Đang tải... (xem toàn văn)
... tien hnh tong hop cõc azomethin tuong ỷng Qua dụ thm dụ tõc dung sinh cỹa cõc azomethin ny 1.2 CAC NGHIấN CĩXJ VE AZOMETHIN 1.2.1 SO Ll/OC LICH Sĩ NGHIấN CĩU CĩA AZOMETHIN Azomethin (base Schiff... cỹa glucose Thõm dụ tõc dung sinh hoc cỹa cõc chõt tong hop duoc PHNI: TO N G QUAN 1.1 SO LITOC CC NGHIấN CU V IẽNG DUNG CA GLUCOSE: 1.1.1 CAU TAO HO HOC.rn Glucose l mot aldohexose: C6H 120 glucose. .. mụt azomethin Vi võy nhỹng chat chỹng tụi tong hop duoc l cõc azomethin >Vở tõc dung sinh hoc -Qua sa bụ thõm dụ tõc dung khõng khuõn, khõng nõm cỹa azomethin dai diờn, chỹng tụi nhõn thõy cõc azomethin
BOY TE TRUÔNG DAI HOC DlTOC HÀ NÔI ====== 0O0 ===== SV: LE TRUNG KIEN NGHIÊN CÛU TÔNG HOP MOT SÔ DÂN CHÂT CUA GLUCOSE CÔ CAU TRUC AZOMETHIN VÀ SO BO THÂM DÔ TÂC DUNG SINH HOC (KHO LUÂN TÔT NGHIÊP 1998 - 2003) Ngirôi hirông dân: TS. Giang Thi Son TS. Pham Thi Minli Thuÿ Noi thirc hiên: Bô môn Hoâ Hiru Ca Thdi gian thuc hiên: 03/2003 — 05/2003 HA NOI - THANG.5/2003 " s ' Pz LÔI CÂM ON Trong thôi gian ngân vï diêu kiên han ché, duoc sir hu'ông dân truc tiép hét slîc tân tînh cûa cô giâo - TS. Giang Thi Son, TS. Pham Thi Minh Thuÿ cùng su giüp dô vè moi mat cûa câc thày cô giâo cüng nhir câc cô kÿ thuât viên trong bô môn Hoâ hüu co - Truông Dai hoc Duoc Hà nôi, tôi dâ hoàn thành khoâ luân tô't nghiêp cûa minh vôi mue dich, nôi dung dé ra dûng thô’i gian quy dinh. Co duoc két quâ ngày hôm nay, tôi xin bày tô long biê't sâu sâc tôi cô giâo - TS. Giang Thi Son, TS. Pham Thi Minh Thuÿ cùng toàn thë câc thày cô giâo, câc cô kÿ thuât viên trong bô môn Hoâ hüu ca - Truông Dai hoc Duoc Hà Nôi. Tôi xin trân thành câm on Ban giâm _hiêu - Tm'àng Dai hoc Duoc Hà Nôi, thày giâo TS. Dô Ngoc Thanh (phong thi nghiêm trung tâm), cô giâo Nguyën Lê Phi cùng câc thày cô và kÿ thuât viên bô môn vi sinh và toàn thë câc bô môn và phong ban trong tnïcmg dâ giüp dô tôi hoàn thành khoâ luân này. Tôi cüng xin trân thành gûi lôi câm on tôi cha ,me, anh- chi ban bè trong và ngoài truông dâ tao diêu kiên giûp dô tôi trong suôt quâ trînh hoc tâp tai truông Dai hoc Duoc Hà Nôi. Sinh viên Lê Trung K iên 1 MUC LUC Dât van de Trang PHÂN I: TÔNG QUAN 1.1.1 .Câu tao hoâ hoc...................................................................4 1.1.2. Tïnh chat...............................................................................5 1.1.3. ung dung............................................................................... 8 1.2. Câc nghiên ciru vë a z o m e î h i n . ___________________9 1.2.1 .Sa luge lich su: nghiên cuu cüa azomethin.......................... 9 1.2.2. Tac dung sinh hoc................................. '...........................10 1.2.3.Tmh châ't.................................................................................. 12 1.2.4. Câc phuong phâp téng hop.............................................. 12 PHÀN D: THUC NGHIÊM VÀ KÊT QU 2.1. TEguyên lieu và phirang phâp nghiên emi................................... 20 2.1.1. Nguyên lieu....................................t.......................................20 2.1.2. Phuong phâp nghiên ctru......................................................... 21 2.2. Tong hçyp azomethin eûa glucose .____._________________ 21 2.3JSà£_dinh eau irue hoâ hoe.......................................... .................32 2.4. Thàm do fâe dung sinh hoe.................................................... ..34 2.5. Bàn luân và nhân xéf hêî quà.......................................................38 PHÂN ni: KÊT LUÂN VÀ DE XUAT PHÀN IV : TÀI LIEU THAM KHÂO VÀ PHU LUC 3.1. JàU lêu fliainJrfiào................................. ............ ...... ^ . ..41 3.2. Phu lue............................................................................................ 42 ? DÂT VAN DE Do nhu càu vê thuoc phông và chùa bênh ngày càng tâng, câc ché phâm I • thiên îihiên kho co thê dâp üng du. Vôi mong muô'n tîm ra nhùng thuô'c mai, nhiêu nhà khoa hoc dâ dira vào câü truc hoâ hoc cüa câc hop chat thiên nhiên de tông hop hay ban téng hop nên câc châ't môi vôi hy vong câc châ't này co tac dung sinh hoc. Théo tài liêu duoc nghiên ciiu câc baze azomethin dâ duoc nhiêu nhà khoa hoc nghiên cuti. Chüng không chî duoc sü dung nhu môt chat trung gian de téng hop mot sô' hop châ't m6i, mà ngay ban thân chüng cüng cô tâc dung khâng khuân, khâng nam, dièu tri lao, hui...[3][12]. Glucose là mot chât dâ duoc sü dung tù* lâu trong diêu tri và công nghiêp. Vôi ngành duoc, glucose duoc sü dung làm nguyên lieu de pha câc dich truyên, huyét thanh nhân tao, làm tâ duoc... Vôi dinh huông két hofp nhom aldehyd cüa glucose vôi câc amin thom bâc I, nhâm hy vong tao ra câc azomethin co tâc dung sinh hoc và co thé û'ng dung vào thuc te diêu tri lâm sàng, chûng tôi tiên hành de tài vôi câc mue tiêu sau: 1. Tong hop azomethin dân chat cüa glucose. 2. Thâm dô tâc dung sinh hoc cüa câc chât tong hop duoc. 3 PHÂNI: TO N G QUAN 1.1. SO LITOC CÂC NGHIÊN CÛU VÀ IÏNG DUNG CÛA GLUCOSE: 1.1.1. CAU TAO HO HOC.rn Glucose là mot aldohexose: C6H 120 6. glucose trong thiên nhiên thuôc duông dây D. D-glucose là chat ràn kê't tinh, dê ngâm nuôc, cô vi ngot. Bi phân huÿ bôi nhiêt. De tan trong nuôc, khô tan trong câc dung môi hüu co. Dung dich trong nuôc cô hiên tuçmg chuyën dông ( thay déi gôc quay eue ). Dung dich môi pha cô [ot]D20= +52.6°. (y Dông phân a-D-glucopyranose cô T°nc = 146°; [a]D20 = +1J 2.2°. Dông phân P~ D-glucopyranose cô T°nc= 148 - 155°; [a]D20 = +18.7°. Dung dich a-D- glucopyranose trong nuôc cô hiên tuong thay doi gôc quay eue [a]D tù + l\2.2°c'âén +52.6°,^côn dung dich (3- D-glucopyranose thay doi gôc quay eue [a]D tù +18.7° dén +52.6°, và cuô'i cùng cô [a]D on dinh là +52.6üC So dï nhu vây vï khi hoà tan D-glucose vào nuôc së cô su cân bàng giùa 34% dang a-D-glucopyranose vôi 66% dang (3- D-glucopyranose c= o H HO H_ C I Ç Tr OH H -O H OH -O H -O H H a-D-glucopyranose D-gluccfte P-Dglucopyranose 4 Hiên tirçmg thay d6i gôc quay eue [a] cüa glucose goi là “hiên tuong chuyën quay” voi hôn hop cân bàng giîra 34% dang a-D-glucopyranose vô'i 66% dang (3- D-glucopyranose. Glucose là mot aldohexose co 4 carbon bâ't doi, vï vây co 24 = 16 dông phân quang hoc hînh thành 8 cap doi quang dây D và L. Glucose co trong thiên nhiên thuôc ducmg dây D. de diéu chë glucose, nguôfi ta di tù nguyên liêu thiên nhiên là tinh bôt (C6H i0O5)„ -► Q H .A polysacarid D- glucose Quâ trînh thuÿ phân co su tham gia cüa xüc tâc acid hoâc men thîch hçfp. Trong thuc tê, de dieu chê'’ glucose ngucri ta thuÿ phân tinh bôt bàng men. Vf du: (C6H10O5)n —> (C6H10O5)x —> C12H22On —> C6H 120 6 dextrin D- maltose D- glucose (x < n ) 1.1.2- TINH CHAT. 1.1.2.1.- TINH CHAT VÂT LŸ Glucose là môt mono saccarit, no là môt châ't không mâu, vi ngot, tan tôt trong nuôc và thuong không tan trong câc dung môi hüu co.. 1.1.2.2.- TINH CHAT HO HOC Quan trong nhat là tfnh châ't hoâ hoc cua nhôm chu'c aldehyd 5 + Phân üng oxy hoâ Phàn ü'ng vôi thuoc thü tollens CH,— CH— CH— CH— CH— C = 0 I' OH I I OH I I OH -12-► CH,-CH— COOH + ! OH OH .1 H CH3— COOH ~ HCOOH OH Phân üng vôi nuôc Brom H r| — H ! c— OH H i‘l° I I C— C— y y y y° « H H I 1 l C— c — c=o o h h -u _ U _ U = -134- OH OH OH Ofl OH H OH D-Glucose H OH Acid - D - Glucozonic Oxy hoâ manh tao acid aldaric là môt diacid H H H0 H j1 | j '° | OH o=ç—c—c—c—c—c=o H H HMO3 H—C— C— C— C— C -C =0 OH OH OH H OH OH Orl OH ACID b — H Orl GLUCARIC D-glucose Phân üng khü CH20rl CH2OM rl-- C — Orl O H -- C — r\ I rl-- C — Orl MASrliJ ï-l— C —OH H*Q I H— C —OH I H a-D-glucopyranosa H----- C —Orl D-glucozza 6 OH— C— H -► H -- C — Orl rl-- C — Orl I rl-- C — Orl I H D-glucitol ( alditol ) + Phân rïng thé oxy cüa nhôm carbonyl. . Phân ü'ng tao oxim. H - C —N—OH H—C—O I H---- Ç-------OH H— c ------- OH HO— ç— H O — Ç— H-iN— OH- h H 1-hO H------- C---- OH Il------C.----- OH I I H----- C----- OH I H------- C---- OH I I H------C----- OH H------- C----OH H H . Phân lîng tao osazon vôi phenylhydrrazin. H. H C=0 H— Ç h— OH H O -c — h + 3h 2 n-nh— q h 5 H— C I ç=N-NHQH 5 HO-c— h h— H— C---- OH I c=N-NHC6 H5 + Nn 3 +QH5 NH2 + HoO c— OH I H— C---- OH OH H— C---- OH i H— C---- OH H H D-glucose + Phân ûng este hoâ ho-^T\ ÇHjOH HO--- H- (ŒbCQkO > j\ OH PYRTDIN0°c OH'/ H3COCO" \^^bO C O C I o h3 cxocH, OCC p-D-glucopyranose Penta-o-acetyl-p-D-glucopyranose + Phân lîng ether hoâ. P-D-glucopyranose Penta - methyl - ether-a-D-glucopyranose 7 + Phàn ring cua toàn bô phân tir trong môi tru'ô'ng kién yéu, à nhiêt dô thuôtag cô hiên tirçmg epimer hoâ. OH--C—H H--i —OH H--C-OH H--C—OH W t>--MAMOSE I 1.1.3. ÜNG DUNG CÜA GLUCOSE.[l][2] Glucose co nhiêu ü'ng dung trong kî nghê và rîüi sông. Trong ngành duoc, glucose duoc dùng làm thuôc bôi ducmg co thé vô'i câc dang khâc nhau. Câc dung dich huyét thanh ngot dang truong ( dung dich 5% trong nu'ôc ) và uu tm'ong ( dung dich glucose 30% trong nuôrc ) duoc dùng nhiêu trong ngành duoc. Glucose con duoc dùng làm tâ duoc, làm ngot thuôc, dùng làm thuc phâm.... > Trong khoâ luân này, dua vào tinh châ't nhom chirc Aldehyd (- CHO) cûa glucose vôi câc Amin bâc I. Chung tôi tien hành tong hop câc azomethin tuong ûng. Qua dô thàm dô tâc dung sinh cüa câc azomethin này 1.2. CAC NGHIÊN CÜXJ VE AZOMETHIN 1.2.1. SO Ll/OC LICH SÜ NGHIÊN CÜU CÜA AZOMETHIN Azomethin (base Schiff ) là nhîrng hç/p chat hfru co trong phân tû cô chu'a nhôm imin (-HC=N-). Câc hop chat này dâ duoc nghiên cü'u tù' lâu vi không nliùng là sân pham tmng gian de t6ng hofp mot sô hop châ't cô tâc dung sinh hoc mà ban thân chung cüng cô tâc dung khâng khuan, khâng nâ'm, diêu tri, lao, hüi, loi tiëu...[3][24][29] 8 - Nam 1850, khi trôn môt hôn hap dông phân phân tir benzaldehyd và anilin thi Laurent và Gerhard thu duac hgp châ't cô công thùc: C13H nN goi là benzoylanilid ( công thu'c câu tao duac tîm ra sau này là: C6HS-CH=N-C6H5 và goi tên là benzylidenanilin hay benzalanilin). dây là Azomethin dâu tiên duoc tïm thây thuôc dây anilin thé. Nâm 1857, khi dun nông dông thé tfch anilin vôi 2- hydroxy benzaldehyd, Schiff dà thu duac châ't cô công thü'c C13Hu ON duôi dang tinh thé màu vàng sâng: + C6H7N = C13HnON + H20 A N y Ong cho râng dây là mot dông phân cüa benzalanilin nhung hoàn toàn khâc nhau vê tînh châ't so vôi benzalanilin. Mirai hai nâm sau, ông dâ nêu ra công thü’c câu tao cüa châ't này là: OH CeH/ C H = N — C6H5 Chât này duac goi tên là salicydenanilin tên này phù hap danh phâp câc imin. dô là châ't dâu tiên duac Schiff nghiên cüu, chüng cô tmh base tirang dôi manh. Tù dô nhüng hap châ't cô nhôm chüc imin dèu duac goi là base Schiff (hay azomethin). Tù dô dên nay, nhiêu tâc giâ trên thê' giôi dâ tiê'p tue nghiên cûu môt câch cô hê thô'ng phân üng cüa câc aldehyd vôi câc amin bâc 1, bâc 2 thuôc dây béo, dây tham và di vong. Vê nguyên tâc chung, châ't azomethin thuôc câc kiêu sau: NH---- R R---- CH = N -----R R ------ C H (II) NH-----R (III) (I) 9 (IV) Ngày nay, (IV) duoc dùng dë tong hop mot sô polymer, (I) và (III) rat ft dùng. (II) dùng trong ïïnh vue duoc hoc cüng nhir kÿ nghê. O Viêt Nam cüng co môt sô công trinh nghiên cüu vê van dê-này, câc tâc già: Dang Nhu Tai và công su truông dai hoc Téng Hop Hà Nôi dâ nghiên cüu tông hop câc azomethin chüa nhân indol và thiazol. Tai tru'ông Dai hoc Duoc Hà Nôi, câc tâc giâ: Giang Thi Son, Nguyên Minh Khoi, Nguyên Kim Thu dâ nghiên cüu tong hop câc azomethin tù câc aldehyd thom và câc amin thom làm dân chat trung gian dë tong hop câc dân chat thuôc dây P- aminoceton.[3][16] 1.2.4. TAC DUNG SINH HOC. Théo nhiêu tài lieu dâ duoc công bô', câc baze azomethin không chï duoc su dung nhu môt châ't trung gian dë tëng hop môt sô' hçp châ't moi , mà ngay ban thân no cüng co tâc dung sinh hoc nhu khâng khuan, khâng nâ'rn, dlüu tri lao, hui, loi tiëu□ [4][9][15] Bâng 1.1: Mot sô' hop châ't azomethin duoc dùng làm thuô'c S T Tên thuô'c T 1 Ampecloral Công dung Công thüc hoâ hoc diêu C i chüng --- C H 3 1 N = C H ------ C C L3 C H 2 -------C H 2 Ambuside biê'ng an Thuôc loi OH 1 CL N = C H ----- CH-------CH3 tien H 2N — - S O X ^ O tri X j C N H------ C H ------ H = O O 10 CII, 3 Teridone Thuôc . \ / NH N=CH— kliâng lào s** 0 0 /0 NH 4 Mecillinam Khâng y :o o H ^ -----N sinh diêt khuân O \ _ 5 N— CH = N/ V b \ ch3 nhôm ;h 3 y Pennicilin Sufanilamid Sulfamid khâng ^ S ^ C H = C H - C H = N —( ^ ^ ) - S 0 2NH2 • khuan 1.2.3- TINH CHAT CÜA AZOMETHIN Bazo azomethin nôi chung kém bên vfrng do cô khuynh hu’ông Polymer hoâ, phàn ung ngimg tu, thuÿ phân do trong câu truc cô nhôm imin (-CH=N-) Câc azomethin mach ho thucmg là nhùng châ't long và kém bên Câc azometin thom tuong doi bên, chung là nhùng chat rân két tinh, thucmg tôn tai dang don phân tu, cô tinh bazç, không tan trong nirôc, tan trong benzen, cloroform: dë tan trong DMF, aceton, ît tan trong methanol, .ethanol, tan duoc trong Ethanol, Methanol nông. Câc azomethin cô nhiêt dô nông chây gàn vdi câc Amin bâc II. Hiên tuong hô biên: Bazo azometin cô thë tôn tai à hai dang dông phân hlnh hoc syn và Anti. Hai dông phân này cô thë hô bien cho nhau c h 2 r ;c = n H r ’ ag......... - XR ’ c H 2C 11 r = n ” *h > Vè hoâ hoc: Tmh chât co ban cüa câc azometin là do lien két dôi ( - C = N - ) du'çc khang dinh bàng hiêu lîng Ramans, không tuong tir nhu câc lien két dôi ethylenic ( I NC = CH - ) Câc hop chat này duac phân biêt bai 3 tmh chat sau - Tmh baza - Phân ü’ng cât mach - Phân ü'ng công hop > Dô ben vümg cüa câc azomethin Câc azometin duoc tao thành tù aldehyd và amin thom thuàng bèn vûng; Côn azomethin tao thành tù aldehyd và amin mach ho thu'ông không bên do: dê bi trùng hiêp hoâ, bi chuyën hoâ tao hop chât di vong: Phân tu luong cüa câc aldehyd và amin tao ra azomethin càng nhô thî khâ nàng bi trùng hiêp hoâ càng cao. 1 .2 .4 . CÂC PH I/O N G PH  P TÔNG HO P > Ngung tu amin bâc 1 vôi ceton mach hô [11] R\ ___ R C— o + h 2n r3 ----------► \ c = n . _ R3 + H^0 R . Phân üng duoc tiên hành à nhiêt dô cao, trong dung môi tro phân eue co nhiêt dô soi cao hon ceton, vôi xüc tâc Iod hoâc ZnCL2 >Khû hoâ câc amid th e .. H Aij— CO—N H — Ar2 P— ^ Ar— Ç—N - A r 2 Zn/HCL> Ar1- C H = N - A r 2 CL Han chë cüa phuong phâp này là không co tinh chon loc cao và sân phâm trung gian dê bi phân huÿ. ^Tù dân chât N- CLo hoâ cüa câc amin.thom bâc 2 trong alcol co mat ™ KHOH + Arr N - C H 2-A r2-------- ► A ^ - C H = N - A r 1 + H20 CL 12 i)i tù hop chat thom co nhôm methyl hoat dông và hop chat azo (-N=N-) [15] l Ar, - N= N- Ar2 + H3C- Ar3 -> Ar, N= CH- Ar3 +H2N- Ar2 > Ngung tu hop chat nitro thom vôi horp chat thtfm cô nhôm methyl hoat dông[16] Ar, -N = O + H3C- Ar2 Ar, -N= CH-'Ar2 + H20 >Khiï hoâ nitril cô xûc tâc( Ni, Pt) [6] r- C n (I) JÜMlEV r . C H=NH- ü - — R -C H ,-N H , 100°C (II) Nhuoc diëm là dë tao ra sân phâm phu là câc amin bâc 2 và 3. > Ngung tu aldehyd vôi amin bâc 1 i [11] Câc amin mach hô cüng nhu amin thom bâc 1 khi ngung tu vôi aldehyd thi tao ra azomethin theo phân üng: R - CHO + H2N- R ’ —» R- CH = N- R ’ + H20 R.R’: alkyl, aryl (don, da vông), vông no, dj vông. Phân üng cô thé x iy ra trong alcol, ether vôi su cô mât cua KOH hoâc K2C 03, theo tî lê mol giüa amin và aldehyd là 1:1. Phân üng cô toâ nhiêt nhe. Trong môt sô tru'ông hop dë phân üng xây ra phài dun nông. ♦♦♦Trong khoâ luân này, chüng tôi sü dung phuong phâp ngung tu aldehyd vôi amin thom bâc I dë tong hop câc dân châ't azomethin cûa glucose. 13 V Phuong trînh tong quât. A11--------C ------ O + H 2N ----- Ar2 -► Arf C H =N - H / Ce chê phân ûfng. - Phân üng xây ra qua 2 giai doan: + Giai doan 1: Tâc nhân ai nhân tân công vào phân tir aldehyd. theo co ché công hop ai nhân AN + Giai doan 2: Phân ûng tâch loai mot phân tir H20 theo co ché tâch loai E,. Co thë biëu diên nhir sau: Nlur vây, khâ nâng và toc dô phân ûng phu thuôc chü yéu vào 2 yéu tô: - Su phân ly H+ cüa phân tü amin - Su' phân eue cüa liên két dôi carbonyl aldehyd (- CHO) VCâc yéu tô ânh huông toi phâh ûng [6][7][8] a- ânh huôfng cüa gôc - Ar, dén khâ nâng phân eue cüa liên két dôi carbonyl aldehyd - Trong phân tû aldehyd 14 Do oxy cô dô âm diên lôn hem carbon nên liên két thu'ông xuyên bi phân eue: carbon là trung tâm tich diên du'ang và oxy là trung tâm cua phân üng công âi nhân. Do vây, néu diên tich dirang riêng phân 8(+) à nguyên tir C càng Ion thi phân üng càng dê xây ra và ngirçc lai (Do ành hu'ông cüa hiêu üng liên hap hüt diên tu cüa gôc aryl vôi nhôm aldehyd lôn han alkyl nên sàn phâm tao ra bên han so vôi aldehyd mach ha) - Néu trên nhân tham cüa aldehyd cô câc nhôm thé thï ban chât, vi tri câc nhôm thé cüng ânh huông dén khâ nâng phân üng: + Néu trên nhân tham cô nhôm thé loai I (- NH2, - OH, - alkyl, OCH?...) gây hiêu üng day diên tu (+1, +M) làm tâng mât dô diên tir trong nhân tham và làm giâm 8(+) trên carbon cüa carbonyl, khâ nâng phân ü'ng cüa hap chât kém di. + Néu trên nhân tham cô nhôm thé loai II ( -N 02, -COOH...) gây hiêu üng hüt diên tü (-1, -M) làm giâm mât dô diên tü trong nhân tham và làm tâng tmh phân eue cüa liên két carbonyl, làm thuân lai cho phân üng công âi nhân. Mire dô hüt diên tü cüa nhôm thé càng lôn (-N 02>- COOH) thï khâ nâng phân ü'ng càng thi khâ nâng phân üng càng dê. + Su cô mât cüa yêu to hüt diên tü và khâ nâng hüt diên tü càng manh (H - COOH...) thi toc dô phân üng càng giâm c- Yêü tô không gian. - Ngoài hiêu üng diên tü thî hiêu üng không gian gây ra bôi câc nhôm thé cùng gây ânh hucmg không nhô tôi phân üng. Trong phân üng công hop ai nhân, gôc Ar, cûa phân tü aldehyd càng lôn “công kênh” sê ngân cân câc tâc nhân phân üng vào nhôm carbonyl làm cho phân üng khô xây ra hon. - Mat khâc, chmh yêü tô không gian cüa phân tü amin cüng gây ânh hu'ông tuong tu. d- Yêü tô xüc tâc. [6] - Phân üng tong hop azomethin tü aldehyd thom và amin thom bâc 1 cô thë dung xüc tâc acid hoâc bazo hoâc không cân xüc tâc. Nêu tînh âi nhân cüa tâc nhân yêü (tînh bazo yêü) thî thuong cân xüc tâc acid. Nguoc lai câc bazo tuong doi thî phân üng công hop cô thë xây ra trong môi truông trung tmh, thâm cht bazo yêü + Nêu xüc tâc là acid, co ché phân üng sê nhu sau: 16 H N -R + -h ,a \+ : c —N H — R - X —NH— R OH _ ^ \ C—NH— R N ~H " » ^ C = N —R /■ - Néu xûc tâc là bazo, co ché phân ûng sê là: H2N - R + OH"--------- *■ H N -R \ + hfco \ /0 = 0 + H N -R ^ +h,0 - 0 NH—R \ -HzO\ A ~ ° ~ H S 5 = fe /C = N - R NH— R Toc dô phân ûng co thë do buoc công hop hoàc ngung tu quyét dinh. Trong môi tru'dng tmng tinh hoàc baza thi giai doan công hop xay ra nhanh, nghîa là tôc dô toàn bô phân ûng chu yéu phu thuôc vào giai doan loai niroc. Néu giai doan này co châ’t xüc tâc acid së làm tàng tôc dô phân ûng tâch loai, tire là xüc tâc acid sê làm thuân loi cho toàn bô quâ trinh phân ûng. Tuy nhiên, xûc tâc là acid cüng tâc dung lên tâc nhân âi nhân cüa phân ûng gây nên hiên tuong tao muoi và diêu này ft nhiêu gây phong toâ dôi diên tir tir do cüa nito NH2-R + H+B ------► [N +H3-R ]B ' Vi thé giai doan công hop co thë bi châm lai và co thë thâp tôi mûc trô thành quyét dinh tôc dô phân ûng. Do vây, phàn ûng së thuân loi nhât tai mot PH nhât dinh chû không phâi là trong môi triïong acid manh hay bazo' manh. ô tri s6 PH tôi im này aldehyd duoc hoat hoâ manh côn amin phân lôn ô dang tu e- Câc yéu tô ânh huông khâc * Tî lê câc chât tham phân ûng - Dây là phân üng dông mol giCra amin và aldehyd, do dô së cô 2 trirô'ng hop: + Khi dir, aldehyd së bi oxy hoâ tao ra acid tirong lîng. Dac biêt -câc aldehyd tham rat de bi oxy hoâ ArCHO -I°V ArCOOH + Khi du amin së cho ra câc san pham phu khâc R -N H -H R -N H -H _ Ho0 + 0 =C—R ----- ^ ,c —R R -N H ^ Câc sân phlm phu này không nhüng làm giâm hiêu suât tong hap mà côn làm cho quâ trïnh tinh chê' khô khân. * Nhiêt dô, thôfi gian phân üng. - Nhiêt dô tâng së làm cho tô'c dô phân lîng tâng, tuy nhiên chî nên duy tri à mot nhiêt dô thich hop vï quâ cao cô thë dân dên phân huÿ ngay sân phâm vï câc hap châ't azomethin thuông không ben. - Tuang tu, thài gian phân lîng cüng duac chon lira thich hop dê phân ü'ng xây ra hoàn toàn và không làm phân huÿ sân phâm. Bên canh dô, kliâu H tinh chê cüng là mot bu'ôc quan trong quyê't dinh hiêu suât sân phâm. 18 P H A N II: TH lTC N G H IÊ M VÀ K E T Q U A 2.1. NGUYÊN VÂT LIÊU VÀ PHÜONG PHÂP THUC NGHIÊM: 2.1.1. NGUYÊN VÂT LIEU: a- Hoâ chat: - Acid acctic dàc. - Ethanol tuyêt doi. - Ethanol, clorofonn. - Amin thom: + Anilin + Toluidin + p - Nitro-anilin + m - Nitro-anilin + Acid p-amino-benzoic + Sulfanilamid - Dimethylfonnamid ( DMF ) - Aecton - Glucose diroc dung. b- Dung eu, mây môc - Bînh càu dung tfch 100 ml - Mây khuay tù co bô phân cung câp nhiêt. - Sinh hàn hoi liru. ’ - Noi câch thuÿ. - Côc cô mô dung tîch 100 ml, 200 ml. - ong dong 10, 100ml - Pitpet 1ml, 5ml, 10ml. - Bân sac kÿ lôp mông kiesclgel - Dèn tù ngoai: - Mây do dô chây 19 2.1.2. PHUONG PHÂP NGHIÊN CÜU > Nguyên tüc : + Thu'c hiên phân ü’ng ngung tu Alcdehyd vôi amin tham bâc I, dé tao thành azomethin > So' do phân üng: ^C =0 + H2N —Ar -------- ► ^ C = N - A r + H20 Phân ung xây ra theo hai giai doan: + Giai doan I : Tâc nhân âi nhân tân công vào phân tir Aldehyd theo co chê công hop âi nhân + Giai doan II : Phân üng tâch loai 1 phân tù nuôc theo co chê tâch loai 2.2.TÔNG HOP AZOMETHIN CÜA GLUCOSE: 2.2.1. Tong hop azomethin cüa glucose vol anilin (Glucosanilin).- mâu ch â tl > Phuong trînh phân ü'ng H—C = 0 + H2N-- ---------------- ► I H ----(p----OH H C„H120 6 C6H6N M=180 M=92 ‘ C12H16N 0 5 M=254 20 + H2O >Tién hành: Trong bïnh càu 3 c6 dung tich 100ml. + Buôc 1: Cho vào 1,81g Glucose duoc dung (0,01riiol glucose ) và 15ml Ethanol tuyêt doi. Làp mây khuây tù, sinh hàn hoi liru, nhiêt kë, dun hoi lu'u cach thuÿ ô nhiêt dô soi cüa dung môi (70-80°c) và khuây liên tue cho tan hoàn toàn. + Bu'ôc 2: Thêm tiêp 1ml Anilin ( 0,01ml) và 1ml acid acetic dàc làm xûc tâc vào bînh phân ûng trên. + Birô'c 3: Tiêp tue khuây và dun hoi luu cach thuÿ hôn hop phân ûng, duy tri nhiêt dô sôi cüa dung dich trong vông 15 phût, theo dôi phân ûng bàng sàc kÿ lôp mông (hê dung môi CHCL3:MeOH tÿ lê 7:3). Chuyën hon hop phàn ûng sang côc thuÿ tinh, làm lanh cho sân pham kêt tinh hoàn toàn. Loc lây tua bàng phêu Buchner. Kêt tinh lai sân phâm trong Ethanol tuyêt dôi. Sây tûa thu diroc à nhiêt dô 50-60°c trong vong 6-7 gio. > Két quâ: + Tüa thu duoc co dang bôt màu nâu.Sân pham không tan trong nirô’c ; ît tan trong ethanol, methanol, cholorofonn; Tan Ethanol nông; Tan tôt trong DMF. + Khôi lirong tüa sây khô : 1.48 g + Hiêu suât phàn ûng : 58,0% + Tnc : 176-178°C + Rf : 0.71 21 trongMethanol nông, 2.2.2. Tong hop azomethin cûa glucose vôi p-toluiclin (Glucosal - p- toluidin)- înâu chat sô II > Phuong trïnh phân ung: H -C = 0 I I H -C -O H H O -C -H I H -C -O H + I I H -C -O H I H -C -O H H C6H120 6 C7H9N C13H19NOs M= 180 M=107 M=269 >Tién hành: Trong bînh càu 3 co dung tich 100ml. + Birôc 1: Qio vào 1,81g Glucose duoc dung (0,01mol glucose) và 35ml Ethanol tuyêt dô'i. Lâp mây khuây tù, sinh hàn hôi liru, nhiêt kê', dun hôi lu'u câch thuÿ à nhiêt dô sôi cûa dung môi (70-80°c) và khuây liên tue cho tan hoàn toàn. + Bu’ôc 2: Thêm tiê'p 1.07g p-tdluidin ( 0,01ml) và 1ml acid acetic dâc làm xûc tâc vào bînh phân üng trên. + Bu'ôc 3: Tiê'p tue khuây và dun hôi lu'u câch thuÿ hôn hop phân üng, duy trî ô nhiêt dô sôi cüa dung dich trong khoâng 45 phüt, theo dôi phân üng bang sâc kÿ lop mông (hê dung CHCL3 : MeOH môi tÿ lê 7:3) . Chuyën hôn hop phân üng sang cô'c thuÿ tinh, làm lanh cho sàn phâm kê't tinh hoàn toàn. Loc lây tüa bâng phêu Buchner. Kê't tinh lai sân phâm trong Ethanol tuyêt dôi. Sây tua thu duoc ô nhiêt dô 50-60°c trong vong 6-7 gio. 22 > Két quâ: + Tua thu duoc cô dang bôt màu trâng. Sân pham không tan trong nu'ô'c; if tan trong ethanol, methanol, choloroform; Tan trong Methanol nông, Ethanol nông; Tan tôt trong DMF. + Khôi luong tüa sây khô : 1.29 g + Hiêu suât phân üng : 48,0% +Tnc : 188-190°C + Rf : 0.65 2.2.3. Tong hop Azomethin cüa glucose vôi p-nitro anilin (glucosal - p - Nitro-Anilin)- mâu chat sô III >Phirong trînh phân ùfng: H -C = 0 H -Ç = N H -C -O H H -C -O H H 0—Ç—H H -C -O H + H;N A \ = / H -C -O H • H - C —OH NO j -- , H O - Ç - H + h 2o H -Ç -O H H -Ç -O H H - Ç —OH H H C6H1206 c 6h 6n 2o 2 M=180 M=137 c 12h 16n 2o 7 M=300 >Tién hành: Trong bînh eau 3 co dung tich 100ml. + Bu'ôc 1: Cho vào 1,81g Glucose duoc dung (0,01mol glucose) và 30ml Ethanol tuyêt dôi. Làp mây khuây tù, sinh hàn hoi lu'u, nhiêt. ké, dun hoi lu'u 23 câch thuÿ ô nhiêt dô soi cüa dung môi (70-80°c) và khuây liên tue cho tan hoàn toàn. + Birôc 2: Thêm tiêp 1.38g p-nirto-anilin ( 0,01ml) và 0.5ml acid acetic dâc làm xûc tâc vào bïnh phân üng trên. + Buôc 3: Tiêp tue khuây và dun hôi luu câch thuÿ hôn hop phân ü'ng, duy tri ô nhiêt dô soi cua dung dich trong khoâng 25 phüt, theo dôi phân üng bâng sâc kÿ lop mông (hê dung môi CHCL3: MeOH tÿ le 7:3) . Chuyën hôn hop phân üng sang côc thuÿ tinh, làm lanh cho sân phâm kê't tinh hoàn toàn. Loc lây tüa bâng phêu Buchner. Két tinh lai sân phâm trong Ethanol tuyêt dôi. Sây tua thu duoc à nhiêt dô 50-60°c trong vong 6-7 giô. >Kêt quâ: + Tüa thu duoc cô dang bot màu vàng nhat. Sân phâm không tan trong nuô'c ; ît tan trong ethanol, methanol, choloroform; Tan trong Methanol nông, Ethanol nông; Tan tôt trong DMF. + Khoi luçrng tua sây khô : 1.89 g +Hiêu suât phân ûng : 63,0% +Tnc : 222-224°C + Rf : 0.68 24 2.2.4. Tong hop Azomethin cûa glucose voi m-nitro-anilin (Glucosal- m- nitro-Anilin). mâu chat so IV no2 >Phuong trlnh phân îrng: H—C:= N H—C—O I NO, + h 2N 9 \ H—C—OH H—C—OH HO—Ç—H « I \ _* H O -Ç -H H—C—OH H—C—OH H —C—OH H H —C—OH 1 H H —Ç—OH H H Ç + H2° OH c „h 12o 6 c 6h 6n 20 2 c 12h 16n 20 M=180 M=138 M^300 7 >Tién hành: Trong bînh càu 3 c6 dung tîch 100ml. + Biïorc 1: Cho vào 1,81g Glucose duoc dung (0,01mol glucose) và 30ml Ethanol tuyêt dô'i.Lâp mây khuâytù, sinh hàn hôi luu,nhiêt kê', dun hôi liru câch thuÿ b nhiêt dôsôi cüa dung môi(70-80°c) và khuây liên tue cho tan hoàn toàn. + Buôc 2: Thêm tiê'p 1.38g m-nirto-anilin ( 0,01ml) và 0.5ml acid acetic dâc làm xüc tâc vào bînh phân üng trên. + Bu'oc 3: Tiê'p tue khuây và dun hôi lu'u câch thuÿ hôn hop phân üng, duy tri ô nhiêt dô sôi cûa dung dich trong khoâng 20 phüt, theo dôi phân üng bâng sâc kÿ lôp mông (hê dung môi CHCL3: MeOH tÿ lê 7:3) . Chuyën hôn hop phân üng sang côc thuÿ tinh, làm lanh cho sân phâm kê't tinh hc>àn toàn. Loc lây tùa bâng phëu Buchner. Kê't tinh lai sân pham trong Ethanol tuyêt dô'i. Sây tûa thu duoc ô nhiêt dô 50-60°c trong vông 6-7 giô. 25 >K éî quâ: + Tua thu duoc co dang bôt màu vàng tirai. San phâm không tan trong nu'ôc ; ft tan trong ethanol, methanol, choloroform; Tçtn trong Methanol nông, Ethanol nông; Tan tôt trong DMF. + Khôi litong tüa sây khô : 1.71 g 4- Hiêu suât phân üng : 57,0% + Tnc : 227-229°C + Rf : 0.7 2.2.5. Tong hop Azomethin cüa glucose vciï p-Bromo- anilin(GIucoza - p- Bromo-aniIin):/wâ« chat sô'V >Phuong trïnh phân ûng: H—C = 0 I I H O -C -H I H -C -O H H -C -O H I I H -C -O H H -C -O H I H Q H .A C6H6NBr C12H16N br05 H M=180 M=1.73 M=334 >Tién hành: Trong bînh câu 3 co dung tich 100ml. + Bu'ôc 1: Cho vào 1,81g Glucose du'gc dung (0,01mol glucose ) và 30ml Ethanol tuyêt doi. Làp mây khuây tir, sinh hàn hoi liru, nhiêt kê', dun hoi 26 kru câch thuÿ à nhiêt dô soi cüa dung môi (70-80°c) và khuây liên tue cho tan hoàn toàn. + Bu'ô'c 2: Thêm tiêp 1.38g p-bromo-anilin ( 0,01mol) và 1ml acid acetic dâc làm xüc tâc vào bïnh phân üng trên. + Bu'ôc 3: Tiêp tue khuây và dun hôi .km câch thuÿ hôn hop phân üng, duy tri ô nhiêt dô sôi cüa dung dich trong khoâng 70 phüt, theo dôi phân ü'ng bâng sâc kÿ lorp mông (hê dung môi CHCL3 : MeOH tÿ le 7:3) . Chuyën hon hop phân üng sang coc thuÿ tinh, làm lanh cho sân phâm két tinh hoàn toàn. Loc lây tüa bâng phêu Buchner. Két tinh lai sân phâm trong Ethanol tuyêt dôi. Sây tüa thu duoc à nhiêt dô 50-60°c trong vong 6-7 giôr. r Két quâ: + Tüa thu duoc cô dang bôt màu trang duc. Sân phâm không tan trong nuôc ; ît tan trong ethanol, methanol, choloroform; Tan trong Methanol nông, Ethanol nông; Tan tôt trong DMF. + Khô'i luong tua sây khô : 1.53 g + Hiêu suât phân üng : 45% +Tnc : 174-176°C + Rf : 0.56 27 2.2.6. Tong hop Azomethin cûa glucose vol Acid p-aminobenzoic( Acid Glucoza - p - amino-benzoic):môw chat s o VI >Phuong trlnh phân ufng: ’ H-C= 0 . H- C = N — Tien hành: Trong bînh càu 3 co dung tich 100ml. + Birôc 1: Cho vào 1,81g Glucose duoc dung (0,01mol glucose ) và 25ml Ethanol tuyêt dôi. Lâp mây khuây tù, sinh hàn hôi hm, nhiêt kê, dun hôi lu'u câch thuÿ à nhiêt dô sôi cüa dung môi (70-80°c) và khuây liên tue cho tan hoàn toàn. + Buôc 2: Thêm tiêp 1.38g acid p-amino-benzoic ( 0,01mol) và 0.2ml acid acetic dâc làm xüc tâc vào bînh phân üng trên. + Bu'ôc 3: Tiê'p tue khuây và dun hôi liru câch thuÿ hôn hop phân üng, 'i duy trî ô nhiêt dô sôi cüa dung dich trong khoâng 55 phüt, theo dôi phân üng bâng sâc kÿ lop mông (hê dung môi CHCL3: MeOH tÿ lê 7:3) . Chuyên hon hop phân üng sang cô'c thuÿ tinh, làm lanh cho sân phâm kê't tinh hoàn toàn. Loc lâ'y tua bâng phêu Buchner. Kê't tinh lai sân phâm trong Ethanol tuyêt dôi. Sây tua thu duoc ô nhiêt dô 50-60°c trong vông 6-7 giô. >Két quâ: + Tua thu dirgc cô dang bôt màu trâng. Sân phâm không tan trong nu'âc ; ît tan trong ethanol, methanol, cholorofonn; Tan trong Methanol nông, Ethanol nông: Tan tôt trong DMF. + Khôi lirçmg tüa sây khô : 1.67 g + Hiêu suât phân ûng : 39,0% + Tnc : 189-191°C + Rf : 0.71 2.2.7. Tong hop Azomethin cüa glucose vol sulfariilamid (Glucosa- sulfanilamid).m*fw châ'tso VII > PliuoTig trinh phân urng: ,— , H -C = 0 H -Ç = = N —/ H -C -O H H -Ç -O H H O -Ç -H H -C -O H + H2N_ f \ _ S02NH2------ ^ H O -Ç -H \ = / H -Ç -O H H - C —OH H -Ç -O H H - C —OH H -Ç -O H H H c 6h 12o 6 M=180 V - S 0 2NH2 C6H8N2S02 c 12h 18n 2S07 M=172 M=334 29 H20 > Tien hành: Trong bïnh câu 3 cô dung tich 100ml. + Bu'ô'c 1: Chp vào 1,81g Glucose duoc dung (0,01mol glucose ) và 32ml Ethanol tuyêt dôi. Lâp mây khuây tù, sinh hàn hôi luu, nhiêt kë, dun hôi luu câch thuÿ ô nhiêt dô soi cüa dung môi (70-80°c) và khuây liên tue cho tan hoàn toàn. + Budc 2: Thêm tiëp 1,72g sulfanilamid ( 0,01mol) và 0,9ml acid acetic dâc làm xüc tâc vào bînh phân ung trên. + Birôc 3: Tiêp tue khuây và dun hôi luu câch thuÿ hôn hop phân üng, duy tri ô nhiêt dô sôi cüa dung dich trong khoâng 45 phüt, theo dôi phân ü'ng bang sàc kÿ lôp mông (hê dung môi CHCL3: MeOH tÿ lê 7:3) . Chuyên hon ho'p phân ü'ng sang côc thuÿ tinh, làm lanh cho sân phâm két tinh hoàn toàn. Loc lây tüa bâng phêu Buchner. Két tinh lai sân phâm trong Ethanol tuyêt dôi. Sây tüa thu duoc à nhiêt dô 50-60°c trong vong 6-7 gio. > Két quâ: + Tua thu duoc cô dang bôt màu trâng duc. Sân phâm không tan trong nuôc ; ît tan trong ethanol, methanol, cholorofonn; Tan trong Methanol nông, Ethanol nông; Tan tôt trong DMF. + Khôl lu'ofng tüa sây khô : 1.57 g + Hiêu suât phân ûng : 47 % + Tnc : 245-246°C + Rf : 0.67 30 Bâng2.1 : Câc chat azomethin tong hop duoc. 1 1 ! Chat ! .AZOMETHIN | CTPT Tên hop chat c 12h 17n o 5 Glucosanilin c 13h 19n o 5 Glucosal-p- SO I II \ — CH3 H -Ç = N — / R toluidin ----- c 12h 16n 2o 7 m H ^ — NO2 Ç— N — R Anilin ' ----- no IV H -Ç = N — / R 2 c 12h 16n 2o 7 Glucosal-m-nitro- ^ Anilin ' ----- ' V H —Ç = N — R Glucosal-p-nitro- C12H16NBr Glucosal-p- 05 Bromo-anilin c 13h 17n o 7 Acid glucosal-p- \ — Br ' ----- ' t VI \ — COOH H —Ç = N — / R amino-benzoic '---- ' vu GlucosalH —Ç = N — / R \ — S 0 2NH2 '-----' c 12h 18n 2s 07 R: là gôc -CHOH-CHOH-CHOH-CHOH CH2OH 31 sulfanilamid Bàng 2.2: Tinh chat, hàng sovât ly cüa câc hop chat azomethin tong hop duoc Chai M CTPT su Hiêu nhiêt dô Trang suat nông thâi (%) chây(°c) SKLM CHC13: MeOH I II III c 12h 17o 5n 225 58,0 176-178 Nâu dô 7 :3 0,55 c 13h 19o 5n 269 48,0 188-190 Trang 7 :3 0,65 c 12h 16n 2o 7 300 63,0 222-224 Vàng 7 :3 0,64 nhat IV V c 12h 16n 2o 7 C12H 16NBrO 300 57,0 227-229 Trang sûa 7 :3 0,7 333,9 45,0 174-176 Tràng sûa 7 :3 0,5 . 229 39,0 189-191 Tràng 7 :3 0,71 334 47,0 145-147 Tràng sùa 7 :3 0,68 5 VI VII c 13h 17n o 7 c 12h 18n 2s o 7 2.4. KIËN TRA CAU TRÜC CÂC CHAT TONG HOP DUOC. Chung tôi tien hành xâc dinh ph6 hông ngoai, phé tu ngoai cua câc châ't tong hop duoc. 2.4.1. Bien giâi pho hông ngoai. Qua nghiên ctru, phân tich pho dô, chung tôi nhân biét duo'c câc dai hâp thu dâc tru'ng cua câc nhôm chât và câc liên két cua câc châ't tông hop diïo'c. Két quâ bien giâi cho timg châ't duoc trinh bày ô bàng 2.3. Hînh ânh phô duoc in trong phàn phu lue. 2.4.2. Bien giai pho tu ngoai. Phân tich pho tir ngoai (UV) duoc ghi trên mây Cary IE-UV-Visible Spectrophometer Varian tai phong thi nghiêm trung tâm trirong Dai hoc Duoc Hà Nôi trong dung môi là DMF (Dimethyformamid). Co giâ tri /.max nm du'o'c ghi trong bâng 2.3. Tù' két quâ này cho phé'p chüng tôi khâng dinh câc chât tong hop duoc là hoàn toàn dung vôi du kién và tinh khiêt. Hïnh ânh duoc ghi trong phân phu lue. Bâng 2.3: Két quâ phân tich pho hông ngoai và tü ngoai cüa câc chât tong hop duac -1 CM Pho hông ngoai VDMF Sô Photo ngoai Nhân chât C-OH C=N glucose imin (D (2) I 693.4 II 666.7 (3) c=c OH C-N Alcol aromatic (4) ÔOH tham the Nhôm khac trong Mf para (5) (6) (7) 1604.4 1506.7 1360.2 1170 1071.6 1616.9 1519.8 1235.9 1178.9 1075.7 (8) (9) (10) 291 1178.9 291 305 265 III 668.1 2635.4 1536.3 Vn o 2 1439.8 386 283 1350.3 ■266 IV 666.1 1603.1 1551.2 1171.6 1113.9 668.2 V 650 Vn o , 1476.9 374 1488.2 300 1341.0 1620 1595.5 1261.8 1131.6 1067.7 Vc-Br 265 570.2 VI 650 1599.7 1518.2 VII 632.8 1660.9 1532.7 1288.9 1155.4 1091.6 1179.1 1073.9 Vc-s 670.3 V so ,-N lI: 1111.9 1419.2 271 1405.6 291 2.4. THÂMDÔ TÂC DUNG SINH HOC.[17] Khi tong hop câc châ't, chüng tôi hy vong câc hop châ't azomethin tong hop diroc co thë cô tâc dung sinh hoc. Dira trên mue dich này, trong diêu kiên cho phép, chüng tôi tien hành thü tâc dung sinh hoc cûa câc azomethin tong hop diroc. ♦>Thû tâc dung khâng khuân, khâng nam. Tai bô môn vi sinh hoc, truông Dai hoc Diroc Hà nôi, chüng tôi dà tiê'n hành thü tac dung khâng khuân, khâng nâm cüa câc azomethin tong hop diroc trên 5 chüng vi khuân và 1 chüng vi nâm, theo phuong phâp khuyê'ch tân trên thach cûa Duoc diën Viêt Nam II. > Nguyên tac. Hoat tmh khâng khuân, khâng nâm cüa câc châ't tong hop duoc, diroc xâc dinh bâng khâ nâng üc chê' môt loai chüng chî thi nào dô, à diêu kiên thich hop. Khâ nâng üc chê' duoc dânh giâ bang dirông kmh vông vô khuân. > Phirong phâp thiür Phuong phâp thü duoc chüng tôi lua chon là phuong phâp khuyê'ch tân trên thach cûa câc azomethin tong hop diroc à nông dô thich hop cüa châ't thü, vào khoâng phât triën cüa vi sinh vât sê tao ra mot vông üc chê hoàn toàn xung quanh noi chüa châ't thü >Tién hành. a- Chüng vi sinh vât sû dung * Câc chüng vi khuân Gram(+) gôm: + Bacillus pumilus ATCC6241 34 + Bacillus cereus ATCC21778 + Bacillus subi Uns ATCC6633 + Staphylococcus aureus ATCC1222S * Câc chüng vi khuân Gram(-) gôm: + Escherichia coli DT119B14 * 1 chung vi nam: + Candida albicans ATCC10231 t -1 ôi trucmg. De thuc hiên quâ trinh thu tâc dung sinh hoc, chüng tôi chuân bi câc mô trucmg nuôi cây sau dây: * Môi trucmg thach gôc (MT1) Thach 20g Nuoc cât vd 1000ml * Môi tiilcmg thach thucmg (MT2) Pepton 10g Cao thit 2g Cao men 3g NaCl 4g Thach 13g Nuôc cât vd 1000ml. pH=7 ± 0,2 * Môi trucmg Sabouraud (MT3) Pepton 10g Glucose 20g Thach13g Nuoc câ't vd 1000ml. pH=5,9 ± 0,1 35 c- Nuôi cây vi sinh vât kiëm dinh - Câc vi sinh vât kiëm dinh gôm 4 chüng Gram (+), 1 chüng Gram (-) và 1 chüng vi nâm nhân tù bô mon Vi Sinh truông Dai Hoc Duoc Hà Nôi. Câc chüng vi sinh vât tiirôc khi thu duoc nuôi cây và nhân giông bâng câch cây vào câc ong thach nghiêng vôi môi truông thach thuông (âp dung cho vi khuân) và môi truông Sabouraud (âp dung cho vi nâm) ô nhiêt dô thich hop trong 24h. Sau dô duoc làm thành câc nhü dich vi sinh vât vôi nông dô 106 - 107 tê' bào/ml. d- Chuân bi chât thü - Câc mâu chât thü: 7 azomethin téng hop duoc pha thành nông dô 5mg/ml trong dung môi DMF. e- Tien hành - Câc môi truông duoc hâp tiêt trùng à 120°C trong 30 phut - Vôi môi chüng vi sinh vât, chuân bi 3 hôp Pétri Trên câc hôp Pétri d6 9-10 MT1 dë làm môi truông thach nên, de thach dông. Sau dô cho vào môi dïa Pétri 10 ml MT2 (dôi vôi vi khuân) hoâc MT3 (dôi vôi vi nâm) dâ trôn nhü dich vi sinh vât kiëm dinh (nông dô 1% so vôi môi truông), lâng dêu và dofi thach nguôi Tien hành phân bô làn luot câc azomethin tëng hop duoc vào câc lô thach cô dirông kînh 7 mm - Dë câc dîa Pétri à nhiêt dô phông trong khoâng 2h dë cho câc chât khuyéch tan vào môi truông, sau dô dë tü âm 37°C (dôi vôi vi khuân) và 28°C (dôi vô'i vi nâm) 36 Sau 18-20h, do dirong kmh vong vô khuân bâng thuôc chmh- xàc dén 0,1mm Bâng2.4: Két quâ thü tâc dung khâng khuân và khâng nâm cüa 4 dai diên VK gram (+) Vi sinh vât kiëm VK gram (-) nam dinh Thü Glucoza- 7. 7. 7. 19.3 7. 7. Anilin 7. III Glucoza-p Nitro-anilin VI Acid glucoza 12.1 11.1 7. p-amino-benzoic VII Glucoza 7. sulfanilamid Ghi chu: - Két quâ âm tinh 7. kê't quâ không rô rang 37 Candida E.coli B. Aureus B. Subtilus B. Cereus B.Pamilus Duong kmh vong vô khuân stt Tên châ't I Vi d: Nhân xét két quâ: Tù két quâ thuc nghiêm trên chüng tôi thây: - Câc azomethin tong hop duoc dëu cho tâc dung trên vi khuân gram (+), dâc biêt là B.cereus. Tuy vây nhüng tâc dung này côn chu'a ràng, riêng chât so (III) cho tâc dung khâ ràng trên chüng này. - Trên vi khuân gram (-) nhüng tâc dung không noi bât, mot so co tâc dung nhung nhüng tâc dung rat kém, mot so khâc không co tâc dung. Trên vi nâm Candida albicans, azomethin tong hop duoc không cho tâc dung 2.5. BÀN LUÂN VÀ NHÂN XÉT Nhu vây tù glucose và câc amin thom.chüng tôi dâ tong hop duoc 7 azomethin. Qua do chüng tôi dâ tien hành khâo sât nhüng hâng sô vât lÿ, hoâ hoc cùa nhüng châ't tong hop duoc. ^Vê tong hop hoâ hçc. Phân ùng tong hop câc azomethin duoc tien hành trong dung môi là ethanol tuyêt dôi. Dây là dung môi hoà tan phân eue không nhüng hoà tan tôt câc hop chât tham gia phân üng mà côn làm thuân loi cho quâ trinh phân üng, vï dung môi làm tâng tinh phân eue cüa liên két carbonyl. Mât khâc, nhiêt dô soi cüa dung môi thâp (khoâng 70-80°C) nên trânh diroc su phân huÿ sân phâm cüng gôp phân làm tâng hiêu xuât phân üng. Phân üng duoc theo dôi bâng SKLM, qua do cho chüng tôi xâc dinh duoc thô'i gian tôi un cho hiêu suât cao nhât. Hiêu suât phân üng không chî phu thuôc vào pH, nhiêt dô, thô'i gian phân üng mà côn phu thuôc vào hê dung môi tinh ché lai. à dây chüng tôi chon hê dung môi tinh ché là Ethanol tuyêt dô'i, do câc azomethin tëng hop duo'c dëu là câc chât rân két tinh tan tôt trong DMF, ît tan trong alcol lanh, tan tôt trong alcol nông. 38 >Kiém tra câu truc hoâ hoc. Qua phân ti'ch pho hông ngoai và tir ngoai, chüng tôi nhân thây chüng co dày dü câc nhôm chüc cüa môt azomethin. Vi vây nhüng chat chüng tôi tong hop duoc là câc azomethin. >Vë tâc dung sinh hoc. -Qua sa bô thâm dô tâc dung khâng khuân, khâng nâm cüa 4 azomethin dai diên, chüng tôi nhân thây câc azomethin tong hop duoc co tâc dung khâng khuân, khâng nâm khâc nhau. -bTrên vi nâm C.albicans: Không co châ't nào cô tâc dung. +Trên nhôm vi khuân Gram(+), Gram(-): Môt sô châ't cô tâc dung, nhu'ng tâc dung khâ kém hoâc không rô . ♦>V! diêu kiên không cho phép, do dô chüng tôi không thë tien hành thü' dông thoi hoat tinh khâng nâm, khâng khuân cüa azomethin tong hop duoc so vôi câc châ't chuân. Chmh vi lÿ do dô và dë dânh giâ mot câch tong thë nhôm dân châ't này thî phâi cô nhüng nghiên cüu sâu hon. Chüng tôi râ't mong së cô diêu kiên nghiên cüu mot câch sâu hon vê nhôm dân châ't glucose cô câu taie azomethin này. 39 PHÂN III: KET LUAN V A DE X U A T Tir nhùng két quâ nghiên cùu trên chüng tôi rut ra mot sô két luân sau: 1. Qua thuc nghiêm chüng tôi dâ téng hop duo'c 7 hop châ't azomethin cüa glucose vori amin thom bâc I khâc nhau. Trong 7 châ't dô cô 6 châ't(lI,III,IV,V,VI,VII) là chua duoc công bô' trong câc tài lieu tham khâo duoc. 2. Qiüng tôi cùng dâ tiê'n hành xâc dinh nhiêt dô nông chây, hâng sô Rf , pho hông ngoai, tü ngoai cüa câc azomethin tong hop duçrc. Câc két quâ thu duoc cho phép chüng tôi khang dinh câc châ't tong hop duoc cô câ'u trüc nliu du kiê'n . 2. So bô thâm do tâc dung khâng sinh và khâng nâm cüa 4 châ't (châ't: I, III,VI,VIL), dai diên cho câc châ't tong hop duoc vôi 5 chüng vi khuân Và 1 chüng vi nâm. Kêt quâ cho thây châ't sô' VI cho tcâ dung trên chüng B. pamilus và B. cereus. + Trên C.albicans: Tâ't câ mâu thü không cô tâc dung + Trên E.coli, B.aureus:(I),(III) cho tâc dung kém. + Trên B.cereus, B.pamilus: Tâc dung thay déi ô tùng châ't. . ♦♦♦Tù kêt quâ trên, chüng tôi thây dè cô môt câi nhîn tong thê vé nhôm dân châ't này thi càn phâi tiê'p tue nghiên cùu môt câch sâu hon vê nhôm dân châ't này. Tü dô chüng tôi hy vong tïm ra câc châ't môi cô tâc dung sinh hoc de cô thë ûng dung vào diêu tri lâm sàng 40 TÀI LIÊU THAM KHÀO 1- Bô mon hoâ hüu co (1999), Hoâ hüu co\ TRUÔNG DAI HOC DU'OC HÀ NÔI, H À NÔI.,tr. 181-198. 2- Bô mon hoâ duoc (1999), Hoâ duac tâp 2, truông Dai Hoc Du'oc Hà Nôi, tr82-83. 3- Bô mon hoâ sinh (1999),Hoâ sinh tâp I, II, truông dai hoc duoc Hà Nôi 4- Nguyên Minh Khôi, Giang Thi Son, Trân Manh Bînh, Ngô Mai Anh, Chu Thi Lôc (1995), Nghiên cuu tong hop câc j3-aminoceton dân xuâ't cùa 2nitrobenzyliden aiylamin và sa bô thâni dô tâc dung ditacl ly, tap chi duoc hoc (6), tr.8. 5- Giang Thi Son(1988), “Nghiên cûu tong hap dân châ't thuôc dây /?aminoceton và sa bô tham do tâc dung sinh hoc cüa chûng,\ luân ân pho tien sÿ khoa y duofc Hà Nôi. 6- Phan Tông Son, lê Dàng Doanh (1977), “ Thuc hành hoâ hüu co, tâp 2”, NXBKHKT, tr.5-15. 7- Plian Tông Son , Trân Quôc Son, Dàng Nhu Tai (1980), “ Ca sâ.hoâ hüu ca, tâp T NXBKHKT,Hà Nôi,tr. 109. 8- V5 Tri Tüc (1974), “Ly thuyê't diên tü trong hoâ hüu co, tâp 7”,Nhà xuâ't ban dai Hoc và Trung Hoc chuyên nghiêp, Hà Nôi, tr. 167-201. 9- J.Bran và G. cy / D Eglinton, “üng dung quang pho trong hâo hüu ,NXBKHKT. 10- Bô mon bào chê' (1999)jBà[...]... ,-N lI: 1111.9 1419.2 271 1405.6 291 2.4 THMDễ TC DUNG SINH HOC.[17] Khi tong hop cõc chõ't, chỹng tụi hy vong cõc hop chõ't azomethin tong hop diroc co thở cụ tõc dung sinh hoc Dira trờn mue dich ny, trong diờu kiờn cho phộp, chỹng tụi tien hnh thỹ tõc dung sinh hoc cỷa cõc azomethin tong hop diroc >Thỷ tõc dung khõng khuõn, khõng nam Tai bụ mụn vi sinh hoc, truụng Dai hoc Diroc H nụi, chỹng tụi d tiờ'n... 2.2.2 Tong hop azomethin cỷa glucose vụi p-toluiclin (Glucosal - p- toluidin)- ợnõu chat sụ II > Phuong trùnh phõn ung: H -C = 0 I I H -C -O H H O -C -H I H -C -O H + I I H -C -O H I H -C -O H H C6H120 6 C7H9N C13H19NOs M= 180 M=107 M=269 >Tiộn hnh: Trong bợnh cu 3 co dung tich 100ml + Birục 1: Qio vo 1,81g Glucose duoc dung (0,01mol glucose) v 35ml Ethanol tuyờt dụ'i Lõp mõy khuõy tự, sinh hn hụi liru,... 2.2.5 Tong hop Azomethin cỹa glucose vciù p-Bromo- anilin(GIucoza - p- Bromo-aniIin):/wõô chat sụ'V >Phuong trùnh phõn ỷng: HC = 0 I I H O -C -H I H -C -O H H -C -O H I I H -C -O H H -C -O H I H Q H A C6H6NBr C12H16N br05 H M=180 M=1.73 M=334 >Tiộn hnh: Trong bợnh cõu 3 co dung tich 100ml + Bu'ục 1: Cho vo 1,81g Glucose du'gc dung (0,01mol glucose ) v 30ml Ethanol tuyờt doi Lp mõy khuõy tir, sinh hn hoi... vụi amin tham bõc I, dộ tao thnh azomethin > So' do phõn ỹng: ^C =0 + H2N Ar ^ C = N - A r + H20 Phõn ung xõy ra theo hai giai doan: + Giai doan I : Tõc nhõn õi nhõn tõn cụng vo phõn tir Aldehyd theo co chờ cụng hop õi nhõn + Giai doan II : Phõn ỹng tõch loai 1 phõn tự nuục theo co chờ tõch loai 2.2.TễNG HOP AZOMETHIN CĩA GLUCOSE: 2.2.1 Tong hop azomethin cỹa glucose vol anilin (Glucosanilin).-... 2.2.4 Tong hop Azomethin cỷa glucose voi m-nitro-anilin (Glucosal- m- nitro-Anilin) mõu chat so IV no2 >Phuong trlnh phõn ợrng: HC:= N HCO I NO, + h 2N 9 \ HCOH HCOH HOầH ô I \ _* H O -ầ -H HCOH HCOH H COH H H COH 1 H H ầOH H H ầ + H2 OH c h 12o 6 c 6h 6n 20 2 c 12h 16n 20 M=180 M=138 M^300 7 >Tiộn hnh: Trong bợnh cu 3 c6 dung tợch 100ml + Biùorc 1: Cho vo 1,81g Glucose duoc dung (0,01mol glucose) v 30ml... nghiờn cỹu tụng hop cõc azomethin chỹa nhõn indol v thiazol Tai tru'ụng Dai hoc Duoc H Nụi, cõc tõc giõ: Giang Thi Son, Nguyờn Minh Khoi, Nguyờn Kim Thu dõ nghiờn cỹu tong hop cõc azomethin tự cõc aldehyd thom v cõc amin thom lm dõn chat trung gian dở tong hop cõc dõn chat thuục dõy P- aminoceton.[3][16] 1.2.4 TAC DUNG SINH HOC Thộo nhiờu ti lieu dõ duoc cụng bụ', cõc baze azomethin khụng chù duoc... /0 NH 4 Mecillinam Khõng y :o o H ^ -N sinh diờt khuõn O \ _ 5 N CH = N/ V b \ ch3 nhụm ;h 3 y Pennicilin Sufanilamid Sulfamid khõng ^ S ^ C H = C H - C H = N ( ^ ^ ) - S 0 2NH2 khuan 1.2.3- TINH CHAT CĩA AZOMETHIN Bazo azomethin nụi chung kộm bờn vfrng do cụ khuynh huụng Polymer hoõ, phn ung ngimg tu, thu phõn do trong cõu truc cụ nhụm imin (-CH=N-) Cõc azomethin mach ho thucmg l nhựng chõ't long... Tong hop Azomethin cỹa glucose vụi p-nitro anilin (glucosal - p - Nitro-Anilin)- mõu chat sụ III >Phirong trợnh phõn ựfng: H -C = 0 H -ầ = N H -C -O H H -C -O H H 0ầH H -C -O H + H;N A \ = / H -C -O H H - C OH NO j , H O - ầ - H + h 2o H -ầ -O H H -ầ -O H H - ầ OH H H C6H1206 c 6h 6n 2o 2 M=180 M=137 c 12h 16n 2o 7 M=300 >Tiộn hnh: Trong bợnh eau 3 co dung tich 100ml + Bu'ục 1: Cho vo 1,81g Glucose. .. tan trong benzen, cloroform: dở tan trong DMF, aceton, ợt tan trong methanol, ethanol, tan duoc trong Ethanol, Methanol nụng Cõc azomethin cụ nhiờt dụ nụng chõy gn vdi cõc Amin bõc II Hiờn tuong hụ biờn: Bazo azometin cụ thở tụn tai hai dang dụng phõn hlnh hoc syn v Anti Hai dụng phõn ny cụ thở hụ bien cho nhau c h 2 r ;c = n H r ag - XR c H 2C 11 r = n *h > Vố hoõ hoc: Tmh chõt co ban cỹa cõc azometin... HC = 0 + H2N I H (p OH H CH120 6 C6H6N M=180 M=92 C12H16N 0 5 M=254 20 + H2O >Tiộn hnh: Trong bùnh cu 3 c6 dung tich 100ml + Buục 1: Cho vo 1,81g Glucose duoc dung (0,01riiol glucose ) v 15ml Ethanol tuyờt doi Lp mõy khuõy tự, sinh hn hoi liru, nhiờt kở, dun hoi lu'u cach thu ụ nhiờt dụ soi cỹa dung mụi (70-80c) v khuõy liờn tue cho tan hon ton + Bu'ục 2: Thờm tiờp 1ml Anilin ( 0,01ml)