PYRIMETHAMIN Pyrimethaminum C12H13ClN4 P.t.l: 248,7 Pyrimethamin 5-(4-chlorophenyl)-6-ethylpyrimidin-2,4-diamin; phải chứa từ 99,0 đến 101,0% C12H13ClN4, tính theo chế phẩm làm khô Tính chất Bột kết tinh màu gần trắng tinh thể không màu Thực tế không tan nước, khó tan ethanol 96% Định tính Có thể chon hai nhóm định tính sau: Nhóm 1: A Nhóm 2: B, C, D A Phổ hồng ngoại (Phụ lục 4.2) chế phẩm phải phù hợp với phổ hồng ngoại pyrimethamin chuẩn (ĐC) B Nhiệt độ nóng chảy: 239 – 243 °C (Phụ lục 6.7) C Hòa tan 0,14 g chế phẩm ethanol (TT), pha loãng thành 100,0 ml với dung môi Hút 10,0 ml pha loãng thành 100,0 ml với dung dịch acid hydrocloric 0,1 M (TT) Hút 10,0 ml dung dịch thu được, pha loãng thành 100,0 ml với dung dịch acid hydrocloric 0,1 M (TT) Phổ hấp thụ ánh sáng dung dịch khoảng từ 250 nm đến 300 nm (Phụ lục 4.1) có cực đại 272 nm cực tiểu 261 nm Độ hấp thụ riêng cực đại có giá trị từ 310 đến 330 D Phương pháp sắc ký lớp mỏng phần thử tạp chất liên quan Vết sắc ký đồ dung dịch thử (2) phải tương ứng với vết dung dịch đối chiếu (1) vị trí kích thước Độ màu sắc dung dịch Dung dịch chuẩn bị trước dùng Hòa tan 0,25 g chế phẩm hỗn hợp methanol - methylen clorid (1 : 3) pha loãng thành 10 ml với dung môi Dung dịch thu phải (Phụ lục 9.2) có màu không đậm dung dịch màu mẫu VN6 (Phụ lục 9.3, phương pháp 2) Giới hạn acid - kiềm Dung dịch S: Lắc 1,0 g chế phẩm với 50 ml nước phút, lọc Lấy 10 ml dung dịch S, thêm 0,05 ml dung dịch phenolphtalein (TT) Dung dịch không màu Không dùng 0,2 ml dung dịch natri hydroxyd 0,01 M (CĐ) để làm chuyển màu thị sang màu hồng Thêm 0,4 ml dung dịch acid hydrocloric 0,01 M (CĐ) 0,05 ml dung dịch đỏ methyl (TT) làm thị Dung dịch phải có màu đỏ màu da cam Tạp chất liên quan Không 0,25% Xác định phương pháp sắc ký lớp mỏng (Phụ lục 5.4 ) Bản mỏng: Silica gel GF254 (TT) Dung môi khai triển: Cloroform – propanol – acid acetic băng – toluen (4 : : 12 : 76) Các dung dịch chuẩn bị trước dùng Dung dịch thử (1): Hòa tan 0,25 g chế phẩm hỗn hợp methanol - cloroform (1:9) pha loãng thành 25 ml với hỗn hợp dung môi Dung dịch thử (2): Pha loãng ml dung dịch thử (1) thành 10 ml hỗn hợp methanol -cloroform (1 : 9) Dung dịch đối chiếu (1): Hòa tan 0,1 g pyrimethamin (CĐ) hỗn hợp methanol – cloroform (1 : 9) pha loãng thành 100 ml với hỗn hợp dung môi Dung dịch đối chiếu (2): Pha loãng 5,0 ml dung dịch thử (1) thành 200 ml hỗn hợp methanol – cloroform (1 : 9) Pha loãng ml dung dịch thu thành 10 ml với hỗn hợp dung môi Cách tiến hành: Chấm riêng biệt lên mỏng 20 µl dung dịch Triển khai sắc ký dung môi khoảng 10 cm Làm khô mỏng không khí Quan sát mỏng ánh sáng đèn tử ngoại 254 nm Trên sắc ký đồ dung dịch thử (1): vết phụ màu đậm vết sắc ký đồ dung dịch đối chiếu (2) Sulfat Không 80 phần triệu (Phụ lục 9.4.14) Dùng 15 ml dung dịch S Mẫu đối chiếu gồm 2,5 ml dung dịch sulfat mẫu 10 phần triệu (TT) 12,5 ml nước Mất khối lượng làm khô Không 0,5% (Phụ lục 9.6) (0,50 g; 100 – 105 °C; giờ) Tro sulfat Không 0,1% (Phụ lục 9.9, phương pháp 2) Dùng 1,0 g chế phẩm Định lượng Hòa tan 0,200 g chế phẩm 25 ml acid acetic khan (TT) cách đun nóng nhẹ Để nguội, chuẩn độ dung dịch acid percloric 0,1 M (CĐ), xác định điểm tương đương phương pháp chuẩn độ đo điện (Phụ lục 10.2) ml dung dịch acid percloric 0,1 M (CĐ) tương đương với 24,87 mg C12H13ClN4 Bảo quản Tránh ánh sáng Loại thuốc Thuốc số rét Chế phẩm Viên nén