ĐÀO THỊ TUYẾT – Xác địnhnồngđộ các thànhphầnxơ dừa 1 XÁC ĐỊNHNỒNGĐỘ CÁC THÀNHPHẦNXƠDỪA,CÁMGẠO,BỘTĐẬUTƯƠNGVÀURÊĐỂCÁCCHỦNGNẤMMỐC Aspergillus awamori VTCC-F296, A.niger VTCC-F128 VÀ A. oryzae MN SINH TỔNG HỢP NHIỀU MANNANASE Đào Thị Tuyết 1* , Vũ Thị Thu Hằng 1 , Lã Văn Kính 2 và Quyền Đình Thi 1 1 Viện Công nghệ sinh học; 2 Viện Khoahọcvà Kỹ thuật Nông nghiệp miền Nam *Tác giả liên hệ: Quyền Đình Thi - Viện Công nghệ sinh học - Hà Nội Tel. (04) 37.568.260; Fax: 04.38.363.144; E-mail: quyen@ibt.ac.vn ABSTRACT Determination of culture component concentration of coconut fiber, rice bran, soya powder and urê for filamentous strains Aspergillus awamori VTCC-F296, A. niger VTCC-F128 AND A. oryzae MN producing high level of mannanase Three strains A. niger VTCC-F128, A. oryzea MN02 and A. awamori VTCC-F296 screened from 131 filamentous strains Aspergillus, grew and produced a high level of mannanase on carbon and nitrogen sources as agricultural by-product. The strain A. niger VTCC-F128 produces mannanase of 62.4 U/ml in the mineral culturê medium Czapek (0,1% K 2 HPO 4 ; 0.2% NaNO 3 ; 0.05% MgSO 4, 0.05% KCl) supplemented with 2% coconut fiber and 0.1% soya powder. In the replaced culturê medium using 4% rice bran as the carbon source and 0.1% urê as nitrogen, mannanase activity of the strain A. oryzae MN riched 63.7 U/ml; the strain A. awamori VTCC-F296 produced 186.5 U/ml with 3% rice bran and 0.4% urê. In the replaced culturê medium, the strain A. awamori VTCC-F296 produced mannanase three times higher than in the basic culture medium. Key words: coconut fiber, rice bran, soya powder; Aspergillus niger VTCC-F128, Aspergillus oryzae MN, Aspergillus awamori VTCC-F296, culture condition, mannanase. ĐẶT VẤN ĐỀ Endo--1,4-mannanase (EC 3.2.1.78) là enzyme xúc tác thủy phân ngẫu nhiên các liên kết - 1,4-mannopyranosyl trong chuỗi mannan và rất nhiều polysaccharide khác có thànhphần chủ yếu là mannose, sản phẩm thủy phân của mannanase là các mannobiose, mannotriose vàcác oligosaccharide khác. Mannanase đã được sản xuất trên qui mô công nghiệp và được ứng dụng trong nhiều ngành công nghiệp như công nghiệp giấy (Kansoh, Nagieb, 2004), thực phẩm, chế biến thức ăn gia súc (Wu và cs, 2005), dược phẩm cho đến dầu khí. Hiện nay, với khả năng thủy phân bã cơm dừa, mannanase cũng được sử dụng đểphân hủy nguồn thải của các nhà máy chế biến thực phẩm từ dừa, sản xuất các oligosaccharide ứng dụng trong công nghiệp dược phẩm, các loại thực phẩm chức năng. Hiện nay việc sử dụng mannanase để chuyển hóa các nguyên liệu không có giá trị dinh dưỡng thành sản phẩm có giá trị hoặc cải thiện một số đặc tính kĩ thuật của nguyên liệu đang được nhiều nhà khoahọc quan tâm. -mannosidase và -mannanase được sản xuất từ chủng A. awamori K4 trong môi trường lỏng với bã cà phê 40% và 60% cám lúa mì, tối ưu pH 5 (Kurakake và Komaki, (2001). Tại Việt Nam, Đặng Thị Thu và cs, (2003) đã phân lập và đánh giá tính chất endo--1,4-mannanase từ A. awamori BK. Chủng này sinh tổng hợp mannanase cao sau 120 giờ nuôi ở môi trường lỏng có thànhphần khoáng czapek, bã cà phê (21,3 g/l), guargum (10 g/l), caonấm men (22 g/l) (Đặng Thị Thu và cs, 2003). Trong một nghiên cứu trước, tối ưu điều kiện nuôi cấy ban đầu cho thấy thời gian sinh tổng hợp mannanase cao nhất của chủng A. niger VTCC-F128 là 120 giờ, nhiệt độ 37C, pH 6,0; chủng A. oryzae MN là 96 giờ, nhiệt độ 28C, pH 5,0 vàchủng A. awamori VTCC-F296 là 168 giờ, nhiệt độ 37C, pH 7,0 (Đào Thị Tuyết và cs, 2009). Nguồn cơ chất cảm ứng tốt nhất cho sinh tổng hợp mannanase của cả ba chủng là guargum. Cả 3 chủng trên đều là cácchủng có khả VIỆN CHĂN NUÔI - Tạp chí Khoahọc Công nghệ Chăn nuôi - Số 18-Tháng 6-2009 2 năng phát triển và sinh tổng hợp mannanase cao trên nguồn cacbon và nitrogen là các sản phẩm hoặc phụ phế liệu của sản xuất chế biến nông sản, chủng A. niger VTCC-F128 (xơ dừa, bã mía vàbộtđậu tương); A. awamori VTCC-F296 vàchủng A. oryzae MN (cám gạo và urê) (Đào Thị Tuyết và cs, 2009). Trong nghiên cứu này, tỷ lệ của cácthànhphần carbon và nitrogen như xơdừa,cámgạo,bộtđậutươngvàurê tiếp tục được khảo sát để xây dựng các công thức môi trường nuôi cấy cácchủng Aspergillus awamori VTCC-F296, A. niger VTCC-F128, A. oryzae MN sinh tổng hợp mannanase cao nhằm sản xuất các chế phẩm enzyme bổ sung vào thức ăn trong chăn nuôi. VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Chủng giống nấmChủng Aspergillus awamori VTCC-F296 và Aspergillus niger VTCC-F128 do Viện Vi sinh vật và Công nghệ sinh học cung cấp; chủng Aspergillus oryzae MN02 do Viện Khoahọc Kỹ thuật miền Nam cung cấp. Môi trường và phương pháp nuôi cấy Môi trường nuôi cấy cơ bản cho sinh tổng hợp mannanase là môi trường khoáng (MTK) Czapek (0,1% K 2 HPO 4 ; 0,2% NaNO 3 ; 0,05% MgSO 4, 0,05% KCl); 0,5% caonấm men, 1% peptone; 0,5% guargum. Đểxácđịnh TP môi trường nuôi tối ưu cho cácchủng Aspergillus sinh tổng hợp mannanase cao từ các nguồn phụ phế liệu sẵn có trên thị trường, caonấm men và peptone được thay thế bằng bã mía, bã sắn, xơ dừa vàbộtđậutương cho A. niger VTCC- F128; cám gạo vàurê cho A. oryzae MN và A. awamori VTCC-F296. Chủng A. awamori VTCC-F296 được nuôi trong môi trường thay thế bổ sung 0,5% guargum, lắc 200 v/ph, ở 37C, pH 7. Chủng A. niger VTCC-F128 được nuôi trong môi trường thay thế bổ sung 0,3% guargum, lắc 200 v/ph, ở 37C, pH 6. Chủng A. oryzae MN02 được nuôi trong môi trường thay thế bổ sung 0,7% guaragum, lắc 200 v/ph, ở 28C, pH 5. Hóa chất: Các hóa chất dùng trong thí nghiệm được cung cấp từ các hãng khác nhau: KH 2 PO 4 , MgSO 4 .7H 2 O, NaNO 3 , KCl, guargum, locust bean gum (LBG) (Biochemika), peptone (Merck),3,5-dinitrosalicylic acid (DNS) (Fluka). Cột Microsep 10K Omega (Mexico). Xácđịnh hoạt tính Hoạt tính endo--1,4-mannanase được định tính theo phương pháp khuếch tán enzyme trên đĩa thạch đã mô tả trước đây (Nguyễn Sỹ Lê Thanhvà cs, 2006) có cải tiến. Thời gian ủ trong tủ lạnh 4C cho enzyme khuếch tán là 12 giờ và thời gian ủ cho phản ứng enzyme cơ chất xảy ra là 6 giờ ở 37C. Hoạt tính endo--1,4-mannanase được định lượng chính xác theo phương pháp quang phổ (Miller, 1959) với nhiệt độphản ứng là 40C. Một đơn vị hoạt tính mannanase được định nghĩa là lượng enzyme xúc tác thủy phân giải phóng 1mol mannose trong 1 phút ở điều kiện thích hợp. KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN Môi trường thay thế nuôi chủng A. awamori VTCC-F296 Chủng A. awamori VTCC-F296 được nuôi trong môi trường MTK; 0,7% guargum; 0,1% ĐÀO THỊ TUYẾT – Xác địnhnồngđộ các thànhphầnxơ dừa 3 peptone, tỷ lệ cấy chuyển giống là 3% với nguồn carbon là cám gạo (1-5%). Sinh tổng hợp mannanase của chủng A. awamori VTCC-F296 tăng lên 20% ở môi trường chứa 3% cám gạo (78,8 U/ml) so với môi trường đối chứng MTK chứa caonấm men (65,8 U/ml). Trong môi trường bổ sung nhiều cám gạo (5%) khả năng sinh tổng hợp mannanase của chủng này kém đi nhiều chỉ còn 50,1 U/ml (Bảng 1) Bảng 1. Ảnh hưởng của nồngđộcám gạo vàurê lên khả năng sinh tổng hợp mannanase của chủng A. awamori VTCC-F296. Hoạt tính Hoạt tính Cám gạo (%) (U/ml) (%) Urê (%) (U/ml) (%) 1 71,5 109 0,1 44,6 85 2 73,3 111 0,2 49,6 94 3 78,8 120 0,3 51,7 98 4 70,2 107 0,4 64,5 123 5 50,1 76 0,5 60,0 114 ĐC 65,8 100 ĐC 52,6 100 Chủng A. awamori VTCC-F296 được nuôi trong môi trường MTK; 0,7% guargum; 3% cámgạo, tỷ lệ cấy chuyển giống là 3% với nguồn nitrogen là urê (0,1-0,5%). Sinh tổng hợp mannanase của chủng A. awamori VTCC-F296 tăng lên 23% (64,5U/ml) khi bổ sung 0,4% urê (Bảng 1). (Alan và cs,1977) đã nghiên cứu khả năng sinh trưởng và sinh tổng hợp mannanase ngoại bào của chủng A. niger vàchủng này sinh tổng hợp mannanase cao trong môi trường MTK bổ sung 1,4 g/l urê (Alan và cs, 1977). Như vậy, thànhphần môi trường thay thế tối ưu đểchủng A. awamori VTCC-F296 sinh tổng hợp mannanase cao là MTK Czapek (0,1% K 2 HPO 4 ; 0,2% NaNO 3 ; 0,05% MgSO 4, 0,05% KCl); 3% cám gạo và 0,4% urê). Môi trường thay thế nuôi chủng A. niger VTCC-F128 Khảo sát tỷ lệ (%) bã mía, bã sắn vàxơ dừa Bảng 2. Ảnh hưởng của tỷ lệ (%) bã mía, bã sắn, xơ dừa lên khả năng sinh tổng hợp mannanase của A. niger VTCC-F128. Hoạt tính Hoạt tính Bã mía (%) (U/ml) (%) Xơ dừa (%) (U/ml) (%) 1 53,7 101 0,5 48,4 91 2 69,3 130 1,0 53,3 100 3 61,5 116 1,5 69,8 131 4 49,4 93 2,0 77,1 145 Bã sắn (%) - - 2,5 75,3 142 1 54,0 102 3,0 55,7 105 2 48,5 91 Caonấm men (%) - - 3 50,4 95 0,5 53,2 100 4 35,9 68 - - - Chủng A. niger VTCC-F128 được nuôi trong môi trường MTK chứa 0,3% guargum và 0,1% peptone, tỷ lệ cấy chuyển giống là 2,5% với các nguồn carbon là bã mía, bã sắn, caonấm men vàxơ dừa. Xơ dừa và bã mía là những nguồn carbon có thể thay thế caonấm men với mức độ VIỆN CHĂN NUÔI - Tạp chí Khoahọc Công nghệ Chăn nuôi - Số 18-Tháng 6-2009 4 sinh tổng hợp mannanase cao hơn 30% (Đào Thị Tuyết và cs, 2009). Sinh tổng hợp mannanase tăng lên 45% trong môi trường nuôi cấy chứa 2% xơ dừa (77,1 U/ml) và 30% trong môi trường nuôi cấy chứa 2% bã mía (69,3 U/ml) so với môi trường chứa 0,5% caonấm men (53,2 U/ml) (Bảng 2). Sinh tổng hợp mannanase gần như giữ nguyên trong môi trường chứa 1% bã sắn (54,0 U/ml) so với môi trường chứa 0,5% caonấm men. Khảo sát tỷ lệ (%) bộtđậutương Mức độ sinh tổng hợp mannanase của chủng A. niger VTCC-F128 tăng lên 33% khi giảm tỷ lệ bộtđậutương từ 1% (57,6 U/ml) xuống 0,1% (77,6 U/ml) và tăng lên 30% so với môi trường đối chứng chứa 0,1% peptone (59,6 U/ml) (Hình 1). Như vậy, thànhphần môi trường thay thế phù hợp cho chủng A. niger VTCC-F128 sinh tổng hợp mannanase cao là MTK Czapek (0,1% K 2 HPO 4 ; 0,2% NaNO 3 ; 0,05% MgSO 4, 0,05% KCl); 0,3% guargum; 0,1% bộtđậu tương; 2% xơ dừa (2% bã mía hoặc 1% bã sắn). Môi trường thay thế nuôi chủng A. oryzae MN02 Chủng A. oryzae MN02 được nuôi trong MTK; 0,7% guargum; 0,1% peptone, tỷ lệ cấy chuyển giống là 3% với nguồn carbon là cám gạo (1-5%) (Bảng 3). Với nguồn carbon 4% cám gạo sinh tổng hợp mannanase (58 U/ml) tăng lên 16% so với nguồn carbon 0,5% caonấm men (50 U/ml). Nhưng có thể sử dụng 2% cám gạo (52 U/ml) để thay thế 0,5% caonấm men (50 U/ml) trong môi trường nuôi cấy chủng A. oryzae MN02. Chủng A. oryzae MN02 được nuôi trong MTK; 0,7% guargum; 4% cámgạo, tỷ lệ cấy chuyển giống là 3% với nguồn nitrogen là urê (0,1-0,5%) (Bảng 3). Bảng 3. Ảnh hưởng của tỷ lệ (%) cám gạo vàurê lên khả năng sinh tổng hợp mannanase của A. oryzae MN02. Hoạt tính Hoạt tính Cám gạo (%) (U/ml) (%) Urê (%) (U/ml) (%) 1 48,9 98 0,1 20,2 40 2 51,6 103 0,2 62,1 124 3 54,4 109 0,3 33,2 66 4 58,0 116 0,4 24,6 49 5 48,0 96 0,5 14,6 29 Đối chứng (0,5% caonấm men và 0,1% peptone) 50,0 100 Mức độ sinh tổng hợp mannanase của chủng A. oryzae MN02 tăng lên 24% trong môi trường MTK chứa 0,2% urê (62,1 U/ml) và 4% cám gạo so với trong môi trường đối chứng MTK chứa 0,5% caonấm men và 0,1% peptone (50 U/ml). Như vậy, thànhphần môi trường thay thế cho chủng A. oryzae MN02 sinh tổng hợp mannanase cao là MTK Czapek (0,1% K 2 HPO 4 ; 0,2% NaNO 3 ; 0,05% MgSO 4, 0,05% KCl); 4% gạo cámvà 0,2% urê. 0 20 40 60 80 100 120 140 0 0.2 0.4 0.6 0.8 1 1.2 Bộtđậutương (%) Hoạt tính (U/ml) Hình 1. Ảnh hưởng của tỉ lệ (%) bộtđậutương lên khả năng sinh tổng hợp mannanase của A. niger VTCC- F128. ĐÀO THỊ TUYẾT – Xác địnhnồngđộ các thànhphầnxơ dừa 5 Khả năng sinh tổng hợp mannanase theo thời gian trong môi trường thay thế của cácchủng nghiên cứu Các kết quả thực nghiệm ở trên cho thấy khả năng sinh tổng hợp mannanase của chủng A. awamori VTCC-F296 (186 U/ml) sau 7 ngày nuôi cấy cao gấp 3 lần so với hoạt tính của chủng này khi nuôi trong môi trường cơ bản (66 U/ml). Chủng A. niger VTCC-F128 vàchủng A. oryzae MN sinh tổng hợp mannanase cao nhất lần lượt sau 5 ngày và 4 ngày nuôi cấy (64 U/ml và 62 U/ml) (Hình 2 và Bảng 4). Từ những kết quả ở trên có thể kết luận thànhphần môi trường nuôi thích hợp đểcácchủng nghiên cứu sinh tổng hợp mananase cao (Bảng 4). Bảng 4. Thànhphần môi trường thay thế nuôi cácchủng nghiên cứu Hoạt tính Tên chủngThànhphần môi trường U/ml U/mg A. awamori VTCC-F296 MTK + 0,5% guargum + 3% cám gạo + 0,4% urê 186,4 453,5 A. niger VTCC-F128 MTK + 0,3% guargum+ 2% xơ dừa +0,1% bộtđậu 62,4 148,4 A. oryae MN02 MTK + 0,7% guargum + 4% cám gạo + 0,2 urê 63,7 165,6 Đặng Thị Thu và cs, (2003) đã tối ưu một số điều kiện để sinh tổng hợp mannanase của chủng A. awamori BK phân lập tại Việt Nam trong môi trường lỏng có thànhphần khoáng Czapek, bã cà phê (21,3 g/l), guargum (10 g/l), caonấm men (22 g/l). Chủng A. awamori BK sinh tổng hợp mannanase đạt 120 U/ml sau 4 ngày nuôi cấy. Với môi trường nuôi cấy cơ bản, thay thế caonấm men và peptone lần lượt bởi 3% cám gạo và 0,4% urê, chủng A. awamori VTCC- F296 sinh tổng hợp mannanase đạt 186,4 U/ml, nếu thay thế bởi 4% cám gạo và 0,2% urê, chủng A. oryzae MN02 sinh tổng hợp mannanase cũng đạt 63,7 U/ml (Bảng 4). Kết quả nghiên cứu này cũng phù hợp với công bố của Kurakake và cs. (2001) khi nghiên cứu - mannosidase và -mannanase từ chủng A. awamori K4, chủng này sinh tổng hợp mannanase cao trong môi trường lỏng bổ sung 60% cám lúa mỳ ; Alan và cs. (1977) khi nghiên cứu khả năng sinh trưởng và sinh tổng hợp mannanase ngoại bào của chủng A.niger đã sử dụng MTK có bổ sung 1,4 g/l urê. Các nguồn carbon (xơ dừa cho chủng A. niger VTCC-F128; cám gạo cho A. oryzae MN02 và A. awamori VTCC-F296) và nguồn nitrogen (bột đậutương cho A. niger VTCC-F128; urê cho A. oryzae MN02 và A. awamori VTCC-F296) đều là những nguồn nguyên liệu rẻ tiền, sẵn có trên thị trường rất thích hợp cho việc sản xuất mannanase trên quy mô công nghiệp phục vụ mục đích tạo ra một lượng lớn enzyme bổ sung vào thức ăn cho gia súc. 0 40 80 120 160 200 0 2 4 6 8 10 12 14 Thời gian (ngày) Hoạt tính (U/ml) Hình 2. Ảnh hưởng của thời gian nuôi đến sinh tổng hợp mannanase của A. awamori VTCC-F296 (), A. niger VTCC-F128 (); và A. oryzae MN () trong môi trường thay thế. VIỆN CHĂN NUÔI - Tạp chí Khoahọc Công nghệ Chăn nuôi - Số 18-Tháng 6-2009 6 Trong môi trường đã được tối ưu hóa, chủng A. awamori BK sinh tổng hợp mannanase cao gấp 2 lần so với trong môi trường cơ bản ban đầu (Đặng Thị Thu và cs, 2003). Những kết quả trong nghiên cứu này cũng khẳng địnhcácchủng nghiên cứu khi được nuôi trong môi trường thay thế sinh tổng hợp mannanase cao hơn khi nuôi ở môi trường cơ bản, đặc biệt chủng A. awamori VTCC-F296 sinh tổng hợp mannanase (186 U/ml) cao gấp ba lần so với môi trường cơ bản (66 U/ml). KẾT LUẬN Chủng A. awamori VTCC-F296 có khả năng sinh tổng hợp mannanase tốt hơn chủng A. niger VTCC-F128 vàchủng A. oryzae MN02. Môi trường thay thế cho cácchủng nghiên cứu sinh tổng hợp mannanase cao là MTK (0,1% K 2 HPO 4 ; 0,2% NaNO 3 ; 0,05% MgSO 4, 0,05% KCl), 3% cámgạo, 0,4% urê, 0,5% guargum (chủng A. awamori VTCC-F296); MTK, 2% xơdừa, 0,1% bộtđậu tương, 0,3% guargum (A. niger VTCC-F128); MTK, 4% cámgạo, 0,2% urê, 0,7% guargum (A. oryzae MN02). LỜI CÁM ƠN Công trình có sự hỗ trợ kinh phí của Chương trình trọng điểm phát triển và ứng dụng CNSH trong lĩnh vực nông nghiệp và PTNT đến năm 2020, của Bộ Nông nghiệp và Phát triển Nông thôn, đề tài: “Nghiên cứu sản xuất và ứng dụng chế phẩm đa enzyme có chất lượng từ vi sinh vật tái tổ hợp nhằm nâng cao hiệu quả sử dụng thức ăn chăn nuôi” 2007-2010. Nhóm tác giả chân thànhcảm ơn TS Phạm Văn Hợp(Viện Vi sinh vật và Công nghệ sinh học (Đại học Quốc Gia Hà Nội) cung cấp chủng A. awamori VTCC-F296 và A. niger VTCC-F128 ; TS Lã Văn Kính (Viện Khoahọc kỹ thuật Nông nghệp Miền Nam) cung cấp chủng A. oryzae MN02. TÀI LIỆU THAM KHẢO Alan DE, Surekha A and Yuan CL, (1977). Purification and properties of a b-mannosidase from Aspergillus niger. J Biol Chem 6: p.2026 - 2031. Đặng Thị Thu, Nguyễn Thị Xuân Sâm và Lại Thị Ngọc Hà (2003). Nghiên cứu thu nhận và một số đặc tính của mannanase từ Aspergillus awamori BK. In: Báocáo KH, Hội nghị CNSH Toàn quốc 2003 Hà Nội 16- 17/12/2003, p 546 - 549. Đào Thị Tuyết, Đỗ Anh Vũ và Quyền Đình Thi, (2009). Tối ưu một số điều kiện nuôi cấy chủngnấmmốc Aspergillus awamori VTCC-F296, A. niger VTCC-F128 và A. oryzae MN02 sinh tổng hợp mannanase. Tạp chí NN và PTNT (Đã gửi bài) Kansoh Al and Nagieb ZA, (2004). Xylanase and mannanase enzymes from Streptomyces galbus NR and their use in biobleaching of softwood kraft pulp. Antonie Van Leeuwenhoek 85: p.103 - 114. Kurakake M and Komaki T, (2001). Production of b-mannanase and b-mannosidase from Aspergillus awamori K4 and their properties. Cur Microbiol 42: p.377 - 380. Laemmli UK, (1970). Cleavage of structurê proteins during the assembly of the head of bacteriophage T4. Naturê 227: p.680 - 685. Miller GL, (1959). Use of dinitrosalicylic acid reagent for determination of reducing sugar. Anal Chem 31: p.426 - 428. Nguyễn Sỹ Lê Thanh, Quyền Đình Thi, Phạm Việt Cường và Đặng Thị Thu, (2006). Endo-b-1,4-mannanse từ B. subtilis G1: Chọn chủng, xácđịnh động thái sinh trưởng, nhân dòng vàphân tích trình tự gene mã hóa. Tạp chí Công nghệ sinh học 4: p.327 - 334. Wu G, Bryant MM, Voitle RA and Roland DAS, (2005). Effects of beta-mannanase in corn-soy diets on commercial leghorns in second-cycle hens. Poult Sci 84: p.894 - 897. *Người phản biện : GS.TS. Vũ Duy Giảng; GS. TS. Lê Văn Liễn . – Xác định nồng độ các thành phần xơ dừa 1 XÁC ĐỊNH NỒNG ĐỘ CÁC THÀNH PHẦN XƠ DỪA, CÁM GẠO, BỘT ĐẬU TƯƠNG VÀ URÊ ĐỂ CÁC CHỦNG NẤM MỐC Aspergillus awamori VTCC-F296, A.niger VTCC-F128 VÀ. gạo và urê) (Đào Thị Tuyết và cs, 2009). Trong nghiên cứu này, tỷ lệ của các thành phần carbon và nitrogen như xơ dừa, cám gạo, bột đậu tương và urê tiếp tục được khảo sát để xây dựng các. cacbon và nitrogen là các sản phẩm hoặc phụ phế liệu của sản xuất chế biến nông sản, chủng A. niger VTCC-F128 (xơ dừa, bã mía và bột đậu tương) ; A. awamori VTCC-F296 và chủng A. oryzae MN (cám