CLOXACILIN NATRI Cloxacillinum natricum ·H2O C19H17ClN3NaO5S · H2O P.t.l: 475,9 Cloxacilin natri natri (2S,5R,6R)-6-[[[3-(2-clorophenyl)-5-methylisoxazol-4yl]carbonyl]amino]-3,3-dimethyl-7-oxo-4-thia-1-azabicyclo[3.2.0]heptan-2-carboxylat, phải chứa từ 95,0 đến 101,0% C19H17ClN3NaO5S, tính theo chế phẩm khan Tính chất Bột kết tinh màu trắng gần trắng, dễ hút ẩm Dễ tan nước methanol, tan ethanol 96% Định tính Có thể chọn hai nhóm định tính sau: Nhóm 1: A, D Nhóm 2: B, C, D A Phổ hồng ngoại (Phụ lục 4.2) chế phẩm phải phù hợp với phổ hồng ngoại cloxacilin natri chuẩn (ĐC) B Tiến hành sắc ký lớp mỏng theo định tính penicilin (Phụ lục 8.2) C Phản ứng B phép thử phản ứng màu penicilin cephalosporin (Phụ lục 8.3) D Chế phẩm cho phản ứng (A) ion natri (Phụ lục 8.1) Độ màu sắc dung dịch Dung dịch S: Hòa tan 2,50 g chế phẩm nước carbon dioxyd (TT) pha loãng thành 25,0 ml với dung môi Dung dịch S phải (Phụ lục 9.2) độ hấp thụ ánh sáng (Phụ lục 4.1) bước sóng 430 nm không 0,04 pH Dung dịch S có pH từ 5,0 đến 7,0 (Phụ lục 6.2) Góc quay cực riêng Từ +160o đến +169o tính theo chế phẩm khan (Phụ lục 6.4) Hòa tan 0,250 g chế phẩm nước pha loãng thành 25,0 ml với dung môi Tạp chất liên quan Xác định phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao (Phụ lục 5.3) Dung dịch thử: Hòa tan 50,0 mg chế phẩm pha động pha loãng thành 50,0 ml với dung môi Dung dịch đối chiếu: Pha loãng 2,0 ml dung dịch thử thành 200,0 ml pha động Điều kiện sắc ký giống phần định lượng Cách tiến hành: Tiêm dung dịch thử, tiến hành sắc ký với thời gian rửa giải gấp năm lần thời gian lưu pic Tiêm dung dịch đối chiếu Trên sắc ký đồ dung dịch thử, diện tích pic phụ không lớn diện tích pic dung dịch đối chiếu (1,0%), tổng diện tích pic phụ không lớn năm lần diện tích pic dung dịch đối chiếu (5,0%) Bỏ qua pic phụ có diện tích nhỏ 0,05 lần diện tích pic dung dịch đối chiếu N,N-dimethylanilin Không 20 phần triệu (Phụ lục 10.16; phương pháp 2) 2-ethylhexanoic acid Không 0,8% (kl/kl) (Phụ lục 10.17) Nước Từ 3,0% đến 4,5% (Phụ lục 10.3) Dùng 0,300 g chế phẩm Nội độc tố vi khuẩn Không 0,40 IU/mg (Phụ lục 13.2), chế phẩm dự tính để sản xuất dạng thuốc tiêm phân liều mà phương pháp loại nội độc tố vi khuẩn Định lượng Phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao (Phụ lục 5.3) Pha động: Acetonitril - dung dịch kali dihydrophosphat 0,27% điều chỉnh pH đến 5,0 với dung dịch natri hydroxyd M (25 : 75) Dung dịch thử: Hòa tan 50,0 mg chế phẩm pha động pha loãng thành 50,0 ml với dung môi Pha loãng 5,0 ml dung dịch thu thành 50,0 ml pha động Dung dịch chuẩn: Hòa tan 50,0 mg cloxacilin natri chuẩn (ĐC) pha động pha loãng thành 50,0 ml với dung môi Pha loãng 5,0 ml dung dịch thu thành 50,0 ml pha động Dung dịch phân giải: Hòa tan mg flucloxacilin natri chuẩn (ĐC) mg cloxacilin natri chuẩn (ĐC) pha động pha loãng thành 50,0 ml với dung môi Điều kiện sắc ký: Cột thép không gỉ (25 cm x 4,0 mm) nhồi pha tĩnh octadecylsilyl silica gel (5 µm) Detector quang phổ tử ngoại đặt bước sóng 225 nm Tốc độ dòng: 1,0 ml/phút Thể tích tiêm: 20 µl Cách tiến hành: Tiêm dung dịch phân giải Điều chỉnh thang đo cho chiều cao pic khoảng 50% toàn thang đo Phép thử có giá trị độ phân giải pic tương ứng với cloxacilin (pic thứ nhất) pic tương ứng với flucloxacilin (pic thứ hai) phải 2,5 Tiêm dung dịch chuẩn sáu lần, độ lệch chuẩn tương đối diện tích pic không lớn 1,0% Tiêm dung dịch chuẩn dung dịch thử Tính hàm lượng C19H17ClN3NaO5S chế phẩm dựa vào diện tích pic đáp ứng dung dịch thử dung dịch chuẩn hàm lượng công bố C19H17ClN3NaO5S cloxacilin natri chuẩn Bảo quản Bao bì kín, nhiệt độ không 25 oC Nếu chế phẩm vô trùng, bảo quản bao bì vô trùng, bảo đảm kín Nhãn Phải ghi rõ chế phẩm nội độc tố vi khuẩn Loại thuốc Kháng khuẩn Chế phẩm Thuốc tiêm truyền