Nghiên Cứu Hấp Phụ Kháng Sinh Trên Vật Liệu Tổ Hợp Oxit Sắt Từ Và Nano Vàng.pdf

Để loại bỏ OTC có thể sử dụng một số phương pháp như phương pháp hấp phụ, quang hóa, ozon và vi sinh, trong đó phương pháp hấp phụ cho hiệu quả xử lý OTC cao và được áp dụng nhiều trong

TỔNG QUAN

Các phương pháp xác định Oxytetracycline

Để xác định lượng OTC trong mẫu sinh học và môi trường, nhiều phương pháp đã được sử dụng, bao gồm sắc ký lỏng, điện di, điện hóa và quang học Sắc ký lỏng là phương pháp phổ biến nhất do độ chính xác cao Theo TCVN 8544:2010 và Dược điển Việt Nam IV, OTC được định lượng bằng sắc ký lỏng hiệu năng cao với giới hạn định lượng 0,3 mg/kg Ngoài ra, phương pháp vi sinh cũng được sử dụng rộng rãi để xác định nhanh các kháng sinh Tetracycline bằng cách phản ứng với các chủng vi sinh.

Hiện nay, đã có một số nghiên cứu phát triển các test kit để phát hiện nhanh OTC trong các nền mẫu Các kết quả nghiên cứu được tổng hợp ở Bảng 1.1

1.2.1 Phương pháp sắc ký lỏng Đây là phương pháp được sử dụng nhiều nhất bởi các đặc điểm nổi trội về khả năng phân tách cũng như đô nhạy cao Nhiều nghiên cứu áp dụng phương pháp này để xác định OTC trên các nền mẫu khác nhau như trong thức ăn chăn nuôi, dược phẩm, nước thải, mẫu sinh học và mẫu thực phẩm Các nghiên cứu đã được thực hiện trên thiết bị sắc ký lỏng với những detector khác nhau như detector UV, huỳnh quang, MS, DAD,… đều cho kết quả phân tích tốt Để xác định Oxytetracycline trong thức ăn chăn nuôi, J.Han và các cộng sự đã sử dụng phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao detector huỳnh quang (HPLC-UVD-FLD) trong ba nền mẫu khác nhau (thức ăn hỗn hợp, cô đặc và trộn trước) Quá trình chiết chất phân tích được thực hiện với hỗn hợp acetonitril và etylendiamin tetraso

9 acid dinatri 0,1 mol/L - đệm Mcllvaine (1:4, v/v) bằng quy trình chuẩn bị mẫu một bước Phương pháp có khoảng tuyến tính rộng với LOD từ 0,90 đến 1,2 mg/kg trong 3 nền mẫu Giá trị thu hồi trung bình nằm trong khoảng từ 84,4 đến 99,0%; RSD thấp hơn 9,6% Phương pháp được sử dụng thành công cho các mẫu thức ăn thương mại để theo dõi các điều kiện ô nhiễm chéo và dư lượng phức tạp (26)

Phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao phát hiện huỳnh quang (HPLC –FLD) đã được nhóm tác giả của Đại học Công nghệ, Trung Quốc nghiên cứu để phân tích các kháng sinh Tetracycline trong mẫu nước thải Các thí nghiệm tiến hành trên cột Luna C18 column (4.6 ì 250 mm, 5 àm) Pha động được cấu tạo bởi (A) 30% v/v metanol và (B) 70% v/v malonat/amoniac; dung dịch đệm (pH 6,5, 100 mM, chứa 5 mM magie clorua) và tốc độ dòng chảy là 0,6 mL/phút; bước sóng kích thích và phát xạ lần lượt là 375 và 535nm Tất cả cỏc mẫu được lọc qua một màng lọc 0,22 àm trước khi phân tích HPLC–FLD Tại các điều kiện được tối ưu, độ thu hồi trung bình của Oxytetracycline, Tetracycline, Doxycycline và Chlorotetracycline trong các mẫu nước thải ao và trang trại nằm trong khoảng từ 78,1 đến 119,3% với độ lệch chuẩn tương đối nhỏ hơn 15% Giới hạn phát hiện (S/N = 3) của phương pháp từ 51–137 pg/mL (20)

Nhóm nghiên cứu từ đại học Aristotle, Thessaloniki đã tiến hành xác định hàm lượng OTC trong mẫu dược phẩm bằng phương pháp HPLC pha đảo với detector UV tại bước sóng 250 nm Quá trình rửa giải được thực hiện với metanol 0,01 M và axit oxalic tại pH 3,0 (30:70, v/v), tốc độ dòng 0,95 mL/phút, sử dụng cột phân tích Silasorb C8 (250ì4 mm, 10 àm) Codein được sử dụng làm chất nội chuẩn Tổng thời gian phân tích là 7 phút Các tác giả xây dựng đường chuẩn với sự có mặt của chất nội chuẩn ở 10 nồng độ OTC từ 0,5 to 20,0 ng/àl Cỏc giỏ trị LOD và LOQ lần lượt là 0,1 và 0.5 ng/àl Nghiờn cứu được thực hiện trờn mẫu thuốc mỡ OTC 50 mg hòa tan trong Metanol Đây là một phương pháp phân tích nhanh và đơn giản trong các chế phẩm dược phẩm (56)

Sắc ký lỏng hiệu năng cực cao ghép nối khối phổ (UHPLC-MS/MS) là phương pháp nhanh, nhạy và hiệu quả để định lượng Oxytetracycline (OTC) trong hải sản

10 Dịch chiết của chúng được pha loãng thành 10,0 mL với axit formic 0,1% và phân tớch bằng UHPLC-MS/MS Cột sử dụng là cột Shimadzu C‐18 (50x2,1 mm, 1,9 àm)

Sử dụng dung môi pha động A là axit fomic 0,1% và pha động B là axetonitri, các mảnh ion đặc trưng được xác định là m/z 337,0, m/z 426,0 và m/z 444,2 Phương pháp này được ứng dụng thành công cho mẫu tôm và một số loài cá, cho hiệu suất thu hồi từ 57,5 đến 83,1%, độ lệch chuẩn tương đối từ 0,01 đến 8,3% Giới hạn phát hiện (MDL) của các mẫu dao động từ 10,10 ppb đến 11,62 ppb (55).

Nhóm nghiên cứu của AL Cinquina đã dử dụng phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao kết hợp detector mảng diot (HPLC-DAD) để tối ưu hóa và xác thực để xác định OTC trong mẫu sữa và mô bò Các mẫu sữa và mô được chiết xuất và tinh chế bằng cách sử dụng hộp chiết xuất pha rắn HLB Oasis, sau đó phân tích trên HPLC- DAD tại bước sóng 365 nm Các điều kiện phân tích bao gồm pha động là Axit oxalic- axetonitril-metanol 0,01 M (60:25:15, v/v/v) trên cột C8 (đường kính trong 250x4,6 mm, 5 àm) Tổng thời gian phõn tớch là 12 phỳt Độ thu hồi đạt trờn 81,1% trong sữa và 83,2% trong cơ Độ lệch chuẩn tương đối RSD dưới 5,8% Khả năng phát hiện lần lượt nằm trong khoảng 117,2-131,3 àg/kg và 114,9-133,1 àg/kg trong sữa và cơ (17)

Phương pháp điện hóa là kỹ thuật hữu ích trong phân tích kháng sinh định tính và định lượng Ưu điểm của phương pháp này là quy trình xác định nhanh gọn OTC trong mẫu dược phẩm, sử dụng đa dạng các điện cực như vàng, bạch kim, điện cực màng mỏng kim cương pha tạp chất boron.

Kurzawa và Kowalczyk - Marzec đã sử dụng các phương pháp chuẩn độ điện thế, đo độ dẫn điện và Von-ampe vòng (CV) để xác định OTC trong các chế phẩm thương mại thường được sử dụng trong thú y Các phép đo độ dẫn điện được thực hiện bằng máy đo độ dẫn điện (CX-742 Elmetron, Ba Lan) và điện cực EPS-2ZM (Radelkis, Hungary) cho kết quả độ thu hồi từ 96,61–100,28% và RSD