COLECALCIFEROL Cholecalciferolum Vitamin D3 C27H44O P.t.l.: 384,6 Colecalciferol (5Z,7E)-9,10 secocholesta-5,7,10(19)-trien-3β-ol, phải chứa từ 97,0% đến 103,0% C27H44O Tính chất Tinh thể trắng gần trắng, dễ biến đổi tiếp xúc với không khí, nhiệt độ ánh sáng Trong dung dịch, tùy thuộc vào nhiệt độ thời gian mà xẩy tượng đồng phân hóa thuận nghịch thành pre-colecalciferol Dễ tan cloroform, ethanol 96% ether, tan dầu béo; thực tế không tan nước Dung dịch dung môi bay không vững bền, nên dùng Định tính A Phổ hồng ngoại (Phụ lục 4.2) chế phẩm phải phù hợp với phổ hồng ngoại colecalciferol chuẩn (ĐC) Góc quay cực riêng Từ +105o đến +112o (Phụ lục 6.4) Hòa tan nhanh không làm nóng 0,200 g chế phẩm ethanol aldehyd (TT) pha loãng thành 25,0 ml với dung môi Góc quay cực dung dịch xác định thời gian không 30 phút kể từ lúc pha Định lượng Tiến hành định lượng nhanh để tránh tác động ánh sáng quang hóa không khí Phương pháp sắc ký lỏng (Phụ lục 5.3) Pha động: Hexan-n-pentanol (997 : 3) Dung dịch thử: Hòa tan (không đun nóng) 10,0 mg chế phẩm 10,0 ml toluen (TT) pha loãng thành 100,0 ml pha động Dung dịch đối chiếu (1): Hòa tan (không đun nóng) 10,0 mg colecalciferol chuẩn (ĐC) 10,0 ml toluen (TT) pha loãng thành 100,0 ml pha động Dung dịch đối chiếu (2): Pha loãng 1,0 ml chuẩn cholecalciferol dùng cho phép thử hiệu pha động thành 5,0 ml Đun hồi lưu 45 phút cách thủy 90 oC, làm nguội Điều kiện sắc ký: Cột thép không gỉ (25 cm × 4,6 mm) nhồi pha tĩnh A (5 µm) Detector quang phổ tử ngoại bước sóng 254 nm Tốc độ dòng: ml/phút Cách tiến hành: Tiêm thể tích thích hợp dung dịch đối chiếu (2) Ghi sắc ký đồ điều chỉnh độ nhạy hệ thống cho chiều cao pic colecalciferol lớn 50% thang đo Tiêm lặp lại lần dung dịch đối chiếu (2), ghi sắc ký đồ Thời gian lưu tương đối so với colecalciferol khoảng 0,4 pre-colecalciferol 0,5 trans-colecalciferol Độ lệch chuẩn tương đối diện tích pic colecalciferol không lớn 1% Độ phân giải pic pre-colecalciferol trans-colecalciferol không nhỏ 1,0 Nếu cần, điều chỉnh tỷ lệ thành phần tốc độ dòng pha động để đạt độ phân giải Tiêm thể tích thích hợp dung dịch đối chiếu (1), ghi sắc ký đồ điều chỉnh độ nhạy hệ thống cho chiều cao pic colecalciferol phải lớn 50% thang đo Tiêm thể tích dung dịch thử ghi sắc ký đồ Tính hàm lượng phần trăm colecalciferol công thức: 100 × m2 × S1 m1 × S Trong đó, m1: Khối lượng mẫu thử dung dịch thử tính mg m2: Khối lượng colecalciferol chuẩn dung dịch chuẩn (1) tính mg S1: Diện tích (hay chiều cao) pic colecalciferol sắc ký đồ dung dịch thử S2: Diện tích (hay chiều cao) pic colecalciferol sắc ký đồ dung dịch chuẩn (1) Bảo quản Colecalciferol bảo quản bình kín chứa khí nitrogen, tránh ánh sáng để nhiệt độ o C đến oC Khi mở bình phải dùng Loại thuốc Vitamin Chế phẩm Viên nén calci colecalciferol Dung dịch tiêm, viên nén Thuốc uống dạng giọt chứa vitamin A, C D