Cẩm nang an toan sinh học phòng thí nghiệm part 6 pps

x 86 x B̫ng12. N͛ng ÿ͡ c̯n thi͇t cͯa hͫp ch̭t gi̫i phóng clo TÌNH TRҤNG “SҤCH” a TÌNH TRҤNG “BҬN” b Clo sҹn có theo yêu cҫu 0.1% (1 g/l) 0.5% (5 g/l) Dung dӏch Natri hypochlorite (5% clo) 20 ml/l 100 ml/l Canxi Hypochlorite (70% clo) 1,4 g/l 7,0 g/l Bӝt Natri dichloroisocyanurate (60% clo) 1,7 g/l 8,5 g/l Viên Natri dichloroisocyanurate (mӛi viên chӭa 1,5 g clo) 1 viên cho 1 lít 4 viên cho 1 lít Chloramine (25% Clo) c a Sau khi dӑn dҽp khӕi lѭӧng vұt liӋu lӟn. b Các vұt liӋu chҧy tràn nhѭ máu hoһc sau khi dӑn dҽp khӕi lѭӧng vұt liӋu lӟn. c Xem phҫn trình bày vӅ chloramines. Clo (natri hypochlorite) Clo là mӝt hóa chҩt oxy hóa tác ÿӝng nhanh, diӋt trùng phә rӝng và có ӣ nhiӅu nѫi. Nó thѭӡng ÿѭӧc bán nhѭ chҩt tҭy trҳng - mӝt dung dӏch cӫa natri hypochlorite (NaOCl) có thӇ pha vӟi nѭӟc ÿӇ cung cҩp clo ӣ các nӗng ÿӝ khác nhau. Clo, nhҩt là chҩt tҭy trҳng, có tính kiӅm cao và có thӇăn mòn kim loҥi. Hoҥt tính cӫa nó giҧm ÿáng kӇ bӣi chҩt hӳu cѫ (protein). Lѭu giӳ chҩt tҭy trҳng ӣ dҥng khô hay dung dӏch trong vұt chӭa hӣ, ÿһc biӋt ӣ nhiӋt ÿӝ cao, làm giҧm khҧ năng diӋt trùng do clo bӏ phóng thích. Cҫn thay dung dӏch tҭy trҳng sau bao lâu phө thuӝc vào nӗng ÿӝ ban ÿҫu cӫa nó, vào loҥi (có hay không có nҳp) và kích cӥ vұt chӭa, tҫn suҩt và ÿһc tính sӱ dөng cNJng nhѭÿiӅu kiӋn xung quanh. Hѭӟng dүn chung là các dung môi nhұn chҩt hӳu cѫ thѭӡng xuyên cҫn thay ít nhҩt mӝt lҫn/ngày và nӃu ít thѭӡng xuyên hѫn có thӇÿӃn mӝt tuҫn. Chҩt tҭy uӃ trong phòng thí nghiӋm dùng phә biӃn cho nhiӅu mөc ÿích cҫn có nӗng ÿӝ 1g clo/l. Mӝt dung dӏch mҥnh chӭa 5 g clo/l sӱ dөng ÿӇ xӱ lý khi làm ÿә các chҩt nguy hiӇm sinh hӑc và khi có lѭӧng lӟn chҩt hӳu cѫ. Dung dӏch natri hypochlorite nhѭ chҩt tҭy trҳng sӱ dөng cho sinh hoҥt chӭa 50 g clo/l và do ÿó cҫn pha vӟi tӹ lӋ 1:50 hay 1:10 ÿӇ ÿҥt ÿѭӧc nӗng ÿӝ cuӕi cùng là 1 g/l hay 5 g/l. Dung dӏch chҩt tҭy trҳng công nghiӋp có nӗng ÿӝ hypochlorite natri khoҧng 120 g/l cҫn pha phù hӧp ÿӇ ÿҥt ÿѭӧc nhӳng nӗng ÿӝ trên. Hҥt hoһc viên canxi hypochlorite (CaClO) 2 ) thѭӡng chӭa khoҧng 70% clo. Dung dӏch pha tӯ viên hay hҥt chӭa 1,4 g/l và 7,0 g/l sӁ có 1,0 g và 5 g clo /l. Chҩt tҭy trҳng không ÿѭӧc dùng nhѭ chҩt khӱ trùng, nhѭng cNJng có thӇ dùng nhѭ mӝt chҩt tҭy nhiӅu công dөng và ÿӇ ngâm các vұt liӋu phi kim bӏ ô nhiӉm. Trong tình trҥng khҭn cҩp, chҩt tҭy trҳng cNJng có thӇ sӱ dөng ÿӇ khӱ trùng nѭӟc uӕng vӟi nӗng ÿӝ cuӕi cùng là 1–2 mg/l clo. x 87 x Khí clo rҩt ÿӝc. Do ÿó, chҩt tҭy trҳng phҧi cҩt giӳ và chӍ sӱ dөng ӣ nhӳng khu vӵc có hӋ thӕng thông gió tӕt. Ngoài ra, không ÿѭӧc pha trӝn chҩt tҭy trҳng vӟi axit ÿӇ phòng ngӯa thҧi khí clo nhanh. NhiӅu sҧn phҭm cӫa clo có thӇ gây hҥi cho ngѭӡi và môi trѭӡng, vì thӃ nên tránh sӱ dөng bӯa bãi các chҩt tҭy trùng có gӕc clo, ÿһc biӋt là chҩt tҭy trҳng. Natri dichloroisocyanurate Natri dichloroisocyanurate (NaDCC) dҥng bӝt chӭa 60% clo. Dung dӏch pha NaDCC bӝt vӟi nӗng ÿӝ 1,7 g/l và 8,5 g/l chӭa 1 g/l hoһc 5 g/l clo. Mӛi viên NaDCC thѭӡng chӭa khoҧng 1,5 g clo. Mӝt hay bӕn viên hòa tan trong 1 lít nѭӟc tҥo thành dung dӏch có nӗng ÿӝ mong muӕn là 1 g/l hay 5 g/l. NaDCC dҥng bӝt hay viên thì cҩt giӳ dӉ dàng và an toàn. NaDCC rҳn có thӇ dùng ÿӇ xӱ lý khi làm ÿә máu hay nhӳng chҩt lӓng sinh hӑc nguy hiӇm khác và ÿӇ khoҧng 10 phút trѭӟc khi loҥi bӓ. Sau ÿó có thӇ làm sҥch kӻ hѫn khu vӵc bӏҧnh hѭӣng. Chloramines Bӝt Chloramines chӭa khoҧng 25% clo. Chloramines phóng thích clo chұm hѫn so vӟi hypochlorites. Vì thӃ nӗng ÿӝ chloramines ban ÿҫu ÿѭӧc yêu cҫu cao ÿӇ ÿҥt hiӋu quҧ tѭѫng ÿѭѫng vӟi hypochlorites. Mһt khác, dung dӏch chloramine không bӏ bҩt hoҥt bӣi chҩt hӳu cѫӣ cùng mӭc ÿӝ hoҥt ÿӝng vӟi dung dӏch hypochlorite và nӗng ÿӝ 20 g/l ÿѭӧc ÿӅ nghӏ cho cҧ tình trҥng “sҥch” và “bҭn”. Dung dӏch Chloramine gҫn nhѭ không mùi. Tuy nhiên, nhӳng vұt ngâm chloramine phҧi rӱa kӻÿӇ loҥi bӓ cһn bám cӫa các tác nhân lӟn dính vào chloramine-T (natri tosylchloramide ). Clo dioxide Clo dioxide (ClO2) là mӝt chҩt diӋt trùng, khӱ nhiӉm và và ô xy hóa tác ÿӝng nhanh và mҥnh, thѭӡng ÿѭӧc ghi nhұn là hoҥt ÿӝng ӣ mӝt nӗng ÿӝ thҩp hѫn so vӟi clo dùng ÿӇ tҭy trҳng. Clo dioxide không bӅn vì là mӝt chҩt khí và trҧi qua sӵ phân huӹ thành khí clo (Cl2), oxy (O2) và giҧi phóng nhiӋt. Tuy nhiên, clo dioxide có thӇ hòa tan trong nѭӟc và әn ÿӏnh trong dung dӏch nѭӟc. Có thӇÿiӅu chӃ Clo dioxide theo hai cách: (1) phát sinh tҥi chӛ bҵng cách trӝn hai chҩt riêng biӋt, hydrochloric axit (HCl) và natri chlorite (NaClO2) và (2) ÿӇ ӣ dҥng әn ÿӏnh hoҥt hoá tҥi chӛ khi cҫn. Trong các chҩt hӫy diӋt ô xy hóa, clo dioxide là chҩt oxy hoá chӑn lӑc nhҩt. Ozone và clo phҧn ӭng mҥnh hѫn clo dioxide và chúng sӁ bӏ phá huӹ bӣi phҫn lӟn hӧp chҩt hӳu cѫ. Tuy nhiên clo dioxide chӍ phҧn ӭng vӟi nhӳng hӧp chҩt nghèo lѭu huǤnh, amin bұc 2 và 3 cNJng nhѭ các hӧp chҩt hӳu cѫ phҧn ӭng và khӱ cao khác. Vì thӃ có thӇ có ÿѭӧc mӝt phҫn tӗn dѭ bӅn vӳng vӟi mӝt liӅu lѭӧng clo dioxide thҩp hѫn clo hay ozone. NӃu ÿѭӧc tҥo ra mӝt cách hӧp lý, nhӡ tính chӑn lӑc, clo dioxide có thӇ hiӋu quҧ hѫn ozone hay clo trong nhӳng trѭӡng x 88 x hӧp lѭӧng chҩt hӳu cѫ lӟn. Formaldehyde Formaldehyde (HCHO) là mӝt chҩt khí diӋt tҩt cҧ các loҥi vi sinh vұt và bào tӱӣ nhiӋt ÿӝ trên 20 0 C. Tuy nhiên, nó không có tác dөng vӟi prion. Hoҥt tính cӫa formaldehyde tѭѫng ÿӕi chұm và cҫn ÿӝ ҭm tѭѫng ÿӕi khoҧng 70%. Nó ÿѭӧc bán trên thӏ trѭӡng nhѭ hӧp chҩt cao phân tӱ rҳn, paraformaldehyde, ӣ dҥng bông hoһc viên, hay nhѭ formalin, mӝt dung dӏch khí trong nѭӟc nӗng ÿӝ khoҧng 370 g/l (37%), chӭa chҩt әn ÿӏnh methanol (100 ml/l). Cҧ hai dҥng ÿѭӧc ÿun nóng ÿӇ giҧi phóng khí ÿӇ khӱ nhiӉm và khӱ trùng các thӇ tích khép kính nhѭ tӫ và phòng an toàn sinh h ӑc (xem phҫn khӱ khҭn môi trѭӡng kín trong chѭѫng này). Formaldehyde (5% formalin trong nѭӟc) có thӇ sӱ dөng nhѭ mӝt chҩt khӱ nhiӉm lӓng. Formaldehyde bӏ nghi ngӡ là chҩt gây ung thѭ. Ĉây là khí gây kích ӭng, nguy hiӇm, có mùi hăng và hѫi cӫa nó có thӇ kích thích mҳt và màng nhҫy. Vì thӃ phҧi cҩt giӳ và sӱ dөng trong tӫ cҩy hoһc khu vӵc có hӋ thӕng thông gió tӕt. Phҧi tuân thӫ các quy ÿӏnh an toàn hóa chҩt quӕc gia. Glutaraldehyde Giӕng nhѭ formaldehyde, glutaraldehyde (OHC(CH 2 ) 3 CHO) cNJng có hoҥt tính diӋt khuҭn, bào tӱ, nҩm và vi rút chӭa và không chӭa lipid. Nó không ăn mòn và có hoҥt tính nhanh hѫn formaldehyde. Tuy nhiên, nó mҩt nhiӅu giӡÿӇ diӋt bào tӱ. Glutaraldehyde thѭӡng ÿѭӧc cung cҩp dѭӟi dҥng dung dӏch có nӗng ÿӝ khoҧng 20 g/l (2%) và mӝt sӕ sҧn phҭm có thӇ cҫn ÿѭӧc “hoҥt hóa” (làm kiӅm hóa) trѭӟc khi sӱ dөng bҵng cách thêm hӧp chҩt bicarbonate vào. Dung dӏch ÿó có thӇ tái sӱ dөng trong khoҧng 1 – 4 tuҫn tùy thuӝc vào công thӭc, loҥi và tҫn suҩt sӱ dөng nó. Mӝt sӕ que thӱ chӍ cho kӃt quҧ thô vӅ mӭc ÿӝ hoҥt ÿӝng cӫa glutaraldehyde trong dung dӏch ÿang sӱ dөng. Dung dӏch Glutaraldehyde nên thҧi bӓ khi trӣ nên vҭn ÿөc. Glutaraldehyde ÿӝc, gây kích ӭng da và niêm mҥc nhҫy. Phҧi tránh tiӃp xúc vӟi nó. Phҧi dùng trong tӫ thao tác hoһc khu vӵc thông gió tӕt. Không nên dùng ÿӇ phun sѭѫng hay xӱ lý khӱ nhiӉm bӅ mһt môi trѭӡng. Phҧi tuân thӫ các quy ÿӏnh an toàn hóa chҩt quӕc gia. Hӧp chҩt Phenolic Các hӧp chҩt Phenolic là mӝt nhóm nhiӅu chҩt, thuӝc nhӳng chҩt ÿҫu tiên sӱ dөng ÿӇ diӋt khuҭn. Tuy nhiên, nhӳng quan tâm hѫn ÿӃn an toàn gҫn ÿây ÿã hҥn chӃ viӋc sӱ dөng chúng. Chúng có hoҥt tính tiêu diӋt vi khuҭn ÿang sinh trѭӣng và vi rút chӭa lipid vӟi công thӭc thích hӧp cNJng nhѭ thӇ hiӋn hoҥt tính chӕng mycobacteria nhѭng không diӋt ÿѭӧc bào tӱ và hoҥt tính chӕng lҥi vi rút không chӭa lipid cӫa chúng thì thay ÿәi. NhiӅu sҧn phҭm phenolic thѭӡng dùng ÿӇ khӱ nhiӉm bӅ mһt môi trѭӡng và mӝt vài loҥi nhѭ triclosan và chloroxylenol là nhӳng chҩt diӋt khuҭn sӱ dөng phә biӃn hѫn. x 89 x Triclosan là sҧn phҭm phә biӃn dùng ÿӇ rӱa tay. Hoҥt tính chính cӫa nó là chӕng lҥi vi khuҭn ÿang sinh trѭӣng, an toàn ÿӕi vӟi da và niêm mҥc nhҫy. Tuy nhiên, theo các nghiên cӭu trong phòng thí nghiӋm, vi khuҭn kháng vӟi triclosan nӗng ÿӝ thҩp cNJng có khҧ năng kháng lҥi mӝt vài loҥi kháng sinh. Ý nghƭa cӫa phát hiӋn này trong lƭnh vӵc khӱ trùng vүn chѭa ÿѭӧc biӃt ÿӃn. Mӝt sӕ hӧp chҩt phenolic nhҥy cҧm vӟi nѭӟc cӭng và có thӇ bӏ bҩt hoҥt bӣi nѭӟc cӭng và do ÿó cҫn phҧi pha loãng bҵng nѭӟc cҩt hoһc nѭӟc khӱ ion. Các hӧp chҩt Phenolic không ÿѭӧc khuyên dùng cho bӅ mһt tiӃp xúc vӟi thӵc phҭm và khu vӵc có trҿ nhӓ. Chúng có thӇ hҩp thө qua cao su và có thӇ ngҩm qua da. Phҧi tuân thӫ các quy ÿӏnh an toàn hóa chҩt quӕc gia. Hӧp chҩt ammonium bұc 4 NhiӅu dҥng cӫa hӧp chҩt ammonium bұc 4 sӱ dөng dѭӟi dҥng hӛn hӧp và thѭӡng kӃt hӧp vӟi nhӳng chҩt tҭy trùng khác nhѭ rѭӧu. Chúng có tác dөng tӕt ÿӕi vӟi mӝt vài vi khuҭn ÿang sinh trѭӣng và vi rút có chӭa lipid. Mӝt sӕ loҥi nhҩt ÿӏnh (nhѭ benzalkonium chloride) sӱ dөng nhѭ chҩt khӱ trùng. Tác dөng tҭy trùng cӫa mӝt vài loҥi hӧp chҩt ammonium bұc 4 giҧm ÿáng kӇ bӣi hӧp chҩt hӳu cѫ, nѭӟc cӭng và chҩt tҭy anionic. Do ÿó khi sӱ dөng nhӳng hӧp chҩt ammonium bұc 4 ÿӇ khӱ trùng cҫn thұn trӑng trong lӵa chӑn tác nhân lau chùi trѭӟc khӱ trùng. Vi khuҭn nguy hiӇm có thӇ phát triӇn trong dung dӏch hӧp chҩt ammonium bұc 4. Vì nhӳng hӧp chҩt này phân hӫy chұm nên chúng sӁ tӗn dѭ lâu trong môi trѭӡng. Alcohols (cӗn) Ethanol (ethyl alcohol, C 2 H 5 OH) và 2-propanol (isopropyl alcohol, (CH 3 ) 2 CHOH) có ÿһc tính khӱ trùng tѭѫng tӵ nhau. Chúng có khҧ năng diӋt vi khuҭn ÿang sinh trѭӣng, nҩm, vi rút có lipid nhѭng không diӋt ÿѭӧc bào tӱ. Hoҥt tính cӫa chúng trên virut chӭa lipid thay ÿәi. ĈӇ ÿҥt hiӋu quҧ cao nhҩt nên sӱ dөng ӣ nӗng ÿӝ khoҧng 70% (v/v) trong nѭӟc: ӣ nӗng ÿӝ cao hay thҩp hѫn có thӇ không có tác dөng diӋt khuҭn. Mӝt ѭu ÿiӇm lӟn cӫa dung dӏch cӗn là chúng không lѭu lҥi trên nhӳng vұt ÿѭӧc xӱ lý. Hӛn hӧp vӟi các tác nhân khác có hiӋu quҧ hѫn cӗn ÿѫn lҿ, ví dө hӛn hӧp cӗn 70% (v/v) vӟi 100 g formaldehyde/l và cӗn chӭa 2 g clo/l. Cӗn 70% (v/v) có thӇ bôi trên da, bӅ mһt làm viӋc trong phòng thí nghiӋm và tӫ an toàn sinh hӑc và ngâm nhӳng bӝ phұn nhӓ cӫa dөng cө phүu thuұt. Vì ethanol có thӇ làm khô da, nó thѭӡng ÿѭӧc pha vӟi phө gia làm mӅm. Nѭӟc rӱa tay chӭa cӗn ÿѭӧc khuyên dùng ÿӇ khӱ trùng tay bӏ bҭn nhҽ trong nhӳng trѭӡng hӧp không thuұn tiӋn hoһc không thӇ rӱa tay ÿúng cách. Tuy nhiên, phҧi chú ý rҵng ethanol không có tác dөng vӟi bào tӱ và cNJng không thӇ diӋt tҩt cҧ nhӳng loҥi virut không chӭa lipid. Cҩm sӱ dөng cӗn gҫn ngӑn lӱa ÿèn cӗn vì nó dӉ bay hѫi và dӉ cháy. Các dung dӏch làm viӋc nên cҩt giӳ trong bình chӭa phù hӧp ÿӇ tránh bӕc hѫi c ӗn. Cӗn có thӇ làm cӭng cao su và phân hӫy mӝt sӕ loҥi keo nhҩt ÿӏnh. ViӋc kiӇm kê và cҩt x 90 x giӳ ethanol phù hӧp trong phòng thí nghiӋm rҩt quan trӑng nhҵm tránh sӱ dөng nó cho các mөc ÿích khác ngoài viӋc tҭy trùng. Các chai ÿӵng dung dӏch cӗn cҫn dán nhãn rõ ràng ÿӇ tránh hҩp khӱ trùng. Iodine (I ӕt) và iodophors Hoҥt tính cӫa nhӳng chҩt khӱ nhiӉm này cNJng tѭѫng tӵ nhѭ cӫa clo, mһc dù chúng có thӇ ít bӏ hҥn chӃ hѫn bӣi các chҩt hӳu cѫ. I ӕt có thӇ nhuӝm màu vҧi và bӅ mһt môi trѭӡng và nhìn chung nó thѭӡng không phù hӧp ÿӇ sӱ dөng nhѭ chҩt khӱ nhiӉm. Mһc khác, iodophors và dung dӏch cӗn i ӕt là chҩt sát trùng tӕt. Polyvidone-iodine là mӝt chҩt khӱ trùng ÿáng tin cұy và an toàn ÿӕi vӟi da trѭӟc phүu thuұt và rӱa tay trѭӟc khi mә. Chҩt sát trùng có nguӗn gӕc i ӕt thѭӡng không thích hӧp ÿӇ sӱ dөng cho dөng cө y khoa / nha khoa. Không nên sӱ dөng i ӕt cho nhôm và ÿӗng. I ӕt có thӇ gây ÿӝc. Nhӳng sҧn phҭm hӳu cѫ có gӕc i ӕt phҧi cҩt giӳӣ nhiӋt ÿӝ 4– 10 0 C ÿӇ tránh sӵ phát triӇn cӫa vi sinh vұt nguy hiӇm tiӅm tàng. Hydrogen peroxide (oxy già) và peracids Giӕng nhѭ clo, oxy già (H 2 O 2 ) và peracid là nhӳng chҩt oxy hóa mҥnh và có khҧ năng diӋt khuҭn phә rӝng. Chúng cNJng an toàn cho con ngѭӡi và môi trѭӡng hѫn clo. Oxy già ÿѭӧc cung cҩp hoһc ӣ dҥng dung dӏch 3% có thӇ sӱ dөng ngay hoһc ӣ dҥng dung dӏch 30% ÿӇ pha loãng vӟi thӇ tích nѭӟc gҩp 5–10 lҫn thӇ tích cӫa nó. Tuy nhiên, dung dӏch 3–6% oxy già ÿѫn ÿӝc hoҥt ÿӝng tѭѫng ÿӕi chұm và chӍ có tác dөng nhѭ chҩt tҭy trùng. Các sҧn phҭm hiӋn nay có nhӳng phө gia khác ÿӇ әn ÿӏnh oxy già , tăng hoҥt tính diӋt trùng và làm giҧm hoҥt tính ăn mòn. Oxy già có thӇ dùng ÿӇ khӱ nhiӉm bӅ mһt làm viӋc cӫa phòng thí nghiӋm và tӫ an toàn sinh hӑc. Dung dӏch ÿұm ÿһc có thӇ thích hӧp ÿӇ khӱ trùng dөng cө y khoa/nha khoa không chӏu nhiӋt. Sӱ dөng nhiӋt hoá bӕc hѫi oxy già hoһc peracetic axit (CH 3 COOOH) ÿӇ khӱ nhiӉm dөng cө phүu thuұt/ y khoa không chӏu nhiӋt ÿòi hӓi phҧi có thiӃt bӏ chuyên dөng. Oxy già và peracids có thӇăn mòn các kim loҥi nhѭ nhôm, ÿӗng, ÿӗng thau, kӁm cNJng nhѭ có thӇ làm phai màu vҧi, da, tóc, và niêm mҥc nhҫy. Nhӳng vұt dөng ÿѭӧc xӱ lý bҵng oxy già và peracids phҧi rӱa kӻ trѭӟc khi cho tiӃp xúc vӟi mҳt và niêm mҥc nhҫy. Nên cҩt giӳӣ nѫi tránh ánh sáng và nhiӋt ÿӝ cao. Khӱ khuҭn môi trѭӡng cөc bӝ Khӱ nhiӉm không gian phòng thí nghiӋm, ÿӗ vұt và thiӃt bӏ trong phòng cҫn phӕi hӧp dung dӏch và khí. BӅ mһt có thӇ khӱ bҵng cách sӱ dөng dung dӏch natri hypochlorite (NaOCl). Dung dӏch chӭa 1 g clo/l có thӇ thích hӧp ÿӇ vӋ sinh môi trѭӡng chung, nhѭng ÿӇ xӱ lý các trѭӡng hӧp nguy cѫ cao cҫn mӝt dung dӏch x 91 x mҥnh hѫn (5 g/l). ĈӇ khӱ nhiӉm môi trѭӡng, dung dӏch chӭa 3% hydrogen peroxide (H2O2) có thӇ thay thӃ cho dung dӏch tҭy trҳng. Có thӇ khӱ nhiӉm phòng và thiӃt bӏ bҵng xông hѫi formaldehyde tҥo ra khi ÿӕt nóng paraformaldehyde hay ÿun sôi formalin. Ĉó là mӝt quá trình rҩt nguy hiӇm ÿòi hӓi phҧi ÿào tҥo kӻ cho nhân viên. Tҩt cҧ nhӳng chӛ hӣ trong phòng (nhѭ cӱa sә, cӱa ra vào ) nên bӏt kín bҵng băng dính hay vұt tѭѫng tӵ trѭӟc khi tҥo ra formaldehyde. Xông hѫi nên tiӃn hành ӣ nhiӋt ÿӝ tӕi thiӇu 21 0 C và ÿӝ ҭm tѭѫng ÿӕi là 70%. (xem phҫn Khӱ nhiӉm tӫ an toàn sinh hӑc trong chѭѫng này). Các khu vӵc xông hѫi xong phҧi thông gió hoàn toàn trѭӟc khi cho phép nhân viên vào. Nhӳng ngѭӡi phҧi vào trѭӟc khi thông gió phҧi mang mһt nҥ phòng ÿӝc thích hӧp. Có thӇ sӱ dөng ammonium bicarbonate thӇ khí ÿӇ trung hòa formaldehyde. Xông hѫi nhӳng khu vӵc nhӓ bҵng hѫi hydrogen peroxide cNJng hiӋu quҧ nhѭng yêu cҫu phҧi có thiӃt bӏ chuyên biӋt ÿӇ tҥo hѫi. Khӱ nhiӉm tӫ an toàn sinh hӑc ĈӇ khӱ nhiӉm tӫ an toàn sinh hӑc cҩp I hay cҩp II cҫn có sҹn các thiӃt bӏ phát sinh ÿӝc lұp, tuҫn hoàn và trung hòa khí formaldehyde. Mӝt cách khác là dùng mӝt lѭӧng paraformaldehyde thích hӧp (nӗng ÿӝ cuӕi cùng cӫa paraformaldehyde trong không khí là 0,8%) ÿһt trong mӝt cái chҧo trên mӝt ÿƭa ÿiӋn nóng. Ĉһt mӝt cái chҧo khác chӭa ammonium bicarbonate nhiӅu hѫn paraformaldehyde 10% trên mӝt cái ÿƭa nóng thӭ hai vào tӫ. Cҳm dây ÿiӋn cӫa ÿƭa nóng bên ngoài cӫa tӫÿӇ có thӇÿiӅu khiӇn hoҥt ÿӝng cӫa chҧo tӯ bên ngoài bҵng cách cҳm hay rút phích ÿiӋn khi cҫn thiӃt. NӃu ÿӝ ҭm tѭѫng ÿӕi thҩp hѫn 70% thì nên ÿһt trong tӫ mӝt bình chӭa nѭӟc nóng ÿӇ hӣ trѭӟc khi ÿóng kín cӱa trѭӟc tӫ và băng kín (ví dө bҵng băng nӕi ӕng). Vӟi nhӳng tҩm nhӵa tәng hӧp nһng thì nên viӅn khe hӣ phía trѭӟc và lӛ thông gió phía sau ÿӇ ÿҧm bҧo khí không thӇ rò rӍ vào phòng. Lӛ dây ÿiӋn qua phҫn ÿóng kín phía trѭӟc cNJng phҧi bӏt kín. Ĉƭa cӫa chҧo paraformaldehyde ÿѭӧc cҳm ÿiӋn vào. Nó ÿѭӧc rút ÿiӋn khi paraformaldehyde ÿã bay hѫi hӃt. ĈӇ yên tӫ trong ít nhҩt 6 giӡ. Sau ÿó cҳm ÿiӋn chҧo thӭ hai và có thӇ hóa hѫi ammonium bicarbonate. TiӃp theo, rút ÿiӋn và bұt rӗi tҳt quҥt gió cӫa tӫ hai lҫn mӛi lҫn tҳt khoҧng 2 giây ÿӇ cho phép khí ammonium bicarbonate tuҫn hoàn. ĈӇ yên tӫ trong khoҧng 30 phút trѭӟc khi mӣ phҫn ÿóng kín phía trѭӟc (hay tҩm nhӵa tәng hӧp) và tháo tҩm bӏt lӛ thông hѫi ra. Cҫn lau sҥch bӅ mһt tӫÿӇ loҥi bӓ nhӳng gì còn lҥi trѭӟc khi sӱ dөng. Rӱa tay/khӱ nhiӉm tay Nên mang găng tay thích hӧp bҩt cӭ khi nào thao tác vӟi vұt liӋu nguy hiӇm sinh hӑc. Tuy nhiên, ÿiӅu ÿó không thӇ thay thӃ yêu cҫu rӱa tay thѭӡng xuyên và ÿúng cách ÿӕi vӟi nhân viên phòng thí nghiӋm. Phҧi rӱa tay sau khi thao tác vӟi vұt x 92 x liӋu và ÿӝng vұt nguy hiӇm sinh hӑc và trѭӟc khi rӡi phòng thí nghiӋm. Thѭӡng thì khӱ nhiӉm tay bҵng cách rӱa kӻ vӟi xà phòng thông thѭӡng và nѭӟc là ÿӫ nhѭng trong các tình huӕng nguy hiӇm cao thì cҫn dùng xà phòng diӋt khuҭn. Nên xoa tay kӻ bҵng xà phòng, chà rӱa ít nhҩt trong 10 giây, rӱa lҥi bҵng nѭӟc sҥch và lau khô bҵng khăn giҩy hay vҧi sҥch (nӃu có thӇ, nên sӱ dөng máy sҩy khô tay bҵng không khí nóng). Nên sӱ dөng vòi rӱa ÿiӅu khiӇn bҵng khuӹu tay hoһc chân. Nhӳng nѫi không có thì nên dùng khăn giҩy hay vҧi ÿӇ ÿóng vòi ÿӇ tránh tái nhiӉm tay ÿã rӱa. Nhѭÿã ÿӅ cұp ӣ trên, tay bҭn ít có thӇÿѭӧc khӱ khuҭn bҵng cӗn khi không có ÿiӅu kiӋn rӱa tay thích hӧp. Khӱ trùng và tiӋt trùng bҵng nhiӋt NhiӋt ÿӝ là mӝt trong nhӳng tác nhân vұt lý phә biӃn nhҩt sӱ dөng ÿӇ khӱ trùng các tác nhân gây bӋnh. NhiӋt khô hoàn toàn không ăn mòn, dùng ÿӇ xӱ lý nhiӅu vұt dөng cӫa phòng thí nghiӋm có thӇ chӏu ÿѭӧc nhiӋt ÿӝ 160 0 C hoһc cao hѫn trong vòng 2–4 giӡ. Ĉӕt hay thiêu (xem dѭӟi ÿây) cNJng là mӝt hình thӭc cӫa nhiӋt khô. NhiӋt ҭm hiӋu quҧ nhҩt khi sӱ dөng dѭӟi hình thӭc hҩp thanh trùng. Ĉun sôi không diӋt ÿѭӧc tҩt cҧ vi sinh vұt và/hoһc mҫm bӋnh, nhѭng có thӇ sӱ dөng ÿӇ khӱ trùng bѭӟc ÿҫu khi các phѭѫng pháp khác (khӱ trùng hay khӱ nhiӉm bҵng hóa chҩt, hҩp thanh trùng) không thích hӧp hay không thӇ thӵc hiӋn hoһc không có. Nhӳng vұt ÿã khӱ trùng phҧi thao tác và cҩt giӳÿӇ duy trì tình trҥng vô trùng cho ÿӃn khi sӱ dөng. Hҩp khӱ trùng Hѫi nѭӟc bão hòa dѭӟi áp suҩt (hҩp thanh trùng) là biӋn pháp vô trùng vұt liӋu phòng thí nghiӋm hiӋu quҧ và ÿáng tin cұy nhҩt. Thѭӡng thì nhӳng chu trình sau sӁÿҧm bҧo viӋc vô trùng nhӳng vұt ÿһt ÿúng cách trong nӗi hҩp. 1. Giӳӣ nhiӋt ÿӝ 134 0 C trong 3 phút. 2. Giӳӣ nhiӋt ÿӝ 126 0 C trong 10 phút. 3. Giӳӣ nhiӋt ÿӝ 121 0 C trong 15 phút. 4. Giӳӣ nhiӋt ÿӝ 115 0 C trong 25 phút. Dѭӟi ÿây là nhӳng mүu nӗi hҩp thanh trùng khác nhau. N͛i h̭p chân không. Hình 10 minh hӑa cҩu trúc chung cӫa mӝt nӗi hҩp chân không. Hѫi nѭӟc ÿi vào khoang áp suҩt và chiӃm chӛ cӫa dòng khí nһng ÿi xuӕng và thông qua các van trong ӕng dүn cӫa khoang, gҳn vӟi bӝ lӑc HEPA. x 93 x Hình 10. N͛i h̭p chân không. N͛i h̭p ti͉n chân không. ThiӃt bӏ này cho phép thҧi bӓ không khí khӓi khoang trѭӟc khi hѫi nѭӟc vào. Khí thҧi ra ngoài qua mӝt van gҳn vӟi bӝ lӑc HEPA. Cuӕi chu kǤ, hѫi nѭӟc tӵÿӝng thҧi ra ngoài. Nӗi hҩp này có thӇ vұn hành ӣ 134 0 C và vì thӃ chu kǤ vô trùng cӫa nó có thӇ giҧm ÿѭӧc 3 phút. Nó rҩt lý tѭӣng cho nhӳng vұt xӕp, nhѭng không thӇ sӱ dөng ÿӇ xӱ lý chҩt lӓng. N͛i h̭p áp sṷt b̹ng nhi͏t. ChӍ nên sӱ dөng loҥi này khi không có nӗi hҩp chân không. Vұt liӋu ÿѭa vào loҥi nӗi này tӯ phía trên và ÿӕt nóng bҵng khí, ÿiӋn hoһc nhӳng loҥi nhiên liӋu khác. Hѫi nѭӟc sinh ra bҵng cách ÿun nóng nѭӟc ӣÿáy thùng và không khí ÿi lên qua mӝt lӛ thông hѫi. Khi tҩt cҧ không khí ÿã ÿѭӧc loҥi bӓ, ÿóng van trên lӛ thông hѫi và giҧm nhiӋt. Áp suҩt và nhiӋt ÿӝ gia tăng cho ÿӃn khi van an toàn mӣ ra ӣ mӭc ÿã ÿһt trѭӟc. Ĉây là lúc bҳt ÿҫu duy trì. Ӣ cuӕi cӫa chu kǤ, ngӯng ÿun và cho phép giҧm nhiӋt ÿӝ xuӕng 80 0 C hay thҩp hѫn trѭӟc khi mӣ nҳp. X͇p v̵t li͏u vào n͛i h̭p Nên xӃp vұt liӋu lӓng lҿo trong khoang ÿӇ hѫi nѭӟc xuyên qua và khí thҧi ra ÿѭӧc dӉ dàng. Túi ÿӵng cho phép hѫi nѭӟc vào ÿӃn các vұt liӋu bên trong. Phòng ngͳa trong s͵ dͭng n͛i h̭p kh͵ trùng Các qui tҳc sau ÿây có thӇ giҧm ÿӃn mӭc tӕi thiӇu nhӳng nguy cѫ phát sinh trong vұn hành nӗi áp suҩt. 1. Trách nhi Ӌm khi vұn hành và bҧo quҧn thѭӡng xuyên cҫn phân công cho x 94 x nhӳng nhân viên ÿã qua ÿào tҥo. 2. Mӝt chѭѫng trình bҧo dѭӥng phòng ngӯa nên bao gӗm kiӇm tra thѭӡng xuyên khoang, nhӳng chӛ bӏt ӣ cӱa, tҩt cҧÿӗng hӗÿo và do nhân viên ÿӫ năng lӵc quҧn lý. 3. Hѫi nѭӟc nên bão hòa và không có nhӳng chҩt hóa hӑc (ví dө nhѭ các chҩt ӭc chӃăn mòn) có thӇ làm hӓng nhӳng vұt ÿѭӧc vô trùng. 4. Tҩt cҧ vұt liӋu ÿӇ hҩp thanh trùng nên ÿӵng trong nhӳng vұt chӭa mà không khí di chuyӇn nhanh và truyӅn nhiӋt tӕt. Cҫn ÿӇ vұt liӋu lӓng lҿo bên trong khoang nӗi hҩp ÿӇ hѫi nѭӟc ÿѭӧc ÿӅu khҳp. 5. Ĉӕi vӟi nӗi hҩp thanh trùng không có gҳn khóa an toàn liên ÿӝng, ÿӇ phòng nҳp bӏ mӣ ra khi có áp suҩt cao trong khoang nӗi hҩp thì nên ÿóng van chính ÿӇ nhiӋt ÿӝ xuӕng dѭӟi 80 0 C rӗi mӟi mӣ nҳp nӗi hҩp. 6. Nên ÿһt cѫ chӃ xҧ khí chұm khi hҩp thanh trùng dung dӏch vì nhiӋt ÿӝ cao có thӇ làm chúng sôi tràn ra. 7. Ngѭӡi vұn hành nên mang găng tay và mһt nҥ thích hӧp ÿӇ bҧo vӋ khi mӣ nӗi hҩp, ngay cҧ khi nhiӋt ÿӝ ÿã hҥ thҩp dѭӟi 80 0 C. 8. Khi kiӇm tra thѭӡng xuyên hiӋu suҩt cӫa nӗi hҩp, nên ÿһt dөng cө chӍ thӏ sinh hӑc hay cһp nhiӋt ÿiӋn ӣ giӳa các vұt ÿѭӧc hҩp thanh trùng. Trong “trѭӡng hӧp xҩu nhҩt”, viӋc giám sát thѭӡng xuyên bҵng cһp nhiӋt ÿiӋn và thiӃt bӏ ghi là rҩt cҫn thiӃt ÿӇ xác ÿӏnh chu kǤ vұn hành thích hӧp. 9. Màng lӑc tháo nѭӟc cӫa khoang (nӃu có) nên tháo ra và lau sҥch hàng ngày. 10. Phҧi cҭn thұn ÿӇ ÿҧm bҧo van xҧ cӫa nӗi hҩp áp suҩt không bӏ nghӁn do giҩy v.v… trong vұt ÿѭӧc hҩp thanh trùng. Thiêu hӫy Thiêu hӫy là cách hiӋu quҧ (xem chѭѫng 3) ÿӇ xӱ lý xác ÿӝng vұt cNJng nhѭ các chҩt thҧi trong giҧi phүu hay tӯ phòng thí nghiӋm, có thӇ không cҫn khӱ trùng trѭӟc (xem chѭѫng 3). ChӍ thiêu hӫy vұt liӋu nhiӉm trùng thay cho hҩp khӱ trùng khi lò thiêu ÿһt dѭӟi sӵ quҧn lý cӫa phòng thí nghiӋm. Thiêu hӫy ÿúng cách cҫn có phѭѫng tiӋn ÿiӅu khiӇn nhiӋt ÿӝ hiӋu quҧ và mӝt khoang ÿӕt thӭ hai. NhiӅu lò thiêu, ÿһc biӋt là nhӳng lò chӍ có mӝt phòng ÿӕt, không phù hӧp ÿӇ xӱ lý vұt liӋu, xác ÿӝng vұt và nhӵa tәng hӧp nhiӉm trùng. Nhӳng vұt liӋu này có thӇ không phân hӫy hoàn toàn và khí thҧi ra tӯӕng khói chӭa vi sinh vұt, hóa chҩt ÿӝc hҥi và khói có thӇ gây ô nhiӉm không khí. Tuy nhiên, có nhiӅu cҩu hình an toàn cho buӗng ÿӕt. NhiӋt ÿӝ lý tѭӣng trong buӗng ÿҫu tiên cҫn ӣ mӭc tӕi thiӇu là 800 0 C và ӣ phòng thӭ hai là 1000 0 C. Vұt liӋu ÿem thiêu, ngay cҧ khi ÿã khӱ nhiӉm trѭӟc, nên chuyӇn ÿӃn lò thiêu trong nhӳng túi ÿӵng, tӕt nhҩt là bҵng nhӵa tәng hӧp. Ngѭӡi vұn hành lò thiêu x 95 x cҫn biӃt nhӳng hѭӟng dүn thích hӧp vӅ sҳp xӃp các vұt liӋu ÿӇ thiêu và ÿiӅu khiӇn nhiӋt ÿӝ. CNJng nên lѭu ý rҵng hiӋu quҧ vұn hành mӝt lò thiêu phө thuӝc lӟn vào sӵ sҳp xӃp thích hӧp các vұt liӋu trong chҩt thҧi ÿѭӧc xӱ lý. HiӋn ÿang có nhӳng băn khoăn vӅ khҧ năng tӗn tҥi nhӳng ҧnh hѭӣng tiêu cӵc ÿӃn môi trѭӡng cӫa nhӳng lò thiêu hiӋn có và cҧ nhӳng lò ÿang ÿѭӧc ÿӅ xuҩt. Ngѭӡi ta vүn tiӃp tөc nӛ lӵc ÿӇ làm ra nhӳng lò thiêu tiӃt kiӋm năng lѭӧng và thân thiӋn hѫn vӟi môi trѭӡng. Thҧi bӓ Thҧi bӓ chҩt thҧi phòng thí nghiӋm và y tӃ là vҩn ÿӅ thuӝc vӅ nhӳng quy ÿӏnh khác nhau cӫa ÿӏa phѭѫng, quӕc gia và quӕc tӃ, và nhӳng qui ÿӏnh mӟi nhҩt phҧi ÿѭӧc tham khҧo trѭӟc khi thiӃt kӃ và thӵc hiӋn mӝt chѭѫng trình ÿóng gói, vұn chuyӇn và vӭt bӓ nhӳng chҩt thҧi có hiӇm hӑa sinh hӑc. Nói chung, ÿӏa phѭѫng có thӇ xӱ lý và thҧi bӓ tro tӯ lò thiêu nhѭ chҩt thҧi sinh hoҥt. Chҩt thҧi ÿã hҩp khӱ trùng có thӇ thiêu ngoài phòng thí nghiӋm hoһc chôn lҩp ӣ nhӳng khu vӵc ÿã ÿѭӧc cҩp phép (xem chѭѫng 3). ĈӇ biӃt thêm thông tin, xem các tài liӋu tham khҧo sӕ (13) và (29–39). [...]... Các thí nghi m k thu t gen thông th ng có th th c hi n an toàn trong E coli K12/pUC18 m c An toàn sinh h c c p 1, cung c p thêm các s n ph m bi u hi n DNA ngo i lai không òi h i các m c an toàn sinh h c cao h n ánh giá an toàn sinh h c i v i các véc t th hi n Nh ng c p an toàn sinh h c cao h n có th c yêu c u khi: 1 S bi u hi n c a o n DNA có ngu n g c t sinh v t gây b nh có th gia t ng c tính cu sinh. .. ng y u t này giúp xác nh m c an toàn sinh h c yêu c u thao tác c th bi n i gen t o thành an toàn và xác nh h th ng ng n ch n v t lý và sinh h c nên s d ng ánh giá an toàn sinh h c i v i các h th ng th hi n sinh h c H th ng th hi n sinh h c bao g m các véc t và các t bào v t ch Ph i tho mãn m t s tiêu chu n có th s d ng chúng hi u qu và an toàn M t ví d v h th ng th hi n sinh h c là plasmid pUC18 Th... t ng h p v t li u di truy n t các ngu n khác nhau t o ra các sinh v t bi n i gen (GMOs) mà tr c ây ch a t n t i trong t nhiên Ban u, các nhà sinh h c phân t có m t m i quan tâm chung ó là nh ng c tính không th oán tr c và không mong mu n c a các sinh v t này có th gây ra m t m i nguy sinh h c n u chúng thoát ra kh i phòng thí nghi m M i quan tâm này tr thành tiêu i m c a m t h i ngh khoa h c c t ch... quan i v i nh ng vi rút mà thông th ng không th gây nhi m cho ng v t ó N u nh ng ng v t chuy n gen ó thoát ra kh i phòng thí nghi m và truy n thông tin di truy n n qu n th ng v t hoang d i thì v m t lý thuy t, m t ngu n ng v t v i vi rút c tr ng ó có th phát sinh Kh n ng này i v i poliovirus ã c th o lu n và c bi t liên quan trong hoàn c nh thanh toán b nh b i li t Chu t chuy n gen bi u hi n th quan... chuy n gen t o thành b ng công ngh DNA tái t h p có th óng vai trò ngày càng quan tr ng trong n n nông nghi p hi n i Nh ng cu c th nghi m liên quan t i xây d ng hay s d ng sinh v t chuy n gen nên c ki m soát sau khi ti n hành ánh giá nguy c an toàn sinh h c M m b nh và b t c m i nguy hi m ti m tàng nào liên quan t i nh ng sinh v t ó có th có c i m ch a c xác nh c tính c a c th cho, b n ch t c a chu... IATA, Montreal, Canada cung c p) 6 Lau chùi và kh trùng vùng b v (n u c n, l p l i b c 2- 5) 7 B các v t li u nhi m b n vào v t ch a ch t th i s d ng m t l n, ch ng 98 th ng và rò r 8 Sau khi hoàn t t kh khu n, báo cáo ng c kh khu n 99 i có th m quy n là v trí ó ã 100 PH N V Gi i thi u v công ngh sinh h c 101 102 16 An toàn sinh h c và công ngh DNA tái t h p Công ngh DNA tái t h p liên quan t i vi c t... tinh khi t sinh ra Nh ng véc t ó nên thao tác cùng m c an toàn sinh h c v i adenovirus b m sinh ra chúng ng v t chuy n gien và ng v t "khác th ng " Nh ng ng v t mang c i m di truy n ngo i lai ( ng v t chuy n gen) nên thao tác trong nh ng m c ng n ch n phù h p v i c i m c a s n ph m c a gen ngo i lai Nh ng ng v t ã lo i b có m c ích nh ng gen c tr ng ( ng v t l ) th ng không b c l nh ng m i nguy sinh h... ng v i hay kh n gi y ng n ch n chúng 3 ch t t y trùng thích h p lên kh n gi y và khu v c ngay xung quanh (thông th ng, dung d ch t y tr ng 5% là thích h p, nh ng i v i nh ng v trên máy bay thì nên s d ng ch t t y trùng ammonium b c 4.) 4 ch t t y trùng theo vòng tròn b t u t mép ngoài c a vùng b v và h ng v phía trung tâm 5 Sau m t kho ng th i gian thích h p (kho ng 30 phút), d n s ch v t li u ó N u... ngh ó, v n an toàn ã c th o lu n và nh ng h ng d n u tiên v công ngh DNA tái t h p ã c a ra Nh ng kinh nghi m nghiên c u trong h n 25 n m sau ó ã ch ng minh r ng k thu t gen có th th c hi n an toàn h n khi ti n hành ánh giá nguy c h p lý và s d ng các bi n pháp an toàn th a áng u tiên, công ngh DNA tái t h p ho c k thu t gen ã c s d ng phân o n DNA vô tính trong v t ch nhi m khu n tìm nhanh các s n... n liên quan n v n chuy n ch t nhi m trùng c gi i thi u trong phiên b n th 13 (2003) c a Nh ng quy nh chu n (40) c a Liên hi p qu c Nh ng h ng d n trên c s nh ng s a i b sung có T ch c Y t Th gi i (44) Nh ng quy nh chu n c a qu c t không nh m thay th b t c quy nh nào c a a ph ng và qu c gia Tuy nhiên, n u không có quy nh qu c gia thì nên th c hi n theo nh ng quy nh chu n c a qu c t 96 i u quan tr ng . mӭc an toàn sinh hӑc cao hѫn. Ĉánh giá an toàn sinh hӑc ÿӕi vӟi các véc tѫ thӇ hiӋn Nhӳng cҩp ÿӝ an toàn sinh hӑc cao hѫn có thӇÿѭӧc yêu cҫu khi: 1. Sӵ biӇu hiӋn cӫa ÿoҥn DNA có nguӗn gӕc tӯ sinh. giúp xác ÿӏnh mӭc ÿӝ an toàn sinh hӑc yêu cҫu ÿӇ thao tác cѫ thӇ biӃn ÿәi gen tҥo thành an toàn và xác ÿӏnh hӋ thӕng ngăn chһn vұt lý và sinh hӑc nên sӱ dөng. Ĉánh giá an toàn sinh hӑc ÿӕi vӟi các. nghӋ sinh hӑc x 102 x x 103 x 16. An toàn sinh hӑc và công nghӋ DNA tái tә hӧp Công nghӋ DNA tái tә hӧp liên quan tӟi viӋc tәng hӧp vұt liӋu di truyӅn tӯ các nguӗn khác nhau ÿӇ tҥo ra các sinh