NUÔI CẤY MÔ

ẢNH HƯỞNG CỦA ABA ẢNH HƯỞNG CỦA ABA TRONG MÔI TRƯỜNG NUÔI TRONG MÔI TRƯỜNG NUÔI CẤY TẠO CHỒI TRỰC TIẾP CẤY TẠO CHỒI TRỰC TIẾP TỪ MÔ SẸO CỦA LÁ CÂY TỪ MÔ SẸO CỦA LÁ CÂY CHÈ ( CAMELLIA SINENSIS CHÈ ( CAMELLIA SINENSIS (L.)) (L.)) MỤC LỤC GIỚI THIỆU: NỘI DUNG: Tổng quan về sinh học của cây chè Vật liệu Phương pháp tiến hành Sự khởi đầu nuôi cấy mô sẹo Tái sinh rễ in vitro và chuyển cây con ra vườn ươm Phân tích thống kê Kết quả Sự hình thành mô sẹo và tái sinh chồi Sự tái sinh rễ in vitro và chuyển cây ra vườn ươm Nghiên cứu cơ quan khí khổng KẾT LUẬN: TÀI LIỆU THAM KHẢO: GIỚI THIỆU: Chè là một trong những cây công nghiệp quan trọng và tạo ra nhiều việc làm ở tất cả các vùng trồng chè trên thế giới. Bên cạnh vai trò là một loại thức uống phổ biến, chè ngày càng được ưa chuộng bởi đặc tính kháng ung thư và chống lão hóa (Jankul et al. 1997) Trước đây, chỉ có một công bố về sự phát sinh phôi vô tính trực tiếp từ các mô lá dòng chè Assamica-SRL 73, (Kato, 1996) và sự tái sinh chồi gián tiếp từ lá thông qua rễ bất định có nguồn gốc callus (Sandal et al. 2005). Tổng quan về sinh học của cây chè Camellia sinensis • C.sinensis có nguồn gốc ở khu vực Đông Nam Á, ngày nay nó được trồng phổ biến ở nhiều nơi trên thế giới(NĐ và CNĐ). Nó là loại cây xanh lâu năm mọc thành bụi hoặc các cây nhỏ, thường được xén tỉa thấp hơn 2 m, được trồng lấy lá. • Hoa: màu trắng ánh vàng. • Hạt:có thể ép để lấy dầu. • Lá: dài 4–15 cm và rộng 2–5 cm. Lá tươi chứa khoảng 4% caffein. . Cây chè C.sinensis Cây chè C.sinensis [...]... mẫu cấy có kích thước (5,0x1,0 mm2 ) được dùng làm vật liệu thí nghiệm • Sau đó, các phản ứng phát sinh hình thái mô được thử nghiệm trên môi trường MS1 có bổ sung 30g.l-1sucrose và các nồng độ khác nhau của tổ hợp giữa IBA và BA Tạo callus trên môi trường MS1 Bảng 1 Ảnh hưởng của các nồng độ IBA và BA lên sự cảm ứng mô sẹo từ nuôi cấy lá THÍ NGHIỆM 2 • Các mô sẹo được hình thành sau 20 ngày nuôi cấy. .. Cây chè được chuyển ra vườn ươm Kết quả 1) Sự hình thành mô sẹo và tái sinh chồi(TN1,2) Sau 14 ngày nuôi cấy trên các nồng độ khác nhau của IBA và BA(hình a) Tuy nhiên, mô sẹo đã không cho thấy bất kì phản ứng phát sinh hình thái khác trong suốt quá trình nuôi cấy trên cùng môi trường MS1 cũng như cấy truyền sang môi trường có cùng đặc tính Mặc dù mô sẹo được phát sinh ở tất cả các nồng độ giữa IBA và... sau 20 ngày nuôi cấy trên môi trường MS1được chuyển sang môi trường MS2 có bổ sung các nồng độ khác nhau của ABA và tổ hợp của BA và IBA để tái sinh chồi.(bảng 2) Tái sinh chồi trong môi trường MS2 Tạo cụm chồi CV=0.01 và LSD=1.456 2) Tái sinh rễ in vitro và chuyển cây con ra vườn ươm THÍ NGHIỆM 3 Các chồi được tái sinh từ mô sẹo lá được tách ra và tiến hành nuôi cấy trên các môi trường MS3, MS4 nhằm... chuyển không phân cực, chủ yếu qua mô libe Chính vai trò rất đặc biệt này của ABA mà người ta đã nghiên cứu tìm ra cơ chế tương tác thích hợp giữa mô và các giai đoạn phát sinh hình thái nhằm kích thích sự tái sinh chồi từ mô sẹo lá chè Phương pháp tiến hành 1)Sự khởi đầu nuôi cấy mô sẹo • Quá trình vô trùng vào mẫu được tiến hành trong erlen 100 ml có bổ sung 20 ml môi trường MS với 8 g.l-1 agar, 1... số chồi /mô đạt cao nhất(hình b) Điều này khuyến cáo áp dụng L14 sẽ có hiệu quả kinh tế nhất • Sự tái sinh chồi bất định thông qua mô sẹo từ nuôi cấy in vitro được báo cáo lần đầu tiên và duy nhất cho đến nay bởi Sandal và cộng sự(2005) Trong nghiên cứu đó, Sandal dùng 2.4-D làm chất ĐHSTTV duy nhất trong quá trình tái sinh chồi bất định đạt kết quả tối ưu(14±1,6 chồi /mô) sau 24 tuần nuôi cấy Tuy nhiên,...VẬT LIỆU • Các đoạn chồi nách những cây chè trưởng thành Camellia sinensis var., • Môi trường nuôi cấy MS, MS1, MS2,MS3,…là những tổ hợp các chất sinh trưởng thực vật (IBA, BA, ABA ) theo liều lượng khác nhau Abscisic acid( ABA) Năm 1961 F.Addicott và cộng sự tách từ quả bông già khô chất kích... không chênh lệch bao nhiêu và nồng độ chất ĐHSTTV thấp hơn nhiều Nghiên cứu cơ quan khí khẩu cây chè Hình thái khí khổng trong 3 môi trường khác nhau dưới KHV độ phóng đại 600 lần • Hình a: lá ngoài tự nhiên • Hình b: lá in vitro môi trường rắn • Hình c: lá in vitro trong môi trường lỏng Các lá in vitro có lượng khí khổng nhiều hơn các lá ex vitro, nhưng ngược lại thì sức sống kém hơn do có nhiều nước . HƯỞNG CỦA ABA ẢNH HƯỞNG CỦA ABA TRONG MÔI TRƯỜNG NUÔI TRONG MÔI TRƯỜNG NUÔI CẤY TẠO CHỒI TRỰC TIẾP CẤY TẠO CHỒI TRỰC TIẾP TỪ MÔ SẸO CỦA LÁ CÂY TỪ MÔ SẸO CỦA LÁ CÂY CHÈ ( CAMELLIA SINENSIS. liệu Phương pháp tiến hành Sự khởi đầu nuôi cấy mô sẹo Tái sinh rễ in vitro và chuyển cây con ra vườn ươm Phân tích thống kê Kết quả Sự hình thành mô sẹo và tái sinh chồi Sự tái sinh rễ in. hợp giữa mô và các giai đoạn phát sinh hình mô và các giai đoạn phát sinh hình thái nhằm kích thích sự tái sinh thái nhằm kích thích sự tái sinh chồi từ mô sẹo lá chè. chồi từ mô sẹo lá