BỘ GIÁO dục và đào tạo

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƢỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM TP.HCM BỘ MÔN CÔNG NGHỆ SINH HỌC ***000*** PHẠM TRẦN XUÂN HIỀN KHẢO SÁT ĐẬM ĐỘ VÀ KHẢ NĂNG SINH ĐỘC TỐ CỦA VI KHUẨN Staphylococcus aureus TRÊN MÔI TRƢỜNG NI CẤY Luận văn kỹ sƣ Chun Ngành: Cơng nghệ sinh học T         9 /2006 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƢỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM TP.HCM BỘ MÔN CÔNG NGHỆ SINH HỌC KHẢO SÁT ĐẬM ĐỘ VÀ KHẢ NĂNG SINH ĐỘC TỐ CỦA VI KHUẨN Staphylococcus aureus TRÊN MÔI TRƢỜNG NI CẤY Luận văn kỹ sƣ Chun ngành:Cơng nghệ sinh học Giáo viên hƣớng dẫn: Sinh viên thực hiện: ThS NGUYỄN ĐỖ PHÚC PHẠM TRẦN XUÂN HIỀN Khóa: 2002-2006      9 /2006 MINISTRY OF EDUCATION AND TRAINING NONG LAM UNIVERSITY, HCMC DEPARTMENT OF BIOTECHNOLOGY  RELATIONSHIPS BETWEEN THE BACTERIA DENSITY AND ABILITY PRODUCING STAPHYLOCOCCAL ENTEROTOXIN (SEs) OF Staphylococcus aureus IN TSGM AND BHI BROTH Engineer Thesis Major: Biotechnology Research adviser Researcher     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which is the primary caussative agent of Staphylococcal food poisoning Therefore, in oder to get information of producing enterotoxin, we carry on examining S aureus growth and its ability to produce enterotoxin in culture medium that contributes practically in testing food, especially in Staphylococcal food poisoning outbreaks S aureus strains are cultured in TSGM and BHI medium; then we examine their growth and test SE by ELISA method with TECRA kit after 16, 24, 48 and 72 hours The results we find: Among 36 strains surveyed, there are ten ones having ability to produce SE (27,8%) In these ten strains, the ones from clinical samples have the highest rate (50%) S aureus growth and SE amount are not correlative SE amount increases with time After 16 hours culture, on TSGM, as the cell concentation reaches 7,86 log10 cfu/ml, OD ELISA value is 1,464; on BHI, as the cell concentation reaches 8,13 log10 cfu/ml OD, E     TSGM and BHI medium are the same influence for S aureus growth and ability to produce enterotoxin These S aureus strains producce SEA, SEB, SEC Among them, the rate of SEA is 80%, of SEB is 10% and of SEC is 10% MỤC LỤC ĐỀ MỤC TRANG           iii   iv Abstract v    vi        ix    x  xi MỞ ĐẦU 1.1       1.2      1.3    2 TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 Gitaphylococcus    S 2.1.1   2.1.2    2.1.3    2.2        Staphylococcus aureus 2.2.1            2.2.2                2.2.3        2.2.4   aureus       S 2.3          Staphylococcus      aureus 2.3.1 Nh           2.3.2  aureus      S 2.4  taphylococcus      aureus    S 11 2.4.1           11 2.4.1.1         11 2.4.1.2           12 2.4.2          13 2.5  taphylococcus    aureus     S 14 2.5.1     14 2.5.2      14 2.5.3           16         2.6  taphylococcus      aureus      S 18 2.6.1    18 2.6.2   18 2.6.3    19 2.6.4                                 19   2.6.5           20 2.6.5.1          20 2.6.5.2        21 2.6.6             22  2.6.6.1           22    2.6.6.2 RIA         22   2.6.6.3          23 2.6.6.4        23 2.6.6.5 P       24 VẬT LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP TIẾN HÀNH 3.1        26 3.1.1               26 3.1.2            26 3.2      26 3.2.1  aureus    S 26 3.2.2         26 3.2.3    26 3.3      27 3.3.1      27 3.3.2   27 3.3.2.1  S. aureus       g 27 3.3.2.2                      29 3.3.2.3                       30 KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 4.1   aureus                   S 36 4.2     aureus                      S 39 4.2.1     39 4.2.1.1       39 4.2.1.2       40 4.2.2         42 4.3                   44 4.3.1                      44 4.3.2                      47 4.4  E          S 47 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 5.1      50 5.2   50 TÀI LIỆU THAM KHẢO 51 PHỤ LỤC 56 DANH SÁCH CÁC CHỮ VIẾT TẮT BHI : Brain Heart Infusion BP : Baird Parker cfu : colony form unit EIA : Enzyme Immunoassay ELISA : Enzyme Linked Immunosorbent Assay FAME : Fatty Acid Modifying Enzyme KL :     MSA : Manitol salt agar MPN : Most Probable Number Method MRSA : Methicilin resistant Staphylococcus aureus PCR : Polymerase Chain Reaction pNPP : -nitrophenyl photphatase RIA : Radio Immunoassay RFLP : Randomly Fragment Length Polymorphism RLPD : Randomly Amplified Polymorphic DNA RPLA : Reversed Passive Latex Aggulutination S aureus : Staphylococcus aureus SE : Staphylococcal enterotoxin S epidermidis : Staphylococcus epidermidis TSA : Tryptic soy agar TSB : Tryptic Soy Broth TSGM : Tecra Staphylococcal Growth Medium TSST-1 : Toxic shock syndrom toxin VRSA : Vancomycin Resistant Staphylococcus aureus (+) :     (-) :  DANH SÁCH CÁC BẢNG BẢNG TRANG  aureus,  S.epidermidis   icrococci   S M  aureus                     S 36   aureus           S 37                       S aureus       39   4  S  aureus                 41 .                       42 aureus  ch    S   44         7  aureus   S   44             aureus 8        S              45  9   aureus           S 48 DANH SÁCH CÁC HÌNH HÌNH TRANG taphylococcus   aureus  S   taphylococcus    aureus  S                  taphylococcus  aureus        S 14   aureus           S 17 n h2.5         21                29                 35                35 aureus     S           38 aureus       S  38       aureus         S 38    aureus 4    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Khs   v kh nng sinh  t c vi khu S aureus trn mi tr   c kho th gian kh                             1.3 Nội dung nghiên cứu o         S aureus     o                       S  aureus                                            Australia) o                                   S aureus o             PHẦN TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 Giới thiệu Staphylococcus: Staphylococcus      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aureus 2.2.1 Hình thái, đặc điểm sinh hóa Staphylococcus aureus       Staphylococcus             staphylococcus  S aureus                             -                                                                    Hình 2.1 Hình thái Staphylococcus aureus            Hình 2.2 Tụ cầu Staphylococcus aureus gram dƣơng dƣới kính hiển vi      http://www.mgm.ufl.edu/%7Egulig/mmid/mmid%2Dlab/labim age/imagky.html>) S.aureu                                          catalase H O H O+O S aureus                                                 S  aureus     bi S aureus                                                                    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         30 KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 4.1   aureus             ...      47 4.4  E          S 47 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 5.1      50 5.2   50 TÀI LIỆU THAM KHẢO