Tiêu chuẩn ngành 28 TCN 182:2003 quy định phương pháp xác định hàm lượng sulfit trong thủy sản và sản phẩm thủy sản. Giới hạn phát hiện của phương pháp là 10 mg/g. Mời các bạn cùng tham khảo nội dung chi tiết.
TIÊU CHUẨN NGÀNH 28 TCN 182:2003 SULFIT TRONG SẢN PHẨM THỦY SẢN – PHƯƠNG PHÁP ĐỊNH LƯỢNG Sulphite in fishery products - Method for quantitative analysis Phạm vi áp dụng Tiêu chuẩn quy định phương pháp xác định hàm lượng sulfit thủy sản sản phẩm thủy sản Giới hạn phát phương pháp 10 mg/g Phương pháp tham chiếu Tiêu chuẩn xây dựng dựa theo phương pháp Ủy ban Phân tích thực phẩm khối Bắc Âu NMKL số 132 - 1989 (NODISK METODIKKOMMITTE FOR LIVSMEDEL Nordic committee on food analysis - Sulphite Spectrophotometric determination in foods) Nguyên tắc Mẫu sản phẩm axit hóa axit sulfuric H 2SO4 chưng cất thiết bị Kjeldahl bán vi lượng Hơi SO2 tạo thành phản ứng với 2,2'- đinitro-5,5'-đithiobenzoic axit (DTNB) cốc nhận để hình thành phức axit 5-mercapto-2- nitrobenzoic có mầu vàng chanh đậm Cường độ mầu phức axit đọc máy quang phổ bước sóng l 412 nm Nồng độ SO mẫu tính tốn theo cường độ mầu phức axit theo phương pháp ngoại chuẩn Thiết bị, dụng cụ, hoá chất, dung dịch 4.1 Thiết bị, dụng cụ 4.1.1 Máy xay thịt có đường kính lỗ đĩa -3 mm 4.1.2 Cân phân tích, độ xác 0,1 mg 4.1.3 Máy nghiền đồng thể 4.1.4 Bộ chưng cất Kjeldahl bán vi lượng, dung tích 100 ml 4.1.5 Máy quang phổ UV-VIS 4.1.6 Bình tam giác dung tích 100 ml 4.1.7 Máy đo pH 4.1.8 Pipet thể tích ml 4.1.9 Bình định mức dung tích 50 ml 4.1.10 Bình định mức dung tích 100 ml 4.1.11 Bình tam giác dung tích 250 ml 4.2 Hóa chất Hóa chất phải loại tinh khiết sử dụng để phân tích, gồm: 4.2.1 Axit sulfuric (H2SO4) đậm đặc 4.2.2 Đikali hyđrophosphat (K2HPO4 3H2O).MW = 228,23 g/mol 4.2.3 Kali hyđrophosphat (KH 2PO4) 4.2.4 Axit chlohyđric (HCl) 0,1M dùng để chuẩn độ 4.2.5 Natri hyđroxit (NaOH), 0,1M dùng để chuẩn độ 4.2.6 Axit 2,2'-đinitro-5,5'-đithiobenzoic (DTNB) (C 14H8N2O8S2) 4.2.7 Hồ tinh bột 4.2.8 Etanol 96% 4.2.9 Muối đinatri etylenđiamin tetraaxetat (C 10H14N2NA2O8ư.2H2o)(EDTA).MW = 372,24g/mol 4.2.10 Natri đisulfit (Na2S2O5) MW = 190,10 g/mol 4.2.11 Khí ni tơ (N2) 4.3 Dung dịch chuẩn dung dịch thử 4.3.1 Dung dịch chuẩn gốc iot 0,05 M: sử dụng ống chuẩn iot (Iodine titrisol) N/10, pha 1000 ml Dung dịch sử dụng vòng tháng 4.3.2 Dung dịch chuẩn iot 0,005M: pha lỗng dung dịch (4.3.1) 10 lần Dung dịch sử dụng vòng tháng 4.3.3 Axit sulfuric 10N: đổ từ từ 272 ml axit sulfuric đậm đặc (4.2.1) vào 700 ml nước cất định mức đến 1000 ml Dung dịch sử dụng vòng năm 4.3.4 Dung dịch đệm phosphat pH=8: hòa tan 3,65hg đikali hyđrophosphat K 2HPO4.3H2O (4.2.2) 0,25 g Kali hyđrophosphat (4.2.3) với 900 ml nước cất Chỉnh pH = 8,0 với axit chlohyđric HCl 0,1M (4.2.4) natri hyđroxit NaOH O,1M (4.2.5) Định mức đến 1000 ml Dung dịch sử dụng vòng tháng 4.3.5 Dung dịch thuốc thử 2,2'-đinitro-5,5'-đithiobenzoic axit (DTNB): hòa tan 1g DTNB 100 ml etanol (4.2.8) định mức đến 1000 ml với dung dịch đệm (4.3.4) Dung dịch sử dụng vòng tháng 4.3.6 Dung dịch hồ tinh bột: trộn g hồ tinh bột (4.2.7) với 100 ml nước cất đun sôi làm nguội Dung dịch sử dụng vòng tuần 4.3.7 Dung dịch gốc đisufit (0,05M): hòa tan 2,3763 g natri đisufit (4.2.10) 0,0093 g EDTA (4.2.9) nước định mức đến 250 ml Dung dịch sử dụng vòng tháng Định phân lại nồng độ lần sử dụng 4.3.8 Dung dịch đisulfit (0,0005 M) (0,064mg SO 2/ml): dùng pipet hút 10 ml dung dịch gốc đisulfit (4.3.7), thêm 0,037 g EDTA (4.2.9), hòa tan định mức đến 1000 ml Dung dịch sử dụng vòng tháng Định phân lại nồng độ lần sử dụng Phương pháp tiến hành 5.1 Chuẩn bị mẫu 5.1.1 Chuẩn bị mẫu thử: đồng mẫu thử máy nghiền đồng thể (4.1.3) Cân mẫu, mẫu 5,00 g cốc có mỏ 100 ml Trộn mẫu cân với 15 ml nước cất 5.1.2 Chuẩn bị mẫu trắng: mẫu trắng mẫu xác định trước không chứa sulfit Chuẩn bị mẫu trắng giống chuẩn bị mẫu thử quy định Điều 5.1.1 5.2 Lập đường chuẩn 5.2.1 Cho vào bình tam giác dung tích 250 ml (4.1.11) , bình ml dung dịch chuẩn iot (4.3.2) 5.2.2 Chuẩn độ với dung dịch chuẩn đisulfit (4.3.8) đến mầu vàng nhạt 5.2.3 Thêm dung dịch hồ tinh bột (4.3.6) tiếp tục chuẩn độ dung dịch đổi mầu 5.2.4 Dùng pipette nhỏ 0,1, 2, 3, 4, ml dung dịch đisufit (4.3.8) chuẩn độ Điều 5.2.3 vào bình định mức 50 ml có chứa 25 ml dung dịch thuốc thử (4.3.5) Sau đó, pha lỗng đến vạch với dung dịch đệm phosphat (4.3.4) để yên 10 phút 5.2.5 Hiệu chỉnh máy quang phổ (4.1.5) với nước cất 412 nm (độ hấp thu nước cất) Xác định độ hấp thụ dung dịch (5.2.4) máy quang phổ 5.2.6 Thành lập đồ thị theo giá trị độ hấp thu nồng độ sulfit dãy chuẩn theo mg/ml Hàm lượng SO2 dịch mẫu tính theo đường hồi quy tuyến tính đồ thị thu sau hiệu chỉnh với giá trị hấp thu mẫu trắng 5.3 Tiến hành thực nghiệm 5.3.1 Chuyển mẫu trắng mẫu thử chuẩn bị theo Điều 5.1 vào bình chưng cất Tráng rửa cốc đựng mẫu với 10 ml nước cất cho hết vào bình chưng cất Lắp đặt bình vào chưng cất Kjeldahl (4.1.4) 5.3.2 Đặt bình tam giác thu hồi chứa 50 ml DTNB (4.3.5) đầu ống ngưng tụ Nối đường dẫn khí nitơ nước làm nguội vào thiết bị chưng cất 5.3.3 Cho vào bình chưng cất 20 ml axit sulfuric 10 N (4.3.3) qua phễu gắn phía chưng cất nhanh chóng đóng kín hệ thống lại Chưng cất vòng phút 5.3.4 Lấy bình hứng khỏi chưng cất Rửa bình ngưng ống nối với dung dịch đệm phosphat (4.3.4), chuyển dịch rửa vào bình thu hồi 5.3.5 Chuyển tồn dịch cất vào bình định mức (4.1.9) rửa bình thu hồi với dung dịch đệm phosphat (4.3.4) Chuyển dịch rửa vào bình định mức định mức với dung dịch đệm (4.3.4) 5.3.6 Đọc số ABS sau 10 phút với bước sóng 412 nm dùng nước cất dung dịch so sánh Nếu trị số ABS > 1,5, phải pha loãng dung dịch với hỗn hợp với tỷ lệ 1:1 dung dịch đệm phosphat (4.3.4) dung dịch thuốc thử (4.3.5) tiến hành đọc lại Tính kết 6.1 Tính nồng độ dung dịch gốc đisulfua theo cơng thức sau: Cso2 (mg/ml) = Vo x Co x MV Vso2 x 1000 Trong đó: V0 số ml dung dịch iot (4.3.1) sử dụng Điều 5.2.1 VSO2 số ml dung dịch gốc đisulfit (4.3.7) dùng cho chuẩn độ, C0 nồng độ dung dịch iot (4.831), tính theo mol/1, MV phân tử gam SO2 (64,06 g/mol) 6.2 Tính hàm lượng SO2 mẫu 6.2.1 Tính lượng SO2 dung dịch mẫu từ đường chuẩn theo Điều 5.2.6 6.2.2 Tính nồng độ SO2 mẫu theo công thức sau: Cso2 (mg/kg) = AxVx m x 1000 Trong đó: A nồng độ SO2 tìm thấy từ đường chuẩn, tính theo mg/ml, V thể tích dịch cất (5.3.5), tính theo ml, g hệ số pha loãng Điều 5.3.6, g = khơng pha lỗng, m khối lượng mẫu cân, tính theo g 6.3 Báo cáo kết Hàm lượng sufit giá trị trung bình lần thử song song tính theo mg/kg ... sulfit Chuẩn bị mẫu trắng giống chuẩn bị mẫu thử quy định Điều 5.1.1 5.2 Lập đường chuẩn 5.2.1 Cho vào bình tam giác dung tích 250 ml (4.1.11) , bình ml dung dịch chuẩn iot (4.3.2) 5.2.2 Chuẩn. .. pháp tiến hành 5.1 Chuẩn bị mẫu 5.1.1 Chuẩn bị mẫu thử: đồng mẫu thử máy nghiền đồng thể (4.1.3) Cân mẫu, mẫu 5,00 g cốc có mỏ 100 ml Trộn mẫu cân với 15 ml nước cất 5.1.2 Chuẩn bị mẫu trắng:... dịch chuẩn đisulfit (4.3.8) đến mầu vàng nhạt 5.2.3 Thêm dung dịch hồ tinh bột (4.3.6) tiếp tục chuẩn độ dung dịch đổi mầu 5.2.4 Dùng pipette nhỏ 0,1, 2, 3, 4, ml dung dịch đisufit (4.3.8) chuẩn