tóm tắt luận án tiến sĩ nghiên cứu ảnh hưởng của một số yếu tố nông sinh học đến sinh trưởng và ra hoa của giống thuốc lá k.326 trồng tại miền bắc việt nam

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG NGHIỆP HÀ NỘI NGUYỄN VĂN VÂN NGHIÊN CỨU ẢNH HƯỞNG CỦA MỘT SỐ YẾU TỐ NÔNG SINH HỌC ĐẾN SINH TRƯỞNG VÀ RA HOA CỦA GIỐNG THUỐC LÁ K.326 TRỒNG TẠI MIỀN BẮC VIỆT NAM Chuyên ngành : Khoa học trồng Mã số : 62.62.01.10 TÓM TẮT LUẬN ÁN TIẾN SĨ HÀ NỘI - 2013 Cơng trình hồn thành tại: TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG NGHIỆP HÀ NỘI Người hướng dẫn: GS.TS Hoàng Minh Tấn TS Trần Đăng Kiên Phản biện 1: TS Nguyễn Đình Vinh Phản biện 2: PGS.TS Lê Tất Khương Phản biện 3: TS Lê Văn Đức Luận án bảo vệ hội đồng chấm luận án cấp trường họp tại: Trường Đại học Nông nghiệp Hà Nội Vào hồi , ngày tháng năm Có thể tìm hiểu luận án thư viện: - Thư viện Quốc gia Việt Nam - Thư viện Trường Đại học Nơng nghiệp Hà Nội MỞ ĐẦU Tính cấp thiết đề tài Thuốc (Nicotiana tabacum L.) cơng nghiệp ngắn ngày, có nguồn gốc từ châu Mỹ Hiện nay, thuốc trồng 120 quốc gia từ 60o vĩ Bắc đến 40o vĩ Nam Thuốc trồng mang lại hiệu kinh tế cao cho người sản xuất đóng góp phần đáng kể cho ngân sách Nhà nước Vì việc sản xuất thuốc nước ta Chính phủ Bộ ngành quan tâm định hướng phát triển Tuy nhiên, suất chất lượng thuốc nước ta mức hạn chế so với nước sản xuất thuốc truyền thống khu vực giới Trong năm qua nhập nội số giống thuốc tốt để thay cho giống thuốc địa mang lại hiệu to lớn cho ngành thuốc Việt Nam Trong giống thuốc nhập nội giống K.326 giống ổn định suất chất lượng nên trồng rộng rãi nước Hạn chế lớn giống hoa sớm làm giảm suất chất lượng thuốc nguyên liệu Do việc nghiên cứu yếu tố biện pháp ảnh hưởng đến hoa giống thuốc K.326 có ý nghĩa to lớn việc điều chỉnh hoa giống Sự sinh trưởng quan dinh dưỡng thân hoa thực vật có mối quan hệ mật thiết quan hệ ức chế tương quan Khi thân sinh trưởng mạnh ức chế hình thành hoa ngược lại Vì vậy, việc điều chỉnh mối quan hệ tương quan ức chế sinh trưởng thân hoa giống K.326 có ý nghĩa quan trọng việc điều chỉnh hoa chúng theo ý muốn Mối quan hệ ức chế tương quan qua trình sinh trưởng thân hoa điều chỉnh cân hormon nên chất điều hòa sinh trưởng ngoại sinh có khả điều chỉnh tốt mối quan hệ Thuốc thuộc nhóm ngày ngắn nên quang chu kỳ ngày dài quang gián đoạn ảnh hưởng lớn đến phân hóa hoa chúng theo hướng kích thích sinh trưởng thân trì hỗn xuất hoa thuốc giống K.326 Ngoài việc tạo thuốc có tuổi sinh lý trẻ từ chồi nách gây hạn cho biện pháp hữu hiệu điều chỉnh hoa thuốc giống K.326 Chính mà chúng tơi thực đề tài: “Nghiên cứu ảnh hưởng số yếu tố nông sinh học đến sinh trưởng hoa giống thuốc K.326 trồng miền Bắc Việt Nam” Mục tiêu nghiên cứu Xác định ảnh hưởng số yếu tố nông sinh học đến sinh trưởng hoa giống thuốc K.326 để điều chỉnh trình hoa chúng sản xuất thuốc nguyên liệu lai tạo giống thuốc Ý nghĩa khoa học thực tiễn 3.1 Ý nghĩa khoa học Kết nghiên cứu đề tài cung cấp dẫn liệu khoa học có giá trị ảnh hưởng số tác nhân nông sinh học đến mối quan hệ tương quan ức chế trình sinh trưởng thân hoa thuốc giống K.326 trồng miền Bắc Việt Nam Kết đề tài tài liệu tham khảo cho việc giảng dạy nghiên cứu sinh lý hoa thực vật kỹ thuật điều chỉnh hoa cho thuốc 3.2 Ý nghĩa thực tiễn Từ kết nghiên cứu đề tài đề xuất số biện pháp điều chỉnh hoa thuốc theo hướng: kìm hãm hoa (biện pháp cắt ngọn, thực quang chu kỳ ngày dài quang gián đoạn, xử lý GA3…) kích thích hoa sớm (gây hạn, xử lý chất ức chế sinh trưởng ethrel, PIX…) để phục vụ sản xuất thuốc nguyên liệu lai tạo giống Những đóng góp luận án - Thực quang chu kỳ khẳng định giống thuốc K.326 có phản ứng rõ với quang chu kỳ ngày ngắn Đồng thời quang chu kỳ ngày dài quang gián đoạn có tác dụng ức chế mạnh mẽ hoa thuốc (làm chậm thời gian hoa): kéo dài thời gian sinh trưởng sinh dưỡng, làm tăng chiều cao số - Xác định mối quan hệ tương quan sinh trưởng thân hoa sử dụng chất điều hịa sinh trưởng Các chất kích thích sinh trưởng kích thích rõ rệt đến sinh trưởng thân có xu hướng kìm hãm hoa Ngược lại, chất ức chế sinh trưởng ức chế mạnh đến sinh trưởng thân có khả kích thích hoa sớm giống thuốc K.326 - Việc cắt thuốc để tạo thân từ chồi nách có ảnh hưởng đến hoa thân mọc từ chồi nách số kìm hãm thời gian hoa làm tăng suất giống thuốc K.326 Cấu trúc luận án Luận án gồm 113 trang không kể tài liệu tham khảo: mở đầu trang, tổng quan tài liệu 35 trang, nội dung phương pháp nghiên cứu 12 trang, kết nghiên cứu thảo luận 61 trang, kết luận đề nghị trang Luận án gồm 47 bảng, 17 biểu đồ hình vẽ Luận án sử dụng 116 tài liệu tham khảo: 66 tài liệu tiếng Việt 50 tài liệu tiếng Anh Chương TỔNG QUAN TÀI LIỆU VÀ CƠ SỞ KHOA HỌC CỦA ĐỀ TÀI 1.1 Giới thiệu thuốc 1.1.1 Nguồn gốc Trong lịch sử, thuốc trồng châu Mỹ từ 6000 năm trước Công Nguyên (Dẫn theo Akchurst B.C, 1981) Loài Nicotiana tabacum L trồng Trung, Nam Mỹ Nicotiana justica trồng Bắc Mỹ Thuốc trồng Châu Á, Châu Phi vào cuối kỷ 16 (Colins and Hawks, 1993) Tại Việt nam, thuốc xuất từ thời Vua Lê Thần Tông (Khoảng năm 1660) (Dẫn theo Lê Đình Thụy Bùi Văn Tài (1987) 1.1.2 Phân loại Theo Wilson and Loomis (1967), thuốc thuộc giới thực vật (Plant), phụ giới có phơi (Embryophyta), ngành có mạch dẫn (Tracheophyta), phụ ngành dương xỉ (Pteropsida), lớp thực vật hạt kín (Angiosperma), lớp phụ mầm (Dicotyledonae), phân lớp cúc (Asteridae), cà (Solanales), họ cà (Solanaceae), Họ có tới 85 chi có chi Nicotiana lồi Nicotinana tabacum L 1.1.3 Giá trị thuốc Thuốc loại cơng nghiệp ngắn ngày có tầm quan trọng bậc kinh tế thị trường giới không 33 triệu nông dân 120 quốc gia (những người coi thuốc nguồn thu nhập chính) mà cịn cho tồn công nghiệp - từ nhà máy chế biến, điếu, sản xuất phụ gia, phụ liệu đến hệ thống phân phối tiêu thụ, chí phần ngành sản xuất vật tư nông nghiệp phục vụ cho thuốc phân bón, thuốc bảo vệ thực vật,… Ở Việt Nam, thuốc trồng chủ yếu tỉnh miền núi phía Bắc, duyên hải Nam Trung Bộ, Đông Nam Bộ Tây Ngun với diện tích trung bình hàng năm từ 18 – 20 ngàn thuốc loại, thu 30 – 45 ngàn thuốc nguyên liệu ngành thuốc nộp cho ngân sách Nhà nước 10 nghìn tỷ đồng năm, góp phần đáng kể xố đói giảm nghèo cho nơng dân dân tộc vùng núi phía Bắc, Tây Ngun 1.2 Tình hình sản xuất tiêu thụ thuốc Theo thống kê Universal Leaf Tobacco Company 2012, hàng năm toàn giới có tổng diện tích trồng thuốc khoảng 2,5 - 3,0 triệu với tổng sản lượng khoảng 4,9 - 5,6 triệu Về tiêu thụ thuốc điếu, mức tiêu thụ năm 2011 toàn giới 6.293 tỷ điếu Ở Việt Nam năm 2012 sản xuất 59.732 thuốc nguyên liệu, sản xuất 105,124 tỷ điếu thuốc loại, nội tiêu 83,495 tỷ điếu, xuất 21,682 tỷ điếu 1.3 Đặc điểm sinh thái dinh dưỡng khoáng thuốc Các điều kiện sinh thái ánh sáng, nhiệt độ, ẩm độ, đất trồng ngun tố khống có vai trò quan trọng cho sinh trưởng, tạo suất chất lượng cho thuốc nguyên liệu 1.4 Các nghiên cứu hoa in vitro thực vật Để tìm hiểu chất trình hoa thực vật, nhiều cơng trình nghiên cứu khoa học hoa in vitro nhiều đối tượng thực vật tiến hành thí nghiệm hoa in vitro cà chua (Lycopersicon esculentum Mill) (Dielen et al., 2001), cải dầu (Brassica napus) (Koh and Loh, 2000), hoa Bát Tiên (Euphorbia millii) (Dewir, 2006), Syamopsis tetragonoloba (Gurusaravanan, 2012) Taylor (2007) nghiên cứu ảnh hưởng đường glucose saccharose đến hoa in vitro Kniphofia leucocephala 1.5 Tuối sinh lý hoa thực vật Khi cắt thân để tạo chồi tức kìm hãm hoa Càng cắt sát gốc mức độ kìm hãm hoa cao Với thuốc lá, biện pháp cắt để tạo chồi phát triển thành thuốc trẻ có tác dụng kìm hãm đáng kể thời gian hoa chúng Tùy theo tuổi thuốc cắt mà thời gian hoa trì hỗn nhiều hay 1.6 Hạn với sinh trưởng hoa thực vật Nhiều nghiên cứu khẳng định hạn nhân tố ảnh hưởng mạnh mẽ đến sinh trưởng, hoa hình thành suất trồng với lúa (Lafitte et al., 2006; Paled and Aspinall, 1981), với ngô (Denmead et al., 1960; Balanos and Edmeades, 1996), với cỏ (Nguyễn Lam Điền, 2005), với vừng (Trần Thị Thanh Huyền, 2011)… 1.7 Các chất điều hòa sinh trưởng với sinh trưởng hoa thực vật Người ta chia chất điều hịa sinh trưởng thành hai nhóm chất kích thích sinh trưởng (auxin, gibberellin, cytokinin…) chất ức chế sinh trưởng (acid absisic, ethylen…) Mối quan hệ hai nhóm chất biểu thị cân hormon Có hai q trình quan trọng diễn điều chỉnh chất điều hòa sinh trưởng trình sinh trưởng quan dinh dưỡng trình hoa Đây mối tương quan ức chế sinh trưởng dinh dưỡng hoa (Hoàng Minh Tấn cs., 2006) Chính mà dùng chất điều hịa sinh trưởng để điều chỉnh q trình sinh trưởng hoa thực vật 1.8 Quang chu kỳ điều chỉnh hoa thực vật Quang chu kỳ có vai trị vơ quan trọng điều chỉnh hoa thực vật Quang chu kỳ Garner and Allard (1932) phát Tùy theo mức độ mẫn cảm với quang chu kỳ mà chia giới thực vật thành nhóm: ngày ngắn, ngày dài trung tính Việc phát phytochrom (Hendrik and Borwick, 1952) với hai phytochrom P660 P730 có khả biến đổi thuận nghịch hấp thu ánh sảng đỏ (660nm) cuối đỏ (730nm) làm sáng tỏ chất điều chỉnh quang chu kỳ hoa Quang chu kỳ ứng dụng rộng rãi sản xuất kìm hãm hoa sớm hoa cúc hay kích thích hình thành hoa Thanh Long 1.9 Một số kết nghiên cứu thuốc giống K.326 Việt Nam Hàng năm, Viện Kinh tế kỹ thuật thuốc thực nhiều đề tài nghiên cứu khoa học thuốc Việt Nam Các kết nghiên cứu khoa học nghiệm thu hàng năm công bố kỷ yếu: Kết nghiên cứu khoa học giai đoạn 1986-1996, 1996-2000, 2001-2005 2005-2010 Các lĩnh vực nghiên cứu ưu tiên là: chọn tạo giống thuốc lá, phân bón, bảo vệ thực vật, sơ chế biến… Giống thuốc K.326 nhập từ Mỹ năm 1991 công nhận giống Quốc gia năm 1996 Đây giống thuốc có suất cao, chất lượng tốt, khả chống chịu tốt ổn định nên trồng phổ biến toàn quốc Nhược điểm giống mẫn cảm với hoa Chính mà nghiên cứu hoa giống có ý nghĩa cho sản xuất thuốc nguyên liệu lai tạo giống Chương ĐỐI TƯỢNG, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Đối tượng vật liệu nghiên cứu - Đối tượng nghiên cứu giống thuốc K.326 công nhận giống quốc gia từ năm 1996 K.326 giống thuốc trồng phổ biến nước ta nay, suất 18 - 20 tạ/ha, dễ sấy, tỷ lệ cấp 1+2 cao Hàm lượng nicotine 1,6 - 3,0%, hàm lượng đường khử 15 - 30%, hương vị đánh giá mức cao tính chất hút đạt loại tốt Hạn chế lớn giống hoa sớm - Vật liệu nghiên cứu gồm: + Các hóa chất cảm ứng hoa nuôi cấy mô: NH4NO3, CoCl2, paclobutrazol, glucose saccharose dạng tinh khiết + Nghiên cứu QCK sử dụng: loại đèn chiếu sáng (ánh sáng trắng ánh sáng đỏ) + Nghiên cứu chất điều hòa sinh trưởng sử dụng: αNAA (α Naphtyl acetic acid) GA3 (Acid gibberellic) dạng bột với hoạt chất 70-80% Ethrel (Chlor ethylen phosphoric acid) dạng dung dịch với hoạt chất 70% PIX (Merpiquat Chlorid) dung dịch có nồng độ 40% Alar (SADH: Sucsinic acid dimetyl hydrazid) dạng bột 2.2 Nội dung nghiên cứu - Nghiên cứu hoa in vitro giống thuốc K.326 - Ảnh hưởng số biện pháp kỹ thuật (tưới nước cắt ngọn) đến sinh trưởng hoa thuốc K.326 - Ảnh hưởng chất điều hòa sinh trưởng (các chất kích thích sinh trưởng ức chế sinh trưởng) đến sinh trưởng hoa thuốc K.326 - Ảnh hưởng quang chu kỳ (quang chu kỳ ngày dài quang gián đoạn) đến sinh trưởng hoa thuốc K.326 2.3 Phương pháp nghiên cứu 2.3.1 Phương pháp bố trí thí nghiệm 2.3.1.1 Ni cấy in vitro Ngọn thuốc in vitro tuần tuổi sau gieo hạt cắt độ dài khoảng 2,5cm, có - cấy môi trường Murashige & Skoog (MS) (Murashige Skoog, 1962) có bổ sung agarose 6,0 g/l, saccharose 30 g/l inositol 100 mg/l số chất điều tiết sinh trưởng tùy thí nghiệm Mơi trường ni cấy điều chỉnh độ pH = 5,8 trước hấp khử trùng 1200C, 1,0 atm, 20 phút Mẫu nuôi nhiệt độ 25 ± 2oC, độ ẩm 70 - 80%, cường độ chiếu sáng 2000 lux, thời gian chiếu sáng 12 giờ/ngày Thí nghiệm bố trí hồn tồn ngẫu nhiên, lần lặp, lần bình, bình mẫu Các thí nghiệm ni cấy in vitro thuốc giống K.326 gồm: - Ảnh hưởng việc gây hạn sinh lý môi trường nuôi cấy bổ sung saccharose nồng độ cao đến sinh trưởng hoa thuốc in vitro - Ảnh hưởng việc gây hạn sinh lý môi trường nuôi cấy bổ sung glucose nồng độ cao đến sinh trưởng hoa thuốc in vitro 2.3.1.2 Trong nhà lưới đồng ruộng Thí nghiệm 1: Ảnh hưởng tần suất tưới nước đến sinh trưởng hoa giống thuốc K.326 CT1 Tưới nước giữ ẩm bình thường (Đ/C); CT2: ngày tưới lần; CT3: ngày tưới lần; CT4: 12 ngày tưới lần; CT5: 15 ngày tưới lần; CT6: 18 ngày tưới lần Bố trí hồn tồn ngẫu nhiên, lần lặp, 10 chậu Tưới 0,5 lít/cây/lần tưới (Đ/C tưới đủ ẩm khơng cố định thời gian) Thí nghiệm 2: Ảnh hưởng biện pháp cắt tạo thân từ chồi nách đến sinh trưởng hoa giống thuốc K.326 CT1: Không cắt (Đ/C); CT2: Cắt số 5; CT3: Cắt số 10; CT4: Cắt số 15; CT5: Cắt số 20 Bố trí hồn tồn ngẫu nhiên, lần lặp, 30 m2 Bố trí ngồi đồng ruộng hoàn toàn ngẫu nhiên, lần lặp, ô 30 m2 Thí nghiệm 3: Ảnh hưởng αNAA đến sinh trưởng hoa giống thuốc K.326 CT1: Phun nước lã (Đ/C); CT2: αNAA 20ppm; αNAA 40ppm; αNAA 60ppm Bố trí TN cắt ngọn, phun vào giai đoạn 20, 30, 40 50 ngày sau trồng Lượng phun từ 300 - 500 lít/ha (Các thí nghiệm 4, 5, bố trí cách phun tương tự TN 3) Thí nghiệm 4: Ảnh hưởng GA3 đến sinh trưởng hoa giống thuốc K.326 CT1: Nước lã (Đ/C); CT2: GA3 10ppm, CT3: GA3 20ppm, CT4: GA3 40ppm Thí nghiệm 5: Ảnh hưởng ethrel đến sinh trưởng hoa giống thuốc K.326 CT1: Nước lã (Đ/C), CT2: Ethrel 400ppm; CT3: Ethrel 600ppm; CT4: Ethrel 800ppm Thí nghiệm 6: Ảnh hưởng PIX đến sinh trưởng hoa giống thuốc K.326 CT1: Nước lã (Đ/C); CT2: PIX100ppm; CT3: PIX 200ppm; CT4: PIX 300ppm Thí nghiệm 7: Ảnh hưởng Alar đến sinh trưởng hoa giống thuốc K.326 CT1: Nước lã (Đ/C); CT2: Alar 2000ppm; CT3: Alar 3000ppm; CT4: Alar 4000 ppm Thí nghiệm 8: Ảnh hưởng quang chu kỳ ngày dài đến sinh trưởng hoa giống thuốc K.326 Thí nghiệm bố trí theo nhân tố (split plot), lần nhắc Thời gian bắt đầu xử lý sau trồng 10 ngày (cây có 2-3 lá) Quang chu kỳ ngày dài thiết lập chiếu sáng bổ sung 2, 4, vào cuối ngày (18 giờ): Ô lớn QCK 14 sáng/10 tối; 16 sáng/8 tối; 18 sáng/6 tối; QCK tự nhiên (12 sáng/12 tối Đ/C) Ô nhỏ thời lượng tác động quang chu kỳ: CT1: 10 ngày; CT2: 20 ngày; CT3: 30 ngày CT4: liên tục đến kết thúc hoa Thí nghiệm 9: Ảnh hưởng quang gián đoạn đến sinh trưởng hoa giống thuốc K.326 Thí nghiệm bố trí theo nhân tố (split plot), lần nhắc Thời gian bắt đầu xử lý sau trồng 10 ngày (cây có 2-3 lá) Quang gián đoạn thiết lập chiếu ánh sáng đỏ ánh sáng trắng vào đêm (23h30 đến 0h30) Ô lớn ánh sáng (trắng đỏ) Ô nhỏ thời lượng tác động quang gián đoạn là: CT1: 10 ngày; CT2: 20 ngày; CT3: 30 ngày CT4: liên tục đến kết thúc hoa * Thí nghiệm 1, thực nhà lưới, trồng chậu nhựa có kích thước 40cm x 40cm với lượng đất - kg đất/chậu * Các thí nghiệm tiến hành Bảo sơn, Lục Nam, Bắc Giang Thí nghiệm cắt thân tiến hành vào vụ Xuân 2011, thí nghiệm khác thực năm 2013 * Qui trình kỹ thuật trồng trọt, chăm sóc, bảo vệ thực vật áp dụng thí nghiệm tn theo qui trình kỹ thuật 10 TCN 618-2005 Bộ Nông nghiệp Phát triển nông thơn, áp dụng cho thuốc vàng sấy lị 2.3.2 Các tiêu theo dõi phương pháp xác định * Các tiêu theo dõi nuôi cấy invitro: Quan sát đo đếm tiêu sau tuần lần: Tỷ lệ sống (%), chiều cao (cm), số (lá/cây), tỷ lệ phát sinh ngồng hoa (%), tỷ lệ nụ (%), tỷ lệ hoa (%) * Các tiêu theo dõi đồng ruộng nhà lưới bao gồm: - Các tiêu sinh trưởng: Được quan sát, theo dõi, đo đếm thu thập số liệu theo tiêu sau: + Chiều cao (cm): Đo từ mặt đất đến chạc ba phân nhánh hoa + Tổng số (lá): Đếm số lá/ sau trồng 20 ngày (10 ngày theo dõi 1lần) + Kích thước (cm): Đo chiều dài chiều rộng vị trí lớn số 5, số 10 số 15 hoa + Đường kính thân (cm): Đo vị trí cách mặt đất 20 cm hoa + Khối lượng (gam): Cân khối lượng 10 vị trí (số 5, 10 15) hoa - Thời gian hoa: Theo dõi thời gian từ ngày trồng đến thời điểm hoa 10%, 50% 90% cơng thức thí nghiệm - Năng suất (tạ/ha): Cân khối lượng sau sấy công thức thí nghiệm Phương pháp xác định tiêu theo phương pháp nghiên cứu thuốc Viện Kinh tế Kỹ thuật Thuốc 2.3.3 Phương pháp xử lý số liệu thí nghiệm Các số liệu thu thập sử dụng Microsoft Word Microsoft Exel để tính tốn số liệu, thiết kế bảng biểu Sử dụng phần mềm chuyên dụng MSTATC trường Đại học Michigan (Michigan State Univesity, 1986), chương trình IRRISTAT để xử lý số liệu, so sánh sai khác có ý nghĩa thí nghiệm LSD Chương KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 3.1 Nghiên cứu hoa in vitrro giống thuốc K.326 Đã thử nghiệm nhóm hợp chất có khả cảm ứng hoa số đối tượng thực vật Đó NH4NO3 có khả thay đổi tỷ lệ C/N chồi in vitrro thuốc lá, CoCl2 paclobutrazol có khả kích thích hoa nhiều thực vật Tuy nhiên, chất khơng có khả kích thích hoa thuốc in vitrro Chính mà yếu tố gây hạn sinh lý cần phải xem xét Hiện có nhiều hóa chất gây hạn sinh lý nhờ tăng áp suất thẩm thấu môi trường nuôi cấy manitol, sorbitol, PEG…nhưng sử dụng đường với nồng độ cao để tăng áp suất thẩm thấu môi trường nuôi an tồn chúng vừa chất dinh dưỡng cho vừa chất gây thẩm thấu cho môi trường Kết ảnh hưởng việc bổ sung đường nồng độ cao vào môi trường nuôi cấy đến sinh trưởng hoa thuốc giống K.326 ghi nhận bảng 3.1 3.2 Bảng 3.1 Ảnh hưởng việc gây hạn sinh lý môi trường nuôi cấy bổ sung đường saccharose nồng độ cao (60 – 120 g/l) đến số tiêu sinh trưởng hoa Sau 12 tuần Tỷ lệ Chiều Số Nồng độ Tỷ lệ Tỷ lệ Công sống Tỷ lệ cao saccharose thức (%) nụ (cm) (lá/cây) PSNH (g/l) hoa 18 tuần (%) (%) (%) 30 100 12,41 29,22 0 (ĐC) 60 100 12,23 28,00 77,80 0 90 88,90 11,61 26,78 88,90 11,10 120 88,90 5,63 12,56 88,90 88,90 CV (%) 0,70 0,60 LSD (0,05) 0,13 0,27 Sau 16 tuần Tỷ lệ Tỷ lệ Tỷ lệ ra nụ PSNH hoa (%) (%) (%) Sau 18 tuần Tỷ lệ Tỷ lệ Tỷ lệ nụ hoa PSNH (%) (%) (%) 0 0 0 77,80 88,90 88,90 66,67 88,90 0 33,33 77,80 88,90 88,90 44,44 66,67 88,90 11,11 55,56 44,44 khối lượng tươi (giảm 1,7 - g/lá), giảm khơng có ý nghĩa thơng kê - Về đường kính thân: Việc tưới nước - 12 ngày/lần không ảnh hưởng đến sinh trưởng đường kính thân thuốc lá, nhiên tưới nước 15 ngày 18 ngày lần khơng đảm bảo đủ ẩm cho đất chậu để thuốc tăng trưởng đường kính thân bình thường Sự sai khác đường kính thân công thức 15 18 ngày tưới lần so với đối chứng so với công thức tưới nước khác có ý nghĩa thống kê Bảng 3.4: Ảnh hưởng tần suất tưới nước đến thời gian hoa Thời gian từ trồng đến hoa (ngày) Công thức (ngày/lần tưới) 10% hoa 50% hoa 90% hoa (Đ/C) 56,7 58,3 60,7 (6 ngày) 56,3 57,7 61,0 (9 ngày) 56,3 59,7 62,0 (12 ngày) 54,7 57,7 60,0 (15 ngày) 52,7 55,7 58,3 (18 ngày) 50,3 53,3 55,6 2,8 2,8 3,1 CV (%) LSD(0,05) 2,4 2,5 2,9 Sự hoa thực vật nhạy cảm với thiếu nước Hầu hết loại trồng gặp hạn thường hoa sớm Trong thí nghiệm này, cơng thức tưới nước - 12 ngày /lần không ảnh hưởng đến thời gian hoa thuốc K.326 Cũng tương tự tiêu sinh trưởng, tưới nước - 12 ngày lần đảm bảo đủ ẩm cho thuốc trồng chậu sinh trưởng bình thường nên hoa bình thường công thức đối chứng tưới nước giữ ẩm bình thường Tuy vậy, tăng khoảng cách tưới nước lên 15 18 ngày lần thuốc trồng chậu bắt đầu biểu thiếu nước kèm theo việc ức chế sinh trưởng kích thích hoa sớm Thời gian bắt đầu hoa sớm đối chứng - 6,5 ngày Thời gian đạt tỷ lệ hoa 50% sớm đối chứng 2,4 - ngày đạt tỷ lệ 90% sớm đối chứng 2,4 - 5,1 ngày Sự sai khác có ý nghĩa thống kê so với đối chứng công thức 12 ngày tưới lần Nếu tăng mức độ gây hạn tăng thời gian lần tưới chắn thuốc hoa sớm Việc sử dụng stress hạn để ức chế sinh trưởng quan dinh dưỡng xúc tiến hoa biện pháp kỹ thuật sử dụng rộng rãi với nhiều loại trồng đặc biệt ăn để tạo nên vụ trái vụ 11 3.2.2 Ảnh hưởng biện pháp cắt tạo thân từ chồi nách đến sinh trưởng hoa giống thuốc K.326 Khi cắt chồi nách phát sinh tạo nên thân Chồi nách gần gốc có tuổi sinh lý thấp chồi gần thời gian sinh trưởng kéo dài làm chậm hoa Tuy nhiên, với thuốc suất chất lượng quan trọng nhất, cần xác định công thức cho suất cao mà trì hỗn hoa để áp dụng vào sản xuất Nghiên cứu việc cắt tạo thân cho thuốc chưa có kết cơng bố Kết thí nghiệm ghi nhận bảng 3.5 3.6 Bảng 3.5 Ảnh hưởng biện pháp cắt tạo thân đến số tiêu sinh trưởng suất Số Kích thước 10 Năng suất Thân từ chồi Chiều cao khô nách số… Dài Rộng (cm) (lá/cây) (cm) (cm) (tạ/ha) Không cắt (Đ/C) 135,6 22,5 50,9 24,0 17,4 130,4 21,9 65,0 30,5 18,6 10 135,1 25,4 60,1 28,0 19,3 15 137,3 22,1 54,9 26,1 17,5 20 144,7 22.7 50,1 24,1 16,5 CV(%) 0,6 4,3 2,5 4,5 4,1 LSD(0,05) 1,4 1,6 2,2 1,9 1,2 Việc cắt tạo thân có ảnh hưởng đến sinh trưởng thân thuốc Trừ công thức cắt lúc có có chiều cao thấp nhất, cịn cơng thức cịn lại có chiều cao hay cao đối chứng khơng cắt Với thuốc số lá, kích thước suất quan trọng Về số cơng thức cắt có 10 cho số cao nhất, cơng thức cịn lại chênh lệch khơng nhiều Về kích thước (dài, rộng lá) hai cơng thức cắt lúc 10 (cắt vị trí số đến số 10) cho kích thước vượt trội so với trồng tự nhiên cơng thức khác, cơng thức cắt lúc có cho kích thước lớn Hai cơng thức cắt có 10 cho suất cao có ý nghĩa thống kê so với trường hợp không cắt cắt muộn sau có 10 Giữa hai công thức cắt thứ thứ 10, sai khác suất ý nghĩa thống kê Số liệu bảng 3.6 cho thấy việc cắt tạo thân thuốc K.326 ảnh hưởng đến thời gian hoa Tuy nhiên, tùy theo vị trí thân tạo nên mà ảnh hưởng khác đến thời gian hoa Chỉ có cơng thức cắt số tức thân tái sinh từ chồi nách số có thời gian hoa chậm so với đối chứng 12 so với công thức khác Ở công thức này, thời gian bắt đầu hoa (tỷ lệ hoa 10%) chậm ngày; thời gian hoa rộ (50%) chậm 7,4 ngày kết thúc hoa (90%) chậm ngày Các cơng thức cịn lại có thời gian hoa xấp xỉ đối chứng (công thức số 10 15) Công thức cắt số 20 tức thân tái sinh từ chồi nách số 20 có thời gian hoa sớm đối chứng khoảng - ngày Bảng 3.6: Ảnh hưởng biện pháp cắt tạo thân từ chồi nách đến thời gian hoa Thời gian từ trồng đến hoa (ngày) Thân từ chồi nách số… 10% hoa 50% hoa 90% hoa Không cắt (Đ/C) 56,0 59,3 61,3 64,0 66,7 69,3 10 58,0 58,3 62,0 15 55,3 57,7 60,0 20 52,3 55,7 58,3 CV (%) 3,2 3,1 3,1 LSD(0,05) 2,9 2,9 3,0 Theo quan niệm tuổi sinh học từ gốc đến tuổi quan tăng dần nên quan gần gốc non trẻ, thể sống mạnh mẽ Quan niệm tuổi sinh học ứng dụng rộng rãi sản xuất phương pháp đốn tạo hình, tạo tán cải tạo vườn Việc cắt thuốc gần gốc (lá số số 10) ức chế xuất hoa làm cho thời gian hoa chậm đối chứng, tương đương với kỹ thuật đốn đau sản xuất Tuy nhiên, thân tái sinh từ chồi nách gần (lá số 15 số 20) tuổi chồi già nên khả sinh trưởng thân bị giảm hoa chúng có xu hướng bị kích thích hoa xuất sớm (thân tái sinh từ chồi số 20 hoa sớm nhất) 3.3 Ảnh hưởng chất điều hòa sinh trưởng lên sinh trưởng hoa giống thuốc K.326 3.3.1 Ảnh hưởng chất kích thích sinh trưởng đến sinh trưởng hoa giống thuốc K.326 Chất kích thích sinh trưởng chủ yếu bao gồm auxin, gibberellin cytokinin dó auxin gibberellin có vai trị sinh lý quan trọng Hai thí nghiệm tiến hành với auxin (αNAA) nồng độ 20, 40, 60 ppm gibberellin (GA3) nồng độ 10, 20, 40 ppm 3.3.1.1 Ảnh hưởng αNAA đến sinh trưởng hoa giống thuốc K.326 Kết ảnh hưởng αNAA với nồng độ từ 20 - 60ppm cho thuốc vào giai đoạn 20, 30, 40 50 ngày sau trồng đến sinh trưởng hoa giống thuốc K.326 ghi nhận bảng 3.7 3.8 13 Bảng 3.7 Ảnh hưởng αNAA đến số tiêu sinh trưởng Nồng độ 60 ngày sau trồng Lá số 15 αNAA Cao Số lá/cây ĐK thân Chiều dài Rộng Khối lượng (ppm) (cm) (lá) (mm) (cm) (cm) (g/lá) (Đ/C) 99,6 25,7 23,2 59,6 18,6 40,7 20 110,5 26,5 23,2 61,4 18,2 41,7 40 110,8 26,9 23,5 65,6 20,4 44,3 60 114,2 26,3 22,2 61,8 19,3 43,3 2,8 1,7 4,1 3,9 4,9 3,8 CV(%) LSD(0,05) 4,9 0,7 ns 4,1 1,5 2,6 Ở thời điểm 60 ngày sau trồng thuốc gần ngừng sinh trưởng, αNAA nồng độ 20 - 60 ppm làm tăng rõ rệt chiều cao thuốc so vớí đối chứng, cịn tiêu số lá/cây, kích thước khối lượng tươi số 15 có nồng độ 40ppm làm tăng cách có ý nghĩa so với đối chứng (bảng 3.7) Bảng 3.8 Ảnh hưởng αNAA đến thời gian hoa ĐVT: ngày sau trồng Nồng độ αNAA Ra hoa 10% Ra hoa 50% Ra hoa 90% (ppm) (Đ/C ) 58,3 61,3 64,3 20 58,7 61,0 64,7 40 58,3 61,7 64,7 60 58,6 61,0 64,3 CV(%) 0,6 1,3 1,0 LSD(0,05) ns ns ns Kết bảng 3.8 phản ánh ảnh hưởng αNAA đến thời gian hoa thuốc Về thời gian đạt tỷ lệ hoa 10, 50 90% cơng thức xử lý αNAA nồng độ 20 - 60ppm không làm thay đổi thời gian hoa Điều chứng tỏ rằng, auxin khơng ảnh hưởng đến hoa giống thuốc K.326 Kết phù hợp với vai trò sinh lý auxin không ảnh hưởng điều chỉnh đến hoa thực vật 3.3.1.2 Ảnh hưởng GA3 đến sinh trưởng hoa giống thuốc K.326 Kết nghiên cứu ảnh hưởng GA3 đến sinh trưởng hoa giống thuốc K.326 thể bảng 3.9 3.10 Về sinh trưởng: Xử lý GA3 có tác dụng kích thích sinh trưởng thân GA3 kích thích tăng trưởng rõ rệt chiều cao chiều dài làm giảm đường kính thân ảnh hưởng đến số chiều rộng so với khơng xử 14 lý Vai trị sinh lý đặc trưng GA kích thích dãn tế bào theo chiều dọc nên dẫn đến tăng chiều cao chiều dài Bảng 3.9 Ảnh hưởng GA3 đến số tiêu sinh trưởng Nồng độ GA3(ppm) (Đ/C) 10 20 40 CV(%) LSD(0,05) 60 ngày sau trồng Cao Số lá/cây ĐK thân(mm) cây(cm) 95,7 25,7 23,2 98,7 26,5 23,2 107,5 26,9 23,5 104,1 26,3 22,2 4,6 1,7 4,1 7,3 0,7 ns Kích thước số 15 (cm) Dài Rộng 63,9 64,8 67,0 69,4 3,0 3,1 17,2 19,3 17,3 18,2 5,1 1,5 Về ảnh hưởng xử lý GA3 đến hoa giống thuốc ká K.326 (bảng 3.10) phun GA3 có tác dụng trì hoãn hoa thuốc lá: Thời gian bắt đầu hoa (đạt tỷ lệ hoa 10%) chậm khoảng ngày kết thúc hoa (đạt tỷ lệ hoa 90%) kéo dài ngày so với đối chứng không xử lý Bảng 3.10 Ảnh hưởng GA3 đến thời gian hoa ĐVT: Ngày sau trồng Nồng độ GA3(ppm) Ra hoa 10% Ra hoa 50% Ra hoa 90% (Đ/C ) 53,3 61,3 64,7 10 58,3 62,3 65,7 20 58,0 63,3 67,0 40 58,3 61,7 67,3 CV(%) 1,1 1,2 1,6 LSD(0,05) 1,0 ns 1,7 Một chức sinh lý gibberellin điều chỉnh hoa số thực vật (Hoàng Minh Tấn Nguyễn Quang Thạch, 1993) Kết thí nghiệm phù hợp với kết nghiên cứu Bùi Quang Đãng cs., 2006) khả ức chế hoa GA3 giống xoài GL6 3.3.2 Ảnh hưởng chất ức chế sinh trưởng đến sinh trưởng hoa giống thuốc K.326 3.3.2.1 Ảnh hưởng ethrel đến sinh trưởng hoa giống thuốc K.326 Ethrel chất ức chế sinh trưởng sử dụng rộng rãi cho nhiều loại trồng để điều chỉnh q trình sinh trưởng, kích thích hoa, xúc tiến q trình chín nhiều loại Kết nghiên cứu tác động ethrel đến sinh trưởng hoa thuốc ghi nhận bảng 3.11 3.12 15 Bảng 3.11: Ảnh hưởng ethrel đến số tiêu sinh trưởng Nồng độ Ethrel (ppm) (Đ/C) 400 600 800 CV(%) LSD(0,05) 60 ngày sau trồng Cao Số lá/cây ĐK thân (cm) (lá) (mm) 99,8 26,7 23,4 80,1 28,6 23,8 67,3 30,4 25,5 62,5 33,7 25,2 4,1 3,3 5,0 5,6 1,5 1,9 Lá số 15 Chiều dài Rộng (cm) (cm) 62,8 20,4 53,9 17,9 52,9 17,0 55,4 18,2 3,4 3,4 3,3 1,0 P (g/lá) 37,7 36,0 28,3 29,3 5,1 3,0 Bảng 3.12 Ảnh hưởng ethrel đến thời gian hoa ĐVT: Ngày sau trồng Nồng độ ethrel(ppm) (Đ/C ) 400 600 800 CV(%) LSD(0,05) Ra hoa 10% 60,3 57,7 58,3 57,7 1,0 1,0 Ra hoa 50% 63,3 61,3 61,7 60,3 1,6 1,6 Ra hoa 90% 67,7 63,3 63,3 60,7 1,3 1,3 - Ethrel từ nồng độ 400 đến 600 ppm có ảnh hưởng ức chế mạnh lên sinh trưởng chiều cao cây, chiều dài, chiều rộng khối lượng Nồng độ ethrel tăng ảnh hưởng ức chế lên sinh trưởng thân rõ hơn; ethrel làm tăng số đường kính thân (bảng 3.11) - Xử lý ethrel ảnh hưởng rõ đến hoa thuốc Kết ethrel làm hoa thuốc xuất (tỷ lệ 10%) sớm ngày, hoa rộ (tỷ lệ 50%) sớm ngày kết thúc hoa (đạt tỷ lệ 90%) sớm ngày so với đối chứng không xử lý (bảng 3.12) Sự ức chế mạnh sinh trưởng quan dinh dưỡng dẫn đến kích thích hoa Đây mối quan hệ tương quan ức chế, quan dinh dưỡng bị ức chế hoa kích thích Đồng thời etylen hocmon có vai trò sinh lý hoa thực vật (Hoàng Minh Tấn cs., 2006) 3.3.2.2 Ảnh hưởng xử lý PIX đến sinh trưởng hoa thuốc Kết xử lý PIX với nồng độ từ 100 - 300ppm cho thấy: - PIX retardant nên ảnh hưởng ức chế chiều cao thuốc mạnh, nồng độ 300 ppm chiều cao 74,2 cm so 100,1 cm (Đ/C) Kèm theo ức chế chiều cao, PIX có tác dụng làm giảm đường kính thân, kích thước khối lượng 16 - Ở nồng độ 100 - 300 ppm, PIX ảnh hưởng đến hoa thuốc lá, làm thời gian kết thúc hoa sớm khoảng ngày (bảng 3.14) Hiệu kích thích hoa PIX không mạnh ethrel Bảng 3.13 Ảnh hưởng PIX đến số tiêu sinh trưởng Nồng độ PIX (ppm) (Đ/C) 100 200 300 CV(%) LSD(0,05) 60 ngày sau trồng Cao Số lá/cây ĐK thân (cm) (lá) (mm) 100,1 25,7 24,8 80,1 25,8 21,1 77,2 26,1 22,1 74,2 25,0 21,1 3,1 2,9 2,2 4,3 ns 0,8 Lá số 15 Chiều dài Rộng (cm) (cm) 64,2 19,7 58,7 18,3 59,0 18,2 59,3 18,4 1,9 4,6 1,8 1,4 Khối lượng (g/lá) 40,0 39,5 38,2 38,8 6,6 4,2 Bảng 3.14: Ảnh hưởng PIX đến thời gian hoa giống thuốc K.326 ĐVT: Ngày sau trồng Nồng độ PIX(ppm) (Đ/C ) 100 200 300 CV(%) LSD(0,05) Ra hoa 10% 59,3 58,3 58,7 58,3 1,1 1,0 Ra hoa 50% 61,3 61,0 61,3 61,3 1,2 1,2 Ra hoa 90% 66,3 63,0 63,7 63,3 1,0 1,1 Kết phù hợp với nghiên cứu Dương Xuân Diêu (2013) ảnh hưởng PIX là: ức chế mạnh sinh trưởng chiều cao chiều dài cành bông, không ảnh hưởng nhiều đến thời gian hoa làm tăng yếu tố cấu thành suất suất 3.3.2.3 Ảnh hưởng xử lý Alar đến sinh trưởng hoa giống thuốc K.326 Alar xếp vào chất ức chế sinh trưởng sử dụng để điều chỉnh hoa đậu nhiều ăn số nước, với thuốc khơng có nghiên cứu cơng bố Kết bảng 3.15 3.16 phản ánh ảnh hưởng alar đế sinh trưởng hoa thuốc Bảng 3.15: Ảnh hưởng Alar đến số tiêu sinh trưởng Nồng độ Alar (ppm) (Đ/C) 2.000 3.000 4.000 CV(%) LSD(0,05) 60 ngày sau trồng Cao Số ĐK thân (cm) (lá/cây) (mm) 98,4 25,8 22,3 96,7 27,0 21,4 98,6 26,4 22,7 97,8 26,4 22,2 1,5 3,1 3,0 2,4 ns 1,2 17 Dài (cm) 66,1 58,2 58,1 60,1 2,4 2,4 Lá số 15 Rộng Khối lượng (cm) (g/lá) 19,0 48,0 19,3 44,7 17,9 45,0 18,8 46,7 4,6 3,1 1,4 1,1 Bảng 3.16: Ảnh hưởng xử lý Alar đến thời gian hoa ĐVT: Ngày sau trồng Nồng độ Alar (ppm) Ra hoa 10% Ra hoa 50% Ra hoa 90% (Đ/C ) 57,3 60,7 63,7 2.000 59,0 63,7 67,3 3000 59,0 65,0 66,3 4.000 59,3 64,0 65,3 CV(%) 1,1 1,1 0,9 LSD(0,05) 1,0 1,1 1,0 Khác với ethrel PIX trình bày trên, Alar với nồng độ 2.000 – 4.000 ppm khơng có ảnh hưởng ức chế đáng kể lên sinh trưởng thân thuốc lá, có ảnh hưởng đến thời gian hoa thuốc theo hướng trì hỗn hoa: Thời gian bắt đầu hoa (đạt tỷ lệ 10%) chậm ngày, hoa rộ (đạt tỷ lệ 50%) chậm 4,3 ngày (nồng độ 3.000ppm) kết thúc hoa (đạt tỷ lệ 90%) chậm ngày (nồng độ 2.000ppm) so với không xử lý Các kết nghiên cứu đề tài trình bày cho thấy rõ tồn mối quan hệ tương quan sinh trưởng thể rõ thuốc sử dụng chất điều hòa sinh trưởng Tương quan sinh trưởng thể tương quan kích thích tương quan ức chế Mối quan hệ quan dinh dưỡng quan sinh sản quan hệ ức chế tương quan Khi kích thích thân sinh trưởng ức chế hình thành hoa (Hồng Minh Tấn cs., 2006) Khi sử dụng chất kích thích sinh trưởng để điều chỉnh sinh trưởng thân trì hỗn hoa Nếu sử dụng chất ức chế sinh trưởng (ethrel, PIX) để ức chế sinh trưởng thân làm cho thuốc xuất hoa sớm 3.3 Ảnh hưởng quang chu kỳ đến sinh trưởng hoa giống thuốc K.326 Nếu thuốc giống K.326 thuộc nhóm có quang chu kỳ ngày ngắn gặp quang chu kỳ ngày dài quang gián đoạn ức chế mạnh hình thành hoa 3.3.1 Ảnh hưởng quang chu kỳ ngày dài đến sinh trưởng hoa giống thuốc K.326 Để tìm hiểu ảnh hưởng quang chu kỳ ngày dài lên khả sinh trưởng hoa giống thuốc K.326, thí nghiệm quang chu kỳ ngày dài thiết lập, việc chiếu sáng bổ sung thêm vào lúc 18 hàng ngày giờ/ngày (tương đương quang chu kỳ 14 sáng 10 tối), giờ/ngày (tương đương 16 sáng/8 tối) giờ/ngày (tương đương 18 sáng/6 tối) Thời lượng tác động quang chu kỳ ngày dài 10, 20, 30 ngày liên tục kết thúc hoa.Thời gian bắt đầu xử lý QCK có (10 ngày sau trồng) Kết nghiên cứu ảnh hưởng quang chu kỳ ngày 18 dài lên sinh trưởng hoa ghi nhận bảng 3.17 3.18 Bảng 3.17: Ảnh hưởng quang chu kỳ ngày dài đến số tiêu sinh trưởng QCK ngày dài (QCK) 14 sáng 10 tối 16 sáng tối 18 sáng tối LSD0,05 (QCK) LSD0,05 (T) LSD0,05 (QCKxT) Thời gian tác động QCK (T) (Đ/C) 10 20 30 LT (Đ/C) 10 20 30 LT (Đ/C) 10 20 30 LT 70 ngày sau trồng Cao Số (cm) (lá/cây) 96,4 24,3 101,8 27,7 102,0 29,0 105,6 30,6 107,5 32,8 94,1 23,0 104,1 27,5 103,2 30,2 106,2 31,5 113,0 32,7 98,1 22,7 103,6 29,2 107,4 32,6 113,9 33,6 118,8 34,5 4,3 0,6 5,0 0,5 8,6 0,9 Lá số 15 Dài Rộng (cm) (cm) 64,2 19,0 55,6 17,7 56,5 17,9 57,4 17,6 56,9 18,4 64,5 19,0 55,6 18,2 55,7 18,2 54,8 17,9 54,7 17,9 63,3 18,2 58,8 17,9 56,5 18,5 56,8 18,1 60,0 18,4 ns ns 2,1 0,6 3,5 1,0 ĐK thân (mm) 14,3 14,7 14,7 15,7 16,7 14,7 15,1 15,8 15,7 18,1 14,3 15,4 16,6 16,7 18,7 ns 0,6 1,0 Kết cho thấy: Có thể thấy quang chu kỳ ngày dài kích thích sinh trưởng chiều cao thân hình thành rõ rệt Tất công thức xử lý quang chu kỳ ngày dài khác có chiều cao số cao có ý nghĩa thống kê so với đối chứng khơng xử lý Quang chu kỳ dài khả kích thích sinh trưởng thân mạnh Chẳng hạn quang chu kỳ 14/10 công thức chiếu sáng liên tục chiều cao đạt 107 cm 32 lá; quang chu kỳ 18/6, chiều cao 118 cm có 34 Thời gian xử lý quang chu kỳ ngày dài nhiều hiệu kích thích sinh trưởng lên thân thuốc rõ Chẳng hạn, công thức quang chu kỳ 14/10 tác động quang chu kỳ liên tục chênh lệch chiều cao so với đối chứng 11 cm số chênh lệch lá; quang chu kỳ 18/6, chiều cao chênh lệch 20 cm số chênh lệch 12 thời điểm 70 ngày sau trồng Theo quan điểm hocmon hoa điều kiện ngày dài kích thích tổng hợp gibberellin làm tinh trưởng chiều cao kéo theo tăng số (Christian Fankhauser and Joanne Chory, 1997) Trong thực tiễn sản xuất, biện pháp thắp 19 đèn ban đêm để kéo dài chiều cao áp dụng phổ biến hoa hoa ly, hoa cúc, hoa loa kèn trắng… Bảng 3.18 Ảnh hưởng quang chu kỳ ngày dài đến thời gian hoa Thời gian đạt tỷ lệ hoa… (ngày sau trồng) 10% 50% 90% Tăng so Tăng Tăng Ngày Đ/C Ngày so Đ/C Ngày so Đ/C (ngày) (ngày) (ngày) Quang chu kỳ (QCK) Thời gian tác động QCK (T) (ngày) 14 sáng 10 tối (Đ/C) 10 20 30 LT 58,0 58,7 66,3 67,7 69,0 0,7 8,3 9,7 11,0 60,3 61,3 76,3 79,0 80,3 1,0 16,0 18,7 20,0 62,7 66,3 79,7 82,0 85,3 3,6 17,0 19,3 22,6 16 sáng tối (Đ/C) 10 20 30 LT 58,7 66,0 68,0 68,3 69,3 7,3 9,3 9,6 10,6 60,7 70,3 76,0 79,3 85,0 9,6 15,3 18,6 24,3 64,0 78,0 87,0 87,3 92,3 14,0 23,0 23,3 28,3 18 sáng tối (Đ/C) 10 20 30 LT 58,3 60,7 69,0 69,3 82,3 2,4 10,7 11,0 24,0 60,0 67,7 77,0 87,3 90,7 7,7 17,0 27,3 30,7 62,7 76,0 80,0 83,3 97,3 13,3 17,3 20,6 34,6 LSD0,05 (QCK) LSD0,05 (T) LSD0,05 (QCK xT) 0,7 0,7 1,2 0,4 0,8 1,4 0,8 0,7 1,2 Sinh trưởng thân hoa có mối tương quan ức chế Khi thân sinh trưởng mạnh ức chế hoa Hiệu ứng kích thích q trình sinh trưởng quan dinh dưỡng có ảnh hưởng đến hoa thuốc giống K.326 Vì thuốc ngày ngắn nên hiệu quang chu kỳ ngày dài ức chế hoa, kéo dài thời gian hình thành hoa Tất công thức xử lý quang chu kỳ ngày dài có thời gian hoa chậm nhiều so với đối chứng không xử lý Ảnh hưởng ức chế hoa phụ thuộc vào quang chu kỳ Sự chậm trễ hoa quang chu kỳ ngày dài rõ rệt Trong đó, thời gian chậm hoa so với đối chứng lúc kết thúc hoa quang chu kỳ 16/8 14 đến 28 ngày quang chu kỳ 18/6 13 đến 34 ngày Trong đó, quang chu kỳ 14/10, thời gian chậm hoa khoảng từ đến 22 ngày Hiệu ức chế hoa quang chu kỳ 16/8 18/6 tương đương Sự chậm trễ hoa phụ thuộc vào thời gian xử lý: Thời gian xử lý quang chu 20 kỳ ngày dài tăng hiệu ức chế lớn Cơng thức xử lý quang chu kỳ liên tục có thời gian chậm hoa lớn nhất, đạt từ 22 đến 34 ngày Hiệu ức chế mạnh mẽ quang chu kỳ ngày dài lên hoa vơ có ý nghĩa sản xuất thuốc nguyên liệu Bản chất tác động phytochrom (Lincoln and Eduardo, 1998) Với ngày ngắn đêm dài thuốc cần giảm lượng P730 hoa nên cần đêm dài để biến P730 thành P660 Quang chu kỳ ngày dài tạo điều kiện để chuyển hóa hồn tồn P660 thành P730 mà ức chế hoa ngày ngắn giống thuốc K.326 Kết phù hợp với kết ức chế hình thành hoa sớm hoa cúc chiếu sáng bổ sung (Đặng Văn Đơng, 2006) kích thích Thanh Long hình thành hoa chiếu sáng bổ sung ngày dài (Nguyễn Văn Kế, 2006) 3.3.2 Ảnh hưởng quang gián đoạn đến sinh trưởng hoa giống thuốc K.326 Quang gián đoạn tạo thí nghiệm cách chiếu sáng vào đêm (23h30 - 0h30) ánh sáng đỏ ánh sáng trắng Thời lượng tác động quang gián đoạn 10, 20, 30 ngày liên tục hoa Thời gian bắt đầu tác động QGĐ thuốc có - (sau trồng 10 ngày) Ánh sáng đèn đỏ có tỷ lệ tia sáng đỏ cao dặc biệt ánh sáng 660 nm Ánh sáng trắng có tỷ lệ ánh sáng 660 nm thấp ánh sáng đỏ Kết theo dõi tiêu sinh trưởng thân thời gian hoa tác động quang gián đoạn ghi nhận bảng 3.19 3.20 Bảng 3.19: Ảnh hưởng quang gián đoạn đến số tiêu sinh trưởng Ánh sáng quang gián đoạn (QGĐ) Ánh sáng đỏ Ánh sáng Trắng LSD0,05 (QCK) LSD0,05 (T) LSD0,05 (QCKxT) Thời gian tác động QCK (T) (Đ/C) 10 20 30 LT (Đ/C) 10 20 30 LT 70 ngày sau trồng Cao Số (cm) (lá/cây) 94,6 24,3 97,2 27,6 101,2 28,0 103,5 29,4 106,7 30,6 Lá số 15 Dài Rộng (cm) (cm) 60,6 16,2 52,3 16,2 55,1 17,0 52,5 17,2 53,5 17,7 ĐK thân 95,4 102,1 102,6 104,8 107,1 24,5 27,1 27,9 30,7 31,3 61,5 51,4 53,3 53,0 51,9 17,2 17,5 17,8 17,9 18,0 (mm) 13,6 14,0 15,0 15,7 16,3 13,7 14,8 15,3 15,8 16,5 ns 3,9 ns 1,0 ns 2,0 0,8 ns 0,1 0,8 5,5 1,5 2,8 1,4 1,1 21 Có thể thấy rõ chiếu sáng vào đêm ảnh hưởng đến sinh trưởng thân thuốc rõ Ở cơng thức có thời gian xử lý quang gián đoạn khác kể ánh sáng đỏ ánh sáng trắng, chiều cao số công thức xử lý quang gián đoạn cao có ý nghĩa so với đối chứng Cơng thức xử lý quang gián đoạn liên tục hoa có chiều cao số cao nhất, chênh lệch so đối chứng ánh sáng đỏ 12 cm chiều cao lá/cây ánh sáng trắng 12 cm lá/cây Ở thí nghiệm hiệu kích thích sinh trưởng thân ánh sáng đỏ trắng tương đương Kết chứng tỏ ánh sáng đèn tác động vào ban đêm có tác dụng kích thích sinh trưởng chiều cao tăng số Ánh sáng đèn có cường độ khơng cao có tỷ lệ ánh sáng có bước sóng dài nhiều nên kích thích sinh trưởng dãn tế bào gây nên tăng trưởng chiều cao dẫn đến tăng số Đây hiệu tích cực người ta muốn tăng chiều cao thân biện pháp thắp đèn ban đêm cho số hoa để tăng chất lượng cành hoa Kết phù hợp với kết nghiên cứu Đặng Văn Đông Nguyễn Quang Thạch (2005) nghiên cứu quang gián đoạn hoa cúc ngày ngắn Kết mong muốn thí nghiệm hiệu ức chế hoa thuốc tác động quang gián đoạn Bảng 3.20: Ảnh hưởng quang gián đoạn đến thời gian hoa Quang gián đoạn (QGĐ) Ánh sáng Đỏ Ánh sáng trắng LSD0,05 (QGĐ) LSD0,05 (T) LSD0,05 (QGĐ xT) Thời gian tác động QGĐ (T) (ngày) (Đ/C) 10 20 30 LT (Đ/C) 10 20 30 LT Thời gian đạt tỷ lệ hoa… (ngày sau trồng) 10% 50% 90% Tăng so Tăng Tăng Ngày Đ/C Ngày so Đ/C Ngày so Đ/C (ngày) (ngày) (ngày) 58,3 60,0 0 63,3 58,3 0,0 66,3 26,7 6,3 90,0 72,3 14,0 68,3 90,3 8,3 27,0 80,0 21,7 92,7 82,0 22,0 29,4 80,3 22,0 93,3 88,3 28,3 30,0 58,0 61,0 63,7 58,7 0,7 64,3 3,3 78,0 14,3 74,7 16,7 80,0 19,0 78,7 15,0 77,3 19,3 80,3 19,3 85,7 22,0 78,7 20,7 89,3 28,3 93,0 29,3 0,8 0,9 1,4 0,9 1,0 0,8 1,2 1,4 1,1 Việc xử lý quang gián đoạn cho giống thuốc K.326 ảnh hưởng rõ rệt đến hình thành hoa chúng Tất công thức xử lý quang gián 22 đoạn khác biệt thời gian hoa rõ rệt so với đối chứng Thời gian xử lý quang gián đoạn dài hoa bị trì hỗn mạnh Quang gián đoạn liên tục với ánh sáng đỏ làm chậm hoa thuốc K.326 22 ngày thời điểm hoa 10%, 28 ngày thời điểm hoa 50% 30 ngày lúc hoa hoàn toàn (so với đối chứng) Còn quang gián đoạn ánh sáng trắng thời gian chậm hoa 20 ngày lúc đạt 10% hoa, 28 ngày lúc 50% hoa 30 ngày lúc 90% hoa Tuy nhiên, thời gian bắt đầu hoa hiệu trì hỗn ánh sáng đỏ trắng xấp xỉ Nhưng thời gian kết thúc hoa ánh sáng đỏ có hiệu làm chậm kết thúc hoa rõ rệt ánh sáng trắng, tức thời gian kết thúc hoa kéo dài thời lượng QGĐ tương ứng Như vậy, cần dùng ánh sáng đỏ tác động vào lúc có - sau trồng với thời gian chiếu sáng 10 ngày làm chậm thời gian hoa thuốc 26,7 ngày (bằng 1/3 thời gian sinh trưởng sản xuất), kết có ý nghĩa lớn sản xuất thuốc nguyên liệu công tác lai tạo giống thuốc Việc thực quang gián đoạn chia đêm thành đêm ngắn nên ức chế hoa ngày ngắn Bản chất tác động phytochrom (Lincol and Eduardo, 1998) Với ngày ngắn đêm dài thuốc cần giảm lượng P730 hoa nên cần đêm dài để biến P730 thành P660 Nhưng chiếu sáng vào ban đêm P660 chuyển hóa thành P730 ức chế hoa thuốc Kết phù hợp với kết nghiên cứu hoa cúc (Đặng Văn Đông, 2006) KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ Kết luận Các chất NH4NO3, CoCl2, paclobutrazol bổ sung vào môi trường nuôi cấy không gây cảm ứng hoa in vitro giống thuốc K.326 Việc gây hạn sinh lý bổ sung đường saccharose, glucose nồng độ cao (60 - 120 g/l) vào mơi trường ni cấy có ảnh hưởng kích thích hoa giống thuốc K.326 điều kiện nuôi cấy in vitro Bổ sung đường glucose saccharose với hàm lượng 90 g/l cho tỷ lệ hoa cao đạt 55,56% sau 18 tuần nuôi cấy Việc gây hạn cách hạn chế cung cấp nước (15 - 18 ngày tưới lần) có ảnh hưởng ức chế mạnh đến sinh trưởng chiều cao thân, giảm khối lượng kích thích hoa sớm ngày (15 ngày tưới lần) 6,5 ngày (18 ngày tưới lần) so với đối chứng tưới nước giữ ẩm bình thường Cắt tạo thân từ chồi nách số 5, 10, 15 20 không ảnh hưởng rõ rệt đến sinh trưởng tái sinh (chiều cao, số lá, kích thước khối lượng lá) thân tái sinh từ chồi nách số 10 cho sinh trưởng thân 23 suất thuốc nguyên liệu cao Biện pháp cắt ảnh hưởng đến thời gian hoa thuốc lá, cắt làm chậm thời gian hoa ngày so đối chứng Các chất kích thích sinh trưởng (α NAA, GA3) kích thích rõ rệt tăng trưởng thân lá, có GA3 có khả ức chế hoa, làm chậm thời gian hoa giống thuốc K.326 ngày so với đối chứng không xử lý GA3 Trong chất ức chế sinh trưởng ethrel PIX có ảnh hưởng ức chế mạnh lên tăng trưởng thân cịn alar khơng ảnh hưởng đáng kể Ethrel kích thích hoa sớm ngày kết thúc sớm ngày Alar có xu hướng kìm hãm hoa giống thuốc K.326, làm chậm hoa từ - ngày Với giống thuốc K.326, quang chu kỳ ngày dài có ảnh hưởng kích thích đáng kể đến khả sinh trưởng thân (tăng chiều cao cây, số lá, đường kính thân) Đồng thời, quang chu kỳ ngày dài có ảnh hưởng kìm hãm rõ rệt hoa Cơng thức 18 sáng/6 tối có ảnh hưởng ức chế hoa mạnh nhất: Bắt đầu hoa (10%) chậm 24 ngày, hoa (50%) chậm 30,7 ngày kết thúc hoa (90%) chậm 34,6 ngày so đối chứng quang chu kỳ tự nhiên (12 sáng/12 tối) Thực quang gián đoạn chiếu sáng ngắt quãng vào đêm ánh sáng trắng ánh sáng đỏ có ảnh hưởng kích thích sinh trưởng thân (tăng chiều cao cây, số lá, đường kính thân…) Đồng thời, quang gián đoạn kìm hãm rõ rệt hoa giống thuốc K.326: ánh sáng trắng làm chậm thời gian bắt đầu hoa (10%) 20 ngày, ánh sáng đỏ 22 ngày; hoa 50% 90% loại ánh sáng (trắng đỏ) làm chậm thời gian hoa tương ứng 28 ngày 29-30 ngày Quang gián đoạn ánh sáng đỏ có khả làm chậm thời gian kết thúc hoa rõ rệt ánh sáng trắng Đề nghị Trong sản xuất thuốc nguyên liệu, thuốc hoa sớm làm giảm suất áp dụng biện pháp sau để kéo dài thời gian hoa: - Cắt tạo thân từ chồi nách số - Xử lý GA3 nồng độ 20 - 30 ppm lần vào thời điểm 20, 30, 40 ngày sau trồng Trong lai tạo giống thuốc để điều chỉnh thời gian hoa bố, mẹ, sử dụng biện pháp sau: - Kích thích hoa sớm: sử dụng ethrel nồng độ 400 - 800ppm, gây hạn cho - Kìm hãm hoa: cách sử dụng quang chu kỳ ngày dài (16 sáng/8 tối), quang gián đoạn (ánh sáng đỏ) sử dụng chất điều hòa sinh trưởng GA3 24 DANH MỤC CƠNG TRÌNH ĐÃ CƠNG BỐ CĨ LIÊN QUAN ĐẾN LUẬN ÁN Nguyễn Văn Vân, Hồng Minh Tấn (2013), “Kìm hãm hoa giống thuốc K.326 chiếu sáng bổ sung, quang gián đoạn cắt thân”, Tạp chí Khoa học phát triển, 11(5): 629-634 Nguyễn Thị Thanh Phương, Nguyễn Quang Thạch, Nguyễn Thị Lý Anh, Nguyễn Văn Vân, Nguyễn Thanh Hoa (2013), "Nghiên cứu ảnh hưởng số yếu tố đến hoa in vitro thuốc nicotiana tabacum", Báo cáo khoa học Proceedings, Hội nghị Khoa học công nghệ sinh học tồn quốc 2013, Quyển 2: Cơng nghệ sinh học Vi sinh, công nghệ sinh học Thực vật, NXB Khoa học tự nhiên Công nghệ: 995-1000 Nguyễn Văn Vân, Hồng Minh Tấn (2013), “Kìm hãm hoa giống thuốc K.326 chiếu sáng bổ sung, quang gián đoạn cắt thân”, Tạp chí Khoa học phát triển, số 19: 51-56 ... chỉnh hoa thuốc giống K.326 Chính mà thực đề tài: ? ?Nghiên cứu ảnh hưởng số yếu tố nông sinh học đến sinh trưởng hoa giống thuốc K.326 trồng miền Bắc Việt Nam? ?? Mục tiêu nghiên cứu Xác định ảnh hưởng. .. hưởng đến hoa giống thuốc K.326 Kết phù hợp với vai trò sinh lý auxin không ảnh hưởng điều chỉnh đến hoa thực vật 3.3.1.2 Ảnh hưởng GA3 đến sinh trưởng hoa giống thuốc K.326 Kết nghiên cứu ảnh hưởng. .. Kết nghiên cứu đề tài cung cấp dẫn liệu khoa học có giá trị ảnh hưởng số tác nhân nông sinh học đến mối quan hệ tương quan ức chế trình sinh trưởng thân hoa thuốc giống K.326 trồng miền Bắc Việt