Nghiên cứu tổng hợp các hợp chất lai của một số triterpenoid có chứa nhóm benzamide và hydroxamate tt

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ VIỆT NAM HỌC VIỆN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ ĐINH THỊ CÚC TÓM TẮT LUẬN ÁN TIẾN SĨ NGHIÊN CỨU TỔNG HỢP CÁC HỢP CHẤT LAI CỦA MỘT SỐ TRITERPENOID CÓ CHỨA NHÓM BENZAMIDE VÀ HYDROXAMATE Chuyên ngành : Hóa hữu Mã số : 9.44.01.14 HÀ NỘI – 2020 Cơng trình hồn thành Viện Hóa học- Viện Hàn lâm Khoa học Cơng nghệ Việt nam  Người hướng dẫn khoa học: Hướng dẫn 1: GS TS Nguyễn Văn Tuyến Hướng dẫn 2: TS Lê Nhật Thùy Giang Phản biện 1: Phản biện 2: Phản biện 3: Luận án bảo vệ trước Hội đồng chấm luận án tiến sĩ, Học viện Khoa học Công nghệ - Viện Hàn lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam Số 18 - Hoàng Quốc Việt, Cầu Giấy, Hà Nội Vào hồi … ngày tháng năm 201 A GIỚI THIỆU VỀ LUẬN ÁN Tính cấp thiết, ý nghĩa khoa học thực tiễn đề tài luận án Ung thư bệnh đe dọa thế giới Tồn cầu ước tính có 8,2 triệu người chết ung thư vào năm 2012, bệnh ung thư phổi (ung thư phế quản khí quản) tăng đáng kể nên trở thành nguyên nhân tử vong đứng hàng thứ năm 2012 giết chết 1,1 triệu nam giới 0,5 triệu phụ nữ Hiện nay, thuốc có cấu trúc lai ngày nhà khoa học quan tâm nghiên cứu tổng hợp nhằm tạo hợp chất lai có hoạt tính sinh học cao vượt trội so với chất ban đầu Việc kết hợp hợp phần có hoạt tính sinh học để lai tạo thành cấu trúc với hoạt tính lý thú hướng nghiên cứu thu hút ý nhiều nhà khoa học Triterpenoid nhóm hợp chất tự nhiên dẫn xuất nhận quan tâm nghiên cứu đáng kể nhà khoa học năm gần Nhiều hợp chất tritecpenoid betulin, betulinic acid, ursolic acid, oleanolic acid công bố có hoạt tính chống HIV, kháng khuẩn, kháng nấm, chống viêm chống ung thư Bên cạnh đó, hợp chất benzamide MS-275, MGCD0103 hợp chất có hoạt tính sinh học lý thú, Cục quản lý thực phẩm dược phẩm Mỹ (US-FDA) phê duyệt điều trị tạng đặc, ung thư bạch cầu, u hắc sắc tố ác tính di giai đoạn muộn [7-11] Các hợp chất hydroxamic vorinostat hay gọi zolinza (SAHA) FDA phê duyệt vào năm 2006 điều trị u lympho da tế bào T, trichosatin A (TSA) belinostat (PXD-101) sử dụng điều trị tặng đặc ung thư máu, panobinostat (LBH-589) điều trị tạng đặc, AML, ALL, MDS [12-16] Tuy nhiên, hợp chất lai triterpenoid có chứa nhóm benzamide hydroxamate chưa nghiên cứu nhiều Hướng nghiên cứu tổng hợp hợp chất lai triterpenoid có chứa nhóm benzamide, nhóm hydroxamate thử hoạt tính gây độc tế bào ung thư nhằm tìm kiếm hợp chất có hoạt tính chống ung thư hướng nghiên cứu Xuất phát từ ý tưởng nên chọn đề tài: ‘‘Nghiên cứu tổng hợp hợp chất lai số triterpenoid có chứa nhóm benzamide hydroxamate ” vấn đề mới, lý thú có ý nghĩa khoa học thực tiễn cao 2.Mục tiêu luận án Nghiên cứu tổng hợp hợp chất lai số triterpenoid có chứa nhóm benzamide nhóm hydroxamate nhằm tìm kiếm hợp chất lai có hoạt tính sinh học cao, làm sở khoa học cho nghiên cứu tiếp theo để tạo thuốc chống ung thư góp phần chăm sóc sức khỏe cho cộng đồng Điểm luận án: Lần thiết kế tổng hợp thành công 13 hợp chất số triterpenoid có chứa nhóm benzamide 16 hợp chất số triterpenoid có chứa nhóm hydroxamate qua cầu nối ester amide Đã tổng hợp dẫn xuất amide 91, 93, 95, chưa thấy công bố tài liệu Đã đưa phương pháp cải tiến tổng hợp dẫn chất benzamide hydroxamate tác nhân hoạt hóa BOP thay sử dụng tác nhân hoạt hóa cũ DCC hay CDI, từ mở hướng hiệu tổng hợp hợp chất Đã khẳng định cấu trúc hợp chất từ kết phân tích liệu phổ hồng ngoại, phổ cộng hưởng proton phổ khối lượng Lần đánh giá hoạt tính gây độc tế bào ung thư 29 hợp chất dòng tế bào ung thư người, tế bào KB (ung thư biểu mô) tế bào Hep-G2 (ung thư gan), có hợp chất 89c, 89e, 89f, 92a, 96b có hoạt tính gây độc tế bào ung thư mạnh với giá trị IC50 < 10 µM Bố cục luận án: Luận án gồm 127 trang gồm: Mở đầu trang Chương 1: Tổng quan 25 trang Chương 2: Thực nghiệm 35 trang Chương 3: Kết thảo luận 61 trang Kết luận : trang Phần tài liệu tham khảo có 100 tài liệu lĩnh vực liên quan luận án, trích dẫn cách trung thực khách quan, tài liệu cập nhật đến năm 2018 Phần phụ lục gồm 51 trang gồm loại phổ chất tổng hợp Phương pháp nghiên cứu Các chất tổng hợp theo phương pháp tổng hợp hữu đại biết, có cải tiến vận dụng thích hợp vào trường hợp cụ thể Sản phẩm phản ứng làm phương pháp sắc kí cột Cấu trúc sản phẩm xác định phương pháp phổ đại như: IR, 1H-NMR, 13C-NMR, LC-MS/MS Hoạt tính sinh học đánh giá theo phương pháp Mossman hai dòng tế bào ung thư người KB Hep-G2 B-NỘI DUNG CỦA LUẬN ÁN CHƯƠNG TỔNG QUAN Phần tổng quan luận án gồm 25 trang trình bày nội dung sau: - Các dẫn xuất triterpenoid hoạt tính sinh học chúng Tổng hợp hoạt tính sinh học lớp chất benzamide Tổng hợp hoạt tính sinh học lớp chất hydroxamate CHƯƠNG THỰC NGHIỆM Thực nghiệm gồm 35 trang, trình bày chi tiết phương pháp nghiên cứu, quy trình tổng hợp, tinh chế, tính chất vật lý sản phẩm nhận như: điểm chảy, hình thái, màu sắc, hiệu suất phản ứng liệu chi tiết phổ IR, HRMS, 1H-NMR, 13CNMR, LC-MS/MS Đi từ dẫn xuất số triterpenoid tiến hành tổng hợp dãy phản ứng: dãy hợp chất lai triterpenoid có chứa nhóm benzamide dãy hợp chất lai triterpenoid có chứa nhóm hydroxamate Phương pháp tối ưu sử dụng hợp chất sử dụng tác nhân hoạt hóa nhóm cacboxylic BOP xúc tác DMAP môi trường bazơ yếu Et3N tác nhân phản ứng amine dung môi DMF Chúng đánh giá hoạt tính gây độc tế bào hợp chất tổng hợp dòng tế bào ung thư người KB Hep-G2 CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 3.1 Mục tiêu đề tài Đầu tiên thực chuyển hóa nhóm –OH C-28 số triterpenoid để tạo thành dẫn xuất ester dẫn xuất amide, sau cho phản ứng với amine khác để tạo thành hợp chất có chứa nhóm benzamide hydroxamate Một số hợp chất triterpenoid cho phản ứng trực tiếp C-28 với amien khác sơ đồ 3.1 Sơ đồ 3.1: Chiến lược mục tiêu luận án 3.2 Kết tổng hợp hợp chất lai số triterpenoid có chứa nhóm benzamide 3.2.1 Kết tổng hợp hợp chất lai betulin có chứa nhóm benzamide qua cầu nối ester Để tổng hợp dẫn chât benzamide qua cầu nối ester, luận án tiến hành tổng hợp dẫn xuất ester betulin Betulin (1) cho phản ứng với anhydride acid cacboxylic với tỉ lệ mol 1:4 dung môi CH2Cl2 khan với xúc tác bazơ triethyl amine, thời gian phản ứng 24 Các dẫn xuất acid 76a-f thu tinh thể màu trắng, có hiệu suất tổng hợp từ 60% đến 79% Phổ hồng ngoại (IR) hợp chất 76a xuất vân hấp thụ 1732 1642 cm-1 đặc trưng nhóm -C=O nhóm chức ester acid phổ hồng ngoại betulin không xuất vân hấp thụ Trên phổ cộng hưởng proton 1H-NMR xuất tín Sơ đồ 3.2: Sơ đồ tổng hợp chất 77a-e hưởng doublet doublet proton H-3 (3,19 ppm) với số J = 11 Hz, tín hiệu Ha-28 Hb-28 xuất 4,31 3,90 ppm; tín hiệu singlet 1H Ha-29 Hb-29 xuất 4,68 4,58 ppm, nhóm methyl xuất đầy đủ với tín hiệu singlet vùng 0,75 - 1,68 ppm, tín hiệu không thay đổi nhiều so với phổ chuẩn betulin Ngoài phổ proton hợp chất 76a xuất đầy đủ proton mạch nhánh (2,71-2,64 ppm, 2H-2’ 2H-3’) Riêng hợp chất 76e tác nhân phản ứng anhydride acid cis-1,2,3,6-tetrahydro phtalic phản ứng với betulin tạo thành dẫn xuất ester 76e thấy hai tín hiệu cộng hưởng proton Ha-28 Hb-28 bị tách làm hai tín hiệu doublet với cường độ 0,5H số tương tác J 11,0 Hz cho phép khẳng định cấu hình cis nối đôi anhydride acid cis-1,2,3,6-tetrahydro phtalic chuyển thành cấu hình trans hợp chất 76e mà cho anhydride acid phản ứng với betulin Các hợp chất khác chứng minh tương tự So sánh kết phân tích phổ với tài liệu tham khảo [66] khẳng định cấu trúc dẫn xuất ester 76a-f phù hợp với sắc ký phổ đồ Hình 3.1: Cấu trúc hóa học số đặc trưng vật lí hợp chất 76a-f Từ dẫn xuất ester acid 76a-e, tiếp tục cho phản ứng với 1,2-diaminobenzene (tỉ lệ mol 1:1,5) dung môi DMF với có mặt BOP/DMAP/Et3N nhận sản phẩm 77a-e Nhóm chức acid -COOH chuyển hóa thành nhóm amide, phản ứng xảy nhanh có hiệu suất cao, sản phẩm phản ứng chọn lọc Cấu trúc sản phẩm 77a-e khẳng định liệu phổ Trên phổ IR hợp chất 77c xuất pic hấp thụ 3373 cm-1 đặc trưng nhóm -NH có pic hấp thụ mạnh đặc trưng nhóm -C=O nhóm amide 1655 cm-1 Trên phổ 1H-NMR hợp chất 77c, bên cạnh tín hiệu khung lupan xuất thêm tín hiệu nhóm benzamide tín hiệu singlet 1H (7,55 ppm) nhóm -NH Tín hiệu vùng 7,18 - 6,76 ppm vòng thơm, cụ thể tín hiệu doublet doublet 7,18 ppm (1H), số J = 1,5 Hz proton H-6”; 7,06 ppm (1H, td, J = 7,5; 1,5 Hz, H4”); 6,78 (1H, dd, J = 7,5; 2,0 Hz, H-3”) 6,76 (1H, td, J = 7,5; 1,5 Hz, H-5”) ( hình 3.2) Hình 3.2: Phổ giãn 1H-NMR hợp chất 77c Trên phổ 13C-NMR hợp chất 77c xuất đẩy đủ tín hiệu nguyên tử cacbon có mặt phân tử Ngồi tín hiệu khung lupan xuất thêm tín hiệu nhóm cacbonyl ester amide vòng thơm, cụ thể tín hiệu 175,6 ppm nhóm cacbonyl ester (C-1’); tín hiệu 172,7 ppm nhóm cacbonyl amide (C-4’); tín hiệu ngun tử cacbon vòng thơm sau: tín hiệu 142,0 ppm C2”; 127,5 C-1”; 123,5 C-6”; tín hiệu 118,9 C5”; 117,2 C-3” (hình 3.3) Trên phổ khối lượng phân giải cao hợp chất 77c tìm thấy mảnh m/z [M+H]+ 661,4883 (hình 3.4) phù hợp với khối lượng tính tốn theo lý thuyết cho công thức phân tử C42H65N2O4 hợp chất 77c 661,4866 So sánh kết phân tích phổ với tài liệu tham khảo cơng bố trước Sơ đồ 3.10:Cơ chế hình thành sản phẩm 89a Hình 3.14: Phổ 1H-NMR hợp chất 89b Đối với hợp chất 89b phổ 1H-NMR tín hiệu khung lupan xuất thêm tín hiệu singlet 3H 3,72 ppm đặc 22 trưng cho nhóm -NMe tín hiệu singlet 3H 3,17 ppm nhóm -OMe (hình 3.14) Trên phổ 13C-NMR ngồi nhóm -C=O este (C-28) tín hiệu 173,3 ppm, xuất thêm tín hiệu 171,1 ppm nhóm -C=O nhóm -CONMeOMe (hình 3.15) Trên phổ IR xuất hai tín hiệu 1733 1667 cm-1 hai nhóm C=O Hình 3.15: Phổ 13C-NMR hợp chất 89b C-B28 #4569 RT: 11.49 AV: NL: 1.59E5 T: FTMS + p ESI SIM ms [584.5000-587.5000] 586.2869 100 95 90 85 80 75 70 Relative Abundance 65 60 55 50 45 40 35 30 25 20 15 10 586.0152 586.7262 585.5 585.6 585.7 585.8 585.9 586.0 586.1 586.2 586.3 m/z 586.4 586.5 586.6 586.7 586.8 586.9 587.0 587.1 587.2 Hình 3.16: Phổ LC-MS/MS hợp chất 89b Hợp chất 89b chứng minh phổ khối lượng phân giải cao, phổ khối lượng tìm thấy mảnh m/z [M+H]+: 586,2869 (hình 23 3.16) phù hợp với khối lượng tính tốn theo lý thuyết cho CTPT C36H60NO5 586,2866 So sánh với liệu phổ số tài liệu cơng bố trước [62, 63], khẳng định cấu trúc dự kiến hợp chất 89b phổ đồ Cấu trúc hợp chất khác khẳng định tương tự 3.3.2 Kết tổng hợp hợp chất lai số triterpenoid khác có chứa nhóm hydroxamate qua cầu nối amide Đầu tiên tổng hợp dẫn xuất amide 91, 93, 95: Betulinic acid (2), 3 -acetoxy-21-oxolup-18-ene-28-oic acid (5) hợp chất 81 cho phản ứng với 6-aminohexanoic acid với tỉ lệ mol 1:2 dung môi DMF, có mặt tác nhân BOP xúc tác DMAP khoảng thời gian 24 thu dẫn xuất amide 91, 93, 95 Hình 3.17: Phổ 1H-NMR hợp chất 91 Trên phổ 1H-NMR hợp chất ngồi tín hiệu khung lupan xuất thêm tín hiệu vân phổ có dạng triplet 1H ứng với độ dịch chuyển từ 5,67-5,80 ppm (trong dung mơi CDCl3), điều cho thấy nhóm cacboxylic acid 2, 81 chuyển thành nhóm amide (hình 3.17) Các hợp chất 91, 93, 95 sau cho phản ứng với H2NOH.HCl HNMeOMe.HCl 24 với tỉ lệ mol 1:2 dung môi DMF có mặt BOP/DMAP thu hợp chất hydroxamate 92a-b, 94a-b 96a-b (sơ đồ 3.11; 3.12 3.13) Sơ đồ 3.11: Tổng hợp hợp chất 90a-b, 92a-b 25 Sơ đồ 3.12: Tổng hợp hợp chất 94a-b Sơ đồ 3.13: Tổng hợp hợp chất 96a-b Cấu trúc hợp chất chứng minh phương pháp phổ đại Trên phổ 1H-NMR hợp chất 92a ngồi tín hiệu khung lupan xuất thêm tín hiệu singlet 1H 10,30 ppm đặc trưng nhóm -NH tín hiệu 26 singlet 1H 8,61 ppm nhóm -OH nhóm hydroxamic CONHOH, ngồi xuất tín hiệu triplet 1H 7,37 ppm đặc trưng nhóm -NH nhóm amide cầu nối ankyl (do tương tác với proton nhóm -CH2 vị trí 1’(phần cầu nối ankyl) nên vân phổ có dạng triplet cộng hưởng trường mạnh hơn) (hình 3.18) Hình 3.18: Phổ 1H-NMR hợp chất 92a Hình 3.19: Phổ 13C-NMR hợp chất 92a 27 Trên phổ 13C-NMR hợp chất 92a ngồi tín hiệu 206,9 ppm nhóm xeton vòng 170,1của CH3CO- xuất thêm tín hiệu nhóm cacbonyl amid C-28 tín hiệu 173,1 ppm nhóm cacbonyl nhóm hydroxamic 172,8 ppm (hình 3.19) Trên phổ khối lượng phân giải cao tìm thấy mảnh m/z [M+H]+: 641,4489 (hình 3.20) phù hợp với khối lượng tính tốn theo lý thuyết cho CTPT C38H61N2O6 641,4429 Như vậy, cấu trúc dự kiến hợp chất 92a phù hợp với phổ đồ Cấu trúc hợp chất khác chứng minh tương tự C-44 #1146 RT: 3.90 AV: NL: 6.78E8 T: FTMS + p ESI SIM ms [639.5000-642.5000] 641.4489 100 95 90 85 80 75 70 Relative Abundance 65 60 55 50 45 40 642.4512 35 30 25 20 15 10 640.4673 639.6 639.8 640.0 640.2 640.4 640.6 640.8 641.0 m/z 641.2 641.4 641.6 641.8 642.0 642.2 642.4 Hình 3.20: Phổ LC-MS/MS hợp chất 92a Khi nghiên cứu thực nghiệm proton nhóm chức hydroxamic -CONHOH tác giả Rachel Cold [100] cho thấy dung môi không proton DMSO, H N-H hoạt động ptoton acid N-OH Do linh động nên -NH cộng hưởng trường yếu (δ = 10,30-12,37 ppm) Hơn proton linh động dễ bị trao đổi hỗ biến cho nên số chất cho tín hiệu -NH, -OH yếu hợp chất 89g hai tín hiệu cộng hưởng proton -NH -OH bị tách làm hai tín hiệu doublet với cường độ 0,5H có trường hợp khơng cho tín hiệu phổ đồ chất 89e 28 Ngoài nhóm nhóm proton quan trọng khác cấu trúc dãy chất proton mạch nhánh Đa số chất có đủ số proton mạch nhánh với độ dịch chuyển hóa học nhóm -CH2 khoảng 1,25-3,94 ppm Các chất đo trog dung môi DMSO nên ảnh hưởng proton nhóm methyl dung mơi DMSO deuteri hóa khơng hồn tồn ( = 2,50 ppm) nên số chất không quan sát proton nhóm -CH2 cho tín hiệu vị trí khoảng 2,50 ppm Như vậy, nghiên cứu tổng hợp thành công 16 hợp chất lai số triterpenoid có chứa nhóm hydroxamate qua cầu nối ester cầu nối amide Các hợp chất tổng hợp đước chứng minh phương phổ đại phổ hồng ngoại IR, phổ cộng hưởng từ hạt nhân 1H-NMR 13C-NMR, phổ khối lượng LC-MS/MS 3.4 Hoạt tính chống ung thư hợp chất lai Với mong muốn tổng hợp hợp chất lai có hoạt tính sinh học nhằm tìm kiếm hợp chất có hoạt tính chống ung thư nên hợp chất lai số triterpenoid có chứa nhóm benzamide hydroxamate sau tổng hợp tiến hành thử hoạt tính gây độc tế bào in vitro hai dòng tế bào ung thư người KB (ung thư biểu mô) Hep-G2 (ung thư gan), với phép thử hoạt tính chất chuẩn Ellipticine Q trình khảo sát hoạt tính gây độc tế bào thực phòng Hóa Sinh Ứng Dụng Viện Hóa Học Kết thử hoạt tính hợp chất trình bày bảng 3.1 bảng 3.2 29 Bảng 3.1: Kết thử hoạt tính hợp chất lai có chứa nhóm benzamide STT Hợp chất IC50 (µM) KB IC50 (µM) Hep-G2 77a 202,2 202,2 77b 197,9 166,0 77c 193,7 115,6 77d 193,7 128,9 77e 186,9 108,0 80 214,0 234,9 83a 222,7 168,5 83b 240,2 176,8 84 15,4 12,1 10 85 234,9 234,9 11 87 216,6 158,7 12 88a 68,2 137,1 13 88b 152,5 209,0 14 Ellipticine 1,3 1,5 30 Bảng 3.2: Kết thử hoạt tính hợp chất lai có chứa nhóm hydroxamate STT Hợp chất IC50 (µM) KB IC50 (µM) Hep-G2 89a 29,76 23,39 89b 55,71 93,25 89c 8,5 67,11 89d 87,71 65,77 89g 52,25 71,75 89h 58,14 113,70 89e 7,60 97,0 89f 63,84 9,13 90a 23,15 24,72 10 90b 50,09 141,03 11 92a 3,06 4,22 12 92b 68,2 137,1 13 94a 43,71 64,42 14 94b 103,76 106,66 15 96a 35,08 45,07 16 96b 5,18 6,21 17 Ellipticine 1.3 1,5 31 Kết thử hoạt tính sản phẩm lai thể chi tiết bảng 3.1 bảng 3.2 Kết phần lớn hợp chất lai thể hoạt tính gây độc hai dòng tế bào nồng độ khác Đối với dãy hợp chất lai số triterpenoid có chứa nhóm benzamide hợp chất 84 hợp chất có hoạt tính sinh học tốt dòng tế bào KB Hep-G2 với giá trị IC50 12,1µM 15,4 µM Mặt khác, so sánh độc tính tế bào hợp chất 3acetyl với hợp chất 3-hydroxy, dễ dàng nhận thấy hợp chất có nhóm 3-acetyl (83a 88a) có hoạt tính mạnh so với hợp chất 3-hydroxy (83b 88b) (bảng 3.1) Đối với dãy hợp chất lai số triterpenoid có chứa nhóm hydroxamate, thấy hầu hết hợp chất có hoạt tính sinh học, có hợp chất 89c, 89e, 92a, 96b thể hoạt tính gây độc tế bào mạnh dòng tế bào ung thư KB hợp chất 89f, 92a, 96b thể hoạt tính gây độc tế bào mạnh dòng tế bào ung thư Hep-G2 với giá trị IC50 < 10 µM Đặc biệt, hai hợp chất 92a 96b có hoạt tính gây độc mạnh dòng tế bào KB HepG-2 với giá trị IC50 tương ứng 3,06 4,22 µM (hợp chất 92a); 5,18 6,21 µM (hợp chất 96b); giá trị cao chút so với chất chuẩn Ellipticine Trong tất hợp chất lai có chứa nhóm hydroxamate hợp chất 92a 96b có hoạt tính cao hai dòng tế bào KB Hep-G2, cơng thức cấu tạo hợp chất có nhóm 3-acetyl nhóm methyl Ngồi ra, nhận thấy hợp chất 89c, 89e, 89f hợp chất lai có chứa nhóm hydroxamate tổng hợp qua cầu nối ester thể hoạt tính thấp so với hợp chất lai có chứa nhóm hydroxamate tổng hợp qua cầu nối amide hợp chất 92a, 96b Từ so sánh kết thử hoạt tính hợp chất lai có chứa nhóm benzamide nhóm hydroxamate thấy hợp chất lai có chứa nhóm benzamide có hoạt tính thấp so với hoạt tính hợp chất lai có chứa nhóm hydroxamate, điều cầu nối C-C mạch nhánh, phần cầu nối có ảnh hưởng đến hoạt tính 32 Đây kết thú vị, làm tiền đề cho nghiên cứu tiếp theo phát triển hợp chất có hoạt tính chống ung thư Hình 3.21: Cấu trúc hóa học số hợp chất lai có hoạt tính tốt 33 KẾT LUẬN 1.Luận án nghiên cứu tổng hợp thành công 13 hợp chất lai số triterpenoid có chứa nhóm benzamide, bao gồm: + hợp chất betulin có chứa nhóm benzamide qua cầu nối ester (77a-e) +3 hợp chất dẫn xuất diacid pentacyclic triterpenoid có chứa nhóm benzamide (80, 83a-b) +2 hợp chất betulinic acid có chứa nhóm benzamide (84, 85) +1 hợp chất ursolic acid có chứa nhóm benzamide (87) + hợp chất 3β-acetoxy-21-oxolup-18-ene-28-oic acid có chứa nhóm benzamide (88a-b) 2.Luận án nghiên cứu tổng hợp thành công 16 hợp chất lai số triterpenoid có chứa nhóm hydroxamate bao gồm : + hợp chất betulin có chứa nhóm hydroxamate qua cầu ester (89a-h) + hợp chất 3β-acetoxy-21-oxolup-18-ene-28-oic acid có chứa nhóm hydroxamate (90a-b 92a-b) + hợp chất betulinic acid có chứa nhóm hydroxamate qua cầu nối amide (94a-b) +2 hợp chất hợp chất 81 có chứa nhóm hydroxamate qua cầu nối amide (96a-b) Luận án tổng hợp dẫn xuất amide 91, 93, 95 Đây dẫn xuất chưa thấy mô tả tài liệu tham khảo Đã chứng minh cấu trúc 29 hợp chất tổng hợp phương pháp phổ đại phổ hồng ngoại (IR), phổ cộng hưởng từ hạt nhân (1H-NMR, 13C-NMR, phổ khối lượng phân giải cao (HRMS) Đã thử hoạt tính gây độc tế bào 29 hợp chất hai dòng tế bào ung thư người tế bào KB (ung thư biểu mô) tế bào HepG2 (ung thư gan) Kết cho thấy có hợp chất 89c, 89e, 34 89f, 92a, 96b có hoạt tính tốt với giá trị IC50