương tự Nguyễn Thu Hà cộng mật độ tế bào đạt 8,6×10 CFU/g [2] Điều tạo nên khác biệt mật độ VSV khác biệt chất mang sử dụng để bao gói VSV 34 Bảng 13 Chất lượng phân vi sinh vật dạng hạt Chỉ tiêu kỹ thuật Độ ẩm (%) pH Mật độ tế bào (CFU/g) Salmonella (CFU/25g) E.coli (CFU/g) Tinh bột biến tính có khả tan tốt nước giảm liên kết hydro nội phân tử , nhờ phân tử tinh bột dễ dàng phân tán dung dịch tạo hạt [1] Bên cạnh đó, chiếu xạ gama làm tăng tính keo tinh bột biến tính Kết hạt phân bón có cấu trúc đồng có khối lượng chất khơ cao hơn, nhờ B.megaterium tồn phát triển tốt hạt phân bón sử dụng tổ hợp alginate – tinh bột biến tính tổ hợp alginate – tinh bột thông thường Bảng 14 Ảnh hưởng thời gian bảo quản đến mật độ tế bào hạt phân bón Thời gian ngâm (ngày) Nhìn vào Bảng 14, ta thấy, tỉ lệ trương hạt phân bón đạt 57% tương đương tăng kích thước gấp 1,57 lần sau 24 ngâm nước Khơng khối lượng hạt phân bón sau ngâm tăng lên mà đường kính hạt tăng lên hấp thu nước, nhờ VSV dễ dàng giải phóng khỏi hạt Trong ngày đầu tiên, lượng tế bào giải phóng 7,2×10 CFU/ml Lượng tế bào giải phóng 8 tiếp tục tăng lên tới 1,15×10 CFU/ml ngày thứ hai đạt 4,2×10 CFU/ml 35 sau tuần ngâm Kết gợi ý vi khuẩn không bị cố định chất mang, mà chúng di chuyển dễ dàng vào rễ sau bón vào đất Trên thực tế, tốc độ giải phóng VSV sống vào đất chậm nhiều hạt phân bón khơ cần phải có thời gian thu đủ ẩm trương nở Nghiên cứu thời hạn sử dụng phân bón, ảnh hưởng thời gian bảo quản đến mật độ tế bào VSV sống hạt hoạt lực chúng khảo sát theo thời gian kết trình bày Bảng 15 Bảng 15 Tỉ lệ sống sót B.megaterium hạt phân bón sau thời gian bảo quản Thời gian bảo quản (ngày) Như Bảng 15, mật độ tế bào VSV gần không thay đổi thời gian đầu trình bảo quản Sau tháng bảo quản điều kiện phịng thí 10 nghiệm, mật độ tế bào B megaterium giảm không đáng kể từ 4,34 ×10 10 xuống cịn 2,31×10 CFU/g CFU/g Sự suy giảm thấp so với nghiên cứu Nguyễn Thu Hà CS [2] cho thấy mật độ vi khuẩn B.megaterium giảm từ 8,6×10 xuống cịn 2,6×10 CFU/g Sự khác biệt chế phẩm phân bón họ chứa chủng VSV tạo chất mang gồm tinh bột sắn cám gạo mà không tạo hạt bảo quản Nghiên cứu Thirumal CS cho thấy mật độ tế bào VSV chất mang nguồn gốc alginate giảm không đáng kể tháng đầu bảo quản Số lượng tế bào VSV phân bón từ chất mang sodium alginate có giảm song trì mức 7×10 CFU/g sau tháng bảo quản [56] Điều gợi ý chất mang dạng hạt khâu mạch sodium alginate calcium chlorua cho phép tế bào VSV nói chung Bacillus nói riêng tồn lâu 36 3.2 Đánh giá hiệu phân bón rau A Hình Thí nghiệm đánh giá ảnh hưởng phân vi sinh đến cải bắp, cà chua cải củ (A) Khảo nghiệm đồng ruộng bắp cải, (B) Khảo nghiệm đồng ruộng cà chua, (C) Khảo nghiệm đồng ruộng cải củ Nghiên cứu ảnh hưởng phân vi sinh đến sinh trưởng phát triển cải bắp, cà chua cải củ (Hình 5) cho thấy rau chăm sóc phân bón khảo nghiệm có khả chống chịu tốt với điều kiện thời tiết, sinh trưởng phát triển tốt bị sâu bệnh công thức đối chứng Ảnh hưởng phân bón đến cấu thành suất xác định ba nhóm lấy (cải bắp), lấy (cà chua), lấy củ (cải củ) trình bày Bảng 16, 17 18 Bảng 16 Ảnh hưởng phân vi sinh dạng hạt đến đặc điểm nông học cà chua Công thức ĐC TN1 TN2 LSD0.05 CV 37 Cà chua đại diện cho nhóm thu quả, nên nghiên cứu tập trung khảo sát đặc điểm tỉ lệ đậu quả, sổ khối lượng trung bình (KLTB) Kết cho thấy, cà chua TN1 TN2 tỉ lệ đậu số cao so với mẫu đối chứng sử dụng NPK Tuy nhiên, TN2 sử dụng cơng thức 80% NPK + 20kg phân bón vi sinh cho có tỉ lệ đậu cao, khối lượng trung bình thấp so với cà chua trồng theo công thức TN1 (nền NPK + 20Kg phân bón) cà chua trồng lô đối chứng sử dụng NPK Mặc dù phân bón vi sinh có chứa B.megaterium có tác dụng kích thích sinh trưởng thực vật góp phần gia tăng tỉ lệ đậu số lượng quả, nhiên để gia tăng chất lượng quả, yếu tố đa lượng NPK khơng thể thiếu Sự gia tăng số đặc tính nơng học cà chua sử dụng phân bón vi sinh dạng hạt không nhờ khả tổng hợp chất kích thích sinh trưởng thực vật, mà khả kháng bệnh thường gặp cà chua vi khuẩn B.megaterium có hạt phân bón Theo nghiên cứu Abdel-monaim cộng năm 2014, nhóm vi sinh vật vùng rễ, có B.megaterium góp phần khống chế bệnh cà chua gây nấm Fusarium oxysporum f sp Lycopersici Khơng B.megaterium cịn kích thích sinh trưởng cây, gia tăng số lượng (số lượng cây) chất lượng cà chua (màu sắc quả, đường kính quả, độ cứng quả, khối lượng quả, tổng chất rắn hòa tan quả) khảo sát hai vụ 20102011 2011-2012 [4] B.megaterium số VSV khác thuộc nhóm Bacillus chứng minh khả khống chế số bệnh thông thường cà chua như: bệnh mốc trắng rễ gây Sclerotinia sclerotiorum [47], bệnh tuyến trùng nút gây giun trịn kí sinh thực vật Meloidogyne incognita [28], bệnh héo gây vi khuẩn Ralstonia solanacearum vài bệnh khác [45] Do vậy, cải thiện suất cà chua sử dụng phân bón vi sinh dạng hạt chứa B.megaterium thí nghiệm chúng tơi hồn tồn giải thích phù hợp với kết nghiên cứu số tác giả khác 38 Bảng 17 Ảnh hưởng phân vi sinh dạng hạt đến đặc điểm nông học cải bắp Công Tỉ lệ thức ĐC TN1 TN2 LSD0.05 CV Ảnh hưởng phân bón lên phát triển mẫu bắp cải mô tả bảng 18 Kết rằng, suất bắp cải tăng lên bón kết hợp phân bón vi sinh dạnh hạt NPK thay bón riêng NPK (Mẫu ĐC) Việc sử dụng phân bón vi sinh khơng cung cấp dinh dưỡng mà cung cấp phyto-hormone giúp kích thích sinh trưởng thực vật, nhờ mà suất cải bắp tăng lên 13,07% so với mẫu đối chứng (ĐC) Với trường hợp giảm 20% lượng NPK nền, suất cải bắp tăng 12,36% so với mẫu đối chứng Theo nghiên cứu Abou cộng năm 2018 bắp cải vụ 20132014 2014-2015, việc sử dụng phân bón vi sinh bổ sung Bacillus silicates vừa cải thiện suất bắp cải, vừa giảm lượng kali cần cung cấp cho mà giữ suất tốt [5] Khơng vậy, nhiều lồi thuộc chi Bacillus chứng minh khả hỗ trợ kháng bệnh bắp cải bệnh đen rễ gây Xanthomonas campestris pv Campestris (Xcc) [42] Khả kích thích sinh trưởng cải thiện hàm lượng dinh dưỡng bắp cải B.megaterium thể rõ nghiên cứu Turan cộng năm 2014 [57] Kết cho thấy việc ngâm hạt cải bắp với B.megaterium strain TV-91C lắc 80 rpm, giờ, 28°C trước gieo gia tăng đáng kể độ tươi, khối lượng khô thân khối lượng rễ với tỉ lệ tăng 32.9%; 22.6% 16% Sự gia tăng cho kết tương tự khảo sát sử dụng phân bón dạng hạt bổ sung B.megaterium bắp cải 39 Bảng 18 Ảnh hưởng phân vi sinh dạng hạt đến đặc điểm cải củ Công thức ĐC TN1 TN2 LSD0.05 CV Cải củ đại diện nhóm lấy củ, hiệu tác động phân bón vi sinh tập trung khảo sát đặc điểm chiều dài củ, đường kính củ khối lượng trung bình củ Từ kết Bảng 17 cho thấy phân bón vi sinh giúp cải thiện đặc điểm nông học củ so với sử 100% NPK Tóm lại, qua khảo sát sơ ảnh hưởng phân bón vi sinh dạng hạt đến phát triển số loại rau đại diện cho dòng rau cho lá, cho cho củ, việc bổ sung phân bón vi sinh dạng hạt làm cải thiện nhiều đặc tính nơng học quan trọng, có giá trị kinh tế so với lô đối chứng (sử dụng 100% NPK không sử dụng phân VSV) Đặc biệt, bắp cải, suất tăng 13,07% so với lô sử dụng NPK Đáng ý việc bón phân vi sinh cho bắp cải giảm lượng phân bón vơ mà đạt suất cao tới 12.63% so với lô đối chứng 40 CHƢƠNG IV: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ KẾT LUẬN Đã khảo sát xác định số thông số phù hợp cho lên men B megaterium VACC 118 quy mô pilot sau: môi trường lên men phù hợp nước chiết đậu pH = 7,0, tỷ lệ cấp giống cấp 3%, nhiệt độ môi trường lên men (tº = 30°C), lượng khí cấp 0,75 lít khơng khí/lít mơi trường/phút, tốc độ cánh khuấy 300 vòng/phút, thời gian lên men 48 Đã nghiên cứu tiêu chất lượng phân bón vi sinh sau: pH = 10 5,7; độ ẩm 9,4%; mật độ VSV hữu ích phân bón đạt 4,34×10 CFU/g, khơng tạp nhiễm E coli, Salmonella Hầu hết VSV hạt giải phóng vào dung dịch ngày với mật độ VSV đạt 4.2×10 CFU/ml dịch ngâm Kết chứng minh mật độ B megaterium hạt phân bón thay đổi không đáng kể 10 sau tháng bảo quản điều kiện phịng thí nghiệm từ 4,34×10 10 2,31×10 CFU/g xuống CFU/g Đã đánh giá sơ hiệu phân bón vi sinh rau Sự kết hợp sử dụng phân bón vi sinh dạng hạt phân NPK giúp cải thiện đáng kể suất đặc điểm nơng học nhóm rau lấy (cà chua), lấy củ (củ cải), lấy (bắp cải) Bằng cách sử dụng phân bón vi sinh dạng hạt kết hợp 80% lượng phân vơ NPK theo khuyến nghị suất bắp cải tăng 12.63% so với mẫu đối chứng sử dụng 100% NPK KIẾN NGHỊ Tiếp tục thực khảo sát sâu hiệu cải thiện suất phân bón vi sinh dạng hạt lên cà chua cải củ Mở rộng thêm thí nghiệm đồng ruộng nhiều khu vực sinh thái khác để làm rõ hiệu phân bón vi sinh dạng hạt lên trồng 41 TÀI LIỆU THAM KHẢO TIẾNG VIỆT Trần Xuân An, Nguyễn Văn Bính, Nguyễn Thị Hằng, Lê Thị Hiền, Trần Minh Quỳnh (2017), Characterization of cassava starch modified by gamma irradiation, The No.12 The Vietnam conference on Nuclear Science and Technology, Nha Trang, pp 208 Nguyễn Thu Hà (2016), Nghiên cứu sản xuất chế phẩm vi sinh vật cho lạc đất cát biển tỉnh Nghệ An Bình Định, Hội thảo quốc gia Khoa học Cây trồng lần thứ hai, Viện Khoa học Nông nghiệp Việt nam, pp 11241131 TCVN 10784-2015, Bộ Khoa học Công nghệ (2015), Vi sinh vật – Xác định khả sinh tổng hợp axit 3-indol-acetic (IAA), TCTC-ĐL-CL, Bộ KH&CN TÀI LIỆU THAM KHẢO TIẾNG ANH Abdel-monaim, A.F., B.A Abdel-gaid, and A.E.-m.A El-morsy (2012), "Efficacy of rhizobacteria and humic acid for controlling Fusarium wilt disease and improvement of plant growth, quantitative and qualitative parameters in tomato", International Journal Of Phytopathology, 1(1), pp 39-48 Abou El Magd M.M., Z.M.F., Abo Sedera S.A (2018), "Bio-fertilization and foliar application of Milagro bio-stimulant in growth, head yield and quality as well as mineral K requirements of Chinese cabbage", Middle East Journal of Agriculture Research, 7(4), pp 1310-1322 Bary, A (1884), Vergleichende morphologie und biologie der pilze, mycetozoen und bacterien Bashan, Y., J.-P Hernandez, L.A Leyva, and M Bacilio (2002), "Alginate microbeads as inoculant carriers for plant growth-promoting bacteria", Biology and Fertility of Soils, 35(5), pp 359-368 42 Beneduzi, A., D Peres, P.B da Costa, M.H.B Zanettini, and L.M.P Passaglia (2008), "Genetic and phenotypic diversity of plant-growthpromoting bacilli isolated from wheat fields in southern Brazil", Research in Microbiology, 159(4), pp 244-250 Benizri, E., E Baudoin, and A Guckert (2001), "Root colonization by inoculated plant growth-promoting rhizobacteria", Biocontrol science and technology, 11(5), pp 557-574 10 Bhattacharjee, R and U Dey (2014), "Biofertilizer, a way towards organic agriculture: A review", African Journal of Microbiology Research, 8(24), pp 2332-2343 11 Bhattacharyya, P.N and D.K Jha (2012), "Plant growth-promoting rhizobacteria (PGPR): emergence in agriculture", World Journal of Microbiology and Biotechnology, 28(4), pp 1327-1350 12 Bhatty, R (1974), "Chemical composition of some faba bean cultivars", Canadian Journal of Plant Science, 54(2), pp 413-421 13 Binkley, W.W and M Wolform(1953), Composition of Came Juce and Cane Final Molasses,Advances in carbohydrate chemistry pp 291-314 14 Bloemberg, G.V., A.H Wijfjes, G.E Lamers, N Stuurman, and B.J Lugtenberg (2000), "Simultaneous imaging of Pseudomonas fluorescens WCS365 populations expressing three different autofluorescent proteins in the rhizosphere: new perspectives for studying microbial communities", Molecular Plant-Microbe Interactions, 13(11), pp 1170-1176 15 Board, N (2004), The complete technology book on bio-fertilizer and organic farming 16 Chakraborty, U., B Chakraborty, and M Basnet (2006), "Plant growth promotion and induction of resistance in Camellia sinensis by Bacillus megaterium", Journal of basic microbiology, 46(3), pp 186-195 43 17 Chang, C.-H and S.-S Yang (2009), "Thermo-tolerant phosphatesolubilizing microbes for multi-functional biofertilizer preparation", Bioresource Technology, 100(4), pp 1648-1658 18 Choudhury, A and I Kennedy (2004), "Prospects and potentials for systems of biological nitrogen fixation in sustainable rice production", Biology and Fertility of Soils, 39(4), pp 219-227 19 Chung, H.-J and Q Liu (2010), "Molecular structure and physicochemical properties of potato and bean starches as affected by gamma-irradiation", International Journal of Biological Macromolecules, 47(2), pp 214-222 20 Clarke, N.A (1952), "Studies on the host-virus relationship in a lysogenic strain of Bacillus megaterium II: The Growth of Bacillus megaterium in Synthetic Medium 1", Journal of bacteriology, 63(2), pp 187 21 De Freitas, J., M Banerjee, and J Germida (1997), "Phosphate-solubilizing rhizobacteria enhance the growth and yield but not phosphorus uptake of canola (Brassica napus L.)", Biology and Fertility of Soils, 24(4), pp 358364 22 Deshwal, V., P Pandey, S Kang, and D Maheshwari (2003), "Rhizobia as a biological control agent against soil borne plant pathogenic fungi" 23 Doi, R.H (1992), Biology of Bacilli: applications to industry 24 Dommergues, Y., H.G Diem, and C Divies (1979), "Polyacrylamideentrapped Rhizobium as an inoculant for legumes", Appl Environ Microbiol., 37(4), pp 779-781 25 Evelyne, R., A LANOIS, M.J Warren, A Rambach, and C THERMES (1998), "Cobalamin (vitamin B12) biosynthesis: identification and characterization of a Bacillus megaterium cobI operon", Biochemical Journal, 335(1), pp 159-166 44 26 Fages, J (1990), "An optimized process for manufacturing anAzospirillum inoculant for crops", Applied microbiology and biotechnology, 32(4), pp 473-478 27 Haque A., B.S.K., Ali M., Robbani M (2015), "Yield and yield attributes of cabbage (Brassica oleracea var capatala L.) as influenced by soil organic amendments", Basic Research Jourrnal of Agricultural Review, 4(12), pp 339-344 28 Huang, Y., C Xu, L Ma, K Zhang, C Duan, and M Mo (2010), "Characterisation of volatiles produced from Bacillus megaterium YFM3 25 and their nematicidal activity against Meloidogyne incognita", European Journal of Plant Pathology, 126(3), pp 417-422 29 Ivanova, E., E Teunou, and D Poncelet Alginate based macrocapsules as inoculants carriers for production of nitrogen biofertilizers in Proceedings of the Balkan Conference of Biology 2005 30 Jha, P.N., G Gupta, P Jha, and R Mehrotra (2013), "Association of rhizospheric/endophytic bacteria with plants: a potential gateway to sustainable agriculture", Greener Journal of Agricultural Sciences, 3(2), pp 73-84 31 Ju, I., B Wj, S Md, O Ia, and E Oj (2018), "A review: Biofertilizer-A key player in enhancing soil fertility and crop productivity", Journal of Microbiology and Biotechnology Reports, 2(2), pp 22-28 32 Kim, I., Y Baek, and Y Yoon (1996), "Effects of dehydration media and immobilization in calcium-alginate on the survival of lactobacillus casei and Bifidobacterium bifidum" 33 Kloepper, J (1992), "Plant growth-promoting rhizobacteria as biological control agents", Soil microbial ecology: applications in agricultural and environmental management., pp 255-274 45 34 Kloepper, J.W Plant growth-promoting rhizobacteria on radishes in Proc of the 4th Internet Conf on Plant Pathogenic Bacter, Station de Pathologie Vegetale et Phytobacteriologie, INRA, Angers, France, 1978 1978 35 Lai, S.-P., K Finney, and M Milner (1959), "Treatment of wheat with ionizing radiations Oxidative, physical, and biochemical changes", Cereal Chemistry, 36, pp 401-411 36 Leloup, V., P Colonna, and A Buleon (1991), "Influence of amyloseamylopectin ratio on gel properties", Journal of Cereal Science, 13(1), pp 113 37 Lim, S.T., J.L Jane, S Rajagopalan, and P.A Seib (1992), "Effect of starch granule size on physical properties of starch‐filled polyethylene film", Biotechnology Progress, 8(1), pp 51-57 38 Lugtenberg, B.J., L Dekkers, and G.V Bloemberg (2001), "Molecular determinants of rhizosphere colonization by Pseudomonas", Annual review of phytopathology, 39(1), pp 461-490 39 Madigan, M.T., D.P Clark, D Stahl, and J.M Martinko (2010), Brock biology of microorganisms 13th edition 40 Mahimaraja, S., P Dooraisamy, A Lakshmanan, G Rajannah, C Udayasoorian, and S Natarajan (2008), "Composting technology and organic waste utilization", Journal of Science, 1(3), pp 332-560 41 Mancinelli, R.L and C.P McKAY (1983), "Effects of nitric oxide and nitrogen dioxide on bacterial growth", Appl Environ Microbiol., 46(1), pp 198-202 42 Massomo, S., C.N Mortensen, R Mabagala, M.A Newman, and J Hockenhull (2004), "Biological control of black rot (Xanthomonas campestris pv campestris) of cabbage in Tanzania with Bacillus strains", Journal of Phytopathology, 152(2), pp 98-105 46 43 Mishra, B and S Dadhick, Methodology of nitrogen bio-fertilizer production unpublished B Sc 2010, Thesis, Department of Molecular and Biotechnology, RCA Udaipur 44 Mohammadi, K and Y Sohrabi (2012), "Bacterial biofertilizers for sustainable crop production: a review", J Agric Biol Sci, 7, pp 307-316 45 Nguyen, M and S Ranamukhaarachchi (2010), "Soil-borne antagonists for biological control of bacterial wilt disease caused by Ralstonia solanacearum in tomato and pepper", Journal of Plant Pathology, pp 395-405 46 Nussinovitch, A (2010), Polymer macro-and micro-gel beads: fundamentals and applications 47 Ouhaibi-Ben Abdeljalil, N., J Vallance, J Gerbore, P Rey, and M DaamiRemadi (2016), "Bio-suppression of Sclerotinia stem rot of tomato and biostimulation of plant growth using tomato-associated rhizobacteria", J Plant Pathol Microbiol, 7(331), pp 48 Parmar, P and S Sindhu (2013), "Potassium solubilization by rhizosphere bacteria: influence of nutritional and environmental conditions", J Microbiol Res, 3(1), pp 25-31 49 Priest, F.G.(1993), Systematics and ecology of Bacillus,Bacillus subtilis and other Gram-positive bacteria pp 3-16 50 Rodr guez, H and R Fraga (1999), Phosphate solubilizing bacteria and their role in plant growth promotion", Biotechnology advances, 17(4-5), pp 319339 51 Rygus, T., A Scheler, R Allmansberger, and W Hillen (1991), "Molecular cloning, structure, promoters and regulatory elements for transcription of the Bacillus megaterium encoded regulon for xylose utilization", Archives of microbiology, 155(6), pp 535-542 47 52 Saharan, B and V Nehra (2011), "Plant growth promoting rhizobacteria: a critical review", Life Sci Med Res, 21(1), pp 30 53 Siu, R and J Sinden (1951), "Effects of pH, temperature, and mineral nutrition on cellulolytic fungi", American Journal of Botany, pp 284-290 54 Somasegaran, P and H Springer, Carrier materials used in biofertilizer making 1994, Nature publisher’s 55 Swathi, V., The use and benefits of bio-fertilizer and biochar on agricultural soils” unpublished B Sc 2010, Thesis, Department of Chemical and Biological Engineering, Chalmers 56 Thirumal, G., R.S Reddy, S Triveni, K Damodarachari, and K Bhavya (2017), "Evaluate the Shelf Life of Rhizobium Carrier Based Biofertilizer Stored at Different Temperatures at Different Intervals", Int J Curr Microbiol App Sci, 6(7), pp 753-759 57 Turan, M., M Ekinci, E Yildirim, A GÜNEŞ, K KARAGÖZ, R Kotan, and A Dursun (2014), "Plant growth-promoting rhizobacteria improved growth, nutrient, and hormone content of cabbage (Brassica oleracea) seedlings", Turkish Journal of Agriculture and Forestry, 38(3), pp 327-333 58 Vessey, J.K (2003), "Plant growth promoting rhizobacteria as biofertilizers", Plant and soil, 255(2), pp 571-586 59 Zahran, H.H (1999), "Rhizobium-legume symbiosis and nitrogen fixation under severe conditions and in an arid climate", Microbiol Mol Biol Rev., 63(4), pp 968-989 60 Zhang, H., X Xie, M.S Kim, D.A Kornyeyev, S Holaday, and P.W Paré (2008), "Soil bacteria augment Arabidopsis photosynthesis by decreasing glucose sensing and abscisic acid levels in planta", The Plant Journal, 56(2), pp 264-273 48 ... THU THỦY NGHIÊN CỨU SẢN XUẤT PHÂN BÓN VI SINH DẠNG HẠT CÓ KHẢ NĂNG KÍCH THÍCH SINH TRƯỞNG TỪ VI KHUẨN Bacillus megaterium VACC 118 VÀ CHẤT MANG ĐƯỢC XỬ LÝ CHIẾU XẠ Chuyên ngành: Vi sinh vật học... kích thích sinh trưởng từ vi khuẩn Bacillus megaterium VACC 118 chất mang xử lý chiếu xạ? ?? CHƢƠNG I: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Tổng quan phân bón vi sinh vật 1.1.1 Định nghĩa phân bón vi sinh vật Phân. .. sử dụng phân bón vi sinh dạng hạt khơng nhờ khả tổng hợp chất kích thích sinh trưởng thực vật, mà khả kháng bệnh thường gặp cà chua vi khuẩn B .megaterium có hạt phân bón Theo nghiên cứu Abdel-monaim